• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    激光剝蝕電感耦合等離子體質(zhì)譜法中生物樣品的元素分餾效應(yīng)研究

    2017-06-15 09:21:08李青張國(guó)霞陳奕睿汪正丁傳賢
    分析化學(xué) 2017年6期
    關(guān)鍵詞:基體玻璃激光

    李青+張國(guó)霞+陳奕睿+汪正+丁傳賢

    摘 要 采用213 nm納秒激光剝蝕系統(tǒng)對(duì)生物基體樣品的剝蝕顆粒進(jìn)行研究,優(yōu)化了激光剝蝕條件。在剝蝕能量為25%,束斑直徑為200 μm,剝蝕速率為20 μm/s,頻率為20 Hz,載氣為700 mL He + 700 mL Ar時(shí),信號(hào)強(qiáng)度及穩(wěn)定性最佳。以31P為內(nèi)標(biāo)元素,最佳剝蝕條件下,考察了56個(gè)元素的相對(duì)分餾因子。結(jié)果表明,生物基體的剝蝕顆粒相較于NIST 610 玻璃標(biāo)樣更大,達(dá)到3 μm;生物基體中元素分餾效應(yīng)相較于玻璃基體小,大多數(shù)元素的相對(duì)分餾因子達(dá)到1.0 ±0.1。探討了生物基體中元素分餾機(jī)理,分析了生物基體相較于玻璃基體剝蝕顆粒大,而相對(duì)分餾因子未明顯增大的原因。一方面可能是粒徑3 μm的顆粒進(jìn)入電感耦合等離子體后能原子化;另一方面,大的剝蝕顆粒的富集效應(yīng)相對(duì)較小。進(jìn)一步對(duì)分餾效應(yīng)的影響因素進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)分餾效應(yīng)與激光剝蝕能量、激光頻率和掃描速率相關(guān),并且與元素的氧化物沸點(diǎn)負(fù)相關(guān),與氧化物鍵能和電離能正相關(guān)。

    關(guān)鍵詞 激光剝蝕電感耦合等離子體質(zhì)譜; 納秒激光; 分餾效應(yīng); 生物樣品

    1 引 言

    近年來(lái),激光剝蝕電感耦合等離子體質(zhì)譜法(LAICPMS) 作為一種重要的原位微區(qū)分析技術(shù)手段,具有空間分辨率高、檢出限低等特點(diǎn),已廣泛應(yīng)用于地球化學(xué)、冶金、生物醫(yī)藥等領(lǐng)域[1~4]。尤其是在生物醫(yī)藥領(lǐng)域,研究者采用LAICPMS研究抗癌藥物在靶器官中的分布,并將其應(yīng)用到蛋白組學(xué)、金屬組學(xué)等領(lǐng)域[5,6]。然而LAICPMS仍面臨著巨大的挑戰(zhàn)——定量校準(zhǔn)[4]。為克服這一難題,研究者建立了基體匹配[7]、內(nèi)標(biāo)校正[7]、在線(xiàn)溶液校準(zhǔn)[8]等方法,但仍難于達(dá)到溶液樣品進(jìn)樣ICPMS分析定量校準(zhǔn)的線(xiàn)性和標(biāo)準(zhǔn)偏差要求,主要原因在于激光物質(zhì)相互作用的復(fù)雜性,例如分餾效應(yīng)[9]。

    分餾效應(yīng)是指不同元素在剝蝕蒸發(fā)及傳輸過(guò)程中行為的差異,測(cè)得的樣品組分與樣品組成有一定差異,即元素的非計(jì)量剝蝕。它的基體差異性發(fā)生在樣品剝蝕、傳輸、蒸發(fā)、原子化和電離過(guò)程中。對(duì)分餾效應(yīng)的研究多集中在硅酸鹽樣品或是金屬基質(zhì)樣品[10,11],研究了分餾效應(yīng)與激光波長(zhǎng)、激光脈沖寬度、激光能量、激光束斑及在ICP中的傳輸和離子化的影響[12,13]。但對(duì)于生物樣品的分餾效應(yīng)研究卻較少。目前,LAICPMS方法在生物醫(yī)藥領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用,使得對(duì)生物樣品分餾效應(yīng)的研究顯得尤為重要。

    本研究以動(dòng)物組織為研究對(duì)象,研究了213 nm納秒激光剝蝕系統(tǒng)對(duì)生物基體樣品的剝蝕顆粒,考察了常見(jiàn)元素和微量元素的分餾效應(yīng),探討了元素分餾機(jī)理,并對(duì)分餾效應(yīng)的影響因素進(jìn)行了研究。

    2 實(shí)驗(yàn)部分

    2.1 儀器及參數(shù)

    采用LSX213型號(hào)213 nm激光剝蝕系統(tǒng)(美國(guó)Cetac公司)與Thermo X Series Ⅱ電感耦合等離子體質(zhì)譜儀 (美國(guó) ThermoFisher Scientific公司) 聯(lián)用的 LAICPMS 系統(tǒng)。ICPMS的主要工作參數(shù)選擇見(jiàn)表 1。

