1—MCP延緩采后臺(tái)灣青棗果實(shí)衰老及其與能量代謝的關(guān)系

陳蓮 王璐璐 林河通 林藝芬 陳藝暉

摘 要 研究1-甲基環(huán)丙烯（1-MCP）處理對采后‘中青臺(tái)灣青棗果實(shí)貯藏品質(zhì)與煙酰胺腺嘌呤二核苷酸激酶（NADK）活性、煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）、煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP）、還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）、還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）、能量物質(zhì)[三磷酸腺苷（ATP）、二磷酸腺苷（ADP）、一磷酸腺苷（AMP）]及能荷（EC）的關(guān)系。采后臺(tái)灣青棗果實(shí)用1.8 μL/L的1-MCP處理12 h后在（15±1）℃下貯藏，定期測定能量物質(zhì)、NAD、NADP、NADH和NADPH含量、NADK活性及細(xì)胞膜透性，并在貯藏前后測定果實(shí)品質(zhì)指標(biāo)和腐爛率。結(jié)果表明：1-MCP處理保持‘中青臺(tái)灣青棗果實(shí)較高的ATP、NADP、NADPH含量，NADK活性和能荷值，較低的NAD和NADH含量，延緩貯藏期間細(xì)胞膜透性的增加；保持較高的果實(shí)硬度、可溶性固形物（TSS）、有機(jī)酸（TA）和維生素C含量，延緩果皮葉綠素含量下降，降低腐爛率。據(jù)此認(rèn)為，1-MCP處理延緩采后臺(tái)灣青棗果實(shí)衰老降低腐爛率可能與細(xì)胞保持較高的能荷水平有關(guān)。

關(guān)鍵詞 臺(tái)灣青棗；果實(shí)；1-甲基環(huán)丙烯（1-MCP）；品質(zhì)；能量代謝

中圖分類號(hào) TS255.3；S667.9 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A

Delaying Senescence of Harvested Ziziphus mauritiana Lamk Fruit

by Postharvest 1-Methylcyclopropene（1-MCP）Treatment

and Its Relation to Energy Metabolism

CHEN Lian1， WANG Lulu2，3， LIN Hetong2，3 *， LIN Yifen2，3， CHEN Yihui2，3

1 Department of Food and Bioengineering， Zhangzhou Institute of Technology， Zhangzhou， Fujian 363000， China

2 College of Food Science， Fujian Agriculture and Forestry University， Fuzhou， Fujian 350002， China

3 Institute of Postharvest Technology of Agricultural Products， Fujian Agriculture and Forestry University， Fuzhou， Fujian 350002， China

Abstract The effects of 1-methylcyclopropene（1-MCP）treatment on the storage quality of the harvested Ziziphus mauritiana Lamk. cv. Zhongqing fruit were investigated， with regard to its relationship with the activity of nicotinamide adenine dinucleotide kinase（NADK）activity， contents of nicotinamide adenine dinucleotide（NAD）， nicotinamide adenine diuncleotide hydrogen（NADH）， nicotinamide adenine dinucleotide phosphate（NADP）and nicotinamide adenine diuncleotide phosphate hydrogen（NADPH）， contents of adenosine triphosphate（ATP）， adenosine diphosphate（ADP）and adenosine monophosphate（AMP）， and energy charge（EC）. The harvested fruits were treated with 1.8 μL/L 1-MCP for 12 h then stored at（15±1）℃. The cellular membrane permeability， contents of ATP， ADP and AMP， NADK activity and contents of NAD， NADH， NADP， NADPH were determined regularly during the storage， while fruit quality was evaluated on the first and the last day of storage. The results showed that 1-MCP treatment could maintain higher activity of NADK， lower the content of NAD and NADH， increase the content of NADP and NADPH， delay the decrease of ATP content and energy charge， and retard the increase of cellular membrane permeability during storage； In addition， it could also keep higher firmness， contents of vitamin C， total soluble solids（TSS）and titratable acid（TA）in fruits， retard the decrease of chlorophyll content in pericarp and decrease fruit decay. Therefore， it could be concluded that 1-MCP treatment could maintaine the quality and delay the senescence of harvested Ziziphus mauritiana fruit due to higher retained cellular energy charge.

