高酸蘋果多酚鑒定及抗氧化、抗溶血活性研究*

孫為正 楊坤 林戀竹 鄒穎 趙謀明

(華南理工大學(xué) 食品科學(xué)與工程學(xué)院， 廣東 廣州 510640)

高酸蘋果多酚鑒定及抗氧化、抗溶血活性研究*

孫為正 楊坤 林戀竹 鄒穎 趙謀明?

(華南理工大學(xué) 食品科學(xué)與工程學(xué)院， 廣東 廣州 510640)

對(duì)新疆產(chǎn)高酸蘋果—“洪勛1號(hào)(紅肉)”進(jìn)行系統(tǒng)研究，發(fā)現(xiàn)其可滴定酸度為1.31%，總酚和花青素含量依次為果皮>果渣>全果(總酚含量為(2 026.88±28.30)mg/kg;花青素含量為(244.92±13.88)mg/kg)>果肉.采用高效液相色譜法對(duì)高酸蘋果多酚進(jìn)行分離鑒定，共鑒定出10種多酚類化合物，包括綠原酸、根皮苷、表兒茶素、阿魏酸、楊梅酮、兒茶素、香草酸、p-香豆酸、蘆丁和咖啡酸，全果中以綠原酸(391.19±18.37)mg/kg)、表兒茶素(698.82±17.21)mg/kg)和兒茶素(570.30±9.21)mg/kg)為主.采用DPPH自由基清除法、氧自由基吸收能力法、2，2-偶氮二異丁基脒二鹽酸鹽(AAPH)損傷人血紅細(xì)胞氧化模型評(píng)價(jià)蘋果各部位的抗氧化活性與抗溶血活性，結(jié)果表明:高酸蘋果的皮、肉、渣、全果均具有較強(qiáng)的抗氧化活性，抗溶血能力依次為果皮>果渣>全果>果肉.研究表明，高酸蘋果值得深度開發(fā)加工為高營養(yǎng)價(jià)值的產(chǎn)品．

高酸蘋果;抗氧化活性;抗溶血活性;多酚

蘋果含有豐富的營養(yǎng)成分，位列我國四大水果之首. 蘋果多酚作為蘋果中的重要的生物活性物質(zhì)，引起了人們的關(guān)注.蘋果多酚是蘋果中所含多元酚類物質(zhì)的通稱，蘋果中的多酚物質(zhì)主要包括黃烷-3-醇類、黃酮醇類化合物、羥基苯甲酸類、二氫查耳酮、花色苷類等五大類[1].蘋果多酚可分為酚酸類(主要是綠原酸和咖啡酸)和黃酮類化合物(如兒茶素、表兒茶素、原花青素等黃烷醇、黃酮醇)[2- 3].研究表明，蘋果多酚具有多種生理功能[4]，包括抗氧化[5]、抗菌消炎[6]、預(yù)防冠心病[7]以及抗腫瘤[8]等．

高酸蘋果屬于薔薇科蘋果屬，有果味酸，具有生津、消食的功效.洪勛1號(hào)高酸蘋果根據(jù)其果肉顏色可以分為黃色、淺紅和紅色，本次實(shí)驗(yàn)所用原料是產(chǎn)自新疆的高酸蘋果“洪勛1號(hào)”，所用個(gè)體經(jīng)人工挑選，果肉鮮紅，質(zhì)地緊密．

據(jù)報(bào)道，濃縮果汁的價(jià)值與其可滴定酸度有著直接的關(guān)系.在國際市場上，濃縮蘋果汁酸度每提高 1度，每噸售價(jià)相應(yīng)提高100～150美元[9].我國是世界上第一大蘋果生產(chǎn)國，同時(shí)也是世界濃縮蘋果汁第一出口大國，但我國濃縮蘋果汁在出口價(jià)格上和出口量上都受到制約，其中一個(gè)很重要的原因就是我國濃縮蘋果汁酸度較低，市場競爭力差.“洪勛1號(hào)(紅肉)”高酸蘋果在新疆地區(qū)已經(jīng)有較廣泛的種植，來源豐富，具有加工成濃縮果汁的生產(chǎn)潛質(zhì).然而，目前對(duì)于高酸蘋果的研究很少．

