• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    益腎祛濁方對(duì)PCOS模型大鼠胰島素抵抗及性激素的影響

    2017-06-13 03:51:16蔡云許昕
    環(huán)球中醫(yī)藥 2017年6期
    關(guān)鍵詞:性激素灌胃造模

    蔡云 許昕

    ?

    益腎祛濁方對(duì)PCOS模型大鼠胰島素抵抗及性激素的影響

    蔡云 許昕

    目的 建立由來(lái)曲唑聯(lián)合高脂飼料誘導(dǎo)的多囊卵巢綜合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)-胰島素抵抗(insulin resistarce,IR)大鼠模型,觀察益腎祛濁方對(duì)PCOS大鼠胰島素抵抗及性激素水平的影響。 方法 將72只6周齡SD雌性大鼠隨機(jī)分為6組:空白組、模型組、益腎祛濁方高劑量組、益腎祛濁方中劑量組、益腎祛濁方低劑量組及西藥二甲雙胍組,每組12只。除空白組外,其余各組采用來(lái)曲唑聯(lián)合高脂飼料法建立PCOS-IR大鼠模型。造模成功后,給予灌服益腎祛濁方,以西藥二甲雙胍作為對(duì)照,觀察用藥后各組大鼠空腹胰島素、性激素水平及卵巢結(jié)構(gòu)變化。 結(jié)果 (1)體重:在造模過(guò)程中,除空白組外,各組大鼠體重均明顯增加。造模后,經(jīng)過(guò)中藥或二甲雙胍灌藥,各組大鼠與模型組比較體重增長(zhǎng)幅度減慢,甚至較前略有減輕。(2)性激素:造模后,模型組黃體生成素(luteinizing hormone,LH)、睪酮(testosterone,T)、黃體生成素/卵泡刺激素(luteinizing hormone/follicle stimulating hormone,LH/FSH)水平較空白組升高;卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,F(xiàn)SH)方面,各組無(wú)明顯差異(P>0.05);用藥后益腎祛濁方各劑量組的T、LH、LH/FSH水平較模型組降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),二甲雙胍組與模型組比較,T、LH、LH/FSH水平無(wú)明顯差異(P>0.05)。(3)代謝指標(biāo):與模型組比較,益腎祛濁方高、中劑量組及西藥二甲雙胍組的空腹胰島素(fasting insulin,F(xiàn)INS)水平降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);益腎祛濁方低劑量組與模型組比較FINS水平無(wú)明顯差異(P>0.05)。(4)卵巢組織:益腎祛濁方各劑量組對(duì)卵巢多囊樣改變均有不同程度改善,使小卵泡數(shù)目減少,顆粒細(xì)胞層增厚;二甲雙胍組改善卵巢組織效果不如益腎祛濁方組明顯。 結(jié)論 益腎祛濁方能夠有效改善PCOS-IR模型大鼠內(nèi)分泌及代謝紊亂狀態(tài),且恢復(fù)卵巢內(nèi)卵泡結(jié)構(gòu),使顆粒細(xì)胞增殖,促進(jìn)卵泡發(fā)育,整體效果優(yōu)于二甲雙胍組。

    多囊卵巢綜合征; 胰島素抵抗; 中藥; 益腎祛濁方; 二甲雙胍

    多囊卵巢綜合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是婦科常見(jiàn)的內(nèi)分泌與代謝功能異常的復(fù)雜性疾病,以持續(xù)無(wú)排卵或稀發(fā)排卵、高雄激素和/或高胰島素血癥、胰島素抵抗為特征,主要表現(xiàn)為月經(jīng)稀發(fā)、閉經(jīng)、不孕、肥胖、多毛、痤瘡等[1-2]。胰島素抵抗(insulin resistance,IR)指機(jī)體生理水平胰島素(insulin,INS)促進(jìn)器官組織和細(xì)胞吸收利用葡萄糖的效能下降時(shí)的代謝狀態(tài),是機(jī)體靶細(xì)胞對(duì)正常水平的INS反應(yīng)低下的一種病理改變,具有空腹胰島素(fasting insulin,F(xiàn)INS)水平增高,而空腹血糖(fasting plasma glucose,F(xiàn)PG)正常,胰島素抵抗指數(shù)(homeostasis model of assessment for insulin resistance index,HOMA-IR)≥2.69等特征。姚元慶等[3]根據(jù)Carmiona的研究結(jié)果估計(jì)PCOS患者廣泛存在IR,其發(fā)生率高達(dá)50%~70%,IR已成為PCOS的基本病理特征。PCOS-IR是目前婦科內(nèi)分泌領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)之一,也是較為棘手的難題。本研究基于“腎主生殖”“沖脈隸于陽(yáng)明”的中醫(yī)理論,在前期臨床研究[2]基礎(chǔ)上進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn),旨在研究益腎祛濁方對(duì)PCOS-IR大鼠空腹胰島素、性激素水平及卵巢組織形態(tài)等方面的影響。