Key words Ziziphus mauritiana Lamk.； fruit； 1-methylcyclopropene（1-MCP）； quality； energy metabolism

doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2017.01.031

臺(tái)灣青棗（Ziziphus mauritiana Lamk.）屬鼠李科（Rhamnaceae）棗屬（zizyphus Mill.）又稱為印度棗、毛葉棗、滇刺棗等，原產(chǎn)印度和中國云南。臺(tái)灣青棗果實(shí)口感脆甜、清香爽口，具有較高的抗氧化活性，且在春節(jié)前成熟上市，深受消費(fèi)者歡迎[1-2]。臺(tái)灣青棗果實(shí)采后易衰老，果皮顏色由青綠色轉(zhuǎn)為黃綠色乃至黃色，部分或全部變成紅色或黑色，果肉硬度下降，口感由脆變軟，食用品質(zhì)快速下降。如何延緩臺(tái)灣青棗果實(shí)采后衰老引起的品質(zhì)劣變進(jìn)程，延長果實(shí)貨架期成為中國臺(tái)灣青棗產(chǎn)業(yè)進(jìn)一步發(fā)展急需解決的問題[3]。

近年研究表明，果實(shí)采后因?yàn)榧?xì)胞內(nèi)能量生成速率降低或可用的能量供應(yīng)不足加速采后果實(shí)衰老和褐變[4-6]。細(xì)胞能量生成速率和水平在果實(shí)采后成熟衰老期間發(fā)生明顯變化，油木奈[4]、龍眼[7]、梨[8]、荔枝[9]等果實(shí)采后貯藏期間ATP濃度或能荷值均下降。劉亭等[10]研究表明，能量水平不僅與呼吸強(qiáng)度、呼吸途徑密切相關(guān)而且還參與果實(shí)采后衰老和品質(zhì)變化的調(diào)控。細(xì)胞內(nèi)因能量供給不足及能量生成速率下降導(dǎo)致呼吸途徑發(fā)生變化從而改變呼吸強(qiáng)度和能量代謝水平。陳夢茵等[11]研究發(fā)現(xiàn)，龍眼果實(shí)細(xì)胞能量供給不足導(dǎo)致植物細(xì)胞中吡啶核苷酸（NAD、NADH、NADP和NADPH）含量發(fā)生變化，認(rèn)為吡啶核苷酸作為呼吸鏈的成員參與呼吸代謝能量產(chǎn)生過程，其含量的變化導(dǎo)致呼吸途徑發(fā)生變化。顧采琴等[7，12]對草莓、番茄等果實(shí)衰老過程中吡啶核苷酸含量變化研究也表明其在采后呼吸代謝和能量代謝水平變化起重要作用。呼吸鏈?zhǔn)侵参锛?xì)胞主要的活性氧產(chǎn)生場所，細(xì)胞因能量供給不足導(dǎo)致呼吸途徑的改變或呼吸鏈?zhǔn)軗p引起活性氧（O2·- 和H2O2）大量生成，活性氧攻擊膜系統(tǒng)導(dǎo)致膜透性不斷上升，細(xì)胞區(qū)室化被破壞最終導(dǎo)致果實(shí)褐變腐爛[5，13-15]。果實(shí)采后的ATP含量和能荷值與衰老程度呈負(fù)相關(guān)[13，15-16]。另一方面，荔枝[9]、龍眼[6]果實(shí)采后外源ATP處理能提高果皮組織的ATP含量和能荷水平，維持細(xì)胞膜的完整性，延緩衰老，延長貨架期?？梢?，果實(shí)細(xì)胞組織ATP含量和能荷水平與果實(shí)采后貯藏期間衰老密切相關(guān)。如何穩(wěn)定果實(shí)采后能量的生成速率成為延緩果實(shí)衰老和品質(zhì)劣變的一個(gè)突破方向。