研究表明，蘋果中多酚的種類和含量會(huì)因品種的不同而不同，同一種蘋果的不同部位也有差異. Podesedek等[10]對(duì)Alva、Elstar、Jonagold、Szampion、Warta等10個(gè)品種的成熟蘋果中的多酚組成的研究表明，兒茶素在 Szampion和Elstar兩個(gè)品種中含量較高，而綠原酸為其余品種蘋果中主要的酚類物質(zhì).因此，筆者以“洪勛1號(hào)(紅肉)”高酸蘋果為研究對(duì)象，系統(tǒng)研究了其出汁率、pH值、可溶性固形物含量、水分含量、可滴定酸含量、總糖、總酚以及花青素含量，對(duì)比研究了其果皮、果肉、果渣、果汁的多酚組成與含量，及其抗氧化活性，構(gòu)建了2，2-偶氮二異丁基脒二鹽酸鹽(AAPH)氧化損傷人血紅細(xì)胞模型，評(píng)價(jià)了全果、果皮、果肉、果渣、果汁的抗溶血活性，以期為高酸蘋果的綜合開發(fā)利用提供理論和方法指導(dǎo)．

1 材料與方法

1.1 原料

“洪勛1號(hào)(紅肉)”高酸蘋果，2015年8月采摘自新疆伊犁，空運(yùn)至廣州，1 h內(nèi)運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室，4 ℃冷藏保存．

多酚提取液的制備:將高酸蘋果分批，將一批高酸蘋果削皮，分離得到果皮、果肉；另外，將一批蘋果榨汁，得果汁和果渣.分別稱取一定質(zhì)量的果皮、果肉、果渣和全果，切丁后浸入無水乙醇(按料液比1 g∶10 mL)，立即打漿， 60 ℃提取2 h，過濾，得濾液，45 ℃真空濃縮后，轉(zhuǎn)入100 mL容量瓶中，50%乙醇定容后，分別得到果皮、果肉、果渣和全果的多酚提取液．

1.2 試劑

DPPH、AAPH、熒光素、Trolox、綠原酸、根皮苷、表兒茶素、阿魏酸、楊梅酮、兒茶素、香草酸、p-香豆酸、蘆丁、咖啡酸，純度為99%，為美國Sigma公司產(chǎn)品;甲醇、三氟乙酸，純度為99%，為德國Merck公司產(chǎn)品.其他試劑均為分析純，購置于富宇化學(xué)有限公司和廣州化學(xué)試劑廠．

1.3 設(shè)備

E-line型阿貝折光儀，香港德祥科技有限公司;RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海亞榮生化儀器廠;SHZ-D(Ⅲ)型循環(huán)水式真空泵，鞏義市予華儀器有限公司;3-18K型離心機(jī)，美國Sigma公司;Varioskan Flash型酶標(biāo)儀，美國Thermo公司;UV-721型紫外分光光度計(jì)，上海精密科學(xué)儀器儀表有限公司;Waters 2695型高效液相色譜儀，美國Waters公司．

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 出汁率

將蘋果切成小丁，放入壓榨機(jī)中勻漿榨汁，后放入4層紗布中，擠出水分得到原果汁，95 ℃滅酶 20 s，稱取質(zhì)量，計(jì)算出汁率．

1.4.2 pH值、可溶性固形物和水分含量

取原果汁，使用pH計(jì)測定果汁pH值，使用阿貝折光儀測定果汁中固形物含量.采用GB 5009.3—2010方法進(jìn)行水分含量測定．

1.4.3 可滴定酸含量測定

將蘋果切成小丁，按1 g∶10 mL的料液比加水打漿，放入80 ℃水浴鍋，每15 min搖晃一次，保溫1 h后取出.過濾，得濾液.取容量瓶，定容后，取20 mL溶液，按1∶5稀釋后，滴入數(shù)滴酚酞溶液，用標(biāo)定后的NaOH溶液進(jìn)行酸堿滴定．

