肥胖肝癌患者術(shù)后3個月血清chemerin、APN和vaspin水平對術(shù)后3年病死事件的預(yù)測價值

歐宏亮 馬莉 陳清鋒

肥胖肝癌患者術(shù)后3個月血清chemerin、APN和vaspin水平對術(shù)后3年病死事件的預(yù)測價值

歐宏亮 馬莉 陳清鋒

目的 探討肥胖原發(fā)性肝細(xì)胞癌（HCC）患者血清趨化素（chemerin）、脂聯(lián)素（APN）和絲氨酸蛋白酶抑制劑（vaspin）水平對術(shù)后3年病死事件的預(yù)測價值。方法 連續(xù)性收錄132例肥胖的HCC患者，根據(jù)術(shù)后3年生存情況分為病死組54例、存活組78例。分別于術(shù)后1、3個月時檢測血清chemerin、APN和vaspin水平，并分析其對術(shù)后3年病死事件的預(yù)測價值。 結(jié)果 與病死組比較，術(shù)后3個月存活組血清chemerin、vaspin水平均明顯降低（均P＜0.05），APN水平明顯升高（P＜0.05）；存活組患者術(shù)后3個月時血清chemerin、APN和vaspin水平均明顯低于術(shù)后1個月的水平（均P＜0.05）；而病死組變化不明顯（均P＞0.05）。ROC曲線分析提示術(shù)后3個月血清chemerin水平對術(shù)后3年病死事件有一定的預(yù)測價值（AUC=0.754，95%CI：0.689～0.802，靈敏度為81.2%，特異度為83.7%）；其他指標(biāo)的預(yù)測價值均不大。非條件logistic回歸分析提示術(shù)后3個月血清chemerin＞52.6mg/L（OR=2.680，95%CI：1.163～6.178）是HCC術(shù)后3年病死事件的獨立危險因素。 結(jié)論 肥胖HCC患者術(shù)后3個月血清chemerin水平對術(shù)后3年病死事件有一定的預(yù)測價值。

原發(fā)性肝細(xì)胞癌 趨化素 脂聯(lián)素 絲氨酸蛋白酶抑制劑 病死率 肥胖

原發(fā)性肝細(xì)胞癌（HCC）是我國惡性腫瘤第二大病死原因[1]，其主要與乙型、丙型病毒性肝炎感染率高有關(guān)[2]。HCC病死率極高，目前主要采取手術(shù)治療，但術(shù)后5年復(fù)發(fā)率＞70%[3]。因此，深入研究HCC復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移機(jī)制，尋找一種特異度、靈敏度均較高的生物標(biāo)記物來幫助評估HCC臨床預(yù)后非常重要。近期有研究表明肥胖是肝癌的危險因素[4]?，F(xiàn)階段認(rèn)為脂肪組織不單純是脂肪細(xì)胞的儲存器官；還是一種內(nèi)分泌器官，可以脈沖式地分泌大量脂肪因子進(jìn)入循環(huán)，調(diào)節(jié)體內(nèi)各種炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激反應(yīng)以及能量代謝等[5]。關(guān)于脂肪因子與腫瘤之間的關(guān)系研究，目前主要集中于趨化素（chemerin）、脂聯(lián)素（APN）和絲氨酸蛋白酶抑制劑（vaspin）這3種新型脂肪因子[6－7]。但是大部分研究為體外研究，缺乏HCC患者臨床預(yù)后方面的結(jié)果。本文以接受手術(shù)治療的肥胖HCC患者為研究對象，動態(tài)觀察術(shù)后上述3種脂肪因子血清濃度，以探討其對術(shù)后3年病死事件的預(yù)測價值。

1 對象和方法

1.1 對象 選擇2009年3月至2013年5月肝病科就診的132例初發(fā)HCC術(shù)后患者（寧波市第二醫(yī)院78例，奉化市人民醫(yī)院54例）為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）年齡18～80歲；（2）BMI＞28kg/m2；（3）均行根治性腫瘤切除術(shù)治療，組織病理學(xué)證實為HCC；（4）術(shù)中切除所有可探及腫瘤結(jié)節(jié)且標(biāo)本切緣術(shù)后經(jīng)病理證實未見癌細(xì)胞累及；（5）術(shù)前影像學(xué)檢查（B超、CT、MRI等）和術(shù)中探查均未發(fā)現(xiàn)肝外轉(zhuǎn)移；（6）術(shù)前均未接受過手術(shù)、放療、射頻消融等抗腫瘤治療；（7）術(shù)后至少生存30d；（8）病例資料及術(shù)后隨訪資料完整。排除合并其他惡性腫瘤，心、肝、腎等臟器功能衰竭患者。術(shù)后隨訪3年，第1年每3個月隨訪1次，第2～3年每6個月隨訪1次。根據(jù)3年后生存結(jié)果分為存活組78例和病死組54例。存活組平均年齡（56.1±7.4）歲，BM（I28.9±0.5）kg/m2；病死組平均年齡（57.2±6.4）歲，BMI（29.2±0.6）kg/m2；兩組患者平均年齡、BMI比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（t= 1.199、1.003，均P＞0.05）。兩組患者在吸煙、飲酒、糖尿病和高血壓等方面比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05），而在門脈癌栓、腫瘤大小、腫瘤包膜和腫瘤分期方面均為病死組高于存活組（均P＜0.05），見表1。

