• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    巴西蕉AP2/ERF超家族全基因組分析

    2017-05-30 00:49:39侯曉婉胡偉徐碧玉金志強張魯斌鹿志偉
    熱帶作物學報 2017年2期
    關鍵詞:香蕉

    侯曉婉 胡偉 徐碧玉 金志強 張魯斌 鹿志偉

    摘 要 香蕉作為熱帶和亞熱帶發(fā)展中國家最重要的糧食和經(jīng)濟作物,其產(chǎn)量和質(zhì)量受到低溫、干旱、高鹽等非生物逆境脅迫的嚴重影響?;谙憬禔基因組測序數(shù)據(jù),利用生物信息學技術和方法,對巴西蕉中調(diào)控植物非生物逆境脅迫應答方面發(fā)揮重要作用的AP2/ERF超家族基因全基因組進行系統(tǒng)分析。結(jié)果表明:共獲得119個巴西蕉AP2/ERF超家族基因,并將其劃分成ERF(100)、RAV(15)和soloist(4)家族,其中ERF家族又被劃分為10個亞家族,每個亞家族基因具有相似的保守motif和基因結(jié)構。此研究結(jié)果不僅為巴西蕉應答非生物逆境脅迫下AP2/ERF超家族基因功能和響應機制的研究、香蕉品種抗逆改良奠定理論基礎,而且也為不同物種的AP2/ERF超家族基因的系統(tǒng)發(fā)育和進化研究提供方法和理論依據(jù)。

    關鍵詞 香蕉;AP2/ERF;全基因組分析

    中圖分類號 S668.1 文獻標識碼 A

    Abstract Banana(Musaceae, Musa)is one of the most important foods and commercial crops in tropical and subtropical developing countries. The abiotic stresses, such as freezing, drought and salt, influence heavily the yield and quality of banana. A genome-wide analysis and expression profiles analysis on AP2/ERF super gene family of banana, which play an important role in responding to abiotic stresses, were conducted based on banana A genome sequencing. The main results showed that 119 AP2/ERF genes from banana A genome were divided into three families of ERF(100), RAV(15)and soloist(4). ERF family were classified again into ten subfamilies which were named fromⅠto Ⅹ. The same subfamily had same intro-exon structure and conserved motif domain. Taken together, the methods and theories in this paper could be used to study the development and evolution of gene coming AP2/ERF super family in other species. This study could identify some abiotic stress-responsive candidate MaERF genes, which would lay a solid foundation for genetic improvement of banana cultivars in the future.

    Key words banana(Musaceae, Musa); AP2/ERF; genome-wide analysis

    doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2017.02.019

    1961年Simmonds等[1]將含尖葉蕉性狀的基因稱為A基因,將含有長梗蕉性狀的基因稱為B基因,按其基因型,并參照染色體數(shù)將由原始的野生尖葉蕉(Musa acuminate Colla)和長梗蕉(Musa balibisiana)種內(nèi)或者種間雜交之后逐漸進化而成的香蕉品種分為AA、AAA、AAAA、AAB、AAAB、AABB、AB、ABBBB、BBB等組,而主要香蕉栽培品種巴西蕉、大蕉和粉蕉均為三倍體,其基因型分別為AAA、ABB和AAB[1-3],特別是巴西蕉,因其具有較高的商業(yè)價值,很受收購商和蕉農(nóng)的歡迎,普遍被大面積種植。然而香蕉是多年生常綠大型草本單子葉植物,對低溫、干旱、高鹽等非生物逆境脅迫異常敏感,非生物逆境脅迫的發(fā)生嚴重影響其產(chǎn)量和質(zhì)量。

    AP2/ERF(APETELLA2/Ethylene Responsive Element Binding Factor)超家族是植物最大的轉(zhuǎn)錄因子之一,其至少包含1個AP2/ERF結(jié)構域?;贏P2/ERF結(jié)構域的數(shù)目和是否出現(xiàn)其他DNA結(jié)合區(qū)域,將其劃分為AP2、ERF、RAV和soloist家族。其中AP2家族基因包含2個重復的AP2/ERF結(jié)構域;ERF家族基因僅包含1個AP2/ERF結(jié)構域;RAV家族基因包含1個AP2/ERF結(jié)構域和1個B3 DNA結(jié)合區(qū)域[4-5]。AP2/ERF超家族在植株花器官的發(fā)育、細胞增生、次生代謝、激素信號響應及生物和非生物脅迫應答中發(fā)揮重要的作用。Wan等[6]研究報導花生AhERF019在轉(zhuǎn)基因擬南芥中過表達的增強了植株對干旱、高溫和高鹽的耐受性。荷花LcERF054和麻瘋樹JcERF1的表達被高鹽誘導,增強了轉(zhuǎn)基因植株對高鹽的耐受性[7-8]。芝麻的AP2si16和水稻的OsERF71改善了芝麻和水稻對干旱的耐受性[9-10]。ERF家族基因在植株響應外界生物和非生物脅迫方面分別發(fā)揮著不同的功能。前人對擬南芥中ERF各家族基因的功能進行研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn)ERF家族的GroupIII亞家族基因在植株響應低溫、高鹽和干旱脅迫方面發(fā)揮重要作用;GroupVII和GroupIX亞家族基因在植株對病害的耐受性方面發(fā)揮重要作用[4,11]。