    1 材料和方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

    選取6周齡SPF級(jí)SD雌性大鼠72只,體重150~160 g,由北京華阜康生物科技股份有限公司提供,許可證號(hào):SCXK(京)2014-0004。

    1.2 實(shí)驗(yàn)用藥

    來(lái)曲唑(江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司,批號(hào):HI9991001);羧甲纖維素鈉(安徽山河藥用輔料股份有限公司,批號(hào):160301);鹽酸二甲雙胍腸溶片(北京利齡恒泰藥業(yè)有限公司,批號(hào):H11021560)。

    益腎祛濁方由菟絲子15 g、桑寄生24 g、續(xù)斷24 g、敗醬草15 g、生薏苡仁24 g、生石膏15 g、茯苓20 g、太子參24 g、澤蘭9 g、桃仁9 g、枳殼9 g、炙甘草6 g組成。制備成中藥水煎劑,按成人服用劑量折算成大鼠用量,設(shè)定為中劑量[4]。高劑量濃度為中劑量的2倍,中劑量濃度為低劑量的2倍。

    1.3 實(shí)驗(yàn)試劑

    血清卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,F(xiàn)SH)、黃體生成素(luteinizing hormone,LH)、睪酮(testosterone,T)、雌二醇(estradiol,E2)、FINS和甘油三酯(triglyceride,TG)等放免試劑盒,均由北京北方生物技術(shù)研究所有限公司提供;羅氏活力型血糖儀(德國(guó)羅氏診斷有限公司)。

    1.4 造模方法

    參考Kafali等[5]的來(lái)曲唑造模法,在來(lái)曲唑灌胃基礎(chǔ)上,加用高脂飼料,建立多囊卵巢綜合征胰島素抵抗大鼠模型。之前筆者已采用此法成功誘導(dǎo)出PCOS-IR大鼠模型,此大鼠同時(shí)具有卵巢多囊樣改變、高雄激素血癥、肥胖及胰島素抵抗等典型病理特征,證實(shí)此造模方法是適用于研究PCOS-IR的動(dòng)物模型。

    具體方法:所有實(shí)驗(yàn)大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)2天,空白組給予普通飼料喂養(yǎng),每日灌胃0.5%羧甲纖維素鈉溶液;其他各組每日灌胃來(lái)曲唑溶液[來(lái)曲唑1 mg/(kg·d)溶于0.5%羧甲纖維素鈉],同時(shí)給予高脂飼料喂養(yǎng)(配方:普通飼料61.5%、豬油12%、蔗糖5%、奶粉5%、花生5%、雞蛋10%、麻油1%、食鹽0.5%),連續(xù)灌胃30天。

    1.5 治療方式

    30天造模結(jié)束后,除空白組外的60只大鼠完全隨機(jī)分為:模型組、益腎祛濁方高劑量組、益腎祛濁方中劑量組、益腎祛濁方低劑量組及西藥二甲雙胍組,每組12只。中、西藥治療組大鼠給予相應(yīng)組別藥物灌胃,具體如下:益腎祛濁方高劑量組按益腎祛濁方40 g/kg灌胃,每日1次,連續(xù)15天;中劑量組按益腎祛濁方20 g/kg灌胃,每日1次,連續(xù)15天。低劑量組按益腎祛濁方10 g/kg灌胃,每日1次,連續(xù)15天。模型組及空白組給予等量生理鹽水,每日1次,連續(xù)灌服15天。期間空白組繼續(xù)普通飼料喂養(yǎng),其他各組繼續(xù)采用高脂飼料喂養(yǎng)。

    1.6 檢測(cè)指標(biāo)

    1.6.1 大鼠體重變化 每周定時(shí)測(cè)量大鼠體重并記錄數(shù)據(jù),繪制大鼠體重變化曲線。

    1.6.2 性激素與代謝指標(biāo) 各組大鼠灌胃結(jié)束后,禁食24小時(shí),于次日以2%戊巴比妥鈉(0.2 mL/100 g)腹腔注射麻醉后,腹主動(dòng)脈取血,離心后收集血清。血清性激素(T、FSH、LH、E2)及相關(guān)代謝指標(biāo)(FINS、TG等)均采用放免法測(cè)定,嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。計(jì)算LH/FSH比值和胰島素抵抗指數(shù)HOMA-IR,計(jì)算公式:HOMA-IR=FPG(mmol/L)×FINS(mIU/L)/22.5。

    1.6.3 卵巢組織學(xué)觀察 卵巢組織以4%多聚甲醛固定,常規(guī)脫水,石蠟包埋;以4 μm厚度切片,常規(guī)脫蠟、水化后蘇木素染色5~10分鐘;1%鹽酸酒精分化,1%伊紅溶液染色,脫水,透明中性樹(shù)膠封片,顯微鏡下觀察各組大鼠卵巢組織學(xué)變化。