    2.2 試劑

    2.3 實(shí)驗(yàn)樣品

    實(shí)驗(yàn)所用生物基體樣品均為實(shí)驗(yàn)室自行配制的標(biāo)準(zhǔn)樣品。取豬腎(購(gòu)于本地超市)切成0.5 cm×0.5 cm薄片,在真空干燥箱中烘干, 待用。配制100和1000 μg/L標(biāo)準(zhǔn)溶液,用移液槍取6.8 μL滴至豬腎切片上,室溫下自然風(fēng)干。對(duì)自行配制的標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行線(xiàn)掃描剝蝕,其標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)相關(guān)系數(shù)達(dá)到0.99~0.999, 信號(hào)RSD<6.5%,認(rèn)為配制的標(biāo)準(zhǔn)樣品具備元素分布均勻性和數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性,可用于分餾效應(yīng)研究。

    實(shí)驗(yàn)玻璃基體樣品為美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究院(NIST)合成玻璃標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) NIST 610。

    2.4 激光剝蝕顆粒的收集及表征

    在最佳激光剝蝕條件下剝蝕生物基體樣品和玻璃基體樣品(NIST610),產(chǎn)生的剝蝕氣溶膠通過(guò)載氣輸出,在輸出口放置干凈硅片并固定,收集30 min剝蝕顆粒后,將硅片密封,待測(cè)。利用場(chǎng)發(fā)射掃描電子顯微鏡(JSM6700F,日本電子株式會(huì)社)表征激光剝蝕顆粒形貌。

    3 結(jié)果與討論

    3.1 激光參數(shù)優(yōu)化

    為獲得最優(yōu)信號(hào)強(qiáng)度及穩(wěn)定性,以Cr為例,對(duì)激光剝蝕能量、束斑直徑、掃描速率、頻率和載氣進(jìn)行了優(yōu)化,結(jié)果如圖1所示。結(jié)果表明,當(dāng)剝蝕能量為25%,束斑直徑為200 μm,剝蝕速率為20 μm/s,頻率為20 Hz,載氣為He + Ar=700 mL+700 mL時(shí),信號(hào)強(qiáng)度及RSD最佳。

    3.2 分餾效應(yīng)機(jī)理探討

    本研究所使用的是納秒激光剝蝕系統(tǒng), 相對(duì)于飛秒激光剝蝕系統(tǒng)分餾效應(yīng)更強(qiáng)。這主要是由于納秒激光的脈沖持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng),通過(guò)雪崩電離獲得激光能量的電子在脈沖結(jié)束前會(huì)將能量傳遞給晶格,因此在一定聚焦體積內(nèi),通過(guò)熱聚焦使樣品局部被加熱,導(dǎo)致化學(xué)鍵斷裂和部分熔融。樣品內(nèi)產(chǎn)生的熱梯度導(dǎo)致從聚焦區(qū)至周?chē)臒醾鬟f擴(kuò)散,使得樣品的剝蝕和熔融區(qū)遠(yuǎn)大于初始聚焦區(qū)。正是這種熱效應(yīng)導(dǎo)致樣品產(chǎn)生大小不一的顆粒。Kuhn等[15]對(duì)玻璃標(biāo)樣的分餾效應(yīng)進(jìn)行研究,收集了不同粒徑范圍的剝蝕顆粒,測(cè)定了其中的成分,發(fā)現(xiàn)剝蝕顆粒大小對(duì)分餾效應(yīng)有直接影響,粒徑小于125 nm和340 nm的剝蝕顆粒中Cu, Zn, Ag, Tl, Pb 和 Bi等易揮發(fā)元素相較于Ca出現(xiàn)明顯富集;但其中不完全蒸發(fā)、原子化、離子化的大顆粒是分餾效應(yīng)的主要原因[15]。由于激光剝蝕條件和基體會(huì)產(chǎn)生不同的剝蝕顆粒,造成不同的元素分餾效應(yīng),因此我們對(duì)生物基體樣品和玻璃基體標(biāo)樣的剝蝕顆粒進(jìn)行表征,比較了兩種不同基體間的分餾效應(yīng)。 圖2為生物基體和玻璃基體標(biāo)樣的剝蝕顆粒SEM表征圖。從圖2可見(jiàn),生物基體的剝蝕顆粒約為3 μm,且多為較規(guī)則的球形;玻璃基體的剝蝕顆粒小于0.5 μm,其形狀多不規(guī)則;生物基體的剝蝕顆粒較玻璃標(biāo)樣的大,這可能是由于基質(zhì)不同導(dǎo)致;生物樣品剝蝕的激光能量閾值較低[16],在相同剝蝕條件下,生物樣品所受到的激光能量密度超出其閾值,導(dǎo)致能量快速轉(zhuǎn)移進(jìn)入材料,在其融化的樣品表面產(chǎn)生微米級(jí)顆粒,同時(shí)較大的顆粒也會(huì)發(fā)生團(tuán)聚[9,17]。