近年研究發(fā)現(xiàn)，適宜濃度乙烯抑制劑（1-MCP）處理在延緩果實(shí)衰老方面的效果顯著，如1-MCP處理能有效的延緩荔枝、油木奈、臺(tái)灣青棗果實(shí)采后衰老及品質(zhì)劣變延長果實(shí)貨架期[1，4，17]。Qu等[17]分別用乙烯、1-MCP處理采后荔枝果實(shí)，發(fā)現(xiàn)乙烯降低了果皮中的能荷值加劇細(xì)胞能量虧缺加速衰老褐變而1-MCP處理延緩了衰老品質(zhì)劣變，認(rèn)為1-MCP處理延緩衰老與能量代謝有關(guān)。張?zhí)m等[18]通過數(shù)字基因表達(dá)譜（DGE）技術(shù)研究1-MCP處理的杧果果實(shí)發(fā)現(xiàn)，果實(shí)呼吸關(guān)鍵酶的表達(dá)豐度顯著下調(diào)，認(rèn)為1-MCP處理抑制果實(shí)呼吸強(qiáng)度，降低能量代謝，延緩果實(shí)衰老。李輝等[4]研究認(rèn)為，采后1-MCP處理可能是通過改變‘油木奈果實(shí)的呼吸途徑從而改變呼吸強(qiáng)度和能量代謝水平，保持細(xì)胞能量水平，維持呼吸鏈中活性氧清除平衡，延緩果實(shí)衰老。目前未見有關(guān)臺(tái)灣青棗果實(shí)細(xì)胞能量代謝的報(bào)道。筆者以福建省主栽臺(tái)灣青棗果實(shí)品種‘中青（Ziziphus mauritiana Lamk. cv. Zhongqing）果實(shí)為材料，研究臺(tái)灣青棗果實(shí)貯藏期間細(xì)胞能量水平和生理品質(zhì)的變化規(guī)律及相關(guān)性，為控制采后臺(tái)灣青棗果實(shí)衰老、延長果實(shí)貨架期提供科學(xué)依據(jù)和生產(chǎn)指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 材料

供試的果實(shí)于2012年12月采自福建省漳州平和縣山格鎮(zhèn)示范科技果園。采收當(dāng)天‘中青臺(tái)灣青棗（Ziziphus mauritiana Lamk. cv. Zhongqing）果實(shí)運(yùn)到福建農(nóng)林大學(xué)農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)后技術(shù)研究所食品貯藏保鮮實(shí)驗(yàn)室（福州），挑選單果重約為100～140 g，大小、色澤相似、沒有病蟲害和機(jī)械傷、八成熟果實(shí)進(jìn)行試驗(yàn)。

1.2 方法

1.2.1 果實(shí)前期處理 果實(shí)用清水清洗、晾干后如下處理：①1-MCP處理：1-MCP濃度為1.8 μL/L[1]。果實(shí)上平放根據(jù)濃度裁剪并噴濕的紙片型1-MCP，在（15±1）℃下泡沫箱里密閉處理12 h。②對照（CK）：果實(shí)不做任何處理，在（15±1）℃下泡沫箱里密閉12 h。1-MCP為臺(tái)灣利統(tǒng)股份有限公司提供的紙片型AnsiP-S（商品名：安喜布）。處理后的臺(tái)灣青棗果實(shí)用0.015 mm的聚乙烯薄膜袋密封包裝，每袋裝果10個(gè)，包裝后在（15±1）℃下貯藏15 d。