    1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    2 結(jié)果

    2.1 一般情況

    所有實(shí)驗(yàn)大鼠經(jīng)灌胃后,無(wú)震顫、驚厥、流涕、呼吸困難等異常生命特征,試驗(yàn)周期內(nèi)無(wú)一只大鼠死亡,其飲食、活動(dòng)等均無(wú)顯著異常狀況。

    2.2 大鼠體重

    6組大鼠實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前的體重?zé)o明顯差異。造模過(guò)程中(至第28天),除空白組外,其余各組大鼠體重增長(zhǎng)明顯。造模后,經(jīng)過(guò)中藥或二甲雙胍治療(第35天至禁食處死當(dāng)天),各組大鼠與模型組比較體重增長(zhǎng)幅度減緩,甚至較前略有減輕。見(jiàn)表1和圖1。

    2.3 性激素水平

    模型組LH、T、LH/FSH水平較空白組升高;FSH水平在各組間無(wú)明顯差異(P>0.05)。灌藥結(jié)束后,空白組及益腎祛濁方各劑量組的LH、T、LH/FSH比值均低于模型組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),二甲雙胍組與模型組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表2。

    圖1 各組大鼠體重增長(zhǎng)趨勢(shì)圖

    2.4 代謝指標(biāo)

    2.4.1 FINS 與模型組比較,益腎祛濁方高、中劑量組及西藥二甲雙胍組的空腹胰島素水平明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);益腎祛濁方低劑量組同模型組相比,F(xiàn)INS水平無(wú)明顯差異(P>0.05)。二甲雙胍組與益腎祛濁方高、中劑量組相比,F(xiàn)INS水平無(wú)明顯差異(P>0.05)。

    2.4.2 FPG 各組間空腹血糖水平無(wú)明顯差異,亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

    2.4.3 TG 各組間甘油三酯水平無(wú)明顯差異,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

    2.4.4 HOMA-IR 空白組、益腎祛濁方高劑量組、中劑量組和二甲雙胍組的胰島素抵抗指數(shù)低于模型組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);中藥低劑量組與模型組比較,HOMA-IR水平無(wú)明顯差異(P>0.05)。見(jiàn)表3。2.5 卵巢組織學(xué)改變

    光學(xué)鏡下,空白組大鼠卵巢內(nèi)有多個(gè)黃體,顆粒細(xì)胞呈多層,形態(tài)完整,排列整齊,顆粒細(xì)胞層較厚。模型組可見(jiàn)較多早期發(fā)育的小卵泡及閉鎖卵泡,囊狀擴(kuò)張顯著,顆粒細(xì)胞層減少,甚至消失,黃體較少,卵巢呈典型多囊樣改變。益腎祛濁方各劑量組對(duì)卵巢多囊樣改變均有不同程度的改善,小卵泡數(shù)目減少,顆粒細(xì)胞層增厚等。二甲雙胍組對(duì)改善卵巢組織多囊樣改變有一定影響,但效果不如中藥組明顯。見(jiàn)圖2。

    表1 各組大鼠體重比較

    表2 各組大鼠性激素指標(biāo)比較

    注: 與模型組比較,aP<0.05。

    表3 各組大鼠代謝指標(biāo)比較

    注: 與模型組比較,aP<0.05。

    注:A空白組; B模型組; C益腎祛濁方高劑量組; D益腎祛濁方中劑量組; E益腎祛濁方低劑量組; F二甲雙胍組

    圖2 各組大鼠卵巢組織學(xué)改變HE染色圖(×40)

    3 討論

    自1980年Burghen首次報(bào)道PCOS患者存在高胰島素血癥以來(lái),越來(lái)越多的臨床證據(jù)表明IR是PCOS的顯著特征[6],PCOS-IR具有高發(fā)性、異質(zhì)性、終身性和難治性等特點(diǎn),且存在糖尿病、代謝綜合征等遠(yuǎn)期并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn),嚴(yán)重威脅患者身心健康。目前,西醫(yī)常首選雙胍類(lèi)藥物治療本病,二甲雙胍是胰島素增敏劑,可增加外周組織對(duì)葡萄糖的攝取和利用,抑制肝糖原異生和糖原分解,改善外周組織對(duì)胰島素的敏感性[7]。二甲雙胍治療PCOS-IR不僅改善胰島素抵抗?fàn)顟B(tài),還可促進(jìn)排卵和受孕,但遠(yuǎn)期效果并不理想,并且口服二甲雙胍常出現(xiàn)腹瀉、惡心、腹脹、胃部不適等不良反應(yīng),部分患者難以堅(jiān)持服藥。中藥治療PCOS-IR,同樣可使患者恢復(fù)排卵功能,調(diào)整月經(jīng)周期,提高生殖能力,不良反應(yīng)相對(duì)較少,具有良好的療效。

