聯(lián)合檢測血清MMP-7及CA19-9對鑒別胰腺癌與慢性胰腺炎的意義①

王 婕，曲義坤，國麟麒，何其勇

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院普外二科，黑龍江 佳木斯 154003)

聯(lián)合檢測血清MMP-7及CA19-9對鑒別胰腺癌與慢性胰腺炎的意義①

王 婕，曲義坤，國麟麒，何其勇

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院普外二科，黑龍江 佳木斯 154003)

目的：探討血清基質(zhì)金屬蛋白酶-7(MMP-7)及糖類抗原19-9(CA19-9)聯(lián)合檢測對早期鑒別胰腺癌與慢性胰腺炎的意義。方法：選取胰腺癌患者27例，慢性胰腺炎患者34例,同期體檢正常者30例(對照組)作為研究對象。MMP-7測定采用ELISA法，CA19-9測定采用化學(xué)發(fā)光免疫法。結(jié)果：胰腺癌組血清MMP-7水平顯著高于慢性胰腺炎組及對照組(P均<0.05)。胰腺癌組、慢性胰腺炎組血清CA19-9水平顯著高于對照組(P均<0.05)，胰腺癌組和慢性胰腺炎組比較無顯著差異。血清MMP-7和CA19-9的ROC曲線下面積分別為0.796和0.668。兩者聯(lián)合診斷對胰腺癌的敏感性、特異性分別為85.3%和70.4%。結(jié)論：血清MMP-7測定可用于胰腺癌的診斷，聯(lián)合檢測CA19-9可提高胰腺癌的敏感性,同時有助于鑒別胰腺癌與慢性胰腺炎。

胰腺癌；慢性胰腺炎；基質(zhì)金屬蛋白酶-7；糖類抗原19-9

病理診斷是目前臨床上對于胰腺癌與慢性胰腺炎明確鑒別的金標(biāo)準(zhǔn)，但由于取材困難及有創(chuàng)性大，造成了其臨床利用的局限性。此外，慢性胰腺炎的臨床表現(xiàn)及病程變化的復(fù)雜性，大部分病人未能及時檢查，且病情好轉(zhuǎn)后血清淀粉酶及影像學(xué)檢查又缺乏特異性，致使部分胰腺炎患者被誤診為胰腺癌[1,2]。血清腫瘤標(biāo)志物的檢測是診斷惡性腫瘤的有效輔助檢查之一，而CA19-9被證明是胰腺癌最有效的腫瘤標(biāo)志物。但后來的眾多實(shí)驗(yàn)證明，許多良性疾病如急慢性胰腺炎、膽囊炎、膽道阻塞、肝炎、肝硬化等患者血清CA19-9水平也有不同程度的升高[3,4]。所以目前單獨(dú)檢測CA19-9已難以診斷與鑒別胰腺癌。該實(shí)驗(yàn)通過檢測血清MMP-7、CA19-9的水平，探討兩者聯(lián)合檢測對胰腺癌的意義，同時為與慢性胰腺炎鑒別提供新方法和新思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2014-03～2015-09經(jīng)我院明確診斷的胰腺癌組患者27例，慢性胰腺炎組患者34例,并選取同期體檢正常者30例作為對照組。排除可引起MMP-7升高的乳腺癌、胃癌、結(jié)腸癌等疾病。胰腺癌組的入選標(biāo)準(zhǔn):手術(shù)診斷。慢性胰腺炎組入選標(biāo)準(zhǔn):符合慢性胰腺炎診斷及治療指南的診斷標(biāo)準(zhǔn)(2012年，上海)。

1.2 方法

血清MMP-7和CA19-9的檢測方法:空腹下抽取各組患者靜脈血兩份，每份各2mL，室溫下靜置3～4h，放置離心機(jī)上，轉(zhuǎn)速3000r/min，離心10min后，取上清液后于零下80℃冰箱保存?zhèn)溆?。ELISA法檢測血清MMP-7水平。直接化學(xué)發(fā)光法(即CA19-9Kits)檢測血清CA19-9水平，判定陽性結(jié)果為大于37U/mL。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。相關(guān)分析采用Pearson線性相關(guān)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α= 0.05。

2 結(jié)果

2.1 各組血清MMP-7、CA19-9水平比較

胰腺癌組血清MMP-7水平顯著高于慢性胰腺炎組及對照組，慢性胰腺炎組高于對照組(P均<0.05)。胰腺癌組、慢性胰腺炎組血清CA-199水平顯著高于對照組(P均<0.05)，胰腺癌組和慢性胰腺炎組比較無顯著差異。見表1。

