雞骨草研究的新進(jìn)展

林夢瑤， 黃鎖義， 李 琳， 譚 冰,2

(1.右江民族醫(yī)學(xué)院 臨床醫(yī)學(xué)院，廣西 百色 533000；2.右江民族醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院，廣西 百色 533000；3.右江流域特色民族藥研究廣西高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣西 百色 533000)

雞骨草研究的新進(jìn)展

林夢瑤1， 黃鎖義2,3*， 李 琳1， 譚 冰1,2

(1.右江民族醫(yī)學(xué)院 臨床醫(yī)學(xué)院，廣西 百色 533000；2.右江民族醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院，廣西 百色 533000；3.右江流域特色民族藥研究廣西高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣西 百色 533000)

雞骨草作為我國的一項傳統(tǒng)中藥，具有多種藥用成分和藥理活性。就近10年來對雞骨草各部位的主要成分和藥用研究的最新現(xiàn)狀作一綜述，并分析雞骨草的發(fā)展前景，為日后開發(fā)利用雞骨草提供參考建議。

雞骨草；中藥；藥用植物

雞骨草(AbruscantoniensisHance)屬豆科植物，味甘、微苦、性涼，廣泛栽培于廣西和廣東地區(qū)，不僅是傳統(tǒng)的一味中藥，有利濕退黃，消炎抑菌，增強(qiáng)抵抗力的作用，常用于治療黃疽，除濕去火，止痛消氣，跌打瘀血內(nèi)傷等疾病，還可制作涼茶和煲湯。雞骨草全草含相思子堿、甾醇化合物、皂苷、黃酮類、大黃酚、大黃素甲醚、氨基酸等化合物[1-3]。雞骨草能明顯降血脂、脂肝，對肝具有一定的保護(hù)作用[4]。本文就近 10年來對雞骨草的含量測定、藥理活性和制劑研究等進(jìn)展?fàn)顩r作一綜述，為進(jìn)一步開發(fā)和利用雞骨草提供理論參考。

1 含量測定

1.1 總黃酮含量測定

雞骨草中含有豐富的總黃酮，也是治療疾病的主要活性成分，不少學(xué)者對探討此成分做了大量的研究。廖春燕[5]用超聲波法提取雞骨草總黃酮的最優(yōu)提取條件為：超聲波功率90 W，乙醇體積分?jǐn)?shù)50%，料液比(g/mL)1∶40，提取時間20 min；乙醇回流法提取雞骨草黃酮最優(yōu)提取條件為：溫度80 ℃，乙醇體積分?jǐn)?shù)60%，料液比(g/mL)1∶30，提取時間1.0 h，兩種方法的總黃酮提取率均高于溶劑浸提法，耗時均比浸提法短，回流法的提取率比超聲波法的略高；超聲波法操作簡便，提取時間短。回流法較為傳統(tǒng)，提取時間較長，能耗大；浸泡法產(chǎn)率較低。黃榮韶[6]采用正交試驗(yàn)優(yōu)化雞骨草總黃酮超聲提取工藝,用比色法測定不同生長期雞骨草不同部位的總黃酮含量，發(fā)現(xiàn)乙醇用量和超聲提取次數(shù)是影響雞骨草總黃酮超聲提取效果的主要因素;雞骨草莖蔓的總黃酮含量最高,其次是根系,葉片含量最低;雞骨草根系、莖蔓總黃酮含量有相似的累積變化規(guī)律,隨著植株生長,雞骨草根系和莖蔓的總黃酮含量逐漸增加,到10月份達(dá)高峰值,隨后緩慢降低,但10～12月份的含量差別不顯著;受低溫影響,到第2年2月份含量顯著降低;葉片在脫落前總黃酮含量達(dá)最大值。

1.2 多糖含量測定

扶雄[7]通過熱水提取乙醇醇沉，Sevage法除蛋白，樹脂脫色、離子交換柱層析分離純化得到雞骨草的中性多糖組分ACPa和酸性多糖組分ACPb。GPC分子量測定結(jié)果顯示，ACPa和ACPb相對分子質(zhì)量分布均比較集中，它們的重均分子量分別為1.24×105Da、2.15×105Da，紅外光譜結(jié)果表明它們都是多糖類化合物，ACPa的糖鏈以α型吡喃糖苷為主，ACPb的糖苷鍵包含α型和β型吡喃糖苷。HPLC-ELSD分析結(jié)果顯示ACPa是一種葡聚糖，ACPb為雜多糖，由鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖和葡萄糖組成，摩爾比為1∶3.4∶3.6∶10.9。