    對植物基因家族的全基因組進行分析,識別出的分類組和假定功能motif將對研究每個家族內(nèi)基因的生物功能有很大作用。自2006~2014年,已先后對擬南芥(Arabidopsis thaliana)、水稻(Oryza sativa L.)、大豆(Giycinemax L.)、玉米(Zea mays L.)、楊樹(Populus trichocarpa)、 高粱(Sorghum bicolor L.)、葡萄(Vitis vinifera L.)、蘋果(Malus domestica)、中國大白菜(Brassica rapa ssp. pekinensis)、荷花(Lotus corniculatus)、黃瓜(Cucumbers)、馬鈴薯(Potato)、苜蓿(Medicago truncatula)等許多物種的AP2/ERF超家族進行了全基因組分析[4-5,7,12-15]。近年來,香蕉基因組的研究也越來越深入,2012年就完成了A基因組的測序工作[16],2016年Lakhwani等[17]從香蕉A基因組數(shù)據(jù)庫中篩選了小果野芭蕉(M. acuminata)和野蕉(M. balbisiana)的AP2/ERF超家族基因,從基因進化角度對其進行了整體分析,但是基因型為AAA的巴西蕉AP2/ERF超家族基因的家族分類和結(jié)構分析還未見報道。

    本研究根據(jù)香蕉A基因組數(shù)據(jù)庫中,基因型為AAA巴西蕉完整、非冗余的AP2/ERF超家族基因全基因組數(shù)據(jù),對其進行了系統(tǒng)的分析,將為巴西蕉應答非生物逆境脅迫下AP2/ERF超家族功能基因的挖掘和鑒定,及后期巴西蕉脅迫響應機制和抗逆品種改良的研究奠定理論基礎,也將為不同物種AP2/ERF超家族基因的系統(tǒng)發(fā)育和進化研究提供方法和理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 巴西蕉AP2/ERF超家族基因的識別和系統(tǒng)發(fā)育樹的構建

    從香蕉A基因組數(shù)據(jù)庫(http://banana-genome.cirad.fr/)中篩選基因型為AAA的巴西蕉AP2/ERF超家族DNA和蛋白序列[16]。另外,以已知的AP2/ERF超家族基因結(jié)構特征為基礎,運用CDD和PFAM數(shù)據(jù)庫[18-19],通過保守結(jié)構域的識別進一步對AP2/ERF超家族基因進行家族劃分,將包含2個重復AP2/ERF結(jié)構域的基因劃分為AP2家族,將僅包含1個AP2/ERF結(jié)構域的基因劃分為ERF家族,而將包含1個AP2/ERF結(jié)構域和1個B3 DNA結(jié)合區(qū)域的基因劃分為RAV家族。此外,AP2/ERF結(jié)構域發(fā)生高度分化但與其他物種中ERF基因有較高相似性的基因被歸為soloist家族[4-5,15,17]。從Rice Genome Annotation Project[20]中獲得水稻ERF家族氨基酸序列。用BLAST分析所有水稻的ERF蛋白,深入識別香蕉數(shù)據(jù)庫中的ERF家族蛋白?;诎臀鹘逗退局凶R別的ERF進行多序列比對,運用Clustal X 2.0和MEGA 5.0構建系統(tǒng)發(fā)育樹。

    1.2 巴西蕉AP2/ERF超家族基因結(jié)構和motif分析

    在香蕉A基因組數(shù)據(jù)庫中下載基因型為AAA的巴西蕉AP2/ERF超家族基因的全基因組和CDS序列。用GSDS2.0軟件對香蕉AP2/ERF超家族全部基因結(jié)構進行分析[21];用MEME軟件對香蕉AP2/ERF超家族全部基因的氨基酸motif組件進行分析[22],并基于InterProScan數(shù)據(jù)對識別的motif做進一步的詮釋[23]。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 巴西蕉ERF家族基因的識別和進化分析

    從香蕉A基因組數(shù)據(jù)庫中共篩選出基因型為AAA巴西蕉的非冗余、完整的AP2/ERF基因119個,依據(jù)擬南芥中MYB、WRKY、bZIP和bHLH轉(zhuǎn)錄因子的命名方法[24-26],從MaERF1~MaERF119對其命名。ExPASY分析結(jié)果表明,119個假定的AP2/ERF超家族基因編碼的蛋白全長為127~1 029 aa,相關分子量為13.837 3~114.825 9 ku,等電點從4.66到11.19(表1)。

