FSHβ基因?qū)慕阖i母豬繁殖性能的影響

李 俊，陳大芳，張 勇，熊勝利，龍清孟，張 雄，白 優(yōu)，陸 靜，馮文武，李 平，王 燕，李 波，侯 萍

（1.貴州省種畜禽種質(zhì)測定中心，貴州 貴陽 550018；2.貴州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，貴州 貴陽 550025；3.貴陽綠生源畜牧科技發(fā)展有限公司，貴州 貴陽 550018）

遺傳育種

FSHβ基因?qū)慕阖i母豬繁殖性能的影響

李 俊1，陳大芳1，張 勇2，3，熊勝利1，龍清孟1，張 雄2，白 優(yōu)2，陸 靜2，馮文武1，李 平1，王 燕1，李 波1，侯 萍1

（1.貴州省種畜禽種質(zhì)測定中心，貴州 貴陽 550018；2.貴州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，貴州 貴陽 550025；3.貴陽綠生源畜牧科技發(fā)展有限公司，貴州 貴陽 550018）

以從江香豬母豬為研究對象，選取卵泡刺激素 β 亞基（FSHβ）基因作為影響從江香豬繁殖性能的候選基因，采用 PCR-SSCP（單鏈構(gòu)象多態(tài)性）和測序技術(shù)，對從江香豬母豬的 FSHβ 基因進(jìn)行單核苷酸多態(tài)性研究，尋找與繁殖性狀相關(guān)聯(lián)的遺傳標(biāo)記。結(jié)果表明：在受試群體中，發(fā)現(xiàn)FSHβ 基因第 2 外顯子 86 bp 處發(fā)生 C/T 突變，該突變?yōu)橥x突變，產(chǎn)生 3 種帶型，分別命名為 TT、CT、CC 基因型。關(guān)聯(lián)性分析顯示：在初產(chǎn)母豬的產(chǎn)活仔數(shù)和經(jīng)產(chǎn)母豬的總產(chǎn)仔數(shù)中，TT 基因型均比 CC、CT 基因型多，均未達(dá)到差異顯著水平（P＞0.05）；但初產(chǎn)母豬總產(chǎn)仔數(shù) TT 基因型比 CC 基因型多 1.66 頭，差異顯著（P＜0.05），經(jīng)產(chǎn)母豬的產(chǎn)活仔數(shù) TT 基因型比 CC 基因型多 1.95 頭，差異顯著（P＜0.05）；對于乳頭數(shù)，TT 基因型比 CC 基因型多 1.38 對，差異顯著（P＜0.05）。遺傳效應(yīng)分析發(fā)現(xiàn)，等位基因 T 對從江香豬母豬的繁殖性能表現(xiàn)為正效應(yīng)，TT 基因型對母豬總產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)、乳頭數(shù)的估計(jì)育種值分別為 0.87、1.03、0.72?？傮w上，TT 基因型為有利基因型，對從江香豬母豬的繁殖性狀數(shù)量值具有一定的促進(jìn)作用，在選育過程中可注重 TT 基因型個(gè)體的選育。

從江香豬；FSHβ 基因；多態(tài)性分析；繁殖性能

從江香豬是我國珍貴的優(yōu)良地方微型豬種，僅產(chǎn)于貴州省從江縣，以體形矮小、肉質(zhì)香嫩、基因純合、純凈無污染等獨(dú)特優(yōu)點(diǎn)而著稱[1]，2000 年農(nóng)業(yè)部130 號公告將其列入《國家級畜禽品種資源保護(hù)名錄》；但其產(chǎn)仔數(shù)較低，平均產(chǎn)仔數(shù) 7 頭左右，乳頭數(shù)平均 5 對[2]。豬的產(chǎn)仔數(shù)是評價(jià)豬繁殖性能的主要指標(biāo)，提高產(chǎn)仔數(shù)對增加養(yǎng)豬業(yè)的總體經(jīng)濟(jì)效益意義重大。由于產(chǎn)仔數(shù)這一性狀的遺傳力較低，且性狀表現(xiàn)晚，如采用常規(guī)選擇方法對其改良則進(jìn)展緩慢，如丹麥耗費(fèi) 30 余年的時(shí)間僅將豬產(chǎn)仔數(shù)提高 1 頭[3]。近年來，隨著分子生物學(xué)和分子遺傳學(xué)的發(fā)展，對動(dòng)物經(jīng)濟(jì)性狀（數(shù)量性狀）多基因構(gòu)成的遺傳分析研究成為遺傳學(xué)研究的主要方向，尤其對豬的高繁殖性能研究更是眾多研究中的熱點(diǎn)，大量的工作投入到從分子水平對繁殖性狀的遺傳剖分研究中，使得尋找多仔基因的遺傳標(biāo)記、開展分子標(biāo)記輔助選擇（MAS）成為可能。目前，已證實(shí)雌激素受體（ESR）基因和卵泡刺激素 β 亞基（FSHβ）基因是影響豬產(chǎn)仔數(shù)的主效基因[4-5]。