    中醫(yī)學(xué)無(wú)與PCOS-IR相對(duì)應(yīng)的病名,根據(jù)其臨床特征,將本病歸屬于“閉經(jīng)”“月經(jīng)稀發(fā)”“月經(jīng)過(guò)少”“經(jīng)期延長(zhǎng)”及“不孕”等范疇。多數(shù)學(xué)者認(rèn)為,本病與臟腑功能失調(diào)及痰濕、血瘀關(guān)系密切。本實(shí)驗(yàn)以補(bǔ)腎健脾,祛濁調(diào)經(jīng)為治療法則,結(jié)果證實(shí)益腎祛濁方能顯著降低PCOS-IR大鼠空腹胰島素水平,改善高雄激素血癥、LH升高、LH/FSH比值異常等內(nèi)分泌紊亂狀態(tài),亦能一定程度糾正卵巢多囊樣病變。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明,該方既能通過(guò)補(bǔ)益腎氣恢復(fù)卵巢局部卵泡質(zhì)量,使體內(nèi)性激素水平趨向正常周期性變化,又能通過(guò)祛濁清除胃腸積滯,抑制過(guò)多雄激素的產(chǎn)生,增強(qiáng)脾運(yùn)而逆轉(zhuǎn)胰島素抵抗,最終遏制高雄激素血癥與高胰島素血癥之間此增彼漲的惡性循環(huán),改善卵巢排卵功效,恢復(fù)月經(jīng)與生殖能力。西藥二甲雙胍組雖能有效降低大鼠FINS水平,但異常激素指標(biāo)改善并不明顯。本研究證明益腎祛濁方在改善PCOS大鼠胰島素抵抗及性激素水平方面,較西藥二甲雙胍組更具有優(yōu)勢(shì)。

    [1] 喬杰,尹太郎. 多囊卵巢綜合征認(rèn)知與對(duì)策[J].中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志,2013,29(11):841-844.

    [2] 高征,許昕,梁婧翹. 益腎助陽(yáng)活血化濁法對(duì)多囊卵巢綜合征患者激素及排卵功能影響[J].環(huán)球中醫(yī)藥,2015,8(6):675-678.

    [3] 姚元慶,陳春玲. 多囊卵巢綜合征的胰島素抵抗[J].中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志,2002,18(11):645-647.

    [4] 張宏,王旭昀,劉美奇,等. 中藥含藥血清實(shí)驗(yàn)動(dòng)物灌胃給藥劑量探討[J]. 吉林中醫(yī)藥,2015,(6):623-625.

    [5] Kafali H, Iriadam M, Ozardall I. et al. Letrozole-induced polycystic ovaries in the rat:a new model for cystic ovarian disease[J]. Archives of medical research, 2004,35(2):103-108.

    [6] March WA,Moore VM,Willson KJ,et al. The prevalence of polycystic ovary syndrome in a community sample assessed under contrasting diagnostic criteria [J].Hum Reprod,2010,25:544-551.

    [7] 朱敏. 針?biāo)幉⒂酶纳贫嗄衣殉簿C合征患者胰島素抵抗的臨床研究[D].廣州:廣州中醫(yī)藥大學(xué),2012.

    (本文編輯: 韓虹娟)

    Effects ofYishenQuzhuodecoction on insulin resistance and hormones of rats with PCOS

    CAIYun,XUXin.

    Departmentofgynecology,BeijingHospitalofTraditionalChineseMedicine,CapitalMedicalUniversity,Beijing10010,China

    XUXin,E-mail:xuxindoudou1959@163.com

    Objective The PCOS-IR rat model was induced by letrozole combined with high fat diet, and the effect ofYishenQuzhuodecoction on insulin resistance and hormones were observed in PCOS rats. Methods 72 6-week-old SD female rats were randomly divided into 6 groups:blank group, model group,YishenQuzhuodecoction high dose group,YishenQuzhuodecoction middle dose group,YishenQuzhuodecoction low dose group, western medicine group, 12 rats in each group. After the rat model was successfully established, theYishenQuzhuodecoction and western medicine melbine (Metformin Hydrochloride) was used to treat. The levels of insulin and hormones were observed, and the change of ovary structure was observed.Results (1)Effect on the weight of rats: model group was significantly elevated, body weight of rats in each treatment group was decreased after treatment.(2)The influence on testosterone(T), luteinizing hormone(LH), luteinizing hormone/follicle stimulating hormone (LH / FSH): the levels of T and LH / FSH in model group was significantly increased, the levels of T ,LH and LH / FSH in allYishenQuzhuodecoction groups were reduced.(3)On serum insulin (FINS) in rats: compared with the blank group, the level of FINS of model group was significantly increased, the level of FINS in all treatment groups was decreased except theYishenQuzhuodecoction low dose group.(4)Ovarian tissue:YishenQuzhuodecoction groups have different degrees of improvement on polycystic ovary in rats, the number of small follicles was reduced, granular cell layer was thickened; the effect of metformin group was not as obvious as the Chinese medicine group.ConclusionYishenQuzhuodecoction can effectively improve the endocrine and metabolism of PCOS-IR rats, and can restore the structure of ovarian follicles, can promote the proliferation of granulosa cells and follicular development, the overall effect is better than metformin group.