表1 各組血清MMP-7、CA19-9水平比較

注： 與對照組比較，*P<0.05;與慢性胰腺炎組比較，ΔP<0.05。

2.2MMP-7、CA19-9 及二者聯(lián)合檢測診斷胰腺癌的敏感度、特異度和準(zhǔn)確性

血清MMP-7和CA19-9的ROC曲線下面積分別為0.796±0.074，0.668±0.079，MMP-7、CA19-9單獨(dú)與聯(lián)合檢測指標(biāo)，見圖1、表2。

表2 MMP-7、CA19-9 及二者聯(lián)合檢測診斷 胰腺癌的敏感性特異性和準(zhǔn)確性(%)

圖1 血清MMP-7、CA19-9檢測的ROC曲線

2.3 相關(guān)分析

在胰腺癌組，MMP-7與CA19-9呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為r=0. 582 (P<0.05)。

3 討論

隨著我國工業(yè)化的飛速發(fā)展及環(huán)境的嚴(yán)重破壞，胰腺癌的發(fā)生率逐年增高，已成為臨床常見的消化系惡性腫瘤之一，此外無特異性的臨床表現(xiàn)及早期診斷率低，許多患者發(fā)現(xiàn)時已屬晚期，錯過最佳的手術(shù)治療時期，即使能夠手術(shù)，患者的預(yù)后也差。臨床上對于鑒別胰腺癌與慢性胰腺炎的常用方法有影像學(xué)、病理學(xué)及血清腫瘤標(biāo)志物檢查。而部分慢性胰腺炎的影像學(xué)表現(xiàn)很難與胰腺癌鑒別。病理學(xué)檢查是確診胰腺癌的最佳方法，包括活檢和細(xì)針穿刺，但其創(chuàng)傷大，并發(fā)癥多，患者往往難以接受。CA19-9屬于I型糖類抗原，在血清中以唾液黏蛋白形式存在，正常胎兒主要分布在胰腺、膽囊、肝、腸等組織中，成人則分布于胰、膽管上皮處，含量甚微。胰腺癌、膽囊癌、結(jié)腸癌等患者的血清CA19-9水平可明顯升高，且CA19-9的含量與胰腺癌的嚴(yán)重程度關(guān)系密切，對于患者預(yù)后分析也有一定的意義。隨后許多學(xué)者發(fā)現(xiàn)良性疾患血清CA19-9水平也可以增高，分析原因可能是正常人膽管和胰管分泌CA19-9，當(dāng)結(jié)石、炎性因素阻塞胰管及膽管時導(dǎo)致胰液、膽汁的排泄不暢及管壁的通透性增加，最終導(dǎo)致血中的CA19-9升高。同時，CA-199作為Lewisa血型抗原的糖鏈抗原，對于這一基因缺失表達(dá)的病人(約5%～10%)即便患胰腺癌，血清CA-199水平也無明顯增高。本實(shí)驗(yàn)研究提示，胰腺癌組與慢性胰腺炎組血清CA19-9水平比較差異無顯著性，符合相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道[5];CA19-9敏感性為77.8%、特異性為67.6%、準(zhǔn)確性為66.8%，故單獨(dú)用血清CA19-9 來確診胰腺癌的難度較大。