卵泡刺激素 （follicle stimulating hormone,FSH）是由垂體前葉合成的糖蛋白激素，分子結(jié)構(gòu)由 α、β兩個(gè)亞基組成，其中β亞基決定促卵泡素的特異性促卵泡素 β 亞基（FSHβ）主要是刺激卵泡的生長和發(fā)育，影響生長卵泡的數(shù)量，并在促黃體素的協(xié)同作用下，激發(fā)卵泡的最后成熟，誘發(fā)排卵[6]。FSHβ 亞基基因定位于豬 2 號染色體上，全長 10 kb，由 3 個(gè)外顯子和 2 個(gè)內(nèi)含子組成，編碼 111 個(gè)氨基酸的蛋白 質(zhì)[7]。 Li 等[5]研 究 表 明 ，促 卵 泡 素 β 亞 基（follicle stimulating hormone β sub-unit,FSHβ） 基因與豬產(chǎn)仔數(shù)的主效基因連鎖，進(jìn)一步的研究證明 FSHβ基因本身也是豬產(chǎn)仔數(shù)的主效基因。

本試驗(yàn)以從江香豬母豬為研究對象，統(tǒng)計(jì)初產(chǎn)母豬和經(jīng)產(chǎn)母豬的總產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)、乳頭數(shù)，利用 PCR-SSCP（單鏈構(gòu)象多態(tài)性）、DNA 測序等分子生物學(xué)研究技術(shù)，從分子水平探究 FSHβ 基因?qū)慕阖i繁殖性能的影響，為后續(xù)分子育種提供理論參考，最終結(jié)合常規(guī)育種手段，提高從江香豬繁殖性能，推動(dòng)從江香豬高繁殖力品系的選育，促進(jìn)貴州這一特有珍稀小型豬品種的合理保護(hù)、開發(fā)和利用。

1 試驗(yàn)方法

1.1 試驗(yàn)時(shí)間與地點(diǎn)

試驗(yàn)于 2015 年 10 月在貴州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院和貴州省貴陽市綠生源香豬生態(tài)福利養(yǎng)殖場進(jìn)行。

1.2 試驗(yàn)材料

1.2.1 試驗(yàn)動(dòng)物 從江香豬母豬 52 頭，采自貴陽市烏當(dāng)區(qū)綠生源畜牧科技公司香豬生態(tài)福利養(yǎng)殖場。用耳號鉗取耳組織 0.5 g，放入裝有 1 mL 70%乙醇的 1.5 mL 離心管中，帶回實(shí)驗(yàn)室-20 ℃冰箱保存?zhèn)溆?；同時(shí)，通過母豬記錄卡記錄母豬的總產(chǎn)仔數(shù)（total number born,TNB）、產(chǎn)活仔數(shù) （number born alive,NBA）及乳頭數(shù)（teatnumber,TN）指標(biāo)。

1.2.2 主要試劑 組織基因組 DNA 提取試劑盒、2× Taq Master Mix、丙烯酰胺、N，N，-亞甲基雙丙烯酰胺、硼酸、過硫酸銨、核酸染料、瓊脂糖（Agarose）、硝酸銀、碳酸鈉、去離子甲酰胺、DL 2 000 DNA Marker等試劑均購自上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司；去離子水、無水乙醇、TAE 緩沖液等試劑實(shí)驗(yàn)室自備。