    對119個基因進行保守區(qū)域檢測和多重序列分析,結(jié)合AP2/ERF超家族分類標準,分別將100個基因歸為ERF家族,15個基因歸類為RAV家族;4個AP2/ERF結(jié)構域發(fā)生高度分化,但與其他物種中ERF基因有較高相似性的基因歸為soloist家族;因沒有包含2個重復AP2/ERF結(jié)構域的基因,所以AAA基因型巴西蕉中未劃分出AP2家族。

    用香蕉和水稻ERF家族基因編碼的AP2/ERF結(jié)構域的氨基酸序列進行了多序列比對,并構建無根系統(tǒng)發(fā)育樹(圖1)。結(jié)果表明,基于序列比對的相似性,香蕉100個ERF家族基因又被劃分成10亞組,即GroupⅠ~GroupⅩ。GroupⅠ亞家族包含MaERF50,-51,-52;GroupⅡ包含MaERF1,-7~-17,-22;GroupⅢ包含MaERF18~-21,-23~-27,-32~-39;Group Ⅳ包含MaERF40,-41,-42;Group Ⅴ包含7個基因,分別為MaERF2~-6,-28,-29;MaERF53~-59,-99,-112,-118和-119屬于GroupⅥ;GroupⅦ亞家族中有MaERF60和MaERF63~-73;GroupⅧ包含MaERF基因-30,-31,

    43~-49,-74~-82;MaERF84,-85和MaERF87~-97屬于亞家族GroupⅨ;GroupⅩ亞家族有3個基因-MaERF103、MaERF104和MaERF105。根據(jù)水稻GroupⅤ和GroupⅩ的劃分,又將香蕉GroupⅤ中的MaERF4-6劃分為Ⅴb,剩余的GroupⅤ亞家族基因劃分為Ⅴa;香蕉GroupⅩ中的MaERF105被劃分為Ⅹa,而Ⅹb有基因MaERF103和MaERF104。

    2.2 巴西蕉AP2/ERF家族基因結(jié)構分析

    基于巴西蕉119個AP2/ERF超家族基因AP2/ERF保守結(jié)構域氨基酸序列同源比對,依據(jù)其相似性建立了一個無根的系統(tǒng)進化樹,然后對基因內(nèi)含子和外顯子結(jié)構進行比較分析(圖2)。結(jié)果顯示,所有的巴西蕉AP2/ERF超家族基因也被劃分為3個大的家族:ERF、RAV和Soloist,其中ERF家族又被劃分成10個亞組,分別命名為Ⅰ~Ⅹ,并且每個亞家族中各基因具有相似的內(nèi)含子-外顯子結(jié)構,如GroupⅠ、GroupⅡ、GroupⅣ和GroupⅨ均只包含1個外顯子;RAV和Soloist家族中的基因大多含有2個外顯子。每個亞組中相似的外顯子數(shù)目說明了他們之間較近的進化關系和相似的功能。這一結(jié)果和圖1的進化結(jié)果一致,進一步證實了AP2/ERF超家族分類的準確性。系統(tǒng)發(fā)育樹和基因結(jié)構分析說明它們之間有較近的進化關系,清晰的展示了巴西蕉ERF家族基因每個分支早期的進化關系。

    2.3 巴西蕉AP2/ERF家族基因保守motif分析

    通過MEME軟件分析,從119個香蕉AP2/ERF超家族基因中搜索出15個保守motif,并運用InterPro 資料對其進一步詮釋(圖3,表2)。15個motif中含有2個功能區(qū)域,分別為AP2/ERF 結(jié)構域和DNA-binding結(jié)構域,其中AP2/ERF 結(jié)構域在motif 1和motif 2中,而DNA-binding結(jié)構域在motif 1、4、5和6中。含有AP2/ERF結(jié)構域的motif 1和motif 2除了在Soloist家族的MaERF106、MaERF107、MaERF108和MaERF109基因中未被詮釋外,剩余的所有AP2/ERF超家族基因中均詮釋有AP2/ERF結(jié)構域;在RAV家族基因中還詮釋出了DNA-binding結(jié)構域。

    另外,每個ERF亞組中基本含有相同的保守motif組件。如GroupⅠ均含有motif 1、2和10;GroupⅣ中基因均含有motif 1、2、3、10和14。保守Motif的分析更進一步的證明了香蕉ERF家族進化和分類關系的準確性,并且每個亞組含有相同motif預示著同一亞組基因有著相似的功能。