1.2.2 果實(shí)細(xì)胞膜透性的測定 10個(gè)臺(tái)灣青棗果實(shí)除去外果皮后從赤道面切取厚度1 cm的柱形果肉（直徑為5 mm）2 g，參照陳藝暉等[19]的方法，加入25 mL蒸餾水，于25 ℃下放置2 h，用DDS-IIA型電導(dǎo)儀來測定電導(dǎo)度，記為C1。浸出液用沸水浴煮30 min后測定電導(dǎo)度，記為C2。相對滲透率=（C1/C2）×100%。

1.2.3 果實(shí)ATP、ADP和AMP含量的測定 參照Chen等[20]的方法，從10個(gè)除去外果皮后的臺(tái)灣青棗果實(shí)赤道面切取厚度1 cm的柱形果肉10 g，用島津LC-20AT型高效液相色譜儀測定ATP、ADP和AMP的含量，采用C18反向柱，檢測波長為254 nm，進(jìn)樣體積50 μL，流速1.0 mL/min。ATP、ADP和AMP的定性采用保留時(shí)間，定量通過外標(biāo)法與標(biāo)品進(jìn)行比對，結(jié)果以μg/g FW表示。根據(jù)所得數(shù)值按照下列公式計(jì)算能荷（EC）：

EC=[ATP+1/2ADP]/[ATP+ADP+AMP]

1.2.4 果實(shí)NADK活性的測定 從10個(gè)除去外果皮后的臺(tái)灣青棗果實(shí)赤道面切取厚度1 cm的柱形果肉5 g，參照顧采琴等[7]的方法測定果實(shí)NADK活性，以每小時(shí)生成1 μmol NADP需要的酶量為1個(gè)NADK活性單位（U），結(jié)果以U/mg protein表示。

1.2.5 果實(shí)NADP、NADPH、NAD和NADH含量的測定 從10個(gè)除去外果皮后的臺(tái)灣青棗果實(shí)赤道面切取厚度1 cm的柱形果肉3 g，參照顧采琴等[7]的方法測定果實(shí)NAD、NADH、NADP和NADPH含量，結(jié)果以nmol/g FW表示。

1.2.6 蛋白質(zhì)含量測定 參照劉士平等[21]的方法，采用考馬斯亮藍(lán)G250染色法測定，以牛血清蛋白作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.7 果實(shí)硬度測定 隨機(jī)取10個(gè)臺(tái)灣青棗果實(shí)，每個(gè)果實(shí)赤道線上相對4個(gè)部位的去皮果肉用EZ Test EZ-S質(zhì)構(gòu)分析儀測定，結(jié)果以N/cm2表示。

1.2.8 果皮葉綠素含量測定 從10個(gè)臺(tái)灣青棗果實(shí)中用刨皮刀取果實(shí)赤道面上的外果皮1 g，參照朱廣廉等[22]的方法測定葉綠素含量，結(jié)果以mg/hg FW表示。

1.2.9 果實(shí)可滴定酸含量測定 從10個(gè)除去外果皮后的臺(tái)灣青棗果實(shí)赤道面切取厚度1 cm的柱形果肉10 g，參照蔡永萍[23]的方法，用NaOH溶液滴定法測定果實(shí)可滴定酸含量。

1.2.10 果實(shí)可溶性固形物含量測定 隨機(jī)取10個(gè)臺(tái)灣青棗果實(shí)，用WYT-1型手持折光儀測定果實(shí)可溶性固形物含量。

1.2.11 果實(shí)維生素C含量測定 從10個(gè)除去外果皮的臺(tái)灣青棗赤道面切取厚度1 cm的柱形果肉1.0 g，參照曹建康[24]的方法測定維生素C含量，結(jié)果以mg/hg FW表示。

1.2.12 果實(shí)腐爛指數(shù)測定 隨機(jī)取5袋臺(tái)灣青棗果實(shí)（共50個(gè)），參照陳學(xué)紅等[25]的方法，以果實(shí)表面出現(xiàn)水漬狀病斑作為是否腐爛的判別依據(jù)，按照腐爛面積將果實(shí)劃分為4級(jí)：0級(jí)，無腐爛；1級(jí)，果實(shí)表面有1～3個(gè)小腐爛斑點(diǎn)；2級(jí)，腐爛面積占25%～50%；3級(jí)，腐爛面積大于50%。果實(shí)腐爛指數(shù)/%=Σ（腐爛級(jí)別×該級(jí)果實(shí)數(shù)）/最高腐爛級(jí)別×總果數(shù)×100。