1.4.4 總糖含量測定

將蘋果切成小丁，按1 g∶10 mL的料液比加水打漿，放入70 ℃超聲波清洗儀，800 W超聲提取1 h后取出.過濾，得濾液.取容量瓶，定容后，取20 mL溶液，按1∶5稀釋后取1 mL加入試管中，加入0.5 mL 6%苯酚，搖勻，繼續(xù)加入2.5 mL濃硫酸，搖勻，放置20 min，于490 nm處測定吸光度值.以標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖為標(biāo)品做標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，計(jì)算得總糖含量．

1.4.5 總酚含量測定

采用Lin等[11]的方法，取200 μL多酚提取液，加蒸餾水至6 mL后搖勻，再分別加入0.5 mL福林酚試劑，搖勻，在1～8 min內(nèi)加入20%的碳酸鈉溶液1.5 mL，加蒸餾水稀釋到10 mL，搖勻，最后在40 ℃的水浴鍋上保溫反應(yīng)2 h，迅速冷卻后，立即在760 nm處測定其吸光度.以沒食子酸溶液為標(biāo)品做標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，計(jì)算得總酚含量．

1.4.6 花青素含量測定

采用pH示差法[12]，分別吸取200 μL多酚提取液于兩支試管中，分別用pH=4.5的緩沖液和pH=1.0的緩沖液稀釋至10 mL，暗處放置80 min，分別在515 nm和700 nm處測吸光值D．花青素含量w的計(jì)算方法如下:

其中：花青素含量的單位為mg/g；D=(D515-D700)pH1.0-(D515-D700)pH4.5;M為矢車菊色素-3-葡萄糖苷的摩爾質(zhì)量，449.2 g/mol;F為樣品體積稀釋倍數(shù);ζ為矢車菊色素-3-葡萄糖苷的摩爾消光系數(shù)，26 900 L/(mol·cm);ρ為質(zhì)量濃度，mg/mL．

1.4.7 高效液相色譜法分離鑒定蘋果多酚

色譜柱為XBridge C18色譜柱，溫度為30 ℃，流動(dòng)相為0.1% 三氟乙酸水溶液(A)和甲醇(B). 梯度洗脫程序?yàn)? 0～5 min，95%A; 5～15 min，95%～80%A;15～35 min，80%～50%A; 35～45 min，50%～30%A; 45～50 min，30%～0% A; 50～60 min，0%～95% A; 60～65 min，95% A．

檢測波長為254 nm;流速為1.0 mL/min;進(jìn)樣量為10 μL．

1.4.8 DPPH自由基清除率的測定

采用Hai等[13]的方法，取2 mL多酚提取液，加入2 mL 0.2 mmol/L DPPH自由基溶液，混勻，避光反應(yīng)30 min后，在517 nm波長處測得吸光值(D樣品).用蒸餾水替代樣品，測得的吸光值為D0，用乙醇替代DPPH自由基溶液，測得的吸光度值為D對(duì)照.DPPH自由基清除率=100[1-(D樣品-D對(duì)照)/D0] .以Trolox做標(biāo)準(zhǔn)曲線，樣品的DPPH值，即每千克樣品相當(dāng)于Torlox的量(mmol/kg)．

1.4.9 氧自由基吸收能力的評(píng)價(jià)