    3 討論

    近年來,擬南芥、水稻、大豆、葡萄等物種AP2/ERF家族基因的全基因組分析已被完成,并且該領域的研究也越來越被重視,僅2014年就報導了玉米、馬鈴薯和黃瓜3種植物AP2/ERF的全基因組分析的結(jié)果,2016年又對小果野芭蕉(M. acuminata)、長梗蕉(M. balbisiana)和苜蓿的AP2/ERF超家族基因全基因組分析進行了報導[7,12,15,17]。本研究對基因型為AAA的巴西蕉AP2/ERF超基因家族進行了分析,共識別出巴西蕉119個全長、非冗余的AP2/ERF超家族基因,又將其劃分成3個家族,分別為ERF(100個)、RAV(15個)和soloist(4個)家族。這一分類結(jié)果與大白菜、水稻、黃瓜、玉米、荷花等植株AP2/ERF超家族基因劃分結(jié)果不同,以上植株均是將AP2/ERF超家族基因劃分為AP2、ERF、RAV和soloist 4個家族。此外,這一分類結(jié)果也與同一物種的小果野芭蕉和長梗蕉的不同,2016年Lakhwani等[17]將小果野芭蕉和長梗蕉的AP2/ERF超家族基因劃分為AP2、ERF、RAV和soloist共4個家族,其中AP2家族有2個重復的AP2/ERF結(jié)構域,ERF家族僅含有1個AP2/ERF結(jié)構域。巴西蕉是野生尖葉蕉和長梗蕉種內(nèi)或者種間雜交之后逐漸進化而來的3倍體新品種,其不存在包含2個AP2/ERF結(jié)構域的AP2家族基因,可能是在進化過程中1個AP2/ERF結(jié)構域消失的原因。因此,根據(jù)AP2/ERF結(jié)構域的數(shù)目和是否出現(xiàn)其他DNA結(jié)構域特征,將本研究識別出的119個AAA基因型巴西蕉AP2/ERF超家族基因劃分為ERF、RAV和soloist是正確的,這一結(jié)果對于后續(xù)AAA基因型巴西蕉AP2/ERF超家族基因的篩選和功能研究具有一定的指導意義。

    一般而言,轉(zhuǎn)錄因子DNA結(jié)合域外的區(qū)域包含重要的功能區(qū)域,參與轉(zhuǎn)錄啟動、蛋白之間互作和核定位。因此,植物轉(zhuǎn)錄因子大家族的一個亞組內(nèi)成員的功能區(qū)域,即氨基酸序列motif通常是保守的,如MYB、WRKY、NAC、Dof、GATA和GRAS[24,27-29]。一個亞組中蛋白的motif可能有相似的功能,有些可能在轉(zhuǎn)錄調(diào)控中發(fā)揮重要作用[4]。本研究依據(jù)水稻ERF家族和巴西蕉100個ERF家族基因編碼的AP2/ERF保守結(jié)構域氨基酸序列的比對結(jié)果,又將ERF家族劃分為10個亞組,即GroupⅠ~GroupⅩ。對于AP2/ERF超家族中ERF家族的劃分,近幾年不同物種中的報導均一致,都被劃分為10個亞組,也與香蕉進化的原始種小果野芭蕉和長梗蕉的劃分結(jié)果一致[17]。對巴西蕉ERF家族基因結(jié)構和保守功能motif分析發(fā)現(xiàn),聚類到同一亞組中的ERF基因具有相似的基因結(jié)構和相似的motif組件。這一結(jié)果也符合前人對其他植物ERF家族全基因組分析后得出的結(jié)論[4-5,7,15]。因此,劃分到同一亞組的ERF基因具有較近的進化關系,并且可能在巴西蕉響應外界生物和非生物脅迫方面具有相似的功能。

    綜上所述,本研究對基因型為AAA的栽培種巴西蕉的AP2/ERF超家族進行了系統(tǒng)的分析,將獲得的119個巴西蕉AP2/ERF超家族基因劃分成ERF、RAV和soloist共3個家族,其中ERF家族又被劃分為10個亞家族,每個亞家族基因具有相似的保守motif和基因結(jié)構。對巴西蕉AP2/ERF超家族基因的研究為不同物種基因家族的系統(tǒng)發(fā)育和進化研究提供了方法和理論依據(jù),更有助于巴西蕉響應非生物逆境脅迫下AP2/ERF超家族功能基因的挖掘和鑒定,對于后期非生物逆境脅迫響應機制的研究、香蕉品種抗逆改良奠定了基礎。

    參考文獻

    [1] Simmonds N W. Megasporogenesis and female fertility in 3 edible triploid bananas[J]. Journal of Genetics, 1961, 57(2-3): 269.

    [2] 吳坤林. 香蕉的生物學特性及其組織培養(yǎng)技術[J]. 生物學通報, 2006, 41(10): 5-8.

    [3] 程曉培. 香蕉MADS-box轉(zhuǎn)錄因子在脅迫條件下的表達分析[D]. ??冢?海南大學, 2013.

    [4] Nakano T, Suzuki K, Fujimura T, et al. Genome-wide analysis of the ERF gene family in Arabidopsis and rice[J]. Plant Physiology, 2006, 140(2): 411-432.

    [5] Song X M, Li Y, Hou X L. Genome-wide analysis of the AP2/ERF transcription factor superfamily in Chinese cabbage(Brassica rapa ssp. pekinensis)[J]. BMC Genomics, 2013, 14(1): 1-15.

    [6] Wan L Y, Wu Y S, Huang J Q, et al. Identif ication of ERF genes in peanuts and functional analysis bof AhERF008 and AhERF019 in abiotic stress response[J]. Funct Integr Genomics, 2014, 14(3): 467-477.