1.2.3 主要儀器 PCR 擴(kuò)增儀（C1000 Touch，美國BIO-RAD 公司），凝膠成相系統(tǒng)（Universal Hood II，美國 BIO-RAD 公司），電泳儀 （PowerPacTM HV Power Supply，美國 BIO-RAD 公司），微量移液器（eppendorf，德國艾本德公司），紫外分光光度計(jì)（Ultrospec 2100 pro，安瑪西亞中國有限公司）等。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 DNA 提取 組織基因組 DNA 提取試劑盒提取 DNA，1%瓊脂糖凝膠電泳檢測，凝膠成像系統(tǒng)照相保存，并用紫外分光光度計(jì)測量每個(gè) DNA 樣品濃度 3 次，取其平均值，-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2 引物設(shè)計(jì)與 PCR 擴(kuò)增 參照 GenBank（登錄號為 NC_010444.3）提供的豬 FSHβ基因序列，運(yùn)用GenBank 中的 Primer-BLAST 設(shè)計(jì) FSHβ基因 Exon2引物（表 1），委托上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司合成。

采用 25 μL PCR 反應(yīng)體系：DNA 模板 2.5 μL，2×Taq Master Mix 12.5 μL，上、下游引物各 1.5 μL，ddH2O 7 μL。PCR 反應(yīng)條件：95 ℃預(yù)變性 4min，94 ℃變性 30 s，退火 30 s，72 ℃延伸 1 min，共 34 個(gè)循環(huán)；72 ℃再延伸 10 min；PCR 產(chǎn)物 4 ℃保存，1%瓊脂糖凝膠電泳檢測，凝膠成像系統(tǒng)照相保存；將目的PCR 產(chǎn)物送北京諾賽生物公司測序。

表1 PCR-SSCP 引物序列、退火溫度、擴(kuò)增長度及區(qū)域

1.3.3 統(tǒng)計(jì)分析 將測序得到的 DNA 序列用 DNAStar等軟件進(jìn)行序列對比，篩選 SNPs位點(diǎn)和基因分型，計(jì)算不同位點(diǎn)在受試群體中的基因型頻率、等位基因頻率、有效等位基因數(shù)（Ne）、群體遺傳純合度（Ho）、雜合度（He）和多態(tài)信息含量（PIC），并進(jìn)行哈迪-溫伯格平衡檢測；根據(jù)最小二乘線性模型，分析不同基因型及單倍型與樣本母豬繁殖性能的關(guān)聯(lián)效應(yīng)。

2 結(jié)果與分析

2.1 基因組 DNA 提取

利用基因組 DNA 提取試劑盒提取從江香豬耳組織 DNA，用 1%瓊脂糖凝膠電泳檢測，電泳條帶明亮清晰、整齊、無拖尾（圖 1），說明所提取的從江香豬基因組 DNA 完整度好，且無降解和污染；然后用微量紫外分光光度計(jì)檢測，其 OD260/280在 1.6～1.8 之間，說明提取的基因組 DNA 純度較好，無需純化，可用于后續(xù) PCR 擴(kuò)增試驗(yàn)。

圖1 從江香豬基因組DNA提取結(jié)果

2.2 FSHβ 基因 Exon2 PCR 擴(kuò)增

對所有樣品進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增，經(jīng) 1%瓊脂糖凝膠電泳檢測，均顯示為 1 條特異性條帶，其片段長度為178 bp（圖 2），與預(yù)期相符，可用于后續(xù) PCR-SSCP檢測分析。

圖2 FSHβ 基因 Exon2 PCR 電泳檢測結(jié)果

2.3 PCR-SSCP 分析及測序結(jié)果

將目的 PCR 產(chǎn)物經(jīng)變性后，通過 10%非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳和硝酸銀染色，結(jié)果顯示為3種帶型，分別命名為 CC、CT 和 TT（圖 3）。選取每種基因型3個(gè)重復(fù)樣送北京諾賽生物公司測序，運(yùn)用SeqMan 軟件分析測序結(jié)果（圖 4），發(fā)現(xiàn)第 2 外顯子86 bp 處發(fā)生 C/T 突變，該突變?yōu)橥x突變，未導(dǎo)致氨基酸序列發(fā)生改變。通過序列對比發(fā)現(xiàn)，CC 基因型個(gè)體的序列與 GenBank 上提交的序列相一致，定義為野生型，TT 基因型定義為突變型，而 CT 基因型定義為雜合型。