氧自由基吸收能力(ORAC)評(píng)價(jià)方法參考Lin等[14]的方法.配制pH=7.4 的75 mmol/L NaH2PO4-Na2HPO4緩沖液.用緩沖液配制濃度為39.9 μmol/L的熒光素鈉儲(chǔ)備液，避光，于4 ℃保藏.用緩沖液稀釋熒光素鈉儲(chǔ)備液，即得使用液(0.159 μmol/L). 用緩沖液配制成38.25 mmol/L的AAPH溶液，每次使用的AAPH溶液均為現(xiàn)配現(xiàn)用，使用前，放置于冰水中.精確稱量Trolox，溶于乙醇，配成2 mmol/L溶液，并用緩沖液稀釋成不同濃度.樣品用二甲基亞砜(DMSO)溶解，以緩沖液稀釋樣品溶液.預(yù)先將酶標(biāo)儀調(diào)溫至37 ℃，保持反應(yīng)體系溫度恒定為37 ℃.設(shè)定激發(fā)波長為485 nm，發(fā)射波長為530 nm.在96孔板中，每孔加入25 μL樣品溶液或Trolox溶液，或緩沖液(空白對(duì)照)，然后加入75 μL熒光素鈉使用液，將孔板放入酶標(biāo)儀中，37 ℃孵育10 min.加入100 μL AAPH溶液后，開始計(jì)時(shí)反應(yīng)并讀數(shù)(f0)，每1 min讀一次數(shù) (f1，f2，…，f70)，共讀數(shù)71次(共計(jì)反應(yīng)70 min)，將每次讀數(shù)連成曲線.每個(gè)樣品設(shè)置3個(gè)復(fù)孔.Q表示曲線下的面積．

Q=0.5(f0+fn)+(f1+f2+…+fi+…+fn-1),

L=Qs-Qb.

Trolox濃度與L成正比，將樣品L代入，換算得到ORAC值，即每千克樣品相當(dāng)于Torlox的量(mmol /kg)．

1.4.10 AAPH氧化損傷人血紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

采用楊兆艷[15]的方法，并加以改進(jìn)．

(1)氧化損傷模型建立

2%紅細(xì)胞懸液(PBS):取健康成年人新鮮抗凝血，4 ℃ 2 500 r/min離心10 min，棄上清得紅細(xì)胞，然后用PBS洗滌紅細(xì)胞3次(前兩次4 ℃ 2 500 r/min 10 min，第3次4 ℃，2 500 r/min，6 min)，嚴(yán)格控制洗滌條件，以便得到相同緊密度的紅細(xì)胞，最后用PBS配制2%紅細(xì)胞懸液．

各取400 μL 2%紅細(xì)胞懸液于2 mL離心管中，加入20 μL樣品溶劑(PBS)，37 ℃預(yù)保護(hù)30 min，分別加入400 μL濃度為0、50、100、150、200、250、300 和400 mmol/L的AAPH溶液(不加AAPH為空白對(duì)照)，37 ℃孵育4 h.每30 min取同一管各60 μL，分別用生理鹽水和蒸餾水稀釋5倍，4 ℃ 2500 r/min離心10 min，取上清液200 μL，412 nm處測吸光值．

(2)樣品對(duì)紅細(xì)胞氧化損傷的預(yù)保護(hù)

實(shí)驗(yàn)分正常組、模型組、樣品組和空白組．

樣品組:140 μL 2%紅細(xì)胞懸液中加入7 μL樣品，37 ℃預(yù)保護(hù)30 min，然后加入140 μL終濃度為100 mmol/L(根據(jù)損傷模型確定)的AAPH溶液，使得終體積為287 μL，37 ℃反應(yīng)1 h．

正常組:140 μL 2%紅細(xì)胞懸液中加入7 μL樣品溶劑，37 ℃預(yù)保護(hù)30 min，然后加入140 μL生理鹽水，使得終體積為287 μL，37 ℃反應(yīng)1 h．

模型組:140 μL 2%紅細(xì)胞懸液中加入7 μL樣品溶劑，37 ℃預(yù)保護(hù)30 min，然后加入140 μL終濃度為100 mmol/L(根據(jù)損傷模型確定)的AAPH溶液，使得終體積為287 μL，37 ℃反應(yīng)1 h．

空白組:140 μL PBS中加入7 μL樣品溶劑，37 ℃預(yù)保護(hù)30 min，然后加入140 μL生理鹽水，使得終體積為287 μL，37 ℃反應(yīng)1 h．

(3)紅細(xì)胞溶血率的測定

取反應(yīng)后的同一管中紅細(xì)胞反應(yīng)液各100 μL，分別用生理鹽水和蒸餾水稀釋5倍，4 ℃ ，2 500 r/min離心10 min，取上清412 nm處測定吸光度．

1.4.11 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 17.0 軟件中的ANOVA方法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)分析，以P<0.05為差異顯著，數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差的形式來表示．