1.2 方法 術(shù)后1、3個月時抽取空腹靜脈血10ml，在4℃、3 000r/min條件下離心15min（山東博科生產(chǎn)的離心機(jī)，BK－TG20WS），取上清液，置于－80℃冰箱內(nèi)冷藏待測。使用 ELISA試劑盒 [ml006876（chemerin）、ml028375（APN）和ml000511（vaspin），均購自上海酶聯(lián)生物有限公司]分別檢測血清chemerin、APN和vaspin濃度，檢測過程嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件。計量資料用表示，兩組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗。應(yīng)用ROC曲線分析脂肪因子對HCC術(shù)后3年病死事件的預(yù)測價值，利用約登指數(shù)分析最佳切點數(shù)值；應(yīng)用非條件logistic回歸分析HCC術(shù)后3年病死事件的影響因素。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者血清脂肪因子水平比較 兩組患者術(shù)后1個月血清chemerin、APN和vaspin水平比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05）；與病死組比較，術(shù)后3個月存活組血清chemerin、vaspin水平均明顯降低（均P＜0.05），APN水平明顯升高（P＜0.05）。存活組患者術(shù)后3個月時血清chemerin、APN和vaspin水平均明顯低于術(shù)后1個月的水平（均P＜0.05）；而病死組變化不明顯（均P＞0.05），見表2。

表1 兩組患者基本情況比較[例（%）]

表2 兩組患者術(shù)后1、3個月血清脂肪因子水平比較

2.2 脂肪因子對術(shù)后3年病死事件的預(yù)測價值 以AUC＞0.7為基準(zhǔn)，HCC患者術(shù)后3個月血清chemerin水平對術(shù)后3年病死事件有一定的預(yù)測價值（AUC= 0.754，95%CI：0.689～0.802，靈敏度為81.2%，特異度為83.7%）；其他指標(biāo)的預(yù)測價值均不大，見圖1（插頁）和表3。

表3 3種脂肪因子對HCC患者術(shù)后3年病死事件的預(yù)測價值

2.3 logistic回歸分析 以術(shù)后3年病死事件為因變量，以術(shù)后1、3個月血清chemerin、APN及vaspin為自變量進(jìn)行非條件logistic回歸分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)術(shù)后3個月血清chemerin＞52.6mg/L（OR=2.680，95%CI:1.163～6.178）是HCC術(shù)后3年病死事件的獨立危險因素，見表4。

表4 logistic回歸分析結(jié)果

3 討論

HCC是具有高度侵襲性的惡性腫瘤，腫瘤切除術(shù)后復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)期生存欠佳是影響HCC患者療效的重要原因。關(guān)于HCC的發(fā)病機(jī)制，腫瘤微環(huán)境（氧化應(yīng)激、炎癥、免疫）與之關(guān)系密切，相互拮抗、相互依存。對于肥胖HCC人群，體內(nèi)異常紊亂的脂肪因子是腫瘤微環(huán)境的重要組成部分。本文以3種脂肪因子（chemerin、APN和vaspin）為切入點，以探究血清脂肪因子水平對HCC術(shù)后3年病死事件的預(yù)測價值。

chemerin是較為新型的脂肪因子，是G蛋白偶聯(lián)受體ChemR23的天然配體，最早于2003年Wittamer等[8]在卵巢癌患者的癌性腹水中發(fā)現(xiàn)。chemerin與惡性腫瘤的發(fā)生、轉(zhuǎn)移和臨床預(yù)后密切相關(guān)：蔡巖等[9]研究發(fā)現(xiàn)42例肺癌患者血清chemerin水平明顯升高，且與TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等密切相關(guān)，chemerin是影響肺癌預(yù)后的獨立危險因素，可作為判斷肺癌轉(zhuǎn)移與預(yù)后的一個參考指標(biāo)；國外研究亦發(fā)現(xiàn)胰腺癌[10]、食管癌[11]和胃癌[12]等消化系統(tǒng)腫瘤患者的血清chemerin水平升高，且與不良預(yù)后密切相關(guān)。本研究以肥胖HCC患者為對象，發(fā)現(xiàn)存活組患者術(shù)后3個月chemerin水平明顯低于術(shù)后1個月，而病死組變化不明顯。經(jīng)ROC曲線、logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，術(shù)后3個月血清chemerin水平對術(shù)后3年病死事件有一定的預(yù)測價值（AUC=0.754，95%CI：0.689～0.802，靈敏度為81.2%，特異度為83.7%）；且chemerin＞52.6mg/L是HCC術(shù)后3年病死事件的獨立危險因素。于照祥等[13]研究發(fā)現(xiàn)chemerin在肝癌組織、癌旁配對組織及正常肝組織中表達(dá)存在差異，且與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、門靜脈癌栓、肝癌分化程度及TNM分期相關(guān)。胡曉菡等[14]研究證實在chemerin及其受體CMKLR1在肝臟脂肪組織中大量特異性表達(dá)。發(fā)生HCC時，腫瘤的異常增生與代謝會進(jìn)一步加重肝內(nèi)脂肪組織的異?；罨?，這一情況可能在肥胖患者中更加明顯。