圖3 FSHβ 基因 Exon2 PCR-SSCP 電泳結(jié)果

圖4 FSHβ基因 Exon2 不同基因型測序結(jié)果

2.4 遺傳效應(yīng)分析

從群體遺傳學(xué)角度對從江香豬 FSHβ 基因C86T 位點(diǎn)的基因型和等位基因頻率進(jìn)行分析結(jié)果見表 2。由表 2 可知，CC 基因型頻率為 21.15%，CT基因型頻率為 61.54%，TT 基因型頻率為 17.31%；C等位基因頻率為 51.92%，表現(xiàn)為優(yōu)勢等位基因，T等位基因頻率為 48.08%。

通過對 C86T 位點(diǎn)的遺傳結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)純合度（Ho）為 0.500 7，雜合度（He）為 0.499 3，有效等位基因數(shù)（Ne）為 1.997 2；純合度和雜合度相差不大，說明該位點(diǎn)在該群體中的變異較均衡；有效等位基因數(shù)（Ne）接近實(shí)際檢測到的 2 個(gè)等位基因數(shù)；多態(tài)信息含量 （PIC） 為 0.374 7，表現(xiàn)為中度多態(tài)（0.25＜PIC＜0.50），表明該位點(diǎn) 在該群體中分布均勻，且能比較合理地提供遺傳信息。經(jīng) χ2適合性檢驗(yàn)結(jié)果表明，該位點(diǎn)在試驗(yàn)群體中產(chǎn)生的多態(tài)性未偏離 Hardy-weinberg 平衡（P＞0.05）。

表2 FSHβ 基因 SNP 位點(diǎn)遺傳效應(yīng)分析

2.5 不同基因型與繁殖性能的關(guān)聯(lián)分析

從江香豬 FSHβ 基因第 2 外顯子 C86T 位點(diǎn)不同基因型與母豬總產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)及乳頭數(shù)的最小二乘分析結(jié)果見表 3。由表3可知，對于初產(chǎn)母豬，總產(chǎn)仔數(shù) TT 基因型比 CC 基因型多 1.66 頭，差異顯著（P＜0.05）；比 CT 基因型多 0.53 頭，差異不顯著（P＞0.05）。而產(chǎn)活仔數(shù) TT 基因型分別比 CC 基因型和 CT 基因型多 1.2 頭和 0.51 頭，但差異均不顯著（P＞0.05）。在經(jīng)產(chǎn)母豬中，總產(chǎn)仔數(shù) TT 基因型分別比 CC 基因型、CT 基因型多 1.25 頭、0.79 頭，差異均不顯著（P＞0.05）；而產(chǎn)活仔數(shù) TT 基因型比 CC 基因型多 1.95 頭，差異顯著（P＜0.05），比 CT 基因型多 0.96 頭，但差異不顯著（P＞0.05）。對于乳頭數(shù)，TT基因型比 CC 基因型多 1.38 對，差異顯著（P＜0.05）；比 CT 基因型多 0.72 對，差異不顯著（P＞0.05）。對于初產(chǎn)母豬和經(jīng)產(chǎn)母豬的總產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)，以及乳頭數(shù)的總體趨勢為：TT＞CT＞CC。