    [7] Sun Z M, Zhou M L, Xiao X G, et al. Genome-wide analysis of AP2/ERF family genes from Lotus corniculatus shows LcERF054 enhances salt tolerance[J]. Functional & Integrative Genomics, 2014, 14(3): 453-466.

    [8] Yang H, Yu C, Yan J, et al. Overexpression of the Jatropha curcas JcERF1 gene coding an AP2/ERF-Type transcription factor increases tolerance to salt in transgenic tobacco[J]. Biochemistry(Moscow), 2014, 79(11): 1 226-1 236.

    [9] Dossa K, Wei X, Li D H, et al. Insight into the AP2/ERF transcription factor superfamily in sesame and expression profiling of DREB subfamily under drought stress[J]. BMC Plant Biology, 2016, 16(1): 171-186.

    [10] Lee D K, Jung H, Jang G, et al. Overexpression of the OsERF71 transcription factor alters rice root structure and drought resistance[J]. Plant Physiology Preview, 2016, 172(1): 379.

    [11] Magome H, Yamaguchi S, Hanada A, et al. dwarf and delayed-flowering, a novel Arabidopsis mutant deficient in gibberellin biosynthesis because of overexpression of a putative AP2 transcription factor[J]. Plant J, 2014, 37(4): 720-729

    [12] Du H W, Huang M, Zhang Z X, et al. Genome-wide analysis of the AP2/ERF gene family in maize waterlogging stress response[J]. Euphytica, 2014, 198(1): 115-126.

    [13] Zhuang J, Cai B, Peng R H, et al. Genome-wide analysis of the AP2/ERF gene family in Populus trichocarpa[J]. Biochem Biophys Res Commun, 2008, 371(3): 468-474.

    [14] Zhuang J, Peng R H, Cheng Z M, et al. Genome-wide analysis of the putative AP2/ERF family genes in Vitis vinifera[J]. Scientia Horticulturae, 2009, 123(1): 73-81.

    [15] Hu L F, Liu S Q. Genome-wide identification and phylogenetic analysis of the ERF gene family in cucumbers[J]. Genetics and Molecular Biology, 2011, 34(4): 624-633.

    [16] D'Hont A, Denoeud F, Aury J M, et al. The banana(Musa acuminata)genome and the evolution of monocotyledonous plants[J]. Nature, 2012, 488(1): 213-217.

    [17] Lakhwani D, Pandey A, Dhar Y V, et al. Genome-wide analysis of the AP2/ERF family in Musa species reveals divergence and neofunctionalisation during evolution[J]. Scientific Report, 2016, 6: 18 878.

    [18] Marchler-Bauer A, Derbyshire M K, Gonzales N R, et al. CDD: NCBI's conserved domain database[J]. Nucleic Acids Res, 2015, 43(1): D222-D226.

    [19] Finn R D, Bateman A, Clements J, et al. The Pfam protein families database[J]. Nucleic Acids Res, 2014, 42(1): D222-D230.

    [20] Kawahara Y, de la Bastide M, Hamilton J P, et al. Improvement of the Oryza sativa Nipponbare reference genome using next generation sequence and optical map data[J]. Rice, 2013, 6(1): 1-10.

    [21] Hu B, Jin J, Guo A Y, et al. GSDS 2.0: An upgraded gene feature visualization server[J]. Bioinformatics, 2015, 31(7): 1 296-1 297.

    [22] Brown P, Baxter L, Hickman R, et al. MEME-LaB: Motif analysis in clusters[J]. Bioinformatics, 2013, 29(9): 1 696-1 697.

    [23] Mulder N, Apweiler R. InterPro and InterProScan: Tools for protein sequence classification and comparison[J]. Methods Mol Biol, 2007, 396(1): 59-70.

    [24] Eulgem T, Rushton P J, Robatzek S, et al. The WRKY superfamily of plant transcription factors[J]. Trends Plant Science, 2000, 5(5): 199-206.

    [25] Jakoby M, Weisshaar B, Droge-Laser W, et al. bZIP transcription factors in Arabidopsis[J]. Trends in Plant Science, 2002, 7(3): 106-111.

    [26] Heim M A, Jakoby M, Werber M, et al. The basic helix-loop-helix transcription factor family in plants: a genome-wide study of protein structure and functional diversity[J]. Molecular Biology and Evolution, 2003, 20(5): 735-747.

    [27] Ooka H, Satoh K, Doi K, et al. Comprehensive analysis of NAC family genes in Oryza sativa and Arabidopsis thaliana[J]. DNA Res, 2003, 10(2): 239-247.

    [28] Tian C, Wan P, Sun S, et al. Genome-wide analysis of the GRAS gene family in rice and Arabidopsis[J]. Plant Molecular Biology, 2004, 54(3): 519-532.

    [29] Gupta S, Malviya N, Kushwaha H, et al. Insights into structural and functional diversity of Dof(DNA binding with one finger)transcription factor[J]. Planta, 2015, 1(7): 549-562.