    選取生物基體中31P 元素為內(nèi)標(biāo),在上述優(yōu)化的最佳剝蝕條件下對(duì)大部分ICPMS可測(cè)元素相對(duì)分餾因子進(jìn)行考察,結(jié)果如圖3所示。實(shí)驗(yàn)未選用13C為內(nèi)標(biāo)元素,是考慮到國(guó)內(nèi)供應(yīng)的氦氣和氬氣中13C 的背景通常較高,不宜使用這種方法[18]。結(jié)果表明,生物基體中多數(shù)元素的分餾因子為1.0 ±0.1。與玻璃基體相比,生物基體中元素分餾因子較小,這可能是由于基體組成元素及元素間的相互作用有關(guān)。玻璃基體中,剝蝕產(chǎn)生的顆粒越小,元素分餾效應(yīng)越大,尤其是易揮發(fā)元素(Ag, Cd, In等)受剝蝕顆粒粒徑影響更為明顯[19]。雖然生物基體剝蝕顆粒的粒徑大于玻璃基體,但研究表明粒徑小于5 μm的顆粒進(jìn)入ICP后能夠原子化[20];另一方面,根據(jù)剝蝕顆粒的SEM表征結(jié)果說(shuō)明生物基體中大剝蝕顆粒較多,而大顆粒的富集效應(yīng)相對(duì)較小,因此生物基體的相對(duì)分餾因子相較于玻璃基體更接近1。

    3.3 不同激光參數(shù)對(duì)分餾效應(yīng)的影響

    本研究所用的激光剝蝕能量均為25%,通過(guò)在線(xiàn)掃描的模式下,改變束斑直徑分別為50、100和200 μm, 考察激光剝蝕能量密度對(duì)生物基體樣品中V、Cr、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Ag、Cd、Tl、Pb等元素的分餾效應(yīng)的影響,結(jié)果如圖4A所示。在束斑直徑為200 μm,頻率為20、10和5 Hz時(shí)考察頻率對(duì)分餾效應(yīng)的影響。如圖4B所示,激光頻率對(duì)分餾效應(yīng)影響較大。隨著頻率增大,相同時(shí)間內(nèi)剝蝕下來(lái)的樣品越多,相對(duì)分餾因子更接近1.0;當(dāng)頻率降至10 Hz時(shí),相對(duì)分餾因子超出了1.0 ±0.1的范圍。圖4C為激光剝蝕速率分別30,20,10 μm/s對(duì)分餾效應(yīng)的影響,發(fā)現(xiàn)隨著剝蝕速率的減小,相對(duì)分餾因子更接近1。

    即束斑直徑為200 μm,頻率為20 Hz,剝蝕速率為10 μm/s時(shí),相對(duì)分餾因子多在1.0附近。難熔元素如V,Co,F(xiàn)e等的相對(duì)分餾因子與易揮發(fā)元素(如Tl、Cd、Zn等)的波動(dòng)較小。隨著剝蝕量的增加,元素在剝蝕氣溶膠中的富集效應(yīng)更小,更能體現(xiàn)標(biāo)樣的均勻性,使得相對(duì)分餾因子更接近1.0。

    進(jìn)一步對(duì)分餾效應(yīng)的影響因素進(jìn)行研究,在上述最佳激光剝蝕條件下,考察了分餾效應(yīng)與電離能、氧化物沸點(diǎn)和鍵能的關(guān)系。從圖5可見(jiàn),元素相對(duì)分餾因子和元素氧化物沸點(diǎn)呈負(fù)相關(guān),與電離能和氧化物鍵能呈正相關(guān)[20],表明氧化物沸點(diǎn)低的元素容易原子化,其相對(duì)分餾因子增大;電離能和氧化物鍵能低的元素非金屬性越強(qiáng),相應(yīng)的氧化物熔點(diǎn)越高,同理,在ICP中原子化能力越差,因此其相對(duì)分餾因子越小。