表3 FSHβ 基因不同基因型與產(chǎn)仔數(shù)關(guān)聯(lián)性分析

為進(jìn)一步分析對從江香豬母豬繁殖性能具有顯著影響的 C86T 位點(diǎn)，利用數(shù)量性狀遺傳分析模型計(jì)算該 SNP 位點(diǎn)在從江香豬群體的基因平均效應(yīng)、基因替代平均效應(yīng)、群體基因型均值和育種值（表 4）。由表 4 中數(shù)據(jù)可知，C86T 位點(diǎn)對從江香豬母豬的初產(chǎn)總產(chǎn)仔數(shù)、經(jīng)產(chǎn)產(chǎn)活仔數(shù)，以及乳頭數(shù)均有顯著影響，其等位基因 T 對初產(chǎn)總產(chǎn)仔數(shù)、經(jīng)產(chǎn)產(chǎn)活仔數(shù)、乳頭數(shù)的平均效分別為 0.44、0.51、0.36；而等位基因C的基因平均效應(yīng)均表現(xiàn)為負(fù)效應(yīng)。TT基因型對初產(chǎn)總產(chǎn)仔數(shù)、經(jīng)產(chǎn)產(chǎn)活仔數(shù)、乳頭數(shù)的估計(jì)育種值分別為 0.87、1.03、0.72；而 CC 基因型均表現(xiàn)為負(fù)效應(yīng)。總體上，TT 基因型對從江香豬母的繁殖性狀數(shù)量值具有一定的促進(jìn)作用，在選育過程中可注重TT基因型個(gè)體的選育。

表4 FSHβ 基因數(shù)量性狀遺傳效應(yīng)分析

3 討論

FSHβ基因作為影響母豬繁殖性狀的一個(gè)主效基因，近年來，國內(nèi)相關(guān)研究者加大對豬 FSHβ基因多態(tài)性研究的力度。趙要風(fēng)等[8]研究發(fā)現(xiàn)，在豬的FSHβ 基因內(nèi)含子 1 中存在的 292 bp 逆轉(zhuǎn)座子插入突變所形成的多態(tài)性位點(diǎn)，只要根據(jù)插入突變設(shè)計(jì)引物，就可利用 PCR 檢測豬的 FSHβ 座位的多態(tài)性，并發(fā)現(xiàn)該座位純合基因型AA顯著提高豬產(chǎn)仔數(shù)。李慶崗等[9]發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)SHβ 基因的 A 等位基因?qū)簇i新品系繁殖性狀均具有正的加性效應(yīng)，AA 基因型為該豬群的優(yōu)良基因型。燕志宏等[10]發(fā)現(xiàn)，宗地花豬 FSHβ 基因 AA 基因型的平均產(chǎn)仔數(shù)及產(chǎn)活仔數(shù)均顯著高于 AB 基因型。萬明春等[11]在玉山黑豬中發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)SHβ 基因 AA 基因型為優(yōu)勢基因型，這與鄒劍戎等[12]在荷包豬和魯紹雄等[13]在撒壩豬群體中的研究結(jié)果相一致。戴麗荷等[14]研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)SHβ基因在嘉興黑豬、巴馬香豬、金華豬和八眉豬中幾乎只有A 等位基因，而在大約克、長白、杜洛克豬種中均是以 B 等位基因占優(yōu)勢。蘇先敏等[15]研究發(fā)現(xiàn)，大白、長白及杜洛克母豬 FSHβ基因 B 等位基因頻率較高，BB 基因型占有優(yōu)勢，這與李千軍等[16]、施啟順等[17]在長白豬種和大白豬種中的研究結(jié)果相一致。劉超等研究也證實(shí)大白豬 FSHβ基因優(yōu)勢基因?yàn)?B 等位基因，初產(chǎn)母豬的 AB 基因型健仔數(shù)比 AA 型多1.21 頭。陳來華等[18]研究大白豬 FSHβ基因發(fā)現(xiàn)，A等位基因?qū)偖a(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)、初生重和胎盤性狀均表現(xiàn)為正效應(yīng)?？梢姡谥袊胤截i種的研究中，大多數(shù)是 A 等位基因頻率較高，AA 基因型為優(yōu)勢基因型，外來品種和少部分地方品種表現(xiàn)為BB基因型為優(yōu)勢基因型；造成這一差異的原因可能是由于外來品種長期對豬的高產(chǎn)性進(jìn)行選擇而導(dǎo)致了BB基因型的積累。

