正常和子癇前期孕婦氧化應(yīng)激指標(biāo)上限值的臨床研究

王 娟，李引弟，李 華，黃娟娟，張利平

(延安大學(xué)附屬醫(yī)院產(chǎn)科，陜西 延安 716000)

正常和子癇前期孕婦氧化應(yīng)激指標(biāo)上限值的臨床研究

王 娟，李引弟，李 華，黃娟娟，張利平

(延安大學(xué)附屬醫(yī)院產(chǎn)科，陜西 延安 716000)

目的 評(píng)估正常妊娠和妊娠期高血壓疾病(子癇前期)初產(chǎn)婦妊娠期間的氧化應(yīng)激。方法 選擇2012年3月至2013年7月在延安大學(xué)附屬醫(yī)院孕期檢查的105例患者分為三組，其中A組為非妊娠女性(n=35)，B組為正常血壓的初產(chǎn)婦(n=35)，C組為子癇前期初產(chǎn)婦(n=35)；對(duì)采取的血標(biāo)本分別測(cè)定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、總抗氧化能力(TAC)和尿酸(UA)水平。結(jié)果 正常妊娠孕婦MDA、SOD和UA水平與非妊娠女性相比顯著增加(P<0.05)；子癇前期孕婦MDA(q=15.691，P<0.001)、SOD(q=4.060，P=0.033)和UA(q=12.095，P=0.001)水平與正常妊娠孕婦相比很大程度增加；正常妊娠孕婦在TAC水平與非妊娠女性相比顯著降低(q=3.310，P=0.031)，子癇前期孕婦較正常妊娠孕婦有更低的TAC水平(q=6.983，P=0.010)；多因素分析顯示MDA、SOD、TAC和UA水平是影響子癇前期發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的顯著性因素(P<0.05)；MDA值為7.89μmol/L可以作為預(yù)測(cè)子癇前期癥狀發(fā)生的臨界值，其敏感性為76.74%，特異度為74.82%。結(jié)論 氧化應(yīng)激是子癇前期發(fā)病的高風(fēng)險(xiǎn)因素，應(yīng)盡可能的避免可導(dǎo)致氧化應(yīng)激增強(qiáng)的危險(xiǎn)因素。

氧化應(yīng)激，妊娠，初產(chǎn)婦，高血壓，子癇前期

子癇前期是指孕前血壓正常的孕婦在懷孕20周后出現(xiàn)高血壓和蛋白尿等癥狀[1]，也是導(dǎo)致產(chǎn)婦、新生兒和胎兒的高死亡率和高發(fā)病率的重要因素[2-3]。孕婦在妊娠期間隨著對(duì)氧需求量的增加，生成活性氧簇(reactive oxygen species，ROS)產(chǎn)物量也隨之增加，即使正常妊娠的孕婦與非妊娠女性相比也具有較高水平的氧化應(yīng)激和脂質(zhì)過氧化反應(yīng)水平[4]。子癇前期孕婦其因氧化應(yīng)激增加導(dǎo)致脂質(zhì)過氧化、ROS和超氧陰離子自由基產(chǎn)物的增加，進(jìn)而引發(fā)內(nèi)皮細(xì)胞受損和功能紊亂(如血小板和中性粒細(xì)胞的激活)[5-6]。本研究通過測(cè)定正常妊娠孕婦和子癇前期孕婦的丙二醛(malondialdehyde，MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、總抗氧化能力(total anti-oxidant capacity，TAC)和尿酸(uric acid，UA)水平,以評(píng)估上述指標(biāo)對(duì)子癇前期影響，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選擇2012年3月至2013年7月在延安大學(xué)附屬醫(yī)院進(jìn)行體檢和妊娠期檢查的女性，納入標(biāo)準(zhǔn)：①單胎初產(chǎn)妊娠；②孕前BMI≤24kg/m2；③孕周的計(jì)算結(jié)合末次月經(jīng)時(shí)間、早孕反應(yīng)時(shí)間和胎動(dòng)出現(xiàn)時(shí)間及超聲診斷等方式確診；④無(wú)畸形胎兒；⑤孕婦無(wú)慢性高血壓貧血及其他心血管疾病史，孕期產(chǎn)前檢查肝腎功能均正常；⑥子癇前期確診前均無(wú)服用高血壓藥及心血管藥物史；⑦臨床資料完整。排除多胎妊娠，近期有急性感染及合并妊娠合并腎臟疾病，妊娠糖尿病，胎兒畸形者。子癇前期的診斷標(biāo)準(zhǔn)參照全國(guó)統(tǒng)編教材《婦產(chǎn)科學(xué)》[7]，結(jié)合上述納入和排除標(biāo)準(zhǔn)納入正常血壓的初產(chǎn)婦35例(B組)和子癇前期的初產(chǎn)婦35例(C組)，同時(shí)納入35例體檢健康的非妊娠期女性最為對(duì)照組(A組)。所有研究對(duì)象均簽署知情同意書，本研究經(jīng)過醫(yī)院倫理道德委員會(huì)審核通過。

