血清IL-6和TNF-α水平與結腸癌病程的相關性

張鵬飛 張玉軍 朱振龍 安永輝 陳進軍

(承德市中心醫(yī)院重癥醫(yī)學科，河北 承德 067000)

血清IL-6和TNF-α水平與結腸癌病程的相關性

張鵬飛 張玉軍1朱振龍2安永輝3陳進軍4

(承德市中心醫(yī)院重癥醫(yī)學科，河北 承德 067000)

目的 探討不同病理分期結腸癌病人血清中的白細胞介素(IL)-6和腫瘤壞死因子(TNF)-α水平及其與結腸癌病理分期的相關性。方法 結腸癌患者168例，其中男88例，女80 例，結腸癌Ⅰ期44例，Ⅱ期43例，Ⅲ期40例，Ⅳ期41例。此外選取健康對照40例，所有入組者血清IL-6和TNF-α水平運用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測，統(tǒng)計分析血清中IL-6、TNF-α水平和結腸癌病程分級的相關性。結果 結腸癌Ⅰ期患者血清中的IL-6、TNF-α水平明顯高于對照組(P<0.01)。IL-6及TNF-α水平與結腸癌病程具有正相關。結論 血清中IL-6、TNF-α水平在結腸癌患者中的水平較正常人明顯升高，且隨著結腸癌病程增加，其水平亦明顯升高，因此，血清中IL-6、TNF-α水平可作為篩選和評估結腸癌預后的重要指標。

結腸癌；白細胞介素-6；腫瘤壞死因子-α

結腸癌患者的5年生存率，僅約50%，較低的生存率主要是由于缺乏有效的預防措施和早期診斷率低〔1〕。研究發(fā)現(xiàn)在結腸癌中許多炎癥信號通路如核轉錄因子(NF-κB)信號通路被異常激活〔2〕，同時流行病學研究發(fā)現(xiàn)在應用非甾體類抗感染藥(NASIDs)人群中結腸癌的發(fā)病率比較低〔3〕，表明抑制炎癥可能為預防結腸癌的重要途徑。本文旨在探討血清中白細胞介素(IL)-6和腫瘤壞死因子(TNF)-α水平與結腸癌病程的相關性。

1 對象和方法

1.1 一般資料 2012年5月至2015年5月在承德市中心醫(yī)院住院的結腸癌患者168例，其中男88例，女80例，年齡34～75〔平均(43.22±10.55)〕歲，均經(jīng)過活檢和病理診斷分級，其中腫瘤的分期和分級參照美國癌癥聯(lián)合委員會/國際抗癌聯(lián)盟(AJCC/UICC)頒布的結直腸癌的腫瘤分期和分級標準。具體病人的分級分期和例數(shù)見表1。所有患者病情穩(wěn)定，無合并腫瘤出血、腸穿孔、腸梗阻、急慢性感染，未使用糖皮質激素、抗過敏藥物以及自身免疫性炎癥抑制劑，且近3個月無輸血史和疫苗接種史。本院接收健康志愿者40例為正常對照組，男22例，女18例，年齡35～70〔平均(42.10±19.85)〕歲，近期未有急慢性感染、自身免疫性疾病等炎癥性疾病，并給予結直腸癌、家族性腺瘤性息肉病、腺瘤性息肉癌、潰瘍性結腸炎、遺傳性非息肉病性結腸癌等的篩查試驗，排除患有腸道疾病的志愿者。免費提供腹部、盆腔的全面B超和CT檢查。同時健康志愿者近期未使用糖皮質激素、抗過敏藥物以及自身免疫性炎癥抑制劑，且近3個月無輸血史和疫苗接種史。兩組均簽署知情同意書，該研究方案已經(jīng)通過醫(yī)院倫理委員會審批。所有參與者于早晨空腹時抽血約4 ml，分離血清，置-80℃冰箱保存，用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測。

表1 所有參與者的年齡和性別分布(n)

1.2 IL-6、TNF-α檢測方法 所有參與者血清中IL-6、TNF-α的含量檢測均采用ELISA 法，IL-6檢測試劑盒和人TNF-α檢測試劑盒均購自南京建成生物科技有限公司。這兩個細胞因子的檢測原理均雙抗體夾心法，微孔板中分別包被有IL-6和TNF-α抗體，抗體被制作成固相抗體，血清中的IL-6、TNF-α與微孔中的抗體特異性結合，再與辣根過氧化物酶(HRP)標記的IL-6抗體或HRP標記的TNF-α抗體結合，最終形成的抗體-抗原-HRP標記抗體復合物，當加入底物時該復合物與底物反應即顯色。此時用酶標儀在450 nm波長下測定吸光度，因此微孔中顯色的深淺和樣品中的IL-6、TNF-α呈正相關，因此通過標準曲線計算人血清中IL-6、TNF-α的濃度。

1.3 統(tǒng)計學方法 應用SPSS17.0軟件進行t檢驗、單因素回歸分析。

2 結 果

2.1 對照組和結腸癌Ⅰ期血清中IL-6、TNF-α水平比較 結腸癌Ⅰ期患者血清中的IL-6、TNF-α水平〔(19.25±5.71)pg/ml、(23.46±8.18)pg/ml〕明顯高于對照組〔(3.21±1.27)pg/ml、(5.21±1.36)pg/ml，均P<0.01〕。

2.2 結腸癌的病程和血清中IL-6、TNF-α水平的相關性 與對照組相比，IL-6、TNF-α在結腸癌患者血清中的水平明顯升高，且結腸癌的病程越高，血清中IL-6、TNF-α水平越高。對照組、Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期分別賦值為0，1，2，3，4，然后利用多重線性回歸分析模型對病程和炎癥因子IL-6、TNF-α水平進行Logistic回歸分析，IL-6、TNF-α水平與結腸癌病程均具有正相關關系(b=1.57，1.81；r=0.481，0.630；P<0.05或P<0.01)。見表2。