2 結(jié)果與討論

2.1 高酸蘋果基本成分分析

高酸蘋果的出汁率、pH、可滴定酸度、總糖含量、總酚含量、花青素含量檢測結(jié)果見表1.據(jù)報(bào)道，80%以上品種的蘋果可滴定酸含量在0.2%～1.0%之間[16]，高酸蘋果可滴定酸為(1.31±0.01)%，是澳洲青蘋[9](0.8%)的1.64倍，是紅富士(0.25%)[9]的5.24倍.高酸蘋果果汁的pH值為3.17±0.01，其出汁率較高， 且可滴定酸度高， 適合加工成高品質(zhì)的濃縮蘋果汁.高酸蘋果多酚含量和花青素含量高，達(dá)到(2 026.88±28.3) mg/kg和(244.92±13.88) mg/kg，預(yù)示著其較強(qiáng)的生理活性，且一般認(rèn)為：酸度高、其干物質(zhì)含量也高，因而蘋果的營養(yǎng)品質(zhì)也高[17].故該品種的蘋果有望開發(fā)為兼具營養(yǎng)價(jià)值與商業(yè)價(jià)值的蘋果濃縮汁．

表1 高酸蘋果全果基本成分分析

此外，筆者對(duì)比研究了其果皮、果肉、果渣、全果的總酚和花青素含量，結(jié)果見表2.果汁的總酚含量為(1380 ± 12.32) mg/L，花青素含量為(152.79 ± 1.18) mg/L.可見，果皮中多酚、花青素含量最豐富;多酚、花青素含量從高到低依次是:果皮>果渣>全果>果肉;高酸蘋果果汁鮮紅透亮，含有較豐富的總酚和花青素.榨汁后，果渣中總酚和花青素含量較高，說明蘋果在榨汁的過程中，果汁主要來自于果肉，果皮中僅僅只有少量的多酚進(jìn)入果汁中，大量的多酚類化合物還殘留于果渣中.因此，榨汁后的果渣值得進(jìn)一步深度開發(fā)．

表2 高酸蘋果皮、肉、渣、全果總酚和花青素含量1)

Table 2 Total phenolics and anthocyanins contents of peel， flesh， pomace， and whole fruit of high acid apple

樣品總酚/(mg·kg-1)花青素含量/(mg·kg-1)果皮4054.27±29.08d624.94±18.69c果肉1625.92±14.20a218.00±10.04a果渣2824.20±97.31c394.31±12.32b全果2026.88±28.30b244.92±13.88a

1)同列中標(biāo)注不同角標(biāo)者具有顯著性差異(P<0.05)．表5與此同.

2.2 高酸蘋果多酚類化合物的分離鑒定

研究顯示:蘋果中的多酚類化合物主要包括了綠原酸、根皮苷、表兒茶素、阿魏酸、楊梅酮、兒茶素、香草酸、p-香豆酸、蘆丁和咖啡酸[18]，每種多酚類化合物因其結(jié)構(gòu)不同，所呈現(xiàn)的生理活性不同.而植物多酚因其獨(dú)特的酚羥基結(jié)構(gòu)，普遍具有抗氧化活性，但因結(jié)構(gòu)差異，抗氧化活性強(qiáng)弱不同.如綠原酸具有抗氧化、抗誘變、抗菌、抗病毒，保肝利膽的生理活性[19];根皮苷具有抗腫瘤活性，對(duì)皮膚癌有治療效果，在治療糖尿病及其并發(fā)癥方面有很好的療效[20]．

蘋果中多酚的種類和含量會(huì)因品種的不同而不同，同一種蘋果的不同部位也有差異[10].目前對(duì)于高酸蘋果多酚組成和含量研究較少.采用高效液相色譜法對(duì)高酸蘋果(全果、皮、肉、渣、汁)中的多酚類化合物進(jìn)行研究，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3和4.共有10種多酚類化合物被鑒定出來，分別是綠原酸、根皮苷、表兒茶素、阿魏酸、楊梅酮、兒茶素、香草酸、p-香豆酸、蘆丁和咖啡酸.高酸蘋果富含綠原酸、根皮苷、表兒茶素、兒茶素、香草酸、p-香豆酸和咖啡酸，值得進(jìn)一步開發(fā)利用．