1.2氧化應(yīng)激檢測(cè)

肘前靜脈采血6mL，將血標(biāo)本收集在肝素化抗凝管中；血樣置于離心機(jī)中，3 000rpm離心10min，收集血清進(jìn)行下一步的生化分析。

血清中MDA (南京建成生物工程研究所)的測(cè)定采用硫代巴比妥酸反應(yīng)物(thiobarbituric acid-reactive substances，TBARS)的方法；SOD(南京建成生物工程研究)的測(cè)定按照試劑盒說(shuō)明書采用黃嘌呤氧化酶法。TAC(碧云天生物技術(shù)研究所)的測(cè)定按照試劑盒說(shuō)明書采用亞鐵還原能力(fluoride-resistant acid phosphatase，F(xiàn)RAP)法進(jìn)行測(cè)定，UA(寧波亞太生物技術(shù)有限責(zé)任公司)的測(cè)定按照試劑盒說(shuō)明書采用Uricase-PAP法。通過 INFINITE M 200 酶標(biāo)儀檢測(cè)。每份血清標(biāo)本均檢測(cè)3次，取平均值。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2結(jié)果

2.1三組初產(chǎn)婦的基本信息比較

三組初產(chǎn)婦基本信息比較無(wú)顯著性差異(均P>0.05)，見表1。

2.2 三組初產(chǎn)婦MDA、SOD、TAC和UA水平比較

正常血壓初產(chǎn)婦的MDA(q=5.773，P=0.013)、SOD(q=8.982，P=0.009)和UA(q=3.845，P=0.024)水平顯著性高于非妊娠女性，而TAC水平顯著低于非妊娠女性(q=3.310，P=0.031)；子癇前期初產(chǎn)婦的MDA(q=15.691，P<0.001)、SOD (q=4.060，P=0.033)和UA(q=12.095，P=0.001)水平顯著性高于正常血壓初產(chǎn)婦(P<0.010)，而TAC水平顯著低于正常血壓初產(chǎn)婦(q=6.983，P=0.010)，見表2。

組別A組(n=35)B組(n=35)C組(n=35)F/χ2/tP年齡(歲)24．53±1．2424．31±1．6526．44±2．131．5870．768BMI(kg/m2)23．43±0．7225．41±0．6226．15±0．942．3340．404吸煙2(5．71)3(8．57)2(5．71)1．1450．901本科及以上29(82．86)30(85．71)30(85．71)1．0340．913流產(chǎn)次數(shù)0．50±0．400．50±0．500．60±0．401．3160．864懷孕時(shí)間-20．43±3．4521．12±2．841．8540．582

2.3子癇前期發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的多因素分析

多因素回歸分析顯示，MDA、SOD、TAC和UA是影響子癇前期發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)顯著性因素(P<0.05)；而BMI、懷孕時(shí)間、吸煙史和流產(chǎn)次數(shù)并不是子癇前期的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的顯著性影響因素(P>0.05)，詳見表3。

項(xiàng)目A組(n=35)B組(n=35)C組(n=35)MDAnmol/mL4．13±0．515．32±0．53?7．98±0．66△□SODIU/L312．7±78．6714．6±131．2?918．7±149．8△□TACIU/mL16．74±2．1210．55±3．03?5．02±0．97△□UAmg/dL3．32±0．475．64±0．72?8．33±1．12△□

注：*A組vs B組P<0.05；△A組vs C組P<0.05；□B組vs C組P<0.05。

表3 多因素分析子癇前期風(fēng)險(xiǎn)的影響變量

2.4 MDA預(yù)測(cè)子癇前期的臨界值

采用ROC曲線分析MDA在預(yù)測(cè)子癇前期發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的臨界值，其ROC曲線下面積為0.764(95%CI：0.504～0.923)，MDA值為7.89 μmol/L可以作為預(yù)測(cè)子癇前期發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的臨界值，其敏感性為76.74%，特異度為74.82%，見圖1。

圖1 MDA對(duì)子癇前期預(yù)測(cè)的ROC曲線分析

Fig.1 ROC curve analysis of MDA for prediction of preeclampsia

3 討論

3.1 氧化應(yīng)激指標(biāo)MDA水平對(duì)子癇前期的預(yù)測(cè)作用

MDA是脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的產(chǎn)物，氧化劑通過破壞多不飽和脂肪酸的雙鍵而形成過氧化反應(yīng)產(chǎn)物MDA，因此MDA水平可以作為氧化應(yīng)激的間接指標(biāo)[8-9]。先前的研究表明妊娠女性與非妊娠女性相比其MDA水平顯著性增加[10]，子癇前期孕婦血清中MDA的濃度也顯著性的高于非妊娠女性[11]，上述的研究結(jié)果也與我們的研究結(jié)果相一致；子癇前期孕婦與正常孕婦相比其血漿和胎盤中有更高的MDA水平，MDA水平也隨著子癇前期的嚴(yán)重程度增加而增加[8]。因此，MDA可以作為一個(gè)重要的氧化應(yīng)激指標(biāo)以預(yù)測(cè)子癇前期發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，本研究結(jié)果表明MDA值為7.89 μmol/L可以作為預(yù)測(cè)子癇前期癥狀發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的臨界值，其敏感性為76.74%，特異度為74.82%。