表2 所有參與者血清中IL-6、TNF-α水平比較

3 討 論

結腸癌的發(fā)病率在中國多個地區(qū)呈迅速上升的趨勢，且患者在發(fā)現(xiàn)時多已經(jīng)出現(xiàn)了血行轉移和淋巴轉移，其中肝臟和胃最常發(fā)生轉移的臟器〔4〕。早期發(fā)現(xiàn)、早期治療已成為降低結腸癌死亡率最根本的方法。

通常情況下，腫瘤由于生長速度較快，常發(fā)生中心性壞死，壞死組織分泌化學性趨化因子，引起單核細胞和巨噬細胞在腫瘤壞死部位異常聚積，炎癥細胞分泌更多的炎性因子〔5〕，其干擾正常的腸道細胞的物質和能量代謝，并最終導致正常細胞惡變或凋亡。研究顯示炎癥性腸病中潰瘍性結腸炎患者患結腸癌的風險比一般人群高2.75倍，克羅恩病患者患結腸癌的風險比一般人群高2.64倍〔6〕。炎癥性腸病最終多進展為結腸癌，這與自身免疫功能的紊亂以及炎癥細胞的異常激活有關。

促炎癥因子IL-6和TNF-α由激活的巨噬細胞和單核細胞分泌并釋放入血。血清中IL-6和TNF-α水平不僅作為結腸癌的一個重要危險因素〔7〕，研究還發(fā)現(xiàn)血清中IL-6和TNF-α水平較高的結腸癌患者預后多較差〔8〕。Poutahidis等〔9〕在基礎實驗研究中發(fā)現(xiàn)用IL-6抗體和TNF-α抗體競爭性結合小鼠體內的IL-6和TNF-α，可以顯著改善小鼠中潰瘍性結腸炎的進展和裸鼠中的結腸癌的轉移。同時，在人群研究中發(fā)現(xiàn)應用免疫調節(jié)劑可以顯著降低結腸癌的發(fā)病率〔10〕。這些研究均提示下調IL-6和TNF-α的炎癥作用可抑制結腸癌的侵襲、轉移。

本研究表明血清中IL-6、TNF-α水平可以作為結腸癌篩查的一個指標，當患者血清中IL-6、TNF-α水平的水平達到較高水平時，應引起足夠的重視。其次可以通過檢測血清中IL-6、TNF-α的水平，評估結腸癌的預后和侵襲轉移風險，對患者的治療具有一定的指導意義。

此外，本研究推測IL-6、TNF-α可能通過干擾結腸癌患者的糖脂代謝，加速腸癌患者惡病質的進程，降低患者的生存質量，因此給予腸癌患者炎癥抑制藥物可降低IL-6、TNF-α的水平，可以改善癌癥患者的生存質量和預后，對延緩結腸癌患者惡病質的發(fā)生具有重要的臨床意義。

1 Espejo-Herrera N，Gracia-Lavedan E，Boldo E，etal.Colorectal cancer risk and nitrate exposure through drinking water and diet〔J〕.Int J Cancer，2016；139(2)：334-46.

2 Nachiappan S，Askari A，Mamidanna R，etal.The impact of adjuvant chemotherapy timing on overall survival following colorectal cancer resection〔J〕.Eur J Surg Oncol，2015；41(12)：1636-44.

3 唐人民，李俊明，鄒秀蘭.IKKε/TBK1信號通路調控與致癌作用的研究進展〔J〕.中國老年學雜志，2015；35(23)：6918-21.

4 付國靜，楊正德.非甾體類藥與老年人小腸黏膜損傷〔J〕.中華老年醫(yī)學雜志，2015；34(6)：689-91.

5 張 慶，龍躍平，杜寒松，等.塞來昔布增強氟尿嘧啶對人結腸癌細胞SW480增殖與侵襲的抑制作用〔J〕.華中科技大學學報(醫(yī)學版)，2013；42(5):525-9.

6 Gao XY，Wang XL.An adoptive T cell immunotherapy targeting cancer stem cells in a colon cancer model〔J〕.J BUON，2015；20(6)：1456-63.

7 Xavier RJ，Podolsky DK.Unravelling the pathogenesis of inflammatory bowel disease〔J〕.Nature，2007；448(7152)：427-34.

8 袁帶秀，舒麗霞，黃 蓉.杜仲黃酮對H22小鼠的抑瘤作用及其機制〔J〕.中國老年學雜志，2016；36(2)：291-3.

9 Poutahidis T，Haigis KM，Rao VP，etal.Rapid reversal of interleukin-6-dependent epithelial invasion in a mouse model of microbially induced colon carcinoma〔J〕.Carcinogenesis，2007；28(12)：2614-23.

9 Scheller J，Garbers C，Rose-John S.Interleukin-6：from basic biology to selective blockade of pro-inflammatory activities〔J〕.Semin Immunol，2014；26(1)：2-12.

10 Djaldetti M，Bessler H.Modulators affecting the immune dialogue between human immune and colon cancer cells〔J〕.World J Gastrointest Oncol，2014；6(5)：129-38.

〔2016-12-11修回〕

(編輯 袁左鳴)

河北省自然科學基金資助項目(No.301354)

張鵬飛(1985-)，男，主治醫(yī)師，主要從事重癥醫(yī)學基礎研究。

R735.4

A

1005-9202(2017)11-2716-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.11.050

1 河北醫(yī)科大學病理學教研室 2 河北醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院病理科 3 河北醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院腫瘤科 4 河北醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院肝膽外科