    猜你喜歡
    香蕉
    香蕉有輻射嗎
    古代香蕉原來并不好吃
    軍事文摘(2024年4期)2024-01-09 09:07:14
    摘香蕉
    幼兒畫刊(2023年8期)2023-08-11 07:48:38
    你喜歡香蕉嗎?
    香蕉彎彎
    好吃的香蕉
    快樂語文(2020年30期)2021-01-14 01:05:38
    快手香蕉餅
    摘香蕉
    娃娃畫報(2018年4期)2018-08-15 12:38:26
    香蕉
    瓶里有香蕉
    香蕉精品网在线| 国产在视频线精品| 精品人妻熟女av久视频| 夜夜爽夜夜爽视频| 熟女电影av网| 久久久成人免费电影| av国产精品久久久久影院| 国产精品国产三级国产专区5o| 久久久久久久亚洲中文字幕| 欧美三级亚洲精品| 亚洲国产欧美在线一区| 亚洲国产色片| 亚洲丝袜综合中文字幕| 国产免费一级a男人的天堂| 最近最新中文字幕免费大全7| 亚洲精品久久午夜乱码| 中文字幕制服av| 人妻一区二区av| freevideosex欧美| 五月开心婷婷网| 免费看a级黄色片| a级毛片免费高清观看在线播放| 午夜福利视频1000在线观看| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 国产有黄有色有爽视频| 亚洲自偷自拍三级| 丝袜脚勾引网站| 欧美一级a爱片免费观看看| 99精国产麻豆久久婷婷| 国产精品人妻久久久影院| 亚洲综合精品二区| 久久精品国产亚洲av天美| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 人妻夜夜爽99麻豆av| 国产一区亚洲一区在线观看| 男人爽女人下面视频在线观看| 男女那种视频在线观看| 全区人妻精品视频| 啦啦啦在线观看免费高清www| 国产精品久久久久久av不卡| 国产在线一区二区三区精| 少妇高潮的动态图| 精品久久久久久电影网| 日本一二三区视频观看| 成人一区二区视频在线观看| 国产黄色免费在线视频| 久久久久久久午夜电影| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 久久这里有精品视频免费| 欧美精品一区二区大全| 国产亚洲最大av| 亚洲人与动物交配视频| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | 成人鲁丝片一二三区免费| 97超碰精品成人国产| 亚洲av中文av极速乱| 国产亚洲最大av| 秋霞在线观看毛片| 看免费成人av毛片| 日本午夜av视频| 久久精品久久精品一区二区三区| 亚洲国产精品成人久久小说| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 亚洲,欧美,日韩| 国产av码专区亚洲av| 99热网站在线观看| 精品一区二区三区视频在线| 亚洲精品一二三| 久久久午夜欧美精品| 国产亚洲最大av| 人妻系列 视频| 高清视频免费观看一区二区| 99久久精品热视频| 成年人午夜在线观看视频| 中文字幕久久专区| 久久99蜜桃精品久久| 久久综合国产亚洲精品| 亚洲精品国产av蜜桃| 伦理电影大哥的女人| 视频区图区小说| 亚洲高清免费不卡视频| 亚洲在线观看片| 日本黄大片高清| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91 | 六月丁香七月| 真实男女啪啪啪动态图| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 国精品久久久久久国模美| 午夜精品国产一区二区电影 | 一级毛片久久久久久久久女| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 永久网站在线| 男女边吃奶边做爰视频| 韩国高清视频一区二区三区| 国产黄片美女视频| 97超视频在线观看视频| 人妻少妇偷人精品九色| 亚洲无线观看免费| 日本wwww免费看| 国模一区二区三区四区视频| 成人欧美大片| 亚洲精品,欧美精品| 免费观看性生交大片5| 国产精品久久久久久久久免| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 欧美另类一区| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 一个人看的www免费观看视频| 亚洲综合色惰| 男人爽女人下面视频在线观看| 少妇的逼水好多| 久久99精品国语久久久| 欧美日韩国产mv在线观看视频 | 亚洲精品aⅴ在线观看| 久久久久久久午夜电影| 熟妇人妻不卡中文字幕| 国产免费一级a男人的天堂| 亚洲精品国产色婷婷电影| 亚洲成人一二三区av| 欧美激情久久久久久爽电影| 在线观看三级黄色| 婷婷色av中文字幕| av天堂中文字幕网| 精品一区在线观看国产| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 欧美区成人在线视频| xxx大片免费视频| 欧美xxxx性猛交bbbb| 久久久久久久久久成人| 一本色道久久久久久精品综合| 国产精品嫩草影院av在线观看| 久久这里有精品视频免费| 街头女战士在线观看网站| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 亚洲国产精品国产精品| 午夜福利高清视频| 久久6这里有精品| 国产大屁股一区二区在线视频| 日本黄大片高清| 激情 狠狠 欧美| 晚上一个人看的免费电影| 久久久久久久久久人人人人人人| 国国产精品蜜臀av免费| 国产乱人偷精品视频| 91久久精品电影网| 