1.3 微量元素含量測定

目前對雞骨草中微量元素的研究報道較少，陳偉珠等[8]用電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀測定了湛江人工栽培的雞骨草中微量元素含量,發(fā)現(xiàn)其鈣、鎂、鐵、鋅等元素的含量都較豐富，但同時鋁的含量也很高。

1.4 生物堿含量測定

史海明[9]建立測定雞骨草藥材中相思堿含量的高效液相色譜法，Kromasil C18色譜柱(250 mm×4.6 mm,5μm)，流動相為甲醇-水-磷酸-三乙胺(12∶88∶0.36∶0.16),流速1.0mL·min-1，檢測波長280 nm，測定了不同來源的17批雞骨草藥材，其相思子堿的含量在0.02%～0.66%之間，相思子堿在0.1～4.0μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.999 9,n=8),平均回收率為99.2%(n=9)。黃平等[10]也建立采用反相高效液相色譜法,發(fā)現(xiàn)相思子堿和下箴刺桐堿線性范圍均為1.1～55 mg·L-1(r= 0.999 9);平均回收率(n=6)，分別為104.6%和103.5%。

1.5 總皂苷含量測定

胡彥[11]采用比色法測定雞骨草和毛雞骨草不同部位總皂苷的含量,得出雞骨草不同部位總皂苷的含量分別為:根為0. 817%,莖為0.599%,葉為0.939%;毛雞骨草不同部位總皂苷的含量分別為:根為0.995%,莖為0.507%,葉為0.882%，雞骨草莖、葉中總皂苷的含量比毛雞骨草中的高,但雞骨草根中總皂苷的含量比毛雞骨草中的低。

2 藥理活性研究

2.1 降血脂作用

中藥雞骨草含有總黃酮、甾體等多種活性成分，有一定的降血脂作用。陳曉白等[12]在復(fù)制模型同時，采用毛雞骨草提取液對高脂喂養(yǎng)的大鼠進(jìn)行預(yù)防性治療，結(jié)果顯示毛雞骨草能顯著降低血清和肝中TC、TG含量，提高血中HDL、Apo-A水平，尤以高、中劑量對大鼠血中TG和Apo-A的影響較為顯著。并發(fā)現(xiàn)[13]采用高脂肪乳劑灌胃法復(fù)制大鼠高血脂模型,毛雞骨草組連續(xù)給藥21天后,毛雞骨草組大鼠血清TC、TG的含量和全血粘度、全血還原粘度、卡松粘度和紅細(xì)胞聚集指數(shù)、紅細(xì)胞剛性指數(shù)、紅細(xì)胞電泳時間、紅細(xì)胞壓積均較模型組明顯降低,大鼠血清HDL含量則較模型組明顯升高，即毛雞骨草能降血脂并改變高血脂引起的血液流變學(xué)的變化,從而改善血液濃、粘、聚狀態(tài)。

2.2 抗氧化作用

2.3 保肝作用

由于雞骨草有降血脂和清除自由基的能力，對脂肪肝、病毒性肝病、肝損傷有著一定的治療作用。韋敏[18]以HepG2.2.15細(xì)胞模型，采用ELISA法檢測雞骨草在作用HepG2.2.15細(xì)胞72 h和144 h后上清液中HBsAg和HBeAg的含量,結(jié)果表明雞骨草在作用HepG2.2.15細(xì)胞72 h和144 h后，均可同時抑制HepG2.2.15細(xì)胞上清液中HBsAg和HBeAg的表達(dá)。江生周[19]發(fā)現(xiàn)雞骨草總黃酮100,80 mg· kg-1能明顯改善CCl4小鼠肝損傷程度,壞死范圍和程度明顯減輕,有少量的炎細(xì)胞浸潤，且能顯著降低CCl4損傷小鼠血清中ALT、AST活力和肝臟系數(shù),并能提高肝組織中SOD和GSH-Px活性,減少肝組織中MDA的生成。經(jīng)研究證明，脂肪肝是肝臟對各種代謝紊亂產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)引起的肝細(xì)胞脂肪性變，其誘因可能是肝臟脂質(zhì)代謝障礙，機(jī)體對胰島素的反應(yīng)性下降，對脂質(zhì)的抗氧化能力不足，免疫系統(tǒng)破壞及遺傳因素等。王昀[20]通過研究得出雞骨草總黃酮碳苷可以顯著減少小鼠肝臟脂肪空泡的數(shù)量和脂變的面積，降低TG和TC含量以及血清轉(zhuǎn)氨酶水平,在脂質(zhì)相關(guān)代謝基因的調(diào)控上，可以下調(diào)DL-E導(dǎo)致的固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1、脂肪酸合成酶和乙酰輔酶A羧化酶的高表達(dá)，并且雞骨草總黃酮碳苷可以逆轉(zhuǎn)DL-E對過氧化物酶體增殖物活化受體α和肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1α的抑制作用。雞骨草凝集素具有抑制HepG2 細(xì)胞生長和繁殖的能力，可能會起到人類肝癌細(xì)胞向正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化的作用[21]。