    4 結(jié) 論

    本研究以動(dòng)物組織為研究對(duì)象,研究了213 nm納秒激光剝蝕系統(tǒng)對(duì)生物基體樣品和玻璃基體標(biāo)準(zhǔn)樣品的剝蝕顆粒。形貌表征結(jié)果表明,生物基體的剝蝕顆粒相較于NIST 610 玻璃標(biāo)樣更大,達(dá)到3 μm。以31P為內(nèi)標(biāo)元素,利用相對(duì)分餾因子考察了各元素的分餾效應(yīng),發(fā)現(xiàn)生物基體中元素分餾效應(yīng)相較于玻璃基體小,大多數(shù)元素的相對(duì)分餾因子達(dá)到1.0 ± 0.1。探討了生物基體中元素分餾機(jī)理,分析了生物基體相比于玻璃基體剝蝕顆粒大,而相對(duì)分餾因子未明顯增大的原因。一方面可能是粒徑3 μm的顆粒進(jìn)入ICP后仍能原子化;另一方面,大剝蝕顆粒的富集效應(yīng)相對(duì)較小。進(jìn)一步對(duì)分餾效應(yīng)的影響因素進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn),分餾效應(yīng)與剝蝕量有直接關(guān)系,并且分餾效應(yīng)與氧化物沸點(diǎn)呈負(fù)相關(guān),而與電離能和氧化物鍵能呈正相關(guān)。由于分餾效應(yīng)不能完全避免,因此在研究時(shí)應(yīng)根據(jù)需求對(duì)分餾效應(yīng)、信號(hào)強(qiáng)度及穩(wěn)定性有所取舍。本研究為生物樣品LAICPMS法準(zhǔn)確定量分析的可行性提供了重要信息。

    References

    1 GarbeSchnberg D, Müller S. J. Anal. At. Spectrom., 2014, 29(6): 990-1000

    2 WANG Ying, GUO YanLi, YUAN HongLin, WEI YongFeng, YAN HongTao, CHEN HuiHui. Spectroscopy and Spectral Analysis, 2012, 32(1): 223-228

    王 穎, 郭艷麗, 袁洪林, 魏永鋒, 閆宏濤, 陳慧慧. 光譜學(xué)與光譜分析, 2012, 32(1): 223-228

    3 ZHANG XinYing, ZHENG LingNa, WANG HaiLong, SHI JunWen, FENG WeiYue, LI Liang, WANG Meng. Chinese J. Anal. Chem., 2016, (11): 1646-1651

    張欣穎, 鄭令娜, 王海龍, 史俊穩(wěn), 豐偉悅, 李 亮, 王 萌. 分析化學(xué), 2016, (11): 1646-1651

    4 Pozebon D, Scheffler G L, Dressler V L, Nunes M A G. J. Anal. At. Spectrom., 2014, 29(12): 2204-2228

    5 Lum T S, Tsoi Y K, YueP YK, LeungK S Y. Microchem. J., 2016, 127: 94-101

    6 MorenoGordaliza E, Giesen C, Lazaro A, EstebanFernandez D, Humanes B, Canas B, Panne U, Tejedor A, Jakubowski N, GomezGomez M M. Anal. Chem., 2011, 83(20): 7933-7940

    7 Austin C, Fryer F, Lear J, Bishop D, Hare D, Rawling T, Kirkup L, McDonagh A, Doble P. J. Anal. At. Spectrom., 2011, 26(7): 1494-1501

    8 Pozebon D, Dressler V L, Mesko M F, Matusch A, Becker J S. J. Anal. At. Spectrom., 2010, 25(11): 1739-1744

    9 Niehaus R, Sperling M, Karst U. J. Anal. At. Spectrom., 2015, 30(10): 2056-2065

    10 Loewen M W, KentA J R. J. Anal. At. Spectrom., 2012, 27(9): 1502-1508

    11 Zhang S, He M, Yin Z, Zhu E, Hang W, Huang B. J. Anal. At. Spectrom., 2016, 31(2): 358-382

    12 Horn I, Günther D. Appl. Surf. Sci., 2003, 207(14): 144-157

    13 Horn I, Guillong M, Gunther D. Appl. Surf. Sci., 2001, 182(12): 91-102

    14 Gunther D, Jackson S E, Longerich H P. Spectrochim. Acta B, 1999, 54(34): 381-409

    15 Kuhn H R, Günther D. J. Anal. At. Spectrom., 2004, 19(9): 1158-1164

    16 Benesova I, Dlabkova K, Zelenak F, Vaculovic T, Kanicky V, Preisler J. Anal. Chem., 2016, 88(5): 2576-2582

    17 Paltauf G, SchmidtKloiber H. Laser.Surg. Med., 1995, 16(3): 277-287

    18 WANG Qi, ZHANG Wen, WANG LiYun, LIU YongSheng, HU ShengHong, HU ZhaoChu. Spectrosc. and Spect. Anal., 2011, 31(12): 3379-3383

