SENP1蛋白在老年腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及其與預(yù)后的相關(guān)性

黃琦丹 陳家康 劉 全 鄭捷敏

(廣西醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院神經(jīng)外科一病區(qū)，廣西 柳州 545005)

SENP1蛋白在老年腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及其與預(yù)后的相關(guān)性

黃琦丹 陳家康 劉 全 鄭捷敏

(廣西醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院神經(jīng)外科一病區(qū)，廣西 柳州 545005)

目的 探討SUMO特異性蛋白酶(SENP-1)蛋白在老年腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及其與預(yù)后的相關(guān)性。方法 145例老年腦膠質(zhì)瘤患者，選取腦膠質(zhì)瘤癌灶旁未見明顯組織學(xué)改變的組織區(qū)域正常腦組織為對照組。根據(jù)免疫組織化學(xué)法檢測SENP1蛋白在老年膠質(zhì)瘤及正常腦組織中表達(dá)的結(jié)果，比較SENP1蛋白在兩組中的陽性表達(dá)率。分析腦膠質(zhì)瘤組織中SENP1蛋白的陽性表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系，應(yīng)用Kaplan-Meier法分析SENP1蛋白表達(dá)與腦膠質(zhì)瘤預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果 SENP1在腦膠質(zhì)瘤組織中的陽性表達(dá)率高于正常腦組織(P<0.05)。SENP1在臨床分期為Ⅲ和Ⅳ期的腦膠質(zhì)瘤組織中的陽性表達(dá)顯著高于Ⅰ和Ⅱ期，在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織的表達(dá)顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，大病灶組織中SENP1的陽性表達(dá)顯著高于小病灶組(P<0.05)，在不同性別患者中，不同分化程度中的表達(dá)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。提示SENP1的表達(dá)與腦膠質(zhì)瘤的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和腦膠質(zhì)瘤的病灶大小相關(guān)。SENP1陰性表達(dá)組的中位生存期顯著高于陽性表達(dá)組(P<0.05)。結(jié)論 SENP1在腦膠質(zhì)瘤組織中的陽性表達(dá)顯著增強(qiáng)，且與老年患者的預(yù)后密切相關(guān)，SENP1陰性表達(dá)的老年腦膠質(zhì)瘤患者具有更長的生存期。

SUMO特異性蛋白酶；腦膠質(zhì)瘤

腦膠質(zhì)瘤具有浸潤性生長，手術(shù)難度大，難以完全切除等特點(diǎn)，因此死亡率較高，預(yù)后較差〔1〕。腫瘤細(xì)胞的增生得益于對于缺氧微環(huán)境的適應(yīng)，介導(dǎo)此過程的關(guān)鍵性轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子是缺氧誘導(dǎo)因子(HIF)-1α〔2〕，其表達(dá)和活性對維持腫瘤細(xì)胞能量代謝、細(xì)胞增殖和腫瘤血管生成具有重要作用，而SENP1是在缺氧環(huán)境中維持 HIF-1α生物功能的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，能催化大量類泛素化蛋白與HIF-1α發(fā)生去SUMO化，此功能的紊亂與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和腫瘤細(xì)胞的增殖密切相關(guān)〔3,4〕。本研究通過檢測SENP1在老年腦膠質(zhì)瘤石蠟切片中的表達(dá)，分析其與臨床預(yù)后的相關(guān)性，探討SENP1的表達(dá)與臨床病理因素及預(yù)后之間的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2007年7月至 2012年7月廣西醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院收治的145例老年腦膠質(zhì)瘤患者，全部病例均經(jīng)術(shù)后病理檢查證實，其中男83例，女62例，年齡65～82〔平均(73.8±6.3)〕歲。臨床分級Ⅰ級35 例、Ⅱ級29例、Ⅲ級53例、Ⅳ級28例。將腦膠質(zhì)瘤手術(shù)切除石蠟標(biāo)本進(jìn)行蘇木素-伊紅(HE)染色病理確認(rèn)，選取腦膠質(zhì)瘤癌灶旁未見明顯組織學(xué)改變的組織區(qū)域正常腦組織為對照組。入選標(biāo)準(zhǔn)：(1)年齡65歲以上；(2)腦膠質(zhì)瘤患者均經(jīng)術(shù)后病理證實；(3)均為初治患者，術(shù)前未接受放化療及生物治療，有完整的臨床數(shù)據(jù)。本研究均獲得患者的知情同意，通過醫(yī)院倫理委員會審核批準(zhǔn)。

