TNF-在妊娠高血壓患者體內(nèi)的表達及對胎兒的影響情況分析

王 英，朱 峰，王家美，鄢 玲

(十堰市中醫(yī)醫(yī)院婦產(chǎn)科，湖北 十堰 442000)

TNF-在妊娠高血壓患者體內(nèi)的表達及對胎兒的影響情況分析

王 英，朱 峰，王家美，鄢 玲

(十堰市中醫(yī)醫(yī)院婦產(chǎn)科，湖北 十堰 442000)

目的 探討腫瘤壞死因子-(TNF-)在妊娠高血壓綜合征患者血清中的表達及對胎兒的影響。方法 選取2012年4月至2016年9月在十堰市中醫(yī)醫(yī)院婦產(chǎn)科住院分娩的妊娠高血壓綜合征產(chǎn)婦400例，其中輕度132例，中度140例，重度128例，同時選取150例健康產(chǎn)婦作為對照組，采用ELISA法檢測母血及臍血血清中TNF-的含量。結果 對照組母血及臍血TNF-水平明顯低于其他組(t值分別為5.432、6.921、6.722、8.122、7.034、9.116，均P<0.05)；重度組母血及臍血TNF-水平均顯著高于輕度組和中度組(t值分別為7.921、8.055、9.032、10.215，均P<0.05)。重度組Apgar評分明顯低于其他組(t值分別為5.832、9.821、12.042，均P<0.05)；中度組Apgar評分明顯低于對照組(t=8.372，P<0.05)；輕度組與對照組Apgar評分比較差異無統(tǒng)計學意義(t=2.104，P>0.05)。母血及臍血TNF-水平與新生兒Apgar評分呈顯著負相關(r值分別為-0.322、-0.411，均P<0.05)。結論 妊娠期高血壓患者血液中TNF-α呈現(xiàn)出高表達趨勢，TNF-的表達與妊高癥患者的嚴重程度和胎兒的狀態(tài)有一定的相關性。

腫瘤壞死因子-；妊娠高血壓；胎兒；母血；臍靜脈血

妊娠期高血壓疾病是臨床上較為常見的妊娠合并癥，相關研究顯示妊娠期高血壓疾病的發(fā)病率可達0.5‰以上，且近年來呈現(xiàn)出了明顯的上升趨勢[1]。臨床上妊娠期高血壓的發(fā)生發(fā)展可以導致不良妊娠結局的發(fā)生，增加母兒病死率[2]。對于妊娠期高血壓疾病的評估具有重要的意義，病情的評估可以為早期臨床干預提供有效的參考。血清學指標在妊娠合并癥的診斷以及臨床預后評估中均具有重要的意義。

腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor α,TNF-α)可以通過加劇血管內(nèi)皮細胞的損傷，導致胎盤血管的繼發(fā)性病理改變的發(fā)生，進而加劇妊娠期高血壓的病情進展[3]。本研究通過選取2012年4月至2016年9月在十堰市中醫(yī)醫(yī)院住院分娩的妊娠高血壓綜合征產(chǎn)婦400例，探討了其血清及臍帶血中TNF-α的表達變化，報道如下。

1資料與方法

1.1研究對象

選取2012年4月至2016年9月在十堰市中醫(yī)醫(yī)院婦產(chǎn)科住院分娩的妊娠高血壓綜合征產(chǎn)婦400例，其中輕度132例，中度140例，重度128例，納入標準：①符合中華醫(yī)學會關于妊娠期高血壓的診斷標準[2]；②均為單胎初產(chǎn)婦；③患者及家屬知情同意并簽署同意書。排除標準：①有糖尿病、原發(fā)性高血壓及肝腎慢性疾病史；②有胎膜早破、早產(chǎn)及感染跡象。 同時選取150例妊娠晚期健康婦女作為對照組，各組孕婦年齡、孕周比較差異無統(tǒng)計學意義(均P>0.05)，見表1。