    汪 奇, 張 文, 王立云, 劉勇勝, 胡圣虹, 胡兆初. 光譜學(xué)與光譜分析, 2011, 31(12): 3379-3383

    19 Ebdon L, Foulkes M, Sutton K. J. Anal. At. Spectrom., 1997, 12(2): 213-229

    20 WU ShiTou, WANG YaPing, XU ChunXue, YUAN JiHai. Chinese J. Anal. Chem., 2016, 44(7): 1035-1041

    吳石頭, 王亞平, 許春雪, 袁繼海. 分析化學(xué), 2016, 44(7): 1035-1041

    Abstract The ablated aerosols of biological matrix sample were studied using 213 nm nanosecond laser ablation system. The stable signal intensity and high sensitivity were obtained when the laser energy was 25%, the spot size was 200 μm, the scan rate was 20 μm/s, the frequency was 20 Hz and the carrier gas was 700 mL He + 700 mL Ar. Relative fractionation index of 56 elements were investigated and 31P as the internal standard element was selected under the optimized laser ablation conditions. The results showed that particle size of the biological sample was 3 μm, which was larger compared with NIST 610 sample. Element fractionation in biological sample was smaller than in glass sample, and relative fractionation index of most elements attained 1.0 ± 0.1. Element fractionation mechanism of biological sample was discussed. The possible reason why the relative fractionation index in biological sample with large particle size did not significantly increase compared to the glass sample is that the 3μm particles entered into ICP can be atomized. On the other hand, enrichment effect for large ablation particles was relatively small. Further study of the influence factors of fractionation effect indicated that, the fractionation effect had relations with laser ablation energy, laser frequency and scan rate, negatively relation with the oxide boiling point, and positively relation with oxide bond energy and ionization energy.

    Keywords Laser ablationinductively coupled plasmamass spectrometry; Nanosecond laser; Fractionation effect; Biological sample