欧美zozozo另类| 真实男女啪啪啪动态图| 亚洲欧美日韩无卡精品| 亚洲精品日本国产第一区| 18+在线观看网站| 亚洲成人中文字幕在线播放| 亚洲国产精品成人久久小说| 亚洲色图av天堂| 国产成年人精品一区二区| 午夜激情福利司机影院| 三级经典国产精品| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| a级毛色黄片| 亚洲色图av天堂| 国产亚洲91精品色在线| 国产精品一二三区在线看| 五月开心婷婷网| 亚洲av福利一区| 国产精品国产三级国产专区5o| 99久久九九国产精品国产免费| 日日撸夜夜添| 亚洲精品456在线播放app| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 日本av手机在线免费观看| 极品少妇高潮喷水抽搐| 91aial.com中文字幕在线观看| 久久99热这里只频精品6学生| 国产乱人偷精品视频| 久久热精品热| 亚洲综合精品二区| 欧美日本视频| 亚洲av免费在线观看| 亚洲欧美日韩另类电影网站 | av在线蜜桃| 青青草视频在线视频观看| 直男gayav资源| 永久免费av网站大全| 久久综合国产亚洲精品| 可以在线观看毛片的网站| 日本午夜av视频| 99久国产av精品国产电影| 中文资源天堂在线| 久久久久久久久大av| 黄色视频在线播放观看不卡| 国产探花极品一区二区| 99热网站在线观看| 嘟嘟电影网在线观看| 国产午夜福利久久久久久| 久久影院123| 亚洲图色成人| 亚洲欧美日韩无卡精品| 最近的中文字幕免费完整| 伦理电影大哥的女人| 国产精品三级大全| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 亚洲色图综合在线观看| 一级毛片aaaaaa免费看小| 黄片wwwwww| 人妻少妇偷人精品九色| 国产男女超爽视频在线观看| 日韩成人av中文字幕在线观看| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 午夜日本视频在线| 毛片女人毛片| 亚洲经典国产精华液单| 久久综合国产亚洲精品| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 七月丁香在线播放| 中文字幕免费在线视频6| 午夜福利网站1000一区二区三区| 丰满少妇做爰视频| 黄色配什么色好看| 青春草亚洲视频在线观看| 伊人久久国产一区二区| 久久国产乱子免费精品| 亚洲成人久久爱视频| 白带黄色成豆腐渣| 综合色丁香网| 少妇的逼水好多| 国产成人免费观看mmmm| 国产爽快片一区二区三区| 亚洲av欧美aⅴ国产| 色播亚洲综合网| 午夜免费观看性视频| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 国产精品久久久久久精品古装| 免费观看在线日韩| 国精品久久久久久国模美| 99久久精品一区二区三区| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 久久久久国产精品人妻一区二区| 欧美xxⅹ黑人| 国产成人免费无遮挡视频| 成人欧美大片| 欧美精品国产亚洲| 最近最新中文字幕大全电影3| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 男插女下体视频免费在线播放| 国产成人freesex在线| 亚洲内射少妇av| 久久久久久久久久久丰满| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 国产亚洲av嫩草精品影院| 久久精品国产亚洲av涩爱| 九色成人免费人妻av| 熟妇人妻不卡中文字幕| 五月伊人婷婷丁香| 国产视频内射| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 欧美成人一区二区免费高清观看| 亚洲最大成人中文| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 男女那种视频在线观看| 国产成人91sexporn| 男人狂女人下面高潮的视频| freevideosex欧美| 成年人午夜在线观看视频| av天堂中文字幕网| 91在线精品国自产拍蜜月| 国产伦精品一区二区三区四那| 99热网站在线观看| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 欧美日韩在线观看h| av女优亚洲男人天堂| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 久久人人爽av亚洲精品天堂 | 中文字幕av成人在线电影| 久久午夜福利片| 欧美激情国产日韩精品一区| 国产精品精品国产色婷婷| 精品一区二区三卡| 在线观看三级黄色| 在线观看一区二区三区激情| 美女国产视频在线观看| 欧美高清性xxxxhd video| 国产精品偷伦视频观看了| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 秋霞在线观看毛片| 日韩av不卡免费在线播放| 国产亚洲av嫩草精品影院| 成人亚洲精品一区在线观看 | 一区二区三区免费毛片| 色综合色国产| 日本爱情动作片www.