本試驗(yàn)研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在從江香豬 FSHβ 基因第 2 外顯子 86 bp 處發(fā)現(xiàn) C/T 突變，且產(chǎn)生 3 種不同基因型，與龍國榮等[19]在貴州白香豬上發(fā)現(xiàn)的C86T突變位點(diǎn)相一致，均產(chǎn)生 3 種基因型。而 Zhang 等[20]在民豬、杜洛克等 6 個(gè)品系中研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)SHβ 基因外顯子 2 在 48 bp 處發(fā)生 C/T 突變，與吳兆海[21]在馬身豬、杜洛克豬、大白豬、山西黑豬和山西白豬等 5個(gè)豬種 FSHβ 基因第 2 外顯子第 48 位上檢測到C→T 的轉(zhuǎn)換突變?yōu)橥x突變相一致，但與本研究結(jié)果不一致，猜測其原因可能是由于品種的不同導(dǎo)致SNP 位點(diǎn)的檢測發(fā)生差異。高天等[22]在嘉興黑豬中研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)SHβ基因第 2 外顯子 3 個(gè) SNP 位點(diǎn)（A923C、A926G 和 T1 036C），但與繁殖性狀沒有顯著關(guān)聯(lián)。鄭心力等[23]在五指山豬中發(fā)現(xiàn) FSHβ 基因 6處單堿基突變位點(diǎn)，分別位于第 1 內(nèi)含子（A-757G、A-645G、A-531G）和第 2 內(nèi)含子（C+1 431T、A+1 434G、C+1 502T）。本研究通過關(guān)聯(lián)分析發(fā)現(xiàn)，C86T 位點(diǎn)對從江香豬母豬的初產(chǎn)總產(chǎn)仔數(shù)、經(jīng)產(chǎn)產(chǎn)活仔數(shù)以及乳頭數(shù)均有顯著影響（P＜0.05），T 基因?yàn)橛欣任换?，TT 基因型為有利基因型，表現(xiàn)為正效應(yīng)，對于初產(chǎn)母豬和經(jīng)產(chǎn)母豬的總產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)，以及乳頭數(shù)的總體趨勢為：TT>CT>CC。因此，在以后選育從江香豬母豬繁殖性狀時(shí)，注重TT基因型母豬的選育，再結(jié)合常規(guī)育種方法，選擇和淘汰種母豬，以便更有效地提高選種準(zhǔn)確度和遺傳改良效率，加快選種選育進(jìn)程，擴(kuò)大從江香豬種群規(guī)模，更好地保護(hù)和利用從江香豬這一名貴的地方豬種。但由于本試驗(yàn)樣本數(shù)少、品種單一，具有一定局限性，再加上母豬的繁殖性能受到遺傳、管理、營養(yǎng)水平和周圍環(huán)境等各方面的影響很大[24]，因此，在今后的研究中，將擴(kuò)大樣本數(shù)，并在產(chǎn)仔數(shù)、乳頭數(shù)差異較大品種中驗(yàn)證該突變位點(diǎn)是否對母豬繁殖性能產(chǎn)生影響。

[1] 劉培瓊，劉若余，燕志宏，等.香豬的種質(zhì)特性[J].中國豬業(yè)，2013（S1）：163-164.

[2] 劉培瓊.中國香豬[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2010：142-148.

[3] 熊遠(yuǎn)著.瘦肉豬育種的發(fā)展及展望[J].中國工程科學(xué)，2000，2（9）：42-46.

[4] Rothschild M,Jacobson C,Vaske D,et al.The estrogen receptor locus is associated with amajor gene influencing litter size in pigs[J].Proc Natl Acad Sci U SA,1996,93(1):201-205.

[5] Li N,Zhao Y F,Xiao L,et al.Candidate gene approach for identification of genetic loci controlling litter size in swine[A]// Proc.6th World Congress on Genetics Applied to Livestock Production[C].Armidale,Australia,1998:183-188.

[6] Cooke D J,Crowe M A,Roche JF,et al.Gonadotrophin hetero-geneity and its role in farm animal reproduction[J].Animal Reproduction Science,1996,41(2):77-79．

[7] Hirai T,Takikawa H,Kato Y.The gene for beta subunit ofporcine FSH of consensus oestrogen-responsive element andpresenceof retroposons[J].JMolEndocrinol,1990,5(2):147-158.

[8] 趙要風(fēng)，李寧，肖璐，等.豬 FSHβ 亞基基因結(jié)構(gòu)區(qū)逆轉(zhuǎn)座子插入突變及其與豬產(chǎn)仔數(shù)關(guān)系的研究[J].中國科學(xué)，1999，29（1）：82-86.