    猜你喜歡
    基體玻璃激光
    金剛石圓鋸片基體高溫快速回火技術(shù)的探索
    石材(2022年3期)2022-06-01 06:23:54
    溝口雄三的中國(guó)社會(huì)主義歷史基體論述評(píng)
    原道(2022年2期)2022-02-17 00:59:12
    Er:YAG激光聯(lián)合Nd:YAG激光在口腔臨床醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用
    激光誕生60周年
    科學(xué)(2020年5期)2020-11-26 08:19:24
    鈮-鋯基體中痕量釤、銪、釓、鏑的連續(xù)離心分離技術(shù)
    玻璃中的自然之美
    玻璃是怎樣煉成的
    請(qǐng)給激光點(diǎn)個(gè)贊
    鋼基體上鍍鎳層的表面質(zhì)量研究
    我不是玻璃熊
    搖籃(2016年19期)2016-12-01 06:32:52
    久久精品夜色国产| 男女高潮啪啪啪动态图| 国产综合精华液| 性色avwww在线观看| 热re99久久精品国产66热6| 丝袜喷水一区| 精品酒店卫生间| 天堂中文最新版在线下载| 99香蕉大伊视频| 伦理电影免费视频| 欧美国产精品va在线观看不卡| 久久久久久久大尺度免费视频| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 高清不卡的av网站| 热re99久久精品国产66热6| h视频一区二区三区| 免费av不卡在线播放| 国产精品偷伦视频观看了| 国产成人精品婷婷| 99久久精品国产国产毛片| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 久久久欧美国产精品| 亚洲第一区二区三区不卡| 日韩伦理黄色片| 在线观看国产h片| 国产精品熟女久久久久浪| 免费黄网站久久成人精品| 国产又色又爽无遮挡免| 1024视频免费在线观看| 色哟哟·www| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 国产精品国产三级国产av玫瑰| xxxhd国产人妻xxx| 亚洲成av片中文字幕在线观看 | 1024视频免费在线观看| 免费av中文字幕在线| 春色校园在线视频观看| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 欧美人与善性xxx| 美女大奶头黄色视频| 一级毛片 在线播放| 亚洲,一卡二卡三卡| 一级黄片播放器| 国产xxxxx性猛交| 久久女婷五月综合色啪小说| 亚洲av成人精品一二三区| 色视频在线一区二区三区| 亚洲欧美一区二区三区国产| 成年女人在线观看亚洲视频| 国产福利在线免费观看视频| 七月丁香在线播放| 一本久久精品| 欧美成人午夜免费资源| 国产高清不卡午夜福利| 少妇人妻久久综合中文| 91精品国产国语对白视频| 超碰97精品在线观看| 另类亚洲欧美激情| 只有这里有精品99| 综合色丁香网| 纯流量卡能插随身wifi吗| 久久av网站| 日韩av在线免费看完整版不卡| 少妇的丰满在线观看| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| videos熟女内射| 国产成人精品在线电影| 亚洲综合色惰| 国产精品熟女久久久久浪| 免费黄频网站在线观看国产| 大陆偷拍与自拍| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 青春草国产在线视频| 国产av一区二区精品久久| 国产福利在线免费观看视频| 久久久精品94久久精品| 最近2019中文字幕mv第一页| 18禁国产床啪视频网站| 亚洲美女黄色视频免费看| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 最近的中文字幕免费完整| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 国产成人免费无遮挡视频| 黄色 视频免费看| 在线精品无人区一区二区三| 免费人妻精品一区二区三区视频| 中文字幕最新亚洲高清| a级毛色黄片| 国产精品国产av在线观看| 国产精品 国内视频| 一级a做视频免费观看| 男人爽女人下面视频在线观看| 国产又爽黄色视频| 一级,二级,三级黄色视频| 亚洲内射少妇av| 免费日韩欧美在线观看| 国产午夜精品一二区理论片| 国产精品一国产av| 91在线精品国自产拍蜜月| 国产精品久久久久久精品古装| 少妇的逼水好多| 免费高清在线观看日韩| 久久鲁丝午夜福利片| 美女主播在线视频| 我的女老师完整版在线观看| 一区二区三区四区激情视频| 2021少妇久久久久久久久久久| 日韩 亚洲 欧美在线| 极品少妇高潮喷水抽搐| av有码第一页| 视频在线观看一区二区三区| 日韩中文字幕视频在线看片| 久久青草综合色| 久久久久国产精品人妻一区二区| 高清毛片免费看| 精品人妻在线不人妻| 国产色婷婷99| 国产一区二区三区综合在线观看 | 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 成人毛片60女人毛片免费| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 在线观看一区二区三区激情| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 满18在线观看网站| 1024视频免费在线观看| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 国产精品久久久久久久久免| 香蕉丝袜av| 少妇的丰满在线观看| 女性被躁到高潮视频| 久热这里只有精品99| 18在线观看网站| 在线观看美女被高潮喷水网站| 国产黄色视频一区二区在线观看| 丝袜在线中文字幕| 免费看av在线观看网站| 欧美精品av麻豆av| 高清欧美精品videossex| 亚洲av免费高清在线观看| 国产精品一二三区在线看| 超碰97精品在线观看| 久久人人97超碰香蕉20202| 亚洲人成网站在线观看播放| 亚洲人成77777在线视频| 黄片无遮挡物在线观看| 大片电影免费在线观看免费| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 最近的中文字幕免费完整| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 99香蕉大伊视频| 国产亚洲最大av| 2021少妇久久久久久久久久久| 三上悠亚av全集在线观看| 另类亚洲欧美激情| 亚洲第一区二区三区不卡| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 免费日韩欧美在线观看| 男人舔女人的私密视频| 国产午夜精品一二区理论片| 久久久久精品人妻al黑| 久久免费观看电影| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 寂寞人妻少妇视频99o| 夫妻午夜视频| 熟妇人妻不卡中文字幕| 成年美女黄网站色视频大全免费| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 成年av动漫网址| 中文字幕人妻丝袜制服| 一级a做视频免费观看| 性色av一级| 五月开心婷婷网| 成人国语在线视频| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 看免费成人av毛片| 在线观看三级黄色| 人妻系列 视频| 岛国毛片在线播放| 激情五月婷婷亚洲| 伊人久久国产一区二区| 亚洲精品视频女| 久久99热这里只频精品6学生| av线在线观看网站| 男的添女的下面高潮视频| 丰满迷人的少妇在线观看| 黄色 视频免费看| 熟女电影av网| 青春草亚洲视频在线观看| 中文字幕免费在线视频6| 久久人妻熟女aⅴ| 国产精品一区二区在线不卡| 亚洲伊人色综图| 满18在线观看网站| 在线观看免费高清a一片| 国产又爽黄色视频| 国产国语露脸激情在线看| 99久久精品国产国产毛片| 蜜桃在线观看..