1.3 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 16.0數(shù)據(jù)分析軟件和Ducan多重比較法進(jìn)行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 1-MCP對采后臺(tái)灣青棗果實(shí)貯藏15 d后果實(shí)品質(zhì)的影響

由表1可知，在貯藏第15天，對照臺(tái)灣青棗果實(shí)硬度3.5 N/cm2，而1-MCP處理的臺(tái)灣青棗果實(shí)硬度5.0 N/cm2，為對照的1.4倍，顯著高于對照（p<0.05）；對照果實(shí)果皮葉綠素含量3.19 mg/hg FW，1-MCP處理的果皮葉綠素含量為4.89 mg/hg FW，是對照的1.53倍，顯著高于對照（p<0.05）；對照果實(shí)可溶性固形物為6.97%，可滴定酸為0.08%，而1-MCP處理的可溶性固形物為7.93%，可滴定酸為0.12%，兩者間差異顯著（p<0.05）；對照果實(shí)維生素C含量為1.82 mg/hg FW，而1-MCP處理的果實(shí)維生素C含量為4.92 mg/hg FW，為對照的2.7倍，顯著高于對照（p<0.05）；對照果實(shí)腐爛指數(shù)高達(dá)63.3%，而1-MCP處理的腐爛指數(shù)為29.5%，僅為對照的46.6%，顯著低于對照（p<0.05）。上述結(jié)果表明，對照臺(tái)灣青棗果實(shí)采后易衰老腐爛，而1-MCP處理能有效的抑制果實(shí)外觀色澤變化、保持較高的硬度、可溶性固形物、可滴定酸、維生素C含量，較好的保持果實(shí)外觀品質(zhì)和商品價(jià)值，降低腐爛率。

2.2 1-MCP對采后臺(tái)灣青棗果實(shí)細(xì)胞膜透性的影響

果實(shí)衰老程度常用細(xì)胞膜透性來反映，一般常用細(xì)胞膜相對滲透率來表示。由圖2可知，隨貯藏時(shí)間的延長，對照臺(tái)灣青棗果實(shí)細(xì)胞膜透性不斷上升，而1-MCP處理的臺(tái)灣青棗果實(shí)細(xì)胞膜相對滲透率在貯藏0～3 d略有下降，隨后隨貯藏時(shí)間的延長不斷上升。在貯藏第15天對照臺(tái)灣青棗果實(shí)細(xì)胞膜相對滲透率為61.0%，而1-MCP處理的細(xì)胞膜相對滲透率為42.6%，兩者間差異極顯著（p<0.01）。在貯藏6～15 d內(nèi)，對照臺(tái)灣青棗果實(shí)細(xì)胞膜相對滲透率極顯著（p<0.01）高于處理。說明1-MCP處理有效地減緩臺(tái)灣青棗果實(shí)細(xì)胞膜透性的升高，保持較低的細(xì)胞膜相對滲透率，較好的維持果實(shí)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的完整性，延緩果實(shí)衰老。

2.3 1-MCP對采后臺(tái)灣青棗果實(shí)ATP、ADP、AMP含量和能荷值的影響

由圖3-a可知，對照和1-MCP處理的臺(tái)灣青棗果實(shí)ATP含量在整個(gè)貯藏期間均呈下降趨勢。在貯藏同一時(shí)間內(nèi)1-MCP處理的ATP含量均比對照的高。