組別例數(shù)(n)年齡(y)孕周(w)對照組15027.01±8.7338.41±1.40輕度組13226.87±9.1038.51±1.73中度組14027.11±7.9937.62±1.80重度組12826.98±9.4037.43±1.58F3.1022.087P>0.05>0.05

1.2檢測方法

采用低溫高速離心機進行離心，1 000r/min(離心半徑為15cm)，獲得血清后抽取50μL樣品加入96孔板內(nèi)，采用去離子水作為陰性對照，采用50μL cryab作為陽性對照，平衡搖晃20s混勻，室溫下孵育2h，采用TBSP緩沖液清洗3次，每次5min，加入100μL底物，平衡搖晃30～45s，25攝氏度室溫下孵育40min，加入250μL終止物，直到96孔板中每孔的顏色變黃，最后已空白對照為基準，采用分光光度計進行讀數(shù)。TNF-α抗體購自羅氏檢測公司，相關配套試劑購自南京凱基生物科技有限公司，嚴格按照說明書的要求進行操作。

1.3統(tǒng)計學方法

2結果

2.1各組母血及臍血TNF-水平比較

對照組母血及臍血TNF-水平明顯低于其他組(t值分別為5.432、6.921、6.722、8.122、7.034、9.116，均P<0.05)；重度組母血及臍血TNF-水平均顯著高于輕度組和中度組(t值分別為7.921、8.055、9.032、10.215，均P<0.05)，見表2。

2.2各組新生兒Apgar評分比較

重度組Apgar評分明顯低于其他組(t值分別為5.832、9.821、12.042，均P<0.05)；中度組Apgar評分明顯低于對照組(t=8.372，P<0.05)；輕度組與對照組Apgar評分比較差異無統(tǒng)計學意義(t=2.104，P>0.05)，見表3。

2.3相關性分析

將妊娠高血壓綜合征產(chǎn)婦母血及臍血TNF-水平與新生兒Apgar評分進行相關性分析，母血及臍血TNF-水平與新生兒Apgar評分呈顯著負相關(r值分別為-0.322、-0.411，均P<0.05)。

Table 2 Comparison of TNF-levels in maternal and umbilical cord blood among each ±S)

注：a與對照組比較P<0.05；b與輕度組比較P<0.05；c與中度組比較P<0.05。

組別例數(shù)(n)Apgar評分(分)FP對照組1508.09±1.0681.601<0.05輕度組1327.91±0.90中度組1407.22±0.82a重度組1286.60±0.91abc

注：a與對照組比較P<0.05；b與輕度組比較P<0.05；c與中度組比較P<0.05。

3討論

3.1妊娠期高血壓疾病的臨床預后評估指標

自身免疫性因素、高血脂癥及高齡初產(chǎn)婦等，均為妊娠期高血壓的獨立風險因素，特別是在年齡大于30歲的孕產(chǎn)婦中，妊高癥的發(fā)病率可較普通對照人群上升3～4倍[4]。臨床上妊高癥的發(fā)生發(fā)展，可以導致孕產(chǎn)婦產(chǎn)后出血的發(fā)生，并增加胎兒宮內(nèi)窘迫或者新生兒窒息的風險。通過檢測血壓或者尿蛋白可以評估妊高癥的病情嚴重程度，但一項匯集了173例樣本量的臨床回顧性分析研究顯示，單純血壓或者尿蛋白檢測評估妊高癥臨床預后的靈敏度和特異度均不足45%，其評估一致性較差，臨床應用仍然具有一定的局限性[5-6]。血清學指標的檢測較為方便、經(jīng)濟，短期內(nèi)可反復測量，在妊娠期特有疾病的診斷以及臨床預后評估中均發(fā)揮了重要的參考價值。