    Polycystic ovary syndrome; Insulin resistance; Traditional Chinese medicine;YishenQuzhuodecoction; Metformin Hydrochloride

    國(guó)家自然科學(xué)基金(81674010)

    100010 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京中醫(yī)醫(yī)院婦科[蔡云(碩士研究生)、許昕]

    蔡云(1989- ),女,2014級(jí)在讀碩士研究生。研究方向:中醫(yī)藥治療多囊卵巢綜合征胰島素抵抗。E-mail:caiyun0717@126.com

    許昕(1959- ),女,碩士,主任醫(yī)師。研究方向:中西醫(yī)結(jié)合治療排卵障礙性疾病。E-mail:xuxindoudou1959@163.com

    R285.5

    A

    10.3969/j.issn.1674-1749.2017.06.003

    2016-07-08)

    猜你喜歡
    性激素灌胃造模
    肺動(dòng)脈高壓與性激素相關(guān)性研究進(jìn)展
    腎陽(yáng)虛證動(dòng)物模型建立方法及評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)研究進(jìn)展
    脾腎陽(yáng)虛型骨質(zhì)疏松癥動(dòng)物模型造模方法及模型評(píng)價(jià)
    濕熱證動(dòng)物模型造模方法及評(píng)價(jià)研究
    為什么要做性激素檢查
    為什么要做性激素檢查
    小鼠、大鼠灌胃注意事項(xiàng)
    來(lái)曲唑灌胃后EM大鼠病灶體積及COX-2 mRNA、survivin蛋白表達(dá)變化
    慢性焦慮刺激對(duì)成年雌性大鼠性激素水平的影響
    實(shí)驗(yàn)小鼠的灌胃給藥技巧
    √禁漫天堂资源中文www| 国产综合精华液| 嘟嘟电影网在线观看| 亚洲国产欧美在线一区| 国产精品不卡视频一区二区| 免费观看的影片在线观看| 七月丁香在线播放| 国产熟女欧美一区二区| 涩涩av久久男人的天堂| 插阴视频在线观看视频| 国产一区亚洲一区在线观看| 免费av不卡在线播放| 国产69精品久久久久777片| 精品国产乱码久久久久久小说| 赤兔流量卡办理| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 777米奇影视久久| 午夜福利网站1000一区二区三区| 免费少妇av软件| 午夜激情福利司机影院| 久久 成人 亚洲| 国产伦精品一区二区三区视频9| 在线看a的网站| 国产日韩欧美在线精品| 久久久久国产精品人妻一区二区| 视频中文字幕在线观看| 亚洲av.av天堂| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 国产精品一区www在线观看| 人人澡人人妻人| 欧美精品国产亚洲| 2022亚洲国产成人精品| 免费看光身美女| av在线app专区| 99热6这里只有精品| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 欧美bdsm另类| 天堂中文最新版在线下载| 在线观看一区二区三区激情| 99久久综合免费| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 日韩av在线免费看完整版不卡| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 久久久久国产精品人妻一区二区| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 亚州av有码| 亚洲精品aⅴ在线观看| 欧美人与善性xxx| 简卡轻食公司| 色视频在线一区二区三区| 亚洲美女视频黄频| 男女啪啪激烈高潮av片| 中国美白少妇内射xxxbb| 飞空精品影院首页| 亚洲av免费高清在线观看| 欧美日韩精品成人综合77777| 欧美三级亚洲精品| kizo精华| 欧美3d第一页| 亚洲色图综合在线观看| 国产一区二区在线观看av| 成年美女黄网站色视频大全免费 | 亚洲性久久影院| 国产日韩欧美亚洲二区| 国产精品久久久久久精品电影小说| 日本爱情动作片www.在线观看| 色婷婷av一区二区三区视频| 久久国产精品大桥未久av| 99久久精品一区二区三区| 久久久久久久久久久丰满| 午夜福利视频精品| 男女国产视频网站| 男人操女人黄网站| 亚洲av中文av极速乱| 天堂中文最新版在线下载| 国产精品不卡视频一区二区| 午夜影院在线不卡| 老熟女久久久| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 亚洲综合精品二区| 精品午夜福利在线看| 欧美精品一区二区免费开放| 18+在线观看网站| 如何舔出高潮| 精品国产国语对白av| 2018国产大陆天天弄谢| 中文欧美无线码| 99国产综合亚洲精品| 91精品一卡2卡3卡4卡| 性色av一级| 一本久久精品| 国产男人的电影天堂91| 五月伊人婷婷丁香| 午夜av观看不卡| 国产高清不卡午夜福利| 亚洲欧美成人精品一区二区| 熟妇人妻不卡中文字幕| 下体分泌物呈黄色| 精品少妇内射三级| 伦理电影免费视频| 午夜av观看不卡| 亚洲av日韩在线播放| 女性生殖器流出的白浆| 精品一区二区三卡| 天堂俺去俺来也www色官网| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 99久久中文字幕三级久久日本| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 国产毛片在线视频| 婷婷成人精品国产| 精品卡一卡二卡四卡免费| 99久久中文字幕三级久久日本| 国产在线视频一区二区| 在线观看免费视频网站a站| 