高血壓腎病患者轉(zhuǎn)化生長因子β1的表達(dá)及臨床意義

原守平

[摘要] 目的 該研究旨在探討TGF-β1水平對原發(fā)性高血壓腎病的早期診斷價值。方法 方便選取2010年6月—2016年6月在該院接受治療的確診為高血壓腎病的成年患者82例作為實(shí)驗(yàn)組，選擇同期入院的65名健康者作為對照組，比較分析兩組患者的血清TGF-β1的水平、尿mAlb含量及eGFR，并分析其相關(guān)性。結(jié)果 高血壓腎病組血漿TGF-β1（46.6±12.8）ug/L、尿微量白蛋白（mAlb）（18.0±4.2） mg/L水平顯著高于正常對照組，而腎小球?yàn)V過率估計值（eGFR）（50.7±12.5）mL/（min·1.73 m2）顯著低于對照組。高血壓腎病組TGF-β1、mAlb與eGFR相比較均具有極為顯著的負(fù)相關(guān)（r2=0.9779）；而對照組TGF-β1、mAlb與eGFR之間無顯著的關(guān)聯(lián)性（r2=0.6762）。結(jié)論 高血壓腎病的病理改變伴隨著一個復(fù)雜的包含血管損傷與修復(fù)的病理性血管重塑過程。高血壓腎病的發(fā)病機(jī)制可能與TGF-β1/Smad 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)功能的增強(qiáng)有關(guān)。

[關(guān)鍵詞] 高血壓腎??；生長因子；腎小球?yàn)V過率

[中圖分類號] R697 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-0742（2016）12（b）-0014-03

Clinical Significance of TGF-β1 Expressions in Hypertensive Nephropathy

YUAN Shou-ping

Department of Renal Medicine， Putian First Hospital， Fujian Province， Putian， Fujian Province， 351100 China

[Abstract] Objective The aim of the present study is to explore the potential values for the early diagnosis of primary hypertensive nephropathy. Methods Convenient selection adult patients with hypertensive nephropathy who were treated in our hospital from June 2010 to June 2016 were diagnosed as experimental group. The experimental group consisted of 82 consecutive adult hypertensive nephropathy patients. Sixty five healthy controls were enrolled in this study. The levels of serum TGF-β1， urinary mAlb and eGFR in the two groups were compared and analyzed， and the correlations were analyzed between the two groups. Results The plasma TGF-β1（46.6±12.8）μg/L and microalbuminuria （mAlb） （18.0±4.2）mg/L in the urine were significantly higher and the estimated glomerular filtration rate （eGFR） （50.7±12.5）mL/（min·1.73 m2）was significantly lower in the Hypertensive Nephropathy Group than in the Control. In the Hypertensive Nephropathy Group， TGF-β1 and mAlb showed a significant correlation with eGFR（r2=0.9779）； whereas no siginificant correlations were noted between them in the control group（r2=0.6762）. Conclusion The pathogenesis involved in the process of hypertensive nephropathy might be associated with a complex pathologically vascular remodeling that is comprised of vascular injury and repair. The mechanisms of hypertensive nephropathy might be related to an enhanced function of TGF-β1/Smad signaling pathway

[Key words] Hypertensive nephropathy；Glomerular filtration rate；Growth factors.

轉(zhuǎn)化生長因子（TGF）-β1是一種同源二聚體多肽，其生物學(xué)作用相當(dāng)廣泛，對細(xì)胞的分化、增殖具有調(diào)節(jié)作用，參與血管再生及重構(gòu)等生物過程。研究表明，TGF-β1作為一種生長因子存在，高血壓和其靶器官損害與該基因變異密切相關(guān)[1]。腎小球間質(zhì)纖維化、硬化以及不敏感激素反應(yīng)可能是由于TGF-β1增多引起，任其發(fā)展會導(dǎo)致終末期腎病[2]。除此還發(fā)現(xiàn)高血壓患者血壓與該患者血漿里TGF-β1含量呈正比[3]。研究表明，TGF-β1與高血壓腎病的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后密切相關(guān)[4]。但其病因至今尚未完全闡明。為探討TGF-β1水平對原發(fā)性高血壓腎病的早期診斷價值，方便選取2010年6月—2016年6月在該院接受治療的82例高血壓腎病的成年患者的血漿TGF-β1水平進(jìn)行了檢測，并與常規(guī)應(yīng)用于評估的指標(biāo)進(jìn)行對照，現(xiàn)報道如下。endprint