3.2 TNF-α在妊娠期高血壓疾病中的作用機制

TNF-α作為血清中的細胞炎癥因子，可以通過加劇下游細胞炎癥因子如白細胞介素-6(interleukin-6，IL-6)、白細胞介素-10(interleukin-10，IL-10)等的激活或者富集，進而促進炎癥細胞對于胎盤組織的浸潤，導致胎盤血流動力學的紊亂，加劇胎兒宮內(nèi)缺氧表現(xiàn)。相關基礎研究也顯示， TNF-α可以通過加劇氧化應激損傷，進而促進胎盤血管微循環(huán)的障礙，導致胎兒宮內(nèi)生長受限，并增加新生兒窒息的風險[7-8]。已有的研究探討了 TNF-α在妊高癥患者血清中的異常表達，認為高表達的 TNF-α與患者的遠期不良臨床預后具有密切的關系[9]，但相關研究的樣本量不足，臨床資料的收集偏移較為嚴重，可信性不高。本研究的創(chuàng)新點主要在于分析了不同嚴重程度的新生兒窒息與血清TNF-α的關系，且總體樣本量達400例以上，樣本量較為豐富，研究結論的可靠性較高。

3.3 TNF-α在妊高癥中的異常表達及其與患者臨床預后的關系

本研究發(fā)現(xiàn)，妊高癥組患者血清及臍帶血中的TNF-α均明顯高于正常對照組，差異具有統(tǒng)計學意義，提示TNF-α可能參與到了妊高癥的發(fā)生發(fā)展過程中。TNF-α可以通過加劇血管內(nèi)皮細胞的氧化損傷，促進胎盤血流阻力系數(shù)的上升，進而導致孕產(chǎn)婦不良妊娠結局的發(fā)生。Limoges等[10]研究者通過回顧性分析了73例樣本量的臨床資料，發(fā)現(xiàn)妊娠期高血壓患者血清中的TNF-α可較正常對照人群上升25%以上，這與本研究的結論較為一致。在不同病情嚴重程度的孕產(chǎn)婦中，TNF-α的表達同樣具有明顯的差異，妊高癥患者的病情越為嚴重，其血清或者臍帶血中的TNF-α表達濃度越高，趨勢較為明顯，提示TNF-α的表達可以作為評估妊高癥病情的重要參考[10]。但需要注意的是，Maru等[11]研究者的研究中并未發(fā)現(xiàn)血清中TNF-α的表達與妊高癥患者病情間的關系，這與本研究的結論存在一定的差別，考慮到樣本量的不足、臨床資料的收集偏移等，均可能導致了最終結論的差別。重度組及中度組患者的Apgar評分較低，低于正常對照組，Apgar評分是評估新生兒臨床結局的重要指標，而在輕度、中度及重度組患者血清中，TNF-α的表達逐漸上升，提示TNF-α與新生兒不良臨床結局具有密切的關系，臨床上可以通過妊娠中晚期采集孕產(chǎn)婦的血清TNF-α，進而評估新生兒不良結局風險，據(jù)此有利于早期進行新生兒復蘇急救。但本研究并未發(fā)現(xiàn)輕度組及正常對照組間的TNF-α表達差異，考慮TNF-α的表達主要參與到了較為嚴重的新生兒窒息的發(fā)生發(fā)展過程中。而通過相關關系分析可以發(fā)現(xiàn)，母血及臍血TNF-α水平與新生兒Apgar評分呈負相關，TNF-α的表達越高，孕產(chǎn)婦新生兒窒息的風險越高，進一步提示TNF-α的表達可以作為評估新生兒宮內(nèi)缺氧或者窒息風險的重要依據(jù)。

綜上所述，在妊娠期高血壓患者血清及臍帶血中，TNF-α呈現(xiàn)出了明顯的高表達趨勢，TNF-α的表達越高，妊高癥患者的病情往往越為嚴重。但本研究對于TNF-α的表達與妊高癥孕產(chǎn)婦不良臨床結局的關系研究不足，存在一定的局限性。

[1]林彤,陳麗紅,胡繼芬,等.妊娠期高血壓的危險因素[J].中華高血壓雜志,2015,23(1):83-85.

[2]劉曉莉,阮炎,劉亞君,等.14省、市、自治區(qū)婦女妊娠年齡與妊娠期高血壓疾病關系的探討[J].中華醫(yī)學雜志,2015,95(1):19-22.