3.2其它指標(biāo)(SOD、TAC和UA)對(duì)子癇前期的影響

本研究還發(fā)現(xiàn)妊娠期間SOD的活性顯著性增加，早期的研究發(fā)現(xiàn)妊娠晚期SOD水平明顯高于非妊娠女性[9]，SOD活性水平也與子癇前期癥狀的程度有關(guān)[12]。這也與本研究結(jié)果相類似。本研究同時(shí)并未對(duì)不同妊娠時(shí)期和不同子癇前期程度的初產(chǎn)婦的氧化應(yīng)激進(jìn)行分層分析，但是根據(jù)之前的研究結(jié)果提示隨著妊娠期時(shí)間的變化和子癇前期程度的增加MDA水平和SOD水平顯著性增加的[10-11]。

妊娠期間TAC的減少可以作為增加氧化劑的消耗或者降低氧化劑的生成重要指標(biāo)。正常妊娠期孕婦與子癇前期孕婦相比TAC水平呈現(xiàn)急劇性的下降。相關(guān)的研究也顯示懷孕30周的孕婦TAC水平明顯的低于非妊娠女性[10]，TAC水平的顯著性降低可以作為非酶類抗氧化劑(維生素E、A和C)水平降低的指標(biāo)。本研究結(jié)果也顯示，子癇前期孕婦的TAC水平明顯的低于正常妊娠女性和非妊娠女性，同時(shí)TAC水平降低會(huì)增加孕婦子癇前期的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。子癇前期孕婦和正常血壓孕婦相比，其血清中總的抗氧化活性和谷胱甘肽水平的均降低，這也與本研究中TAC水平的變化相類似。本研究雖未對(duì)子癇前期患者后期的妊娠結(jié)局和新生兒的結(jié)局進(jìn)行分析，但根據(jù)Namdev等[8]研究結(jié)果表明氧化應(yīng)激和總抗氧化能力可以作為預(yù)測(cè)子癇前期孕婦新生兒臨床結(jié)局的重要預(yù)測(cè)因素。

根據(jù)血漿中UA水平評(píng)估的結(jié)果顯示妊娠期間UA水平呈現(xiàn)增加的趨勢(shì)，并且尤其在子癇前期的妊娠期女性增加的更為明顯。子癇前期UA的增加可引起胎盤的局部缺血或者損傷，隨之增加ROS產(chǎn)物進(jìn)而導(dǎo)致過度的核苷酸代謝，進(jìn)而影響妊娠結(jié)局和圍產(chǎn)兒預(yù)后[13-14]。

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[專業(yè)責(zé)任編輯：于學(xué)文]

Clinical study on levels of upper limit of oxidative stress markers between preeclampsia and normal pregnant women

WANG Juan, LI Yin-di, LI Hua, HUANG Juan-juan, ZHANG Li-ping

(DepartmentofObstetrics,HospitalofYan’anUniversity,ShaanxiYan’an716000,China)

Objective To assess the oxidative stress during uncomplicated pregnancy and pregnancy associated with hypertension in primipara. Methods A total of 105 women were enrolled and divided into 3 groups, group A of healthy non-pregnant women (n=35), group B of primipara with normal blood pressure (n=35) and group C of preeclamptic primipara (n=35). Blood samples were analyzed for levels of malondialdehyde (MDA), superoxide dismutase (SOD), total anti-oxidant capacity (TAC) and uric acid (UA) using appropriate biochemical methods. Results The levels of MDA, SOD and UA increased significantly in pregnant women compared to non-pregnant women (P<0.05) and to a greater extent in preeclampsia women compared to normal pregnant women(qMDA=15.691,P<0.001), (qSOD=4.060,P=0.033) and(qUA=12.095,P=0.001). TAC levels were significantly decreased in pregnant women when compared to non-pregnant women (q=3.310,P=0.031), and it was lower in preeclampsia women than in normal pregnant women (q=6.983,P=0.010). Multiple-factors analysis showed that MDA, SOD, TAC and UA were the significant risk factors of preeclampsia (P<0.05). An MDA value of 7.89μmol/L could be used as a cut-off value to predict preeclampsia symptoms, and the sensitivity was 76.74% and specificity was 74.82%. Conclusion Oxidative stress is the high-risk factor of pathogenesis of preeclampsia. Risk factors which may cause oxidative stress should be avoided.

oxidative stress; pregnancy; primipara; hypertension; preeclampsia

2016-11-04

王 娟(1983-),女，主治醫(yī)師，主要從事婦產(chǎn)科疑難病癥診斷和治療工作。

張利平，副主任醫(yī)師

10.3969/j.issn.1673-5293.2017.04.016

R714.24

A

1673-5293(2017)04-0411-03