將高效液相色譜法測定得到的多酚類物質(zhì)含量進(jìn)行加合得到總酚含量，與前面使用福林酚法測得的總酚含量進(jìn)行對(duì)比，兩種方法測定結(jié)果存在一定差異.原因可能是，福林酚與酚型氨基酸、抗壞血酸等還原性物質(zhì)反應(yīng)，進(jìn)而使其測得的總酚結(jié)果偏高．

2.3 高酸蘋果抗氧化、抗溶血活性評(píng)價(jià)

高酸蘋果富含多酚類化合物，一般情況下，多酚含量越高，其抗氧化活性越強(qiáng).筆者采用DPPH自由基清除法和氧自由基吸收能力法評(píng)價(jià)了高酸蘋果(全果、皮、肉、渣、汁)的抗氧化活性，并構(gòu)建AAPH損傷人血紅細(xì)胞氧化模型，對(duì)比研究了高酸

表3 高酸蘋果皮、肉、渣、全果多酚類化合物組成與含量1)

Table 3 Phenolics profiles of peel， flesh， pomace， and whole fruit of high acid apple

多酚化合物含量/(mg·kg-1)果皮果肉果渣全果綠原酸357.75±10.23a546.30±19.56b413.52±20.1a391.19±18.37a根皮苷348.39±7.98d23.58±1.65a148.86±5.72c57.10±1.85b表兒茶素1834.96±21.78d550.21±11.76a1210.88±18.32c698.82±17.21b阿魏酸6.89±0.21a3.68±0.03a10.39±0.12c3.88±0.11a楊梅酮41.91±1.01d1.42±0.01a14.42±0.05c4.25±0.01b兒茶素1001.90±9.21d399.01±8.24a647.08±7.21c570.30±9.21b香草酸132.81±2.22d7.82±0.18a98.79±0.76c55.68±0.64bp-香豆酸76.99±1.01b38.87±0.65a98.83±1.11c38.75±0.21a蘆丁125.25±7.21d3.84±0.11a41.83±0.76c12.75±0.14b咖啡酸104.40±1.23d37.93±0.24a78.35±0.63c42.95±0.35b總酚(HPLC法)4031.261612.662762.931875.67總酚(福林酚法)4054.271625.922824.202026.88

1)同行中標(biāo)注不同角標(biāo)者具有顯著性差異 (P<0.05).

表4 高酸蘋果汁多酚類化合物組成與含量

蘋果(全果、皮、肉、渣、汁)的抗溶血活性，結(jié)果如表5 所示.果汁的DPPH自由基清除率為(9.75 ± 0.20)μmol/mL，抗溶血活性為(15.58 ± 0.05)μmol/mL,氧自由基吸收能力為(25.34 ± 1.20)μmol/mL．

總的來說， 高酸蘋果(全果、皮、肉、渣、汁)均具有一定的抗氧化活性，且具有保護(hù)氧化損傷的紅細(xì)胞能力(抗溶血活性).抗氧化和抗溶血活性從高到低依次為:果皮>果渣>全果>果肉．

表5 高酸蘋果皮、肉、渣、全果抗氧化和抗溶血活性

Table 5 Antioxidant and anti-hemolysis activities of peel， flesh，pomace， and whole fruit of high acid apple mmol/kg

具體說來，果皮抗氧化活性最好.果皮的DPPH自由清除能力是全果的2.6倍，是果肉的3.5倍;果皮的氧自由基吸收能力是全果的2.25倍，是果肉的2.54倍;果皮的抗溶血活性是全果的3.08倍，是果肉的4.15倍.此外，果汁也具有較強(qiáng)的抗氧化活性．

蘋果的抗氧化活性與其中多酚含量呈正相關(guān)，即，多酚含量越高，其抗氧化活性越強(qiáng).果皮中多酚類化合物最高，因此它呈現(xiàn)出最強(qiáng)的抗氧化活性.榨汁過程中，果肉中的多酚物質(zhì)進(jìn)入果汁，大量多酚還殘留在果渣中，所以果渣的抗氧化活性也很強(qiáng)．