[9] 李慶崗，王志秀，張博，等.FSHβ、ESR 和 PRLR 基因多態(tài)性與淮豬新品系產(chǎn)仔數(shù)相關(guān)性分析[J].養(yǎng)豬，2014（1）：52-56.

[10] 燕志宏，毛同輝，馮文豪.宗地花豬 ESR、FSHβ 基因的多態(tài)性及其對繁殖性能的影響[J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38（7）：134-137.

[11] 萬明春，周泉勇，霍俊宏，等.玉山黑豬 ESR 和 FSH-β 基因多態(tài)性及相關(guān)性狀的研究[J].江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2014，26（3）：107-109.

[12] 鄒劍戎，朱弘焱，蘇玉虹.遼寧種豬 ESR 和 FSHβ 基因多態(tài)性及其與產(chǎn)仔性能的關(guān)聯(lián)分析[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2010（6）：66-68.

[13] 魯紹雄，胡曉湘，連林生，等.撒壩豬 ESR 和 FSH-β 基因多態(tài)性及其與產(chǎn)仔數(shù)的關(guān)聯(lián)分析[J].云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2009，24（3）：389-393.

[14] 戴麗荷，胡錦平，褚曉紅，等.FSHβ 基因多態(tài)性及對不同品種豬繁殖性狀的影響[J].浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2013，25（3）：461-466.

[15] 蘇先敏，朱世平，趙喬輝，等.臺系大白、長 白和杜洛克 豬FSHβ 基因多態(tài)性及其與繁殖性能的關(guān)系[J].中國畜牧雜志，2013，49（19）：5-8.

[16] 李千軍，王立剛，穆淑琴，等.ESR，F(xiàn)SHβ 及 OPN 基因多態(tài)性與母豬繁殖性狀的關(guān)聯(lián)分析[J].中國畜牧獸醫(yī)，2010（10）：139-143.

[17] 施啟順，柳小春，劉志偉，等.5 個(gè)與豬產(chǎn)仔數(shù)相關(guān)基因的效應(yīng)分析[J].遺傳，2006，28（6）：652-658.

[18] 陳來華，王立賢，季躍光，等.FSHβ 亞基基因與繁殖性能及胎盤性狀的關(guān)聯(lián)分析[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2010，41（11）：1365-1370.

[19] 龍國榮，許厚強(qiáng)，李世功，等.貴州白香豬 FSHβ 基因多態(tài)性與產(chǎn)仔數(shù)的關(guān)聯(lián)分析[J].廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，40（13）：129-131.

[20]Zhang D J,Liu D,Yang GW.Polymorphism of FSHβ subunit gene in six pig breeds[J].Journal of Northeast Agricultural University(English Edition),2010,17(1):62-64.

[21] 吳兆海，薛振鋒，梁超，等.豬 FSHβ 基因第 2 外顯子多態(tài)性與產(chǎn)仔性能的關(guān)聯(lián)分析[J].中國畜牧雜志，2012（17）：6-9.

[22] 高天，鐔忠斌，王曉杜，等.嘉興黑豬 ESR2 和 FSHβ 及 PRLR基因多態(tài)性與繁殖性狀 相關(guān)性分析[J].中國 畜牧雜志，2016，52（5）：1-7.

[23] 鄭心力，劉海隆，黃麗麗，等.五指山豬 FSHβ 基因克隆測序及生物信息學(xué)分析[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2016（9）：93-95.

[24] 劉嬋娟，曾勇慶，魏述東，等.8 個(gè)豬種 ESR 和 FSHβ 基因合并基因型與繁殖性狀關(guān)系的研究[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2009，40（3）：291-295.