久久久久久久亚洲中文字幕| av在线app专区| 久久精品国产a三级三级三级| 国产伦理片在线播放av一区| 九九在线视频观看精品| 亚洲一区二区三区欧美精品| 成人国产av品久久久| 免费看光身美女| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 视频在线观看一区二区三区| 午夜日本视频在线| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 精品一区在线观看国产| 久久99热这里只频精品6学生| 精品久久久精品久久久| 天美传媒精品一区二区| 国产综合精华液| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 69精品国产乱码久久久| 亚洲av国产av综合av卡| 黑人高潮一二区| 国产成人av激情在线播放 | 丝袜喷水一区| 欧美3d第一页| 两个人免费观看高清视频| 婷婷色综合www| 2021少妇久久久久久久久久久| 在线观看免费高清a一片| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 三级国产精品片| 美女国产高潮福利片在线看| 亚洲四区av| 国产精品一二三区在线看| 久热久热在线精品观看| 久久久久久人妻| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 中文欧美无线码| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 久久这里有精品视频免费| 波野结衣二区三区在线| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 观看av在线不卡| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 老司机影院成人| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 亚洲中文av在线| 一级,二级,三级黄色视频| 成人毛片a级毛片在线播放| 精品久久久久久久久亚洲| 色吧在线观看| 人人澡人人妻人| 午夜福利影视在线免费观看| 91精品伊人久久大香线蕉| 激情五月婷婷亚洲| 亚洲av福利一区| 欧美日韩成人在线一区二区| 一个人看视频在线观看www免费| 国产成人精品一,二区| 97在线人人人人妻| 中文字幕免费在线视频6| 色婷婷久久久亚洲欧美| 亚洲精品日本国产第一区| av不卡在线播放| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 水蜜桃什么品种好| 国产色婷婷99| 女性被躁到高潮视频| 在线观看国产h片| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 制服人妻中文乱码| 亚洲成人手机| 国产亚洲一区二区精品| 亚洲人与动物交配视频| 我要看黄色一级片免费的| 国产 精品1| 国产在视频线精品| 毛片一级片免费看久久久久| 欧美国产精品一级二级三级| 国产国语露脸激情在线看| 婷婷色综合大香蕉| 国产伦精品一区二区三区视频9| 成人黄色视频免费在线看| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 欧美最新免费一区二区三区| 亚洲久久久国产精品| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 高清毛片免费看| 免费日韩欧美在线观看| 精品一区二区三区视频在线| 久久久久国产精品人妻一区二区| 久久久久网色| 国产视频首页在线观看| 午夜福利网站1000一区二区三区| 亚洲精品亚洲一区二区| 最近最新中文字幕免费大全7| 在线观看美女被高潮喷水网站| 久久精品国产亚洲av天美| www.av在线官网国产| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 丁香六月天网| 特大巨黑吊av在线直播| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 亚洲精品中文字幕在线视频| 久久久久精品性色| 亚洲精品成人av观看孕妇| 免费看av在线观看网站| 大香蕉97超碰在线| 一边摸一边做爽爽视频免费| 老司机影院成人| 亚洲五月色婷婷综合| 最近手机中文字幕大全| 91精品伊人久久大香线蕉| 亚洲四区av| 美女国产高潮福利片在线看| 男男h啪啪无遮挡| 热re99久久国产66热| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 最近手机中文字幕大全| 五月天丁香电影| 国产精品99久久99久久久不卡 | 国产精品一区二区在线不卡| 国产视频首页在线观看| 欧美性感艳星| 丝袜美足系列| 男男h啪啪无遮挡| 丝袜脚勾引网站| 国产精品国产三级国产专区5o| 久久精品国产亚洲av天美| 秋霞伦理黄片| www.av在线官网国产| 人妻一区二区av| 久久精品人人爽人人爽视色| 妹子高潮喷水视频| 九色成人免费人妻av| 久久影院123| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 一边摸一边做爽爽视频免费| 久久久久久久国产电影| 久久久国产欧美日韩av| 免费大片黄手机在线观看| 永久网站在线| 男女边摸边吃奶| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 飞空精品影院首页| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 青春草亚洲视频在线观看| 国产成人aa在线观看| 国产爽快片一区二区三区| 国产色婷婷99| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 青春草亚洲视频在线观看| 在线免费观看不下载黄p国产| 丝袜喷水一区| 熟女电影av网| 久久人人爽人人爽人人片va| 