中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染腦脊液細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測的價(jià)值

王瑞鋒

平煤神馬醫(yī)療集團(tuán)總醫(yī)院檢驗(yàn)科 平頂山 467000

中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染腦脊液細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測的價(jià)值

王瑞鋒

平煤神馬醫(yī)療集團(tuán)總醫(yī)院檢驗(yàn)科 平頂山 467000

目的 探討腦脊液細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測在中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病中的價(jià)值。方法 對2013-08—2016-08我院收治的280例符合中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)的送檢標(biāo)本進(jìn)行回顧性分析。實(shí)施腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查，測量不同疾病腦脊液各類有核細(xì)胞的細(xì)胞直徑、面積等，并對細(xì)胞大小特征變化等進(jìn)行分析。結(jié)果 本組280份標(biāo)本中，根據(jù)形態(tài)特征分類，63份為化膿性腦膜炎，主要表現(xiàn)為均勻一致的中性粒細(xì)胞反應(yīng)；186份為病毒性腦膜炎，主要表現(xiàn)為淋巴細(xì)胞反應(yīng)，也可見中性粒細(xì)胞；31份為結(jié)核性腦膜炎，主要表現(xiàn)為淋巴樣細(xì)胞、單核吞噬細(xì)胞，偶爾有中性粒細(xì)胞。3組腦病白細(xì)胞數(shù)、未激活單核細(xì)胞、未激活淋巴細(xì)胞、激活單核細(xì)胞、激活淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)，但3組腦病嗜酸性粒細(xì)胞差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；結(jié)核性腦膜炎組中性粒細(xì)胞面積大于病毒性腦膜炎組、化膿性腦膜炎組(P<0.05)，且病毒性腦膜炎組大于化膿性腦膜炎組(P<0.05)；結(jié)核性腦膜炎組淋巴細(xì)胞面積大于病毒性腦膜炎組(P<0.05)；化膿性腦膜炎組、結(jié)核性腦膜炎組淋巴細(xì)胞直徑大于病毒性腦膜炎組(P<0.05)，且結(jié)核性腦膜炎組大于化膿性腦膜炎組(P<0.05)；在單核細(xì)胞面積與直徑方面，結(jié)核性腦膜炎組、病毒性腦膜炎組均大于化膿性腦膜炎組(P<0.05)。結(jié)論 腦脊液細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征改變可作為診斷中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病的重要指標(biāo)。

中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染；腦脊液細(xì)胞形態(tài)學(xué)；細(xì)胞測量

作為臨床上一種常見的綜合征，中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染患病率較高，會給患者大腦及脊髓造成不良影響[1]，主要包括化膿性腦膜炎、結(jié)核性腦膜炎、病毒性腦膜炎、隱球菌性腦膜炎[2]。因不同疾病類型的臨床表現(xiàn)及體征相似，影像學(xué)檢查特異性較低，增加了臨床診斷難度。臨床上改善中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染患者治療效果的關(guān)鍵是采取積極措施進(jìn)行早期診斷、早期治療。所以，臨床采取積極措施，尋找有效的檢查方法，提升中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病的早期診斷效果，從而盡早實(shí)施對癥治療至關(guān)重要。腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查操作簡單，能提高腦脊液細(xì)胞學(xué)分類的準(zhǔn)確性，在早期診斷中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病中效果顯著[3]。本研究以280例符合中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)的臨床送檢標(biāo)本為研究對象，探討腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查的價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1．1 一般資料 對2013-08—2016-08我院收治的280例符合中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]的臨床送檢標(biāo)本進(jìn)行回顧性分析，包括63份化膿性腦膜炎，186份病毒性腦膜炎，31份結(jié)核性腦膜炎。

1．2 方法

1．2．1 儀器與試劑：所用儀器及試劑包括奧林巴斯公司生產(chǎn)的OLYMPUSBX51光學(xué)生物顯微鏡；購自北京國聯(lián)在線技術(shù)有限公司的腦脊液細(xì)胞圖像分析系統(tǒng)；購自Thermo Fisher公司的雙圓孔離心濾紙、玻片架支撐板等Cytospin-4型細(xì)胞玻片離心涂片機(jī)隨機(jī)配套；購自珠海貝索生物技術(shù)有限公司的瑞氏-吉姆薩染色液。