由圖3-b可知，在整個(gè)貯藏期間，對照和1-MCP處理的臺(tái)灣青棗果實(shí)AMP含量呈階梯上升，ADP含量均呈先下降后上升的趨勢。在貯藏同一時(shí)間內(nèi)1-MCP處理的AMP、ADP含量均比對照的低。

由圖3-c可知，在整個(gè)貯藏期間，對照和1-MCP處理的臺(tái)灣青棗果實(shí)能荷值呈階梯下降。在貯藏同一時(shí)間內(nèi)1-MCP處理的果實(shí)能荷值均高于對照。

上述結(jié)果表明，1-MCP處理能有效減緩采后臺(tái)灣青棗果實(shí)ATP含量的下降和ADP、AMP含量的升高，抑制果實(shí)能荷值的下降，延緩果實(shí)的衰老。

2.4 1-MCP對采后臺(tái)灣青棗果實(shí)NADK活性的影響

NADK是催化NAD與ATP磷酸化生產(chǎn)NADP的唯一酶。由圖4可知，臺(tái)灣青棗果實(shí)NADK活性在貯藏前期先上升，對照在貯藏第6天達(dá)到最大值4.74 U/mg protein，1-MCP處理在貯藏第3 d達(dá)到最大值7.94 U/mg protein，隨后兩者NADK活性都下降；在貯藏期間，1-MCP處理的臺(tái)灣青棗果實(shí)NADK活性都高于對照。說明1-MCP處理能維持較高的NADK活性。

2.5 1-MCP對采后臺(tái)灣青棗果實(shí)NAD、NADP、NADH和NADPH含量的影響

NADP是NAD在NADK催化下磷酸化作用的產(chǎn)物，NADH和NADPH是NAD和NADP的還原態(tài)形式。由圖5-a可知，對照臺(tái)灣青棗果實(shí)NAD含量除了貯藏3～6 d小幅度上升外，總體上呈下降趨勢，而1-MCP處理的NAD含量在貯藏初期0～3 d快速下降后其NAD含量在貯藏3～15 d變化不大；在貯藏同一時(shí)間內(nèi)，1-MCP處理的果實(shí)NAD含量均低于對照。

由圖5-a可知，對照和1-MCP處理的臺(tái)灣青棗果實(shí)NADH含量在貯藏0～9 d先下降后上升，之后緩慢下降；在貯藏同一時(shí)間內(nèi)，1-MCP處理的臺(tái)灣青棗果實(shí)NADH含量都低于對照。

由圖5-b可知，對照臺(tái)灣青棗果實(shí)NADP含量隨貯藏時(shí)間的延長而下降；1-MCP處理的果實(shí)NADP含量在貯藏0～6 d快速上升，隨后下降；在貯藏同一時(shí)間內(nèi)，1-MCP處理的果實(shí)NADP含量高于對照。

由圖5-b可知，對照和1-MCP處理的臺(tái)灣青棗果實(shí)NADPH含量在貯藏初期0～6 d快速下降，貯藏6～9 d快速上升，隨后下降；在貯藏同一時(shí)間內(nèi)，1-MCP處理的臺(tái)灣青棗果實(shí)NADPH含量高于對照果實(shí)。

上述結(jié)果表明，1-MCP處理可使采后的臺(tái)灣青棗果實(shí)保持較高的NADP（H）的含量和較低的NAD（H）含量。表明1-MCP處理可促進(jìn)臺(tái)灣青棗果實(shí)貯藏期NAD的磷酸化，與高NADK活性相一致。