久久国内精品自在自线图片| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 日韩一本色道免费dvd| 有码 亚洲区| 一区二区三区乱码不卡18| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 国产成人freesex在线| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 人人妻人人澡人人看| 久久久久人妻精品一区果冻| 日韩亚洲欧美综合| 国产爽快片一区二区三区| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 性高湖久久久久久久久免费观看| 成人毛片60女人毛片免费| 少妇被粗大猛烈的视频| 久久综合国产亚洲精品| 下体分泌物呈黄色| 欧美成人午夜免费资源| 热99久久久久精品小说推荐| 久久99一区二区三区| 久久久久精品久久久久真实原创| √禁漫天堂资源中文www| 久久午夜福利片| 亚洲精品456在线播放app| 亚洲精品一二三| 熟女电影av网| 亚洲伊人久久精品综合| 91在线精品国自产拍蜜月| 欧美日韩av久久| 亚洲欧美色中文字幕在线| 欧美精品亚洲一区二区| 成人毛片a级毛片在线播放| 国产永久视频网站| 欧美日韩在线观看h| 国产亚洲欧美精品永久| 国产亚洲精品久久久com| 嘟嘟电影网在线观看| 成年人免费黄色播放视频| 一级毛片 在线播放| av卡一久久| 新久久久久国产一级毛片| 欧美三级亚洲精品| 亚洲av福利一区| 51国产日韩欧美| 国产精品99久久久久久久久| 国产伦精品一区二区三区视频9| 亚洲国产最新在线播放| videos熟女内射| 三级国产精品欧美在线观看| 国产片内射在线| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 欧美变态另类bdsm刘玥| 国产黄色免费在线视频| 欧美性感艳星| 亚洲国产成人一精品久久久| 亚洲av二区三区四区| 九色成人免费人妻av| 999精品在线视频| 伊人亚洲综合成人网| 国产精品熟女久久久久浪| .国产精品久久| 校园人妻丝袜中文字幕| 国产探花极品一区二区| 国产综合精华液| 日韩欧美一区视频在线观看| 国产亚洲欧美精品永久| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 中文欧美无线码| 午夜激情福利司机影院| 国产黄色免费在线视频| 日韩一区二区三区影片| 欧美日韩成人在线一区二区| 久久人人爽人人片av| 国产精品 国内视频| 免费日韩欧美在线观看| 欧美三级亚洲精品| 日韩亚洲欧美综合| 天天操日日干夜夜撸| 一本一本综合久久| 欧美日韩综合久久久久久| 久久久久人妻精品一区果冻| 午夜免费男女啪啪视频观看| 久久午夜综合久久蜜桃| 亚洲性久久影院| 亚洲av.av天堂| 青春草国产在线视频| 天天操日日干夜夜撸| 色婷婷久久久亚洲欧美| 91久久精品电影网| 男人爽女人下面视频在线观看| 插逼视频在线观看| 我要看黄色一级片免费的| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 好男人视频免费观看在线| 免费大片黄手机在线观看| 日本爱情动作片www.在线观看| 高清视频免费观看一区二区| 国产综合精华液| 亚洲无线观看免费| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 国产一区二区三区综合在线观看 | 国产69精品久久久久777片| 超色免费av| 国产精品国产三级国产专区5o| 18在线观看网站| 在线免费观看不下载黄p国产| 男女啪啪激烈高潮av片| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 曰老女人黄片| a级毛片在线看网站| 亚洲人与动物交配视频| 只有这里有精品99| 特大巨黑吊av在线直播| 日本wwww免费看| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 国产在线一区二区三区精| 日本vs欧美在线观看视频| 伊人久久国产一区二区| 国产一区亚洲一区在线观看| 一级毛片aaaaaa免费看小| 国产成人精品婷婷| 日韩一区二区视频免费看| 久久久精品94久久精品| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 午夜免费鲁丝| 岛国毛片在线播放| 大片免费播放器 马上看| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 丝袜美足系列| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 久久午夜福利片| 在线天堂最新版资源| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 国产熟女欧美一区二区| av女优亚洲男人天堂| 成人毛片60女人毛片免费| 午夜激情av网站| 男的添女的下面高潮视频| 国产精品久久久久久精品电影小说| 久久久久久久久久久久大奶| 韩国高清视频一区二区三区| 久久精品国产自在天天线| 亚洲图色成人| 日韩中文字幕视频在线看片| 精品人妻在线不人妻| 一级a做视频免费观看| 午夜免费男女啪啪视频观看| 日本av手机在线免费观看| 亚洲久久久国产精品| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国产男女超爽视频在线观看| 五月天丁香电影| 日韩av在线免费看完整版不卡| 亚洲欧美一区二区三区国产| 国产精品 国内视频| 国产精品国产三级国产专区5o| 日本av免费视频播放| 午夜精品国产一区二区电影| 桃花免费在线播放| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 日日撸夜夜添| 亚洲国产成人一精品久久久| 我的女老师完整版在线观看| 