1．2．2 腦脊液白細(xì)胞計(jì)數(shù)：將適量腦脊液混勻，細(xì)胞計(jì)數(shù)采用牛鮑計(jì)數(shù)板進(jìn)行測量，計(jì)算1 mL白細(xì)胞數(shù)。

1．2．3 Cytospin-4型細(xì)胞玻片離心儀制片法：按照計(jì)算出的白細(xì)胞計(jì)數(shù)，在離心機(jī)標(biāo)本室內(nèi)注入0.1～0.5 mL腦脊液標(biāo)本，500～1 000 r/min離心，持續(xù)5～10 min，形成細(xì)胞玻片，實(shí)施邁格吉染色。

1．2．4 腦脊液細(xì)胞分類：在顯微圖像分析鏡下放置完成邁格吉染色的細(xì)胞玻片，按照細(xì)胞核、細(xì)胞胞漿的形態(tài)及特征計(jì)數(shù)100或200個(gè)細(xì)胞進(jìn)行分類。在油鏡下選擇恰當(dāng)視野，細(xì)胞圖像以688像素×512像素進(jìn)行攝取，采集圖片庫，獲得細(xì)胞形態(tài)反映類型特征圖像。

1．2．5 測量細(xì)胞大?。簻y量攝取細(xì)胞的長徑、短徑、面積，在載物臺上放置鏡臺測微計(jì)，經(jīng)計(jì)算機(jī)電子成像系統(tǒng)顯示。

2 結(jié)果

2．1 腦脊液白細(xì)胞計(jì)數(shù)與分類 3組標(biāo)本腦病白細(xì)胞數(shù)、未激活單核細(xì)胞、未激活淋巴細(xì)胞、激活單核細(xì)胞、激活淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)，但腦病嗜酸性粒細(xì)胞差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 腦脊液白細(xì)胞計(jì)數(shù)與分類對比±s)

注：與病毒性腦膜炎組對比，t=9.507、33.530、25.854、63.534、19.950、31.430，*P=0.000、0.000、0.000、0.000、0.000、0.000；與結(jié)核性腦膜炎組對比，t=9.402、46.299、44.130、53.500、14.001、11.975，#P=0.000、0.000、0.000、0.000、0.000、0.000；與病毒性腦膜炎組、結(jié)核性腦膜炎組對比，t=1.633、0.000，aP=0.141、0.000

2．2 腦脊液細(xì)胞面積、直徑比較 結(jié)核性腦膜炎組中性粒細(xì)胞面積大于病毒性腦膜炎組、化膿性腦膜炎組(P<0.05)，且病毒性腦膜炎組大于化膿性腦膜炎組(P<0.05)；結(jié)核性腦膜炎組淋巴細(xì)胞面積大于病毒性腦膜炎組(P<0.05)；化膿性腦膜炎組、結(jié)核性腦膜炎組淋巴細(xì)胞直徑大于病毒性腦膜炎組(P<0.05)，且結(jié)核性腦膜炎組大于化膿性腦膜炎組(P<0.05)；在單核細(xì)胞面積與直徑方面，結(jié)核性腦膜炎組、病毒性腦膜炎組均大于化膿性腦膜炎組(P<0.05)。見表2。

表2 3組腦脊液細(xì)胞面積、直徑比較±s)

注：與化膿性腦膜炎組對比，t=7.003、19.210、20.207、9.783、10.288、16.402，*P=0.000、0.000、0.000、0.000、0.000、0.000；與化膿性腦膜炎組對比，t=15.923、26.495、21.525、8.031、6.833，**P=0.000、0.000、0.000、0.000、0.000；與病毒性腦膜炎組對比，t=14.383、14.879、14.784，#P=0.000、0.000、0.000