3 討論

3.1 1-MCP對采后臺(tái)灣果實(shí)衰老的延緩及其與能量水平的關(guān)系

臺(tái)灣青棗果實(shí)采后易衰老，葉綠素降解，果皮變色，果肉硬度下降。如何延緩衰老，延長了果實(shí)貨架期成為臺(tái)灣青棗果實(shí)采后急需解決的問題[1-2]。衰老是一個(gè)需要能量的過程，衰老過程中許多消耗ATP的反應(yīng)得以激活，比如葉綠素的分解，水解酶的活化、酸的破壞、細(xì)胞軟化等。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，對照臺(tái)灣青棗果實(shí)在貯藏期間ATP含量不斷下降，ATP作為細(xì)胞能量指示物，其含量的不斷下降表明果實(shí)采后貯藏期間可用能量不斷減少。同時(shí)觀察到果實(shí)品質(zhì)隨貯藏時(shí)間的延長而不斷下降，到貯藏第15天時(shí)果實(shí)葉綠素降解，果皮顏色由綠色變成黃色，果肉變軟，有機(jī)酸、可溶性固形物和維生素C含量下降果實(shí)風(fēng)味變淡，果實(shí)腐爛指數(shù)高達(dá)63.3%（表1）。由此可見，采后臺(tái)灣青棗果實(shí)有限的可用能量的減少加劇果實(shí)貯藏期間的衰老，導(dǎo)致果實(shí)貯藏后期品質(zhì)快速下降，腐爛率快速增加。1-MCP處理的臺(tái)灣青棗果實(shí)ATP含量雖然也隨貯藏時(shí)間的延長而下降但在貯藏同一時(shí)間內(nèi)均高于對照（圖3-a），可見1-MCP處理能較好的維持組織的能量水平；果實(shí)品質(zhì)隨貯藏時(shí)間的延長而下降，同樣在貯藏第15天，1-MCP處理的果實(shí)果皮葉綠素含量、果肉硬度及可溶性固形物、有機(jī)酸、維生素C含量都高于對照，果實(shí)腐爛指數(shù)僅為29.5%，顯著低于對照（表1）。由此可見，果實(shí)貯藏期間細(xì)胞能量水平發(fā)生明顯的改變，能量狀態(tài)與果實(shí)成熟衰老有關(guān)，適當(dāng)?shù)哪芰可珊湍芰克娇裳舆t果實(shí)衰老。1-MCP處理能有效延緩組織能量水平的下降（圖3-a），較好地保持外觀品質(zhì)和商品價(jià)值，降低腐爛率（表1），有效延緩采后臺(tái)灣青棗果實(shí)的衰老進(jìn)程。

細(xì)胞膜降解是果實(shí)衰老的一個(gè)基本特征。在本研究中發(fā)現(xiàn)，在貯藏期間對照果實(shí)ATP含量下降，ADP 、AMP含量上升，能荷值下降（圖3-a、3-b、3-c），細(xì)胞膜相對滲透率快速上升（圖2），相關(guān)分析表明，對照臺(tái)灣青棗果實(shí)能荷值（Y）（圖3-c）與臺(tái)灣青棗果實(shí)細(xì)胞膜相對滲透率（X）（圖2）呈極顯著負(fù)相關(guān)（y=-0.005 8x+1.136 7，r=0.969 4）。這與荔枝[10]、龍眼[7]、桃[26]、油木奈[4]果實(shí)衰老進(jìn)程中ATP、能荷值下降而膜透性上升相一致。Rawyler等[27]提出能量生成與細(xì)胞膜完整性有直接關(guān)系。Yi等[28]進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)提供外源能量ATP抑制了荔枝果實(shí)貯藏期間膜脂降解。能量代謝在細(xì)胞膜修復(fù)保持其完整性中起著重要的調(diào)節(jié)作用，細(xì)胞內(nèi)可利用能量的有限而導(dǎo)致膜透性的上升，膜完整性喪失使酶和底物混合，果實(shí)品質(zhì)下降進(jìn)而出現(xiàn)腐爛。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，1-MCP處理的臺(tái)灣青棗果實(shí)ATP含量、能荷水平在貯藏期間均高于對照，ADP、AMP含量和細(xì)胞膜透性在貯藏期間均低于對照果實(shí)（圖3-a、3-b、3-c、2）。說明采后臺(tái)灣青棗在貯藏期間由于細(xì)胞內(nèi)ATP及能荷水平的下降，細(xì)胞內(nèi)可利用能量的有限減弱了細(xì)胞膜自身的修復(fù)能力，加速細(xì)胞膜滲漏，導(dǎo)致細(xì)胞膜的區(qū)室化功能破壞，果實(shí)品質(zhì)快速下降。而1-MCP處理維持較高的ATP和能荷水平，增強(qiáng)了細(xì)胞膜自身的修復(fù)功能，較好保持細(xì)胞膜完整性，延緩果實(shí)衰老。