[3]馮俐平,李景平,吳利玲,等.妊娠期高血壓疾病患者血清TNF-α、IL-6與ET的水平變化及臨床意義[J].海南醫(yī)學,2013,24(5):705-707.

[4]Castleman J S,Ganapathy R,Taki F,etal.Echocardiographic structure and function in hypertensive disorders of pregnancy:a systematic review[J].Circ Cardiovasc Imaging,2016,9(9):e004888.

[5]Rosenzweig E B,Biscotti M,Cleary K,etal.Chronic thromboembolic pulmonary hypertension, pregnancy, and a pulmonary endarterectomy:a rare challenge[J].Pulm Circ,2016,6(3):384-388.

[6]Umesawa M,Kobashi G.Epidemiology of hypertensive disorders in pregnancy: prevalence,risk factors,predictors and prognosis[J].Hypertens Res,2017,40(3):213-220.

[7]王益群.妊娠期高血壓疾病相關影響因素及對妊娠結局影響的研究[J].中華全科醫(yī)學,2015,13(4):602-604.

[8]石軍,羅利飛.妊娠高血壓疾病患者治療前后血漿炎癥因子的變化[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生,2012,50(23):16-17.

[9]王茜,袁曉潔,趙麗,等.IL-1β、NO、TNF-α、瘦素對妊娠期高血壓疾病的臨床研究[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志,2012,20(5):35-36.

[10]Limoges M,Langleben D,Fox B D,etal.Pregnancy as a possible trigger for heritable pulmonary arterial hypertension[J].Pulm Circ,2016,6(3):381-383.

[11]Maru L,Verma M,Jinsiwale N.Homocysteine as predictive marker for pregnancy-induced hypertension-A comparative study of homocysteine levels in normal versus patients of PIH and its complications[J].J Obstet Gynaecol India,2016,66(Suppl 1):167-171.

[專業(yè)責任編輯：于學文]

Expression of TNF- in pregnancy-induced hypertension patients and its effect on fetus

WANG Ying, ZHU Feng, WANG Jia-mei, YAN Ling

(DepartmentofObstetricsandGynecology,ShiyanHospitalofTraditionalChineseMedicine,HubeiShiyan442000,China)

Objective To investigate the expression of tumor necrosis factor- (TNF-) in pregnancy-induced hypertension patients and its effect on fetus. Methods From April 2012 to September 2016, totally 400 cases of pregnancy-induced hypertension delivering in Shiyan Hospital of Traditional Chinese Medicine were selected, including 132 mild cases, 140 moderate cases and 128 severe cases. At the same period 150 healthy pregnant women were selected in control group. Content of TNF- in maternal and umbilical cord blood was detected by ELISA. Results In the control group TNF- levels in maternal and umbilical cord blood were significantly lower than those in the other groups (tvalue was 5.432, 6.921, 6.722, 8.122, 7.034 and 9.116, respectively, allP<0.05). In severe group TNF- levels in maternal and umbilical cord blood were significantly higher than those in mild group and moderate group (tvalue was 7.921, 8.055, 9.032 and 10.215, respectively, allP<0.05), and Apgar score was significantly lower than the other groups (tvalue was 5.832, 9.821 and 12.042, respectively, allP<0.05). Apgar score in moderate group was significantly lower than in the control group (t=8.372,P<0.05). There was no significant difference in Apgar score between mild group and control group (t=2.104,P>0.05). TNF- level in maternal and umbilical cord blood was negatively correlated with neonatal Apgar score (rvalue was -0.322 and -0.411, respectively, bothP<0.05). Conclusion TNF- is highly expressed in pregnancy-induced hypertension patients. The expression of TNF- is correlated with the severity of patients with pregnancy-induced hypertension and fetal situation.

tumor necrosis factor- (TNF-); pregnancy-induced hypertension; fetus; maternal blood; umbilical vein blood

2017-03-10

王 英(1980-)，女，主治醫(yī)師，主要從事產(chǎn)科臨床工作。

鄢 玲，副主任醫(yī)師。

10.3969/j.issn.1673-5293.2017.05.019

R714.246

A

1673-5293(2017)05-0544-03