3 結(jié)論

(1)“洪勛1號(hào)(紅肉)”高酸蘋果出汁率高，pH值低，可滴定酸含量高，適合加工成高品質(zhì)的濃縮果汁．

(2)高酸蘋果的總酚和花青素含量較高，尤其以果皮含量為最高.總酚和花青素含量依次為:果皮>果渣>全果>果肉;果汁中總酚含量為(1 380±12.32)mg/L，花青素含量為(152.79± 1.18)mg/L.高酸蘋果富含綠原酸((391.19 ±18.37 )mg/kg)、表兒茶素((698.82±17.21)mg/kg)和兒茶素((570.30±9.21)mg/kg) ．

(3)高酸蘋果(全果、皮、肉、渣、汁)均具有一定的抗氧化和抗溶血活性，且以果皮活性為最強(qiáng)， 抗氧化和抗溶血活性依次為:果皮>果渣>全果>果肉．

(4)“洪勛1號(hào)(紅肉)”高酸蘋果適合加工成為兼具營養(yǎng)價(jià)值和商業(yè)價(jià)值的優(yōu)質(zhì)濃縮果汁，且榨汁剩余的果渣中多酚含量較高，抗氧化活性較強(qiáng)，值得進(jìn)一步開發(fā)利用．

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Investigation into Identification, Antioxidant Activity and Anti-Hemolysis Activity of Phenolics Compounds in High Acid Apple

SUNWei-zhengYANGKunLINLian-zhuZOUYingZHAOMou-ming

(School of Food Science and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510640, Guangdong, China)

The composition of a kind of high acid apple from Xinjiang, China, namely Hongxun Ⅰ (red flesh), was determined, finding that the high acid apple is of a titratable acidity of 1.31%, a total phenolics and anthocyanins content in an order of peel>pomace>whole fruit (with a total phenolics content of (2 026.88±28.30)mg/kg and a total anthocyanins content of (244.92±13.88)mg/kg)>flesh. Then, ten phenolic compounds including chlorogenic acid, phlorizin, epicatechin, ferulic acid, myricetin, catechins, vanillic acid,p-coumaric acid, rutin and caffeic acid were indentified by means of high-performance liquid chromatography, finding that the high acid apple is rich in chlorogenic acid ((391.19±18.37)mg/kg),epicatechin ((698.82±17.21)mg/kg) and catechins ((570.30±9.21)mg/kg). Moreover, the antioxidant and anti-hemolysis activities of the high acid apple were determined by means of DPPH radical scavenging activity assay, oxygen radical absorption capacity assay and AAPH-induced oxidative damage human erythrocytes model, finding that the peel, flesh, pomace and whole fruit of the high acid apple all exhibit excellent antioxidant activity and that the anti-hemolysis activities are indicative of the following order:peel>pomace>whole fruit>flesh. All these above-mentioned statements indicate that, as a valuable product, high acid apple is worth processing and developing.

high acid apple; antioxidant activity; anti-hemolysis activity; phenolics

2016- 05- 05

廣東省自然科學(xué)基金博士啟動(dòng)基金資助項(xiàng)目(2015A030310494)；廣東“特支計(jì)劃”科技創(chuàng)新青年拔尖人才項(xiàng)目(2014TQ01N538) Foundation items: Supported by the Dr. Start-up Fund Projects of the Natural Science Foundation of Guangdong Province (2015A030310494) and the Special Support Project of Guangdong Province for Science and Technology Innovative Young Talents (2014TQ01N538 )

孫為正(1983-),男,博士,教授,主要從事食品蛋白質(zhì)與營養(yǎng)研究. E-mail:fewzhsun@scut.edu.cn

?通信作者: 趙謀明(1964-),男,博士,教授,主要從事食品生物技術(shù)研究. E-mail:femmzhao@scut.edu.cn

1000- 565X(2017)03- 0146- 07

TS 201

10.3969/j.issn.1000-565X.2017.03.021