3.2 1-MCP對采后臺(tái)灣青棗果實(shí)衰老的延緩及其與吡啶核苷酸水平的關(guān)系

NADK是催化NAD與ATP磷酸化生成NADP的唯一酶。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在貯藏期間1-MCP處理的果實(shí)NADK活性和NADP含量高于對照（圖4、5-b），NAD含量低于對照果實(shí)（圖5-a），這與NADK能催化NAD磷酸化生成NADP相一致。與對照果實(shí)相比，1-MCP處理保持果實(shí)較高的NADP含量，NADP主要參與磷酸戊糖途徑（Pentose phosphate pathway，簡稱PPP）生成ATP和NADPH，而主要參與糖酵解和三羧酸循環(huán)生成ATP和NADH的NAD含量較低，推測1-MCP處理可能通過NADK影響細(xì)胞內(nèi)NAD與NADP含量比例導(dǎo)致采后磷酸戊糖途徑的提高，從而改變呼吸強(qiáng)度和能量代謝水平，影響果實(shí)貯藏壽命。

呼吸鏈?zhǔn)侵参锛?xì)胞主要的活性氧產(chǎn)生場所。在整個(gè)貯藏期間1-MCP處理的果實(shí)NADH含量均低于對照而NADPH含量均高于對照（圖5-a、5-b），NADH含量高時(shí)不僅對能量生成起抑制作用且NADH傳遞電子速率快所生成的活性氧也較多[29]。而NADPH其傳遞電子速率較NADH慢所生成的活性氧也較NADH少[29]，而且NADPH通過抗壞血酸-谷胱甘肽循環(huán)在清除自由基方面起重要作用。這與1-MCP處理果實(shí)中ATP含量較高（圖3-a），活性氧的產(chǎn)生少，活性氧清除能力比對照強(qiáng)相一致[30]，也與1-MCP處理能較好保持果實(shí)細(xì)胞膜完整性、保持果實(shí)品質(zhì)相一致（表1）。因此，1-MCP處理可通過NADK調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)NAD（H）和NADP（H）的含量，從而影響細(xì)胞中活性氧的產(chǎn)生和清除能力，保持細(xì)胞膜的完整性從而延緩果實(shí)的衰老進(jìn)程。

4 結(jié)論

與對照果實(shí)相比，1-MCP處理的采后‘中青臺(tái)灣青棗果實(shí)維持較高的ATP含量和能荷水平，保持細(xì)胞NADK較高活性，提高NADP（H）含量，降低NAD（H）含量，一方面在引起呼吸代謝途徑改變的同時(shí)抑制呼吸鏈中電子漏造成的活性氧含量的增加，保持細(xì)胞活性氧代謝的平衡，抑制了活性氧對細(xì)胞膜的攻擊；另一方面高能荷水平保持了細(xì)胞膜自身的修復(fù)能力，延緩細(xì)胞膜透性的增加，較好地保持果實(shí)細(xì)胞膜完整性；延緩果實(shí)葉綠素含量、硬度、可溶性固形物含量、可滴定酸含量、維生素C含量的下降，果實(shí)外觀品質(zhì)保持較好，腐爛率降低。而對照臺(tái)灣青棗果實(shí)到貯藏第15天果皮變黃、果肉變軟、風(fēng)味變淡、維生素C含量下降，腐爛率高達(dá)63.3%。因此，認(rèn)為1-MCP處理延緩衰老降低腐爛率與能量代謝有關(guān)。

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