2.4 抗炎抗菌作用

程瑛琨[22]發(fā)現(xiàn)雞骨草提取液對大腸埃希菌和銅綠假單胞菌均有抑菌效果,對金黃色葡萄球菌和肺炎克雷伯氏菌則幾乎沒有抑菌效果,其中對銅綠假單胞菌抑菌效果最為明顯,如以1 g雞骨草提取1 mL提取液為標(biāo)準(zhǔn),則其提取液對銅綠假單胞菌的抗菌活性與0.1 mg/mL的鹽酸四環(huán)素溶液相當(dāng)。

2.5 活血化瘀作用

陳曉白[23]采用微循環(huán)顯微鏡及圖像分析系統(tǒng)觀察毛雞骨草對青蛙活體腸系膜微循環(huán)血管管徑、血流速度、血流流態(tài)、管袢數(shù)目、血管交叉數(shù)的影響。給予毛雞骨草后，青蛙腸系膜微循環(huán)的上述指標(biāo)呈正向變化，各數(shù)值均有所增加，即毛雞骨草可以改善微循環(huán)、具有一定的活血化瘀作用。

2.6 治療血型不合

馮惠娟等[24]將411例母兒血型不合孕婦隨機(jī)分為3組, A組148例,給予單味雞骨草治療; B組140例,給予雞骨草湯治療; C組123例,給予西藥治療,每2～4周復(fù)查血清免疫性抗體效價,治療率結(jié)果為:A組為92.6%, B組為91.4%, C組為52.9%，產(chǎn)后新生兒ABO溶血病發(fā)病率A組為0.8%,B組為7.1%, C組為22.8%; A組、B組與C組比較,均有顯著性差異(P<0.01)，說明大劑量雞骨草治療母兒ABO血型不合的療效與雞骨草湯相仿,比西藥治療血型不合具有優(yōu)點(diǎn)。

3 制劑研究

3.1 異夏佛塔苷對照品[25]

取毛雞骨草藥材醇提浸膏的正丁醇萃取部分用硅膠柱色譜分離,氯仿-甲醇(90∶10～70∶30)梯度洗脫,收集異夏佛塔苷富集流份,繼續(xù)采用低壓C18柱色譜及制備HPLC進(jìn)行分離純化,通過NMR、MS等波譜方法鑒定化合物結(jié)構(gòu),經(jīng)TLC、HPLC-UV及MS聯(lián)用等技術(shù)進(jìn)行質(zhì)量分?jǐn)?shù)檢測,得出從毛雞骨草中制備分離的異夏佛塔苷對照品,質(zhì)量分?jǐn)?shù)>99%。

3.2 復(fù)方膠囊

臨床上大多采用雞骨草作為膠囊治療疾病，如廣西玉林產(chǎn)的雞骨草膠囊，與茵陳、梔子、三七等多種中草藥配在一起，可用于治療急性肝病、膽囊炎，且成分安全，副作用相對較小，是肝病、膽囊炎一種較理想的治療藥物。

3.3 湯劑

民間多常用雞骨草與豬骨、雞肉、魚肉一同煲湯，能起到清熱解毒、下火消氣、促進(jìn)肝臟排毒的功效，兩廣地區(qū)也常用來制作涼茶及復(fù)合飲料，雞骨草與佩蘭泡茶喝，也能起到一定的護(hù)肝、利尿的功效。