| 亚洲欧洲国产日韩| 一级黄片播放器| 久久久久久久久久久免费av| 男女国产视频网站| 精品亚洲成a人片在线观看| 日韩av不卡免费在线播放| 最近中文字幕高清免费大全6| av黄色大香蕉| 国产精品一国产av| 下体分泌物呈黄色| 国产高清不卡午夜福利| 天美传媒精品一区二区| 久久狼人影院| 一区二区av电影网| 久久99热6这里只有精品| 欧美最新免费一区二区三区| 搡老乐熟女国产| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 大香蕉久久成人网| 人妻人人澡人人爽人人| 另类亚洲欧美激情| 大码成人一级视频| 欧美成人午夜免费资源| 国产黄频视频在线观看| 欧美国产精品va在线观看不卡| 色5月婷婷丁香| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 美女国产高潮福利片在线看| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 国产69精品久久久久777片| 99视频精品全部免费 在线| 亚洲精品国产色婷婷电影| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| av在线观看视频网站免费| 日韩欧美精品免费久久| 免费看光身美女| 日韩中文字幕视频在线看片| 九九爱精品视频在线观看| 精品福利永久在线观看| 一区二区三区乱码不卡18| 尾随美女入室| 少妇的逼好多水| 亚洲国产成人一精品久久久| 免费高清在线观看视频在线观看| 亚洲综合精品二区| 久久久久国产网址| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 亚洲少妇的诱惑av| 最黄视频免费看| a级毛片黄视频| 女人久久www免费人成看片| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 少妇的逼水好多| 少妇人妻久久综合中文| 天堂俺去俺来也www色官网| 欧美日韩综合久久久久久| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 在线观看人妻少妇| 国产国语露脸激情在线看| 少妇 在线观看| 久久久久久久久久人人人人人人| xxxhd国产人妻xxx| 蜜桃在线观看..| 成人国语在线视频| 欧美日韩亚洲高清精品| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 最后的刺客免费高清国语| 宅男免费午夜| 国国产精品蜜臀av免费| 亚洲欧美色中文字幕在线| 99香蕉大伊视频| 日韩 亚洲 欧美在线| 最近中文字幕2019免费版| 国产高清国产精品国产三级| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 国产69精品久久久久777片| 大话2 男鬼变身卡| 日韩免费高清中文字幕av| 国产一区二区三区综合在线观看 | 成年人免费黄色播放视频| 有码 亚洲区| 亚洲少妇的诱惑av| 日韩精品有码人妻一区| 在线观看www视频免费| 国产福利在线免费观看视频| 亚洲欧美清纯卡通| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 久久婷婷青草| 国产男人的电影天堂91| 老女人水多毛片| 五月伊人婷婷丁香| 国产亚洲一区二区精品| 国产黄色免费在线视频| 国产成人aa在线观看| 最近中文字幕2019免费版| xxxhd国产人妻xxx| 欧美+日韩+精品| 国产激情久久老熟女| 99久久人妻综合| 成人手机av| 一本久久精品| www.av在线官网国产| 精品一区在线观看国产| 男人添女人高潮全过程视频| 日韩大片免费观看网站| 精品人妻一区二区三区麻豆| 又大又黄又爽视频免费| 中文字幕制服av| 国产黄色免费在线视频| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 亚洲成色77777| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| kizo精华| 男女国产视频网站| 国产av一区二区精品久久| 日韩三级伦理在线观看| 极品少妇高潮喷水抽搐| 日韩制服骚丝袜av| 久久久久久人妻| 91国产中文字幕| 97人妻天天添夜夜摸| 国产av码专区亚洲av| 亚洲,一卡二卡三卡| 中国美白少妇内射xxxbb| 日韩av免费高清视频| 在线观看人妻少妇| 成人国产av品久久久| 男女边吃奶边做爰视频| 免费人成在线观看视频色| www.色视频.com| 午夜精品国产一区二区电影| 五月伊人婷婷丁香| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 男人操女人黄网站| 久热久热在线精品观看| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 水蜜桃什么品种好| 精品福利永久在线观看| 国产精品一区www在线观看| 永久网站在线| 热99国产精品久久久久久7| 亚洲av电影在线进入| 视频中文字幕在线观看| 欧美人与善性xxx| 国产片内射在线| 国产色婷婷99| 国产精品免费大片| 免费人成在线观看视频色| 久久久久视频综合| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 国产极品粉嫩免费观看在线| 婷婷成人精品国产| 国产一区二区三区av在线| 国产日韩欧美视频二区| 免费人妻精品一区二区三区视频| 久久精品久久久久久久性| 精品人妻偷拍中文字幕| 狂野欧美激情性bbbbbb| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 色婷婷久久久亚洲欧美| 天天操日日干夜夜撸| 老司机亚洲免费影院| av.在线天堂| 午夜福利影视在线免费观看| 久久人妻熟女aⅴ| 亚洲精品国产av成人精品| 黑丝袜美女国产一区| 精品少妇内射三级| 久久精品人人爽人人爽视色| 9191精品国产免费久久| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 好男人视频免费观看在线| 久久久国产精品麻豆| 久久国产亚洲av麻豆专区| 久久久久国产网址| 热re99久久国产66热| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 免费观看无遮挡的男女| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 久久 成人 亚洲| 久久久久国产网址| 国产成人a∨麻豆精品| 久久久久久久久久久免费av| 亚洲国产最新在线播放| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 亚洲第一区二区三区不卡| 国产亚洲精品久久久com| 全区人妻精品视频| 女性被躁到高潮视频| 国产福利在线免费观看视频| 日韩 亚洲 欧美在线| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 亚洲人与动物交配视频| 一区二区三区精品91| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 在线观看免费日韩欧美大片| 美女视频免费永久观看网站| 视频区图区小说| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃 | 欧美97在线视频| 国产亚洲欧美精品永久| 国产精品国产av在线观看| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 9色porny在线观看| 亚洲精品美女久久av网站| 亚洲精品av麻豆狂野| 性高湖久久久久久久久免费观看| 91精品伊人久久大香线蕉| 免费av不卡在线播放| 人妻人人澡人人爽人人| 国产免费一级a男人的天堂| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 