3 討論

本研究結(jié)果顯示，不同腦病的腦脊液細(xì)胞學(xué)特征存在差異。本組280份標(biāo)本中，63份為化膿性腦膜炎，在細(xì)菌感染期主要表現(xiàn)為均勻一致的中性粒細(xì)胞反應(yīng)，多見桿狀核細(xì)胞，且伴先令指數(shù)左移現(xiàn)象。一般來說，隨著炎癥的發(fā)展，在病原菌影響下，會出現(xiàn)中性粒細(xì)胞體積減少、染色變灰等現(xiàn)象，核染色質(zhì)呈現(xiàn)塊狀，且顆粒消失，輪廓較為模糊，且會逐漸演變?yōu)槟摷?xì)胞[5]。186份為病毒性腦膜炎，腦脊液細(xì)胞學(xué)主要表現(xiàn)為淋巴細(xì)胞反應(yīng)，也可見中性粒細(xì)胞。淋巴細(xì)胞為免疫細(xì)胞，在抗原刺激下，會逐漸發(fā)展成免疫活性細(xì)胞[6]。而激活淋巴細(xì)胞即是形成病毒性腦膜炎的典型細(xì)胞學(xué)改變[7]。腦樣淋巴細(xì)胞是激活淋巴細(xì)胞的另一種特殊形式，在病毒性腦膜炎中較為常見[8]。這些異形淋巴細(xì)胞有較大的胞體，且具有不規(guī)則的細(xì)胞形態(tài)，胞漿顏色為藍(lán)色，有較為疏松的核染色質(zhì)。31份為結(jié)核性腦膜炎，主要表現(xiàn)為淋巴樣細(xì)胞、單核吞噬細(xì)胞，偶爾伴中性粒細(xì)胞。該腦病細(xì)胞學(xué)滲出期有著較高的中性粒細(xì)胞比例，增殖期存在淋巴細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、激活的淋巴細(xì)胞、激活的單核細(xì)胞等，且差別不大[9]。一旦臨床采取積極治療方法，控制住病情后，會表現(xiàn)出免疫活性細(xì)胞含量提升，且有較長的持續(xù)時(shí)間。實(shí)施腦脊液檢查結(jié)果顯示，漿細(xì)胞存在抗原抗體反應(yīng)。

作為腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查的關(guān)鍵，腦脊液細(xì)胞的形態(tài)劃分發(fā)揮重要的作用。在描述細(xì)胞形態(tài)學(xué)時(shí)，首先需要描述的一個(gè)參數(shù)是細(xì)胞大小，能對某些異常細(xì)胞的來源進(jìn)行判斷，便于進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室及臨床診斷[10]。值得注意的是，隨著實(shí)驗(yàn)條件及生理病理?xiàng)l件的變化，同一種細(xì)胞的形態(tài)特征也可能存在差異，會改變細(xì)胞的大小、形態(tài)、直徑、面積等。膿性腦膜炎有著較小的中性粒細(xì)胞體積，且相較于病毒性腦膜炎與結(jié)核性腦膜炎，其面積、直徑均較小，而中性粒細(xì)胞體積大小能對患者病情感染嚴(yán)重程度進(jìn)行準(zhǔn)確反映。筆者認(rèn)為，這可能是因入侵的病原菌產(chǎn)生內(nèi)毒素，從而對骨髓腔壁的基質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生刺激，促使其生成刺激因子，導(dǎo)致中性粒細(xì)胞含量不斷提升。結(jié)核性腦膜炎的臨床癥狀較為復(fù)雜，為細(xì)菌性非化膿性腦膜炎。腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果呈現(xiàn)出混合細(xì)胞反應(yīng)，且患者普遍存在較長的病史。本研究中，結(jié)核性腦膜炎組淋巴細(xì)胞面積大于病毒性腦膜炎組(P<0.05)，淋巴細(xì)胞直徑大于化膿性腦膜炎組(P<0.05)。筆者認(rèn)為，這可能是與患者病程較長炎癥難以控制、易形成腦膜粘連、交通性腦積水等因素有關(guān)。結(jié)核性腦膜炎的胞內(nèi)寄生菌為結(jié)核桿菌，寄生場所包括單核吞噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞。而腦脊液中的結(jié)核桿菌會很快被單核巨噬細(xì)胞吞噬，可能與不同疾病細(xì)菌慢性期與急性期感染等因素有關(guān)，今后需進(jìn)行深入研究。

綜上所述，腦脊液細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征改變可作為診斷中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病的重要指標(biāo)。

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(收稿2016-11-20)

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