3.4 丸劑

臨床上也常將雞骨草制作成丸劑，與其他湯劑聯(lián)合用藥，提高患者的生存質(zhì)量，丸劑制作簡單，使用方便。

4 問題與展望

由于日常的飲食習(xí)慣，特殊的人文因素及社會環(huán)境，我國是一個肝病流行較為嚴(yán)重的國家，尤其是乙肝。而雞骨草從古至今就是治療肝病的一味療效比較理想的中草藥，但其機(jī)制還不明確，可能是與雞骨草中存在的總黃酮有關(guān)。中草藥雖有較西藥毒副作用小，效果明確，可用于長時間治療觀察的優(yōu)點(diǎn)，但同時也存在著有效成分不明確因素存在。筆者認(rèn)為往后應(yīng)著力于研究雞骨草治療肝病的單一有效成分，并從中提取出來，這樣可以進(jìn)一步地減少藥品的不良反應(yīng)，使治療效果更直觀。

目前心腦血管疾病已成為現(xiàn)代人的隱形殺手，高熱量低纖維食品、缺乏運(yùn)動和飲酒文化通常會引起高血脂、高血壓、高血粘，從而繼發(fā)為急性或慢性的心血管、腦血管疾病，嚴(yán)重者可演變?yōu)樾哪X血管功能不全，危害人的身心健康。雞骨草中存在的黃酮類成分可以起到溶解血脂，清除血管，降低血粘等功效。臨床上多用強(qiáng)心苷、利尿劑一類的西藥治療心腦血管疾病，但中西醫(yī)結(jié)合用藥可能會有更好的治療效果，往后的方向應(yīng)研究雞骨草與西藥聯(lián)合使用的最佳配比。

很多中草藥都有總皂苷成分，且不同的植株總皂苷具有不同的生物活性，比如抗癌、降血糖、抗菌、鎮(zhèn)靜等作用。雞骨草中含有豐富的總皂苷成分，但僅停留在萃取的程度，對其可能存在的生物效應(yīng)沒有過多的研究，往后可以研究雞骨草總皂苷對實(shí)驗(yàn)動物是否具有生物活性，是否有臨床上的治療作用等。

國內(nèi)外研究多糖成分較為廣泛，其具有的生物活性成為臨床上治療疾病的新寵，例如銀耳多糖的降血糖能力，香菇多糖的防癌抗癌能力，黃芪多糖的提高免疫力能力等等。雞骨草中也含有豐富的多糖，目前的研究僅停留在抗氧化能力，日后應(yīng)深入挖掘其它活性。

雞骨草是一味傳統(tǒng)的中藥，隨著世界多元化的發(fā)展，中藥也漸漸走向國際，這對推進(jìn)對雞骨草的研究具有深刻的意義，應(yīng)加快雞骨草在保健、抗癌、提高免疫力領(lǐng)域上的研究。

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Recent Progress of Study onAbruscantoniensisHance

LinMengyao1，HuangSuoyi2，3*，LiLin1,TanBing1,2

(1.College of Clinical Medicine, Youjiang Medical University for Nationalities, Baise 533000,China;2.College of Pharmacy, Youjiang Medical University for Nationalities, Baise 533000,China;3. Guangxi Colleges and Universities Key Laboratory of the Characteristics of Ethnic Medicine of the Youjiang Valley，Baise 533000,China)

AbruscantoniensisHance is one of traditional Chinese medicines, which contains many ingredients and pharmacological activity. This paper summarized the medicinal research and main component of various parts ofAbruscantoniensisHance in the recent decade, and analyzed the prospect for the development ofAbruscantoniensisHance, to provide a reference for the development and utilization ofAbruscantoniensisHance.

AbruscantoniensisHance；traditional Chinese medicine；medicinal plant

10.3969/j.issn.1006-9690.2017.01.013

2016-03-03

廣西自然科學(xué)基金資助項目(2013GXNSFAA019240)；國家中醫(yī)藥管理局“十二五”中醫(yī)藥重點(diǎn)學(xué)科中藥化學(xué)建設(shè)項目(國中醫(yī)藥人教發(fā)[2012]32號)；廣西重點(diǎn)學(xué)科藥物化學(xué)建設(shè)項目(桂教科研[2013]16號)；廣西高校科技創(chuàng)新能力提升工程建設(shè)項目(桂教科研[2015]5號)。

林夢瑤(1995—)，女，在讀本科，研究方向?yàn)樘烊凰幬锘瘜W(xué)。E-mail: 471942003@qq.com

*通訊作者： 黃鎖義。E-mail: huangsuoyi@163.com

S567

A

1006-9690(2017)01- 0045-04