欧美一级a爱片免费观看看| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 一本一本久久a久久精品综合妖精 国产伦在线观看视频一区 | 全区人妻精品视频| 国产精品熟女久久久久浪| 日韩亚洲欧美综合| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 水蜜桃什么品种好| 久久久午夜欧美精品| 久久久精品区二区三区| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 在线观看三级黄色| 在线播放无遮挡| 亚洲,一卡二卡三卡| 久久国产精品大桥未久av| 热99国产精品久久久久久7| a级毛片在线看网站| 欧美丝袜亚洲另类| 亚洲伊人久久精品综合| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 亚洲欧美一区二区三区黑人 | videossex国产| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 一区二区三区乱码不卡18| 边亲边吃奶的免费视频| 另类精品久久| 99热网站在线观看| 国产日韩欧美在线精品| 夫妻午夜视频| 高清视频免费观看一区二区| 好男人视频免费观看在线| 三级国产精品欧美在线观看| 丰满饥渴人妻一区二区三| 精品久久久久久久久亚洲| 新久久久久国产一级毛片| 一边亲一边摸免费视频| 国产伦理片在线播放av一区| 亚洲高清免费不卡视频| 制服丝袜香蕉在线| 丰满饥渴人妻一区二区三| 婷婷色综合大香蕉| 亚洲国产精品国产精品| 久久人人爽人人爽人人片va| 热99久久久久精品小说推荐| 男女国产视频网站| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 最后的刺客免费高清国语| 亚洲精品aⅴ在线观看| 国产69精品久久久久777片| 草草在线视频免费看| 青春草视频在线免费观看| 久久综合国产亚洲精品| 人体艺术视频欧美日本| 女性被躁到高潮视频| 久久久午夜欧美精品| 久久久久久久国产电影| 国产成人精品婷婷| 不卡视频在线观看欧美| 亚洲四区av| 免费人妻精品一区二区三区视频| 国产爽快片一区二区三区| 亚洲国产欧美在线一区| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 美女福利国产在线| 我的老师免费观看完整版| 欧美丝袜亚洲另类| 最近最新中文字幕免费大全7| 另类亚洲欧美激情| 99久久综合免费| 我的老师免费观看完整版| 欧美3d第一页| 99久久中文字幕三级久久日本| 国产成人午夜福利电影在线观看| 精品少妇内射三级| 国产永久视频网站| 成年av动漫网址| 一边亲一边摸免费视频| 黄色配什么色好看| av不卡在线播放| freevideosex欧美| 十八禁高潮呻吟视频| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 毛片一级片免费看久久久久| 亚洲精品aⅴ在线观看| 如何舔出高潮| 久久久国产一区二区| 免费看光身美女| av不卡在线播放| 91aial.com中文字幕在线观看| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 成人影院久久| 国产av精品麻豆| 亚洲欧美一区二区三区国产| 草草在线视频免费看| av视频免费观看在线观看| 高清不卡的av网站| 男的添女的下面高潮视频| 三上悠亚av全集在线观看| 少妇的逼好多水| 国产成人freesex在线| 一本一本综合久久| 精品久久久久久久久亚洲| 亚洲三级黄色毛片| 中文字幕av电影在线播放| 国产有黄有色有爽视频| 国产69精品久久久久777片| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 人妻一区二区av| 国产精品久久久久成人av| 国产极品天堂在线| 亚洲少妇的诱惑av| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 国产极品粉嫩免费观看在线 | 亚洲av.av天堂| 熟女av电影| 婷婷色综合www| 国产一区二区三区av在线| 亚洲第一av免费看| 黄色怎么调成土黄色| 在线看a的网站| 欧美亚洲日本最大视频资源| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 99re6热这里在线精品视频| 日韩亚洲欧美综合| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 99久久精品一区二区三区| 大片免费播放器 马上看| 18在线观看网站| 丁香六月天网| 天美传媒精品一区二区| 天天操日日干夜夜撸| 亚洲不卡免费看| 九色成人免费人妻av| 成人亚洲精品一区在线观看| 韩国av在线不卡| 久久久久视频综合| 尾随美女入室| 日韩亚洲欧美综合| 人人妻人人澡人人看| 18+在线观看网站| 毛片一级片免费看久久久久| 国产极品天堂在线| 亚洲欧美色中文字幕在线| 久久97久久精品| 一级,二级,三级黄色视频| 精品亚洲成a人片在线观看| 观看美女的网站| 亚洲av日韩在线播放| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 丰满乱子伦码专区| videosex国产| 在线免费观看不下载黄p国产| 中国三级夫妇交换| 伊人久久精品亚洲午夜| 老司机影院成人| 最黄视频免费看| av视频免费观看在线观看| 午夜福利影视在线免费观看| 日本午夜av视频| 成人综合一区亚洲| 美女内射精品一级片tv| 亚洲精品亚洲一区二区| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 黑人高潮一二区| 伦理电影大哥的女人| 国产日韩欧美视频二区| 成人国产麻豆网| 午夜福利视频在线观看免费| 国精品久久久久久国模美| 满18在线观看网站| 18禁动态无遮挡网站| 国产高清国产精品国产三级| 熟女电影av网| 午夜精品国产一区二区电影|