1.2 處理方法 腦膠質(zhì)瘤組和對照組的標(biāo)本均經(jīng) 4%甲醛溶液固定24 h，常規(guī)石蠟包埋，制備4 μm厚的切片，進(jìn)行免疫組化染色，采用免疫組化(SP法)檢測SENP1蛋白表達(dá)。全部操作均參照試劑盒說明書進(jìn)行。已知SENP1陽性的腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本作為陽性對照，磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗作為陰性對照。兔抗人 SENP1 抗體和試劑盒購自武漢博士德生物工程公司。結(jié)果判定：于高倍顯微鏡下觀察每張切片中細(xì)胞密集處的5個視野，以細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)清晰可見的棕黃色或棕色顆粒為陽性標(biāo)準(zhǔn)，對每個視野的陽性細(xì)胞數(shù)進(jìn)行計數(shù)，陽性細(xì)胞率<10%為陰性，≥10%為陽性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0軟件進(jìn)行t檢驗、χ2檢驗和Kaplan-Meier生存分析。

2 結(jié) 果

2.1 老年膠質(zhì)瘤及正常腦組織中SENP1的表達(dá) SENP1在正常腦組織中的陽性表達(dá)率僅為22.9%(22例)，顯著低于在腦膠質(zhì)瘤中的51.0%(74例；χ2=16.953，P<0.05)。

2.2 腦膠質(zhì)瘤組織中SENP1蛋白表達(dá)與臨床病理參數(shù)的比較 SENP1在臨床分期為Ⅲ和Ⅳ期的腦膠質(zhì)瘤組織中的陽性表達(dá)顯著高于Ⅰ和Ⅱ期 (P<0.05)，在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織的表達(dá)顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P<0.05)。而SENP1在不同性別、不同分化程度中的表達(dá)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。將腦膠質(zhì)瘤病變大小直徑≥3 cm組織中SENP1的陽性表達(dá)顯著高于直徑<3 cm組織(P<0.05)。見表1。

2.3 SENP1蛋白表達(dá)與腦膠質(zhì)瘤預(yù)后的關(guān)系 SENP1陰性表達(dá)患者的中位生存期(23.0個月)顯著高于陽性表達(dá)者為(15.2個月，P<0.05)。見圖1。

圖1 SENP1蛋白表達(dá)與腦膠質(zhì)瘤預(yù)后的關(guān)系

臨床指標(biāo)nSENP1蛋白陽性(n=74)χ2值P值性別 男83413.217>0.05 女6233病變大小(cm) <3601212.075<0.05 ≥38562臨床分期 Ⅰ～Ⅱ642116.385<0.05 Ⅲ～Ⅳ8153分化程度 高分化47325.029>0.05 中分化5425 低分化4417淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 無轉(zhuǎn)移79259.623<0.05 轉(zhuǎn)移6649

3 討 論

老年顱內(nèi)腫瘤患者由于其特殊的病理、生理特點(diǎn)而具有特殊的臨床特點(diǎn)〔4〕。首先，老年患者的腦組織常伴有不同程度的生理性功能衰退，當(dāng)發(fā)生顱內(nèi)腫瘤時，患者的早期神經(jīng)系統(tǒng)體征不明顯，因此誤診率較高，常誤診為老年癡呆、腦功能衰退或腦血管疾病等〔5〕。其次，老年人常伴隨退行性病變，多合并其他基礎(chǔ)疾病，如高血壓、糖尿病、心血管疾病等，因此老年顱內(nèi)腫瘤患者常伴有較多的并發(fā)癥，為治療帶來困難，預(yù)后較差。