此外，本文還對APN、vaspin進(jìn)行觀察比較，結(jié)果提示存活組患者術(shù)后1個月血清APN水平明顯上升，vaspin水平明顯下降；病死組變化不明顯。經(jīng)logistic回歸、ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)血清APN、vaspin水平對HCC術(shù)后3年病死事件的預(yù)測價值低于chemerin。APN是一種較為經(jīng)典的脂肪因子，最早在1995年被發(fā)現(xiàn)，其主要特點是隨著脂肪體積的增大，循環(huán)中的濃度反而降低。APN的基本生理學(xué)作用是脂肪酸氧化和胰島素敏感性，調(diào)節(jié)體內(nèi)能量代謝[14]。隨著研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)APN與一些腫瘤密切相關(guān)，包括肺癌[15]、子宮內(nèi)膜癌[16]和肝癌[17]。戴鍇等[17]研究發(fā)現(xiàn)肝癌患者外周血APN水平明顯下降，病理活檢發(fā)現(xiàn)肝癌組織中APN含量明顯低于癌旁組織，推測APN的表達(dá)下降可能與人HCC的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。vaspin于2005年由Hida在肥胖糖尿病大鼠內(nèi)臟組織中分離出來，含有3個β－折疊、9個α－螺旋的核心區(qū)域和一個活性環(huán)。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)血清vaspin水平明顯升高是肥胖絕經(jīng)后子宮內(nèi)膜癌患者的危險因素[18]。

當(dāng)HCC患者體內(nèi)內(nèi)環(huán)境異常時，可激活脂肪組織異?；罨⒎置谥疽蜃樱赡苓M(jìn)一步加重內(nèi)環(huán)境的紊亂。對于肥胖的HCC患者，術(shù)后3個月血清chemerin水平對術(shù)后3年病死事件可能有一定的預(yù)測價值。

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Correlation between serum adipocytokines levels and fatal events in obese patients with hepatocellular carcinoma

OU Hongliang,MA Li,CHEN Qingfeng.Department of Liver Diseases,Ningbo Second Municipal Hospital,Ningbo 315010,China

Hepatic cell cancerChemerin APN Vaspin Mortality Obesity

2016-12-18）

（本文編輯：陳丹）

10.12056/j.issn.1006-2785.2017.39.12.2016-1930

寧波市科技計劃項目（201501CX-D02007）

315010 寧波市第二醫(yī)院肝病科（歐宏亮、馬莉）；奉化市人民醫(yī)院普外科（陳清鋒）

歐宏亮，E-mail：huahongbi2016@sina.com

【 Abstract】 Objective To investigate the correlation between serum adipocytokines(chemerin,APN and vaspin)and fatal events in obese patients with hepatocellular carcinoma(HCC). Methods Onehundred and thirty-two obese HCC patients were enrolled in the study,among whom 54 cases died(fatal group)and 78 cases survived(survival group)3 years after surgery. Serum adipocytokines chemerin,adiponectin(APN)and vaspin levels were measured at 1 and 3 months after surgery,and the correlation of adpocytokines levels with case fatality in 3 years was analyzed. Results The serum levels of chemerin and vaspin were significantly reduced 3 months after surgery,while APN levels were increased (P＜0.05).The levels of chemerin and vaspin in survival group were lower than those in fatal group,while levels of APN were higher(P＜0.05).ROC analysis showed that levels of chemerin at 3 months after surgery(AUC=0.754)had prediction value for 3-year fatality of HCC patients.Regression analysis showed that chemerin level＞52.6mg/L at 1 month after surgery was independent risk factor for 3-year fatality of HCC patients (OR=2.680,95%CI:1.163-6.178). Conclusion The fluctuation of chemerin after surgery may have prediction value for 3-year fatality of HCC patients.