国产精品国产三级专区第一集| 久久精品久久久久久久性| 午夜av观看不卡| 久久久久久人人人人人| 亚洲国产av影院在线观看| 99久久人妻综合| 中国三级夫妇交换| 国产淫语在线视频| 91久久精品国产一区二区三区| 18禁国产床啪视频网站| 久久精品久久精品一区二区三区| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 日日爽夜夜爽网站| 夫妻性生交免费视频一级片| 国产精品熟女久久久久浪| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲五月色婷婷综合| 91国产中文字幕| 久热久热在线精品观看| 精品久久久久久电影网| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 久久av网站| 亚洲 欧美一区二区三区| av线在线观看网站| 精品国产一区二区久久| 少妇精品久久久久久久| 丰满乱子伦码专区| 国产成人一区二区在线| 男男h啪啪无遮挡| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 99久国产av精品国产电影| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 亚洲精品第二区| 欧美精品一区二区免费开放| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 搡女人真爽免费视频火全软件| av在线app专区| 亚洲综合色网址| 国产精品国产av在线观看| 色视频在线一区二区三区| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 亚洲欧美清纯卡通| 亚洲精品aⅴ在线观看| 人妻系列 视频| 69精品国产乱码久久久| 亚洲av综合色区一区| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 麻豆乱淫一区二区| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 欧美成人午夜免费资源| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 18+在线观看网站| 久久精品久久精品一区二区三区| 在线天堂最新版资源| 亚洲国产色片| 国产精品成人在线| 久久精品国产a三级三级三级| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 国产又色又爽无遮挡免| 卡戴珊不雅视频在线播放| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 久久久久国产精品人妻一区二区| 精品一区二区免费观看| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 久久狼人影院| 黄片播放在线免费| 99精国产麻豆久久婷婷| 一二三四在线观看免费中文在 | 免费黄色在线免费观看| 99热国产这里只有精品6| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 激情五月婷婷亚洲| 五月开心婷婷网| 99久国产av精品国产电影| 丝袜人妻中文字幕| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 赤兔流量卡办理| 国精品久久久久久国模美| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 日韩 亚洲 欧美在线| 婷婷色综合大香蕉| 久久久a久久爽久久v久久| 国产视频首页在线观看| 久久久国产精品麻豆| 久久久久网色| 日本色播在线视频| 久久久国产欧美日韩av| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 91在线精品国自产拍蜜月| 香蕉丝袜av| 少妇熟女欧美另类| 成人国产麻豆网| 免费人成在线观看视频色| 日韩成人av中文字幕在线观看| 性高湖久久久久久久久免费观看| 国产精品久久久久久精品电影小说| 国产精品一国产av| 久久久久久久亚洲中文字幕| 9色porny在线观看| 国产熟女欧美一区二区| 国产日韩欧美视频二区| 国产成人91sexporn| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 综合色丁香网| 天堂中文最新版在线下载| 国产亚洲一区二区精品| 中国三级夫妇交换| 久久av网站| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 国产黄色免费在线视频| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 国产视频首页在线观看| 久久久久久久久久人人人人人人| 亚洲五月色婷婷综合| 久久这里只有精品19| 国产av一区二区精品久久| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 边亲边吃奶的免费视频| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 精品少妇黑人巨大在线播放| 免费日韩欧美在线观看| 欧美日韩视频精品一区| 午夜影院在线不卡| xxxhd国产人妻xxx| 男女下面插进去视频免费观看 | 国产精品国产三级国产av玫瑰| 日韩成人伦理影院| 好男人视频免费观看在线| 亚洲一区二区三区欧美精品| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 午夜激情久久久久久久| 国产一区二区三区综合在线观看 | 91aial.com中文字幕在线观看| 一个人免费看片子| 视频中文字幕在线观看| 在线看a的网站| 美女视频免费永久观看网站| 一级片'在线观看视频| 久久久久精品人妻al黑| 亚洲国产色片| 亚洲av成人精品一二三区| 少妇的逼水好多| 午夜91福利影院| 一区二区三区精品91| 久久久a久久爽久久v久久| 国产成人av激情在线播放| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 热re99久久精品国产66热6| 国产一区亚洲一区在线观看| 欧美激情国产日韩精品一区| 热99国产精品久久久久久7| 99香蕉大伊视频| 日韩一区二区视频免费看| 嫩草影院入口| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 少妇精品久久久久久久| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 成人毛片a级毛片在线播放| 九九爱精品视频在线观看| 国产视频首页在线观看| 国产精品久久久久久久电影| 国产69精品久久久久777片| 在线观看三级黄色| 伦理电影大哥的女人| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 七月丁香在线播放| 十八禁网站网址无遮挡| 午夜激情av网站| 99热网站在线观看| 国产伦理片在线播放av一区| 老司机亚洲免费影院| 99热国产这里只有精品6| 国产精品国产av在线观看| 日韩免费高清中文字幕av| 哪个播放器可以免费观看大片| 日韩电影二区| videossex国产| 亚洲精品,欧美精品| 日韩视频在线欧美| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| freevideosex欧美| 精品亚洲成国产av| 亚洲 欧美一区二区三区| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 丁香六月天网| 久久久久久久精品精品| av网站免费在线观看视频| 乱人伦中国视频| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 激情五月婷婷亚洲| 亚洲第一区二区三区不卡| 熟妇人妻不卡中文字幕|