腦惡性膠質(zhì)瘤是神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤中發(fā)生率較高的一種顱內(nèi)原發(fā)腫瘤，約占神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤的40%～60%〔6〕。老年腦膠質(zhì)瘤患者的生存時間顯著低于年輕患者，且臨床研究對于老年人腦膠質(zhì)瘤群體關(guān)注較少。SENP1在腦膠質(zhì)瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用，多項研究結(jié)果顯示多種腫瘤中均存在SENP1蛋白表達(dá)異常，如肝細(xì)胞癌〔7〕、前列腺癌〔8〕、肺癌〔9〕和乳腺癌等〔10〕。近年來手術(shù)治療和化學(xué)藥物治療成為治療腦膠質(zhì)瘤的主要措施，然而部分腦膠質(zhì)瘤患者的治療效果和預(yù)后較差，因此尋求新的治療靶點(diǎn)至關(guān)重要。

本研究結(jié)果提示在正常腦組織中，SENP1處于低表達(dá)狀態(tài)。腦膠質(zhì)瘤患者中SENP1水平升高，結(jié)合型SUMO蛋白發(fā)生去SUMO化過程〔11〕，其次 HIF-1α蛋白去 SUMO 化后的功能抑制作用被去除，HIF-1α的轉(zhuǎn)錄活性增強(qiáng)，促進(jìn)下游靶基因轉(zhuǎn)錄，誘導(dǎo)血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的產(chǎn)生并介導(dǎo)新生血管大量生成〔12〕；改善缺氧環(huán)境，腫瘤細(xì)胞快速增殖，導(dǎo)致正常上皮細(xì)胞向腫瘤細(xì)胞分化，加速腫瘤進(jìn)展〔13〕。SENP1通過促進(jìn)腫瘤的血管增生過程在腫瘤的進(jìn)展中發(fā)揮重要作用。

Kaplan-Meier 生存分析結(jié)果提示SENP1是影響老年膠質(zhì)腫瘤預(yù)后的因素，本研究進(jìn)一步提示SENP1在腦膠質(zhì)瘤發(fā)生中具有重要作用，與腦膠質(zhì)瘤進(jìn)展程度密切相關(guān)，可能作為膠質(zhì)瘤潛在的預(yù)后指示標(biāo)志物。

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2 Zhao T,Ren H,Jia L,etal.Inhibition of HIF-1α by PX-478 enhances the anti-tumor effect of gemcitabine by inducing immunogenic cell death in pancreatic ductal adenocarcinoma〔J〕.Oncotarget,2015;6(4):2250-62.

3 Burdelski C,Menan D,Tsourlakis MC,etal.The prognostic value of SUMO1/Sentrin specific peptidase 1(SENP1) in prostate cancer is limited to ERG-fusion positive tumors lacking PTEN deletion〔J〕.BMC Cancer,2015;15:538.

4 Bhujbal SV,de Ves P,Niclou SP.Drug and cell encapsulation:alternative delivery options for the treatment of malignant brain tumors〔J〕.Adv Drug Deliv Rev,2014;67-68(1):142-53.

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9 Wang R,Zhi X,Zhang YI,etal.Inhibition of SENP1 induces radiosensitization in lung cancer cells〔J〕.Exp Ther Med,2013;6(4):1054-8.

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11 Bawa-Khalfe T,Yeh ET.SUMO losing balance:SUMO proteases disrupt SUMO homeostasis to facilitate cancer development and progression〔J〕.Genes Cancer,2010;1(7):748-52.

12 陳 軍,王 堅,顧紅玉,等.SENP1與CerBb-2蛋白表達(dá)在乳腺癌中的臨床意義〔J〕.診斷學(xué)理論與實踐,2009;8(2):175-9.

13 劉 延,李湘竑,楊定華,等.SENP-1和HIF-1α在肝細(xì)胞肝癌中的表達(dá)及臨床意義〔J〕.中山大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)科學(xué)版),2012;33(4):465-70.

〔2016-12-11修回〕

(編輯 袁左鳴/滕欣航)

廣西自然科學(xué)基金青年項目(2016GXNSFA380133)；柳州市應(yīng)用技術(shù)研究與開義計劃課題(2015J030511)

鄭捷敏(1973-)，男，主任醫(yī)師，主要從事中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤手術(shù)治療研究。

黃琦丹(1980-)，男，主治醫(yī)師，主要從事中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤手術(shù)治療研究。

R73

A

1005-9202(2017)11-2741-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.11.062