（編輯：富春妮）

艾葉不只用來艾灸

中醫(yī)認(rèn)為，艾葉可理氣血、除寒濕。除了作為艾灸的原料，艾葉還有很多用處。

止癢：艾葉外用有祛濕止癢、抑菌作用。濕疹導(dǎo)致的皮膚瘙癢、腳部細(xì)菌滋生引起的瘙癢，可用艾葉煎水清洗、浸泡。

治療風(fēng)濕痛：艾葉有活氣血、逐寒濕、溫通經(jīng)絡(luò)的作用。用菊花與艾葉一同制作成護(hù)膝以及護(hù)腰墊，可以緩解關(guān)節(jié)紅腫、酸痛、僵硬，以及腰背酸痛等。

調(diào)理痛經(jīng)：艾葉有暖血溫經(jīng)的作用，又能壯子宮，所以治療婦科疾病的方劑中多會(huì)添加。當(dāng)女性發(fā)生痛經(jīng)時(shí)，可以食用艾葉煮蛋、艾葉母雞湯或艾葉紅糖茶來調(diào)理。

緩解頭痛：艾葉枕頭對調(diào)理因天氣寒冷、潮濕引起的頭痛有效好的效果，長期使用艾葉枕頭還可以預(yù)防感冒與緩解頸椎疼。

止盜汗：清醒時(shí)候不流汗，一旦入睡便會(huì)大量地出汗，中醫(yī)稱這種現(xiàn)象為盜汗?！侗静菥V目》指出，可用艾葉 10 克、白茯苓 15 克、烏梅 3 個(gè)，一同煎水，睡前服用治療盜汗。

艾葉雖然作用很多，但是使用時(shí)也有一定注意事項(xiàng)。首先，不宜一次性服用太多，容易引起惡心、嘔吐以及腹部不適等。其次，艾草中的油脂對皮膚有一定的刺激性，如果出現(xiàn)皮膚發(fā)熱、潮紅，最好停止使用。另外，艾草性溫，容易上火的人群最好不要使用，使用艾葉之前最好先咨詢醫(yī)生。

（摘自《長壽養(yǎng)生報(bào)》2017.04.21 徐 云/文）

The Effect on Reproductive Performance for FSHβ Gene in Congjiang Sow Pigs

LIJun1,CHEN Dafang1,ZHANG Yong2,3,XIONG Shengli1,LONG Qingmeng1,ZHANG Xiong2,BAIYou2, LU Jing2,FENGWenwu1,LIPing1,WANG Yan1,LIBo1，HOU Ping1
(1.Guizhou Germplasm Determination Center of Livestock and Poultry,Guiyang 550018,China;2.College of Animal Science of Guizhou University,Guiyang 550025,China;3.Guiyang Lvshengyuan Livestock Technology Development Company Limited,Guiyang 550018,China)

In this study,Congjiang sow pigswere served as research objects.The follicle stimulating hormone β subunit(FSHβ)genewas selected as the candidate gene influencing reproductive performance of Congjiang pigs. Using PCR-SSCP and sequencing techniques to research single nucleotide polymorphisms of FSHβ gene in Congjiang sow pigs,which would search for genetic markers associated with reproductive traits.The results showed that C/T mutation was found in 86 bp of exon 2 of FSHβ gene,and the mutation was a synonymous mutation,and 3 genotypes were generated,respectively named TT,CT,and CC genotype.Correlation analysis showed that TT genotype wasmore than CC and CT genotype in the number born alive of primiparous sows and the total number born of sows.The difference was not significant(P＞0.05).The TT genotype was 1.66 more than CC genotype in the total number born of primiparous sows,the difference was significant(P ＜0.05).The TT genotype was 1.95 more than CC genotype in the number born alive of sows,the difference was significant(P＜0.05).For the teat number,TT genotype was 1.38 more than CC genotype,the difference was significant(P＜0.05). Genetic effects analysis showed that the allele T had a positive effect on the reproductive performance of Congjiang sow pigs.Estimated breeding values of TT genotype were 0.87,1.03,0.72 for the total number born, the number born alive,the teat number of the sows.On the whole,the TT genotype was a favorable genotype, which had a positive effect on the quantitative traits of reproductive performance for Congjiang sow pigs.In the breeding process should pay attention to TT genotype individual breeding.

Congjiang pig;FSHβgene;polymorphism analysis;reproductive performance

S828

A

1002-1957(2017)03-0073-05

2017-03-23

李 ?。?989-），男，貴州遵義人，畜牧師，碩士，主要從事動(dòng)物遺傳育種與種質(zhì)資源創(chuàng)新工作.E-mail:15285116484@163.com

陳大芳（1968-），女，研究員，主要從事種豬遺傳育種研究工作.E-mail:894854907@qq.com