1 資料與方法

1.1 一般資料

實(shí)驗(yàn)組為方便選取該院收入連續(xù)該院接受治療的確診為高血壓腎病的成年患者82例。男46例，女36例，平均年齡（57.6±12.0）歲腎功能均有異常，有持續(xù)性或間歇性蛋白尿。高血壓病史均在5～10年以上。標(biāo)準(zhǔn)高血壓診斷依據(jù)為收縮壓>21.28 kPa及（或）舒張壓≥12.64 kPa，該診斷依據(jù)與WHO標(biāo)準(zhǔn)相符合。腎臟損害程度的分期根據(jù)美國國家腎臟基金會頒布的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行?；颊叩母哐獕耗I病分期為2期69例，3期13例。所有病人均接受降壓、擴(kuò)血管、抗炎、抗凝、改善微循環(huán)等綜合性治療。選擇同期入院的65名健康者作為對照組，其中男42例，女23例，年齡為45～62歲，平均年齡為（55.4±1.8）歲。在兩組數(shù)據(jù)中患者病情、年齡等數(shù)據(jù)資料，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 觀測指標(biāo)

指標(biāo)檢測包括尿微量白蛋白（mAlb）、血漿TGF-β1和腎小球?yàn)V過率估計值（eGFR）。對所有研究對象的早晨第2次清潔中段尿液進(jìn)行收集，收集量為5 mL，經(jīng)過離心沉淀10 min，轉(zhuǎn)速為300 r/min，完成后對上層清液進(jìn)行取樣。運(yùn)用干化學(xué)尿液分析儀及配套試紙對尿蛋白含量進(jìn)行測定；使用試劑通過乳膠增強(qiáng)免疫比濁法進(jìn)行mAlb檢測。在研究對象清晨空腹條件下取靜脈血5 mL。靜脈血取樣工作與血清分離后，在-20℃溫度條件下冷藏保存。使用試劑盒運(yùn)用ELISA法完成血清TGF-β1檢測工作。eGFR是根據(jù)我國eGFR協(xié)作組頒布的簡易計算公式可以得出：eGFR = 175×（肌酐mg/dL）-1.234×年齡-0.179×性別（男性=1，女性=0.79）

1.3 統(tǒng)計方法

該文應(yīng)用SPPS 22.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行了近似服從正態(tài)分布的定量分析，結(jié)果用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）進(jìn)行表達(dá)，采用t檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較。統(tǒng)計結(jié)果P<0.05（或P<0.01）時，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。對因變量與自變量之間的關(guān)聯(lián)作一元線性回歸分析。當(dāng)| r |≥0.8時，視為高度相關(guān)；當(dāng)0.5≤| r |<0.8時，視為中度相關(guān)；當(dāng)0.3≤| r |<0.5時，視為低度相關(guān)；當(dāng)| r |<0.3時，視為不相關(guān)。

2 結(jié)果

與正常對照組進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，高血壓腎病組mAlb、TGF-β1值明顯偏高，但與對照組相比eGFR水平明顯偏低，具體情況見表1。高血壓腎病組TGF-β1、mAlb與eGFR相比較均具有極為顯著的負(fù)相關(guān)（圖1）；而對照組TGF-β1、mAlb與eGFR無顯著關(guān)聯(lián)（TGF-β1：Y = -1.3145X+141.42， r = 0.2766；mAlb：Y=0.0598X + 114.4， r = 0.071）。

3 討論

通常機(jī)體所分泌的TGF-β處于非活化狀態(tài)，需要酸性環(huán)境處理或纖維蛋白溶酶、尿激酶、MMPs、血小板反應(yīng)素等蛋白酶的裂解作用才轉(zhuǎn)變?yōu)榛罨癄顟B(tài)的TGF-β。被激活的TGF-β與細(xì)胞表面的受體結(jié)合，啟動細(xì)胞內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。TGF-β主要通過膜表面的TβRI和TβRII發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。Smad蛋白分子量為42～60 kDa，在氨基和羧基末端有2個同源結(jié)構(gòu)域MH1和MH2，以利于與富脯氨酸蛋白的連接序列結(jié)合[5]。TβRI和TβRII為糖蛋白，分子量分別為55 kDa 和70 kDa，其核心多肽包含500～570個氨基酸。其中，TβRI 過去稱作ALK5，而活化素型TβRI（ActR-IB）則被稱作ALK4。Smad4又稱DPC4（在胰腺癌基因位點(diǎn)4被刪除，deleted in pancreatic carcinoma locus 4）。它是一種候補(bǔ)腫瘤抑制基因，位于染色體18q21，常在胰腺癌發(fā)生突變或缺失[3]。TGF-β可啟動血管重塑效應(yīng)，影響動脈硬化發(fā)展。它需要兩種細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄介質(zhì)Smad2和Smad3的參與。Smad2和Smad3的磷酸化形式與Smad4構(gòu)成異聚復(fù)合體，然后轉(zhuǎn)入核內(nèi)，參與調(diào)控基因表達(dá)。TGF-β/Smad信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)能夠刺激鏈蛋白聚糖的表達(dá)而促進(jìn)脂質(zhì)聚集。TGF-β/Smad信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)也可提升細(xì)胞周期蛋白依賴型激酶抑制劑的活性以及p15Ink4B和p21Waf1/Cip1的活性，藉此影響細(xì)胞增殖反應(yīng)和細(xì)胞對凋亡的敏感性[4]。