近年大量的實(shí)驗(yàn)研究共同闡明了腫瘤細(xì)胞發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移的機(jī)制，腫瘤的形成及侵襲是多因素、多步驟、多基因的動態(tài)過程，且是不可逆的，包括環(huán)境的刺激、基因的突變、原癌基因的激活、抑癌基因的失活、癌細(xì)胞脫落、侵出基底膜、沿著血管及淋巴結(jié)造成遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等。在以上過程中，細(xì)胞外基質(zhì)(extracellularmatrix，ECM)發(fā)生多次不同的降解。研究證明，基質(zhì)金屬蛋白酶(matrixmetalloprotelnases，MMPs)是一組能夠降解幾乎所有的ECM蛋白的限速酶，在生理及病理情況下都起到降解和再塑組織的關(guān)鍵作用，因此在腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移中被認(rèn)為是主要的蛋白水解酶。迄今MMPs家族已發(fā)現(xiàn)26個成員，根據(jù)作用底物及片段的同源性，又將他們分為6類。MMP-7作為重要的MMPs成員之一，歸屬于間質(zhì)降解素類，由腫瘤細(xì)胞分泌，而其余成員由腫瘤基質(zhì)細(xì)胞分泌，說明MMP-7和腫瘤的關(guān)系更為緊密，故MMP-7能夠成為腫瘤的生物標(biāo)記。目前已研究發(fā)現(xiàn)，MMP-7在結(jié)腸癌、胃癌、乳腺癌等中檢測到，并且參與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移等[6，7]。日本學(xué)者胡育新等[8]通過免疫組織化學(xué)染色法測定51例胰腺癌組織中MMP-7的表達(dá)，結(jié)果提示68. 6%(35/51)有MMP-7的陽性表達(dá)。福庫斯馬等[9]采用半定量的逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)檢測11個胰腺癌細(xì)胞系和70例胰腺癌組織中的MMP-7mRNA的表達(dá)水平，結(jié)果提示70例癌組織中MMP-7基因表達(dá)的水平被上調(diào)，表達(dá)率約為81.4%，且與腫瘤大小、惡性程度、是否有淋巴結(jié)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、臨床病理分期等有明顯相關(guān)性。但是聯(lián)合MMP-7用于胰腺疾病的研究鮮有報(bào)道，在此次研究中，胰腺癌組血清MMP-7水平明顯高于慢性胰腺炎組及正常對照組，其診斷的靈敏度為81.5%、特異度為88.2%、準(zhǔn)確率可達(dá)到79.6%，與研究結(jié)果相符，說明MMP-7可用于對胰腺癌的診斷。聯(lián)合CA19-9測定時，其敏感度可提高為85.3%，特異性為70.4%，說明聯(lián)合檢測可為早期鑒別胰腺癌及慢性胰腺炎提供新的診斷依據(jù)。與CA19-9相比，MMP-7的優(yōu)點(diǎn)在其表達(dá)時可以不受Lewis抗原反應(yīng)的影響，在較易出現(xiàn)CA19-9假陰性時，可聯(lián)合血清MMP-7測定進(jìn)行鑒別。

綜上所述，無論是體征還是輔助檢查，都很難成為胰腺癌與慢性胰腺炎的區(qū)分標(biāo)準(zhǔn)，MMP-7作為一種新的腫瘤標(biāo)志物，可用于胰腺癌的診斷，且與CA19-9聯(lián)合檢測時有助于胰腺癌、慢性胰腺炎兩者之間的鑒別。

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The significance of combined detections of MMP-7 and CA19-9 on differential diagnosis between chonic pancreatitis and pancreatic cancer

WANGJie,QUYi-kun,GUOLin-qi，HEQi-yong

(The Second General Surgery, the First Affiliated Hospital of Jiamusi University, Jiamusi 154003,China)

Objective: To investigate the vsignificance of combined detections of MMP-7 and CA19-9 in differential diagnosis between chonic pancreatitis and pancreatic cancer. Methods: 27patients with pancreatic cancer, 34 patients with chronic pancreatitis were chosen as research groups, and 30 healthy subjects were selected as the control group. The levels ofMMP-7 andCA19-9 were measured by using ELISA and chemistry luminescence technique. Results: The serum levels of CA19-9 in pancreatic cancer group and chonic pancreatitis group were statistically significantly higher than those in control group (P<0.05).Buttherearenosignificantlystatisticaldifferencesincomparisonbetweenpancreaticcancergroupandchonicpancreatitisgroup.TheserumlevelsofMMP-7inpancreaticcancergroupwerestatisticallyandsignificantlyhigherthanthoseinpancreatitisgroupandcontrolgroup(P<0.05).TheareasunderROCcurveofserumMMP-7andCA19-9were0.796and0.668,respectively.ThesensitivityandspecificityofjointdetectionofserumMMP-7andCA19-9were85.3%and70.4%，respectively. Conclusion: The joint detection of serum MMP-7 and CA19-9 can be used for differential diagnosis between chonic pancreatitis and pancreatic cancer, which can significantly increase the detection rate of pancreatic cancer.

pancreatic cancer; chonic pancreatitis; matrix metalloproteinase-7; glucoprotein antigen 19-9

王婕(1989～)女，山東棗莊人，在讀碩士研究生。

何其勇(1966～)男，黑龍江佳木斯人，主任醫(yī)師，碩士研究生導(dǎo)師。E-mail:hqy3377@126.com。

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1008-0104(2017)02-0087-03

2015-12-18)