TGF-β1已牽涉幾種的控制不良的高血壓，包括：左心室肥大，高血壓性血管重塑的長期的慢性后遺癥，和終末期腎病。血管緊張素II是TGF-β1產(chǎn)生的已知刺激物；因此，TGF-β1可以是血管緊張肽Ⅱ誘導(dǎo)的高血壓損傷的重要介質(zhì)。雖然大部分TGF-β1的生物作用在自分泌或旁分泌介導(dǎo)，由TGF-β1轉(zhuǎn)基因小鼠已經(jīng)證明闕高循環(huán)水平可以介導(dǎo)腎臟纖維化和功能逐步喪失[5]。

對成年人正常的eGFR >90 mL/（min·1.73 m2），據(jù)美國國家腎臟基金會（因?yàn)橛嬎阕钸m合估計腎功能降低，當(dāng)前的數(shù)字僅1次報告的值都小于60 mL/（min·1.73 m2），低于60 mL/（min·1.73 m2）的eGFR：建議出現(xiàn)一些腎臟損害，測試可以被重復(fù)，以查看是否異常結(jié)果仍然存在。慢性腎臟疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)是腎臟損傷或eGFR小于60 mL/（min·1.73 m2），持續(xù)時間≥3個月[6]。腎小管處于早期損害時會表現(xiàn)出腎小管上皮細(xì)胞壞死、凋亡、剝落等情況；缺血情況下腎小管上皮細(xì)胞脫落，使得永久性腎單位功能喪失；腎小管萎縮、間質(zhì)纖維化主要由殘余腎單位腎小管代謝亢進(jìn)引發(fā)。對于原發(fā)性高血壓患者來說早期診斷尤為重要，因?yàn)槠淠I損害加重處于進(jìn)行性狀態(tài)[7]。當(dāng)機(jī)體處于健康狀態(tài)，腎小球?yàn)V過膜不允許mAlb透過，因此mAlb在尿液里含量少。對mAlb含量進(jìn)行把控，能完成早期腎損害預(yù)測，mAlb也能夠?qū)ρ軆?nèi)皮的相關(guān)狀況進(jìn)行反映[8]。mAlb具備較為簡便的檢測方法，只需要對尿液進(jìn)行24 h留取，倘若存在30～300 mg/24 h尿蛋白量就可以確診[9]。結(jié)果表明，與正常對照組相比高血壓腎病組血漿TGF-β1[（46.6±12.8）μg/L]、mAlb值[（18.0±4.2）mg/L]明顯較高，而eGFR（50.7±12.5）mL/（min·1.73 m2）顯著低于對照組。TGF-β1、mAlb與eGFR相比較均具有極為顯著的關(guān)聯(lián)性（r2=0.9779）。腎功能損害可以把TGF-β1和mAlb看作其敏感指標(biāo)，通過這兩種指標(biāo)體內(nèi)變化可以對腎功能損傷進(jìn)行有效反映。endprint

學(xué)者秦建華[2]的研究發(fā)現(xiàn)，糖尿病腎病伴高血壓患者中RAAS和血清TGF-β1，隨著分期增加，TGF-β1、RAAS水平顯著增加，二者之間的相互作用，會增加糖尿病腎病伴高血壓患者腎功能損害。學(xué)者孫志敏等[6]血清TGF-β1、LOX-1水平與高血壓患者血壓呈正相關(guān)，TGF-β1和LOX-1是高血壓的危險因素；因此，控制血清TGF-β1和LOX-1水平可能有利于降低患者血壓水平。學(xué)者梅艷等[10]的研究表明，老年高血壓腎病患者外周血TGF-β1水平顯著升高，且與腎功能受損程度呈正相關(guān)，具有一定輔助診斷價值。進(jìn)行血清mAlb以及TGF-β1的檢測對高血壓腎病患者而言有必要進(jìn)行，對腎功能損害做到早發(fā)現(xiàn)、早治療，從根本上減少重度腎病發(fā)生概率及其死亡率，保證患者身體狀態(tài)相對健康。

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（收稿日期：2016-09-15）endprint