在线观看| 看黄色毛片网站| 国产一区亚洲一区在线观看| 国产高清三级在线| 亚州av有码| 别揉我奶头 嗯啊视频| 国产真实伦视频高清在线观看| 狂野欧美激情性bbbbbb| 日韩人妻高清精品专区| 男人爽女人下面视频在线观看| 欧美区成人在线视频| 91久久精品国产一区二区成人| 亚洲欧美成人精品一区二区| 97在线视频观看| 日韩视频在线欧美| 国产av不卡久久| 涩涩av久久男人的天堂| 少妇人妻久久综合中文| 99久久人妻综合| 日本色播在线视频| 久久久久性生活片| freevideosex欧美| 国产精品国产三级国产专区5o| av网站免费在线观看视频| 禁无遮挡网站| 国产黄片美女视频| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 亚洲精品国产av蜜桃| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 如何舔出高潮| 成人亚洲精品一区在线观看 | 男人和女人高潮做爰伦理| 欧美+日韩+精品| 高清日韩中文字幕在线| 午夜激情福利司机影院| kizo精华| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 国产黄色视频一区二区在线观看| 国产探花极品一区二区| 亚洲综合色惰| 成年人午夜在线观看视频| 欧美+日韩+精品| 精品午夜福利在线看| 如何舔出高潮| 九九在线视频观看精品| 精品久久国产蜜桃| 欧美潮喷喷水| 久久精品综合一区二区三区| 秋霞伦理黄片| 综合色av麻豆| 人人妻人人看人人澡| 欧美国产精品一级二级三级 | 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 最近最新中文字幕大全电影3| 亚洲国产av新网站| av在线app专区| 亚洲国产精品专区欧美| 观看免费一级毛片| 大码成人一级视频| 联通29元200g的流量卡| 九色成人免费人妻av| 亚洲三级黄色毛片| 黑人高潮一二区| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 久久精品国产自在天天线| 香蕉精品网在线| 亚洲天堂av无毛| 男人狂女人下面高潮的视频| 亚洲熟女精品中文字幕| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 欧美日韩精品成人综合77777| 亚洲精品456在线播放app| 欧美日韩视频精品一区| 如何舔出高潮| 日本wwww免费看| 国产在线一区二区三区精| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 亚洲图色成人| 各种免费的搞黄视频| 男女那种视频在线观看| 少妇的逼好多水| 国产欧美日韩精品一区二区| 2018国产大陆天天弄谢| 久久久精品免费免费高清| a级毛片免费高清观看在线播放| 少妇的逼水好多| 国产高清国产精品国产三级 | 深夜a级毛片| 美女高潮的动态| 亚洲真实伦在线观看| a级毛色黄片| 黄片无遮挡物在线观看| 极品教师在线视频| 久久99热这里只有精品18| 久久精品国产a三级三级三级| 精品久久久久久电影网| 国产成人a区在线观看| 国产成人精品婷婷| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 亚洲av一区综合| 久久久久久久久久成人| 一个人观看的视频www高清免费观看| 白带黄色成豆腐渣| 亚洲综合精品二区| 中文天堂在线官网| 韩国av在线不卡| av播播在线观看一区| 欧美丝袜亚洲另类| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 亚洲欧美日韩东京热| av免费在线看不卡| 激情 狠狠 欧美| 99热这里只有是精品50| 亚洲自拍偷在线| 少妇人妻精品综合一区二区| 国产午夜福利久久久久久| 嫩草影院入口| 欧美激情国产日韩精品一区| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91 | 久久久久久久久大av| 好男人在线观看高清免费视频| 国产一区二区三区综合在线观看 | av在线蜜桃| 最后的刺客免费高清国语| 白带黄色成豆腐渣| 久久影院123| 丝袜喷水一区| 日韩伦理黄色片| 欧美日韩亚洲高清精品| 欧美日韩在线观看h| 男人爽女人下面视频在线观看| 日韩,欧美,国产一区二区三区| av一本久久久久| 成人综合一区亚洲| 在线观看三级黄色| 天堂网av新在线| 亚洲国产精品专区欧美| 极品教师在线视频| 男人舔奶头视频| 好男人在线观看高清免费视频| 日本黄大片高清| 精品一区二区三区视频在线| 成人毛片60女人毛片免费| 97热精品久久久久久| 国产成人freesex在线| 黄色怎么调成土黄色| 看免费成人av毛片| 色吧在线观看| av线在线观看网站| 亚洲国产av新网站| 久久精品国产亚洲av天美| 亚洲天堂av无毛| 欧美3d第一页| 永久免费av网站大全| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 午夜免费男女啪啪视频观看| 久久久精品94久久精品| 亚洲av不卡在线观看| av免费观看日本| 美女视频免费永久观看网站| 五月伊人婷婷丁香| 久久久久久久国产电影| 日本午夜av视频| 男人狂女人下面高潮的视频| 国产永久视频网站| 国产 精品1| 边亲边吃奶的免费视频| 国内精品宾馆在线| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 亚洲欧美清纯卡通| 肉色欧美久久久久久久蜜桃 | 国产毛片a区久久久久| 免费观看性生交大片5| 成人特级av手机在线观看| 免费大片18禁| 人妻一区二区av| 国产男人的电影天堂91| 涩涩av久久男人的天堂| 免费电影在线观看免费观看| 校园人妻丝袜中文字幕| 最近最新中文字幕大全电影3| 国产成人免费观看mmmm| 亚洲美女搞黄在线观看| www.色视频.com| 观看免费一级毛片| 午夜激情久久久久久久| 免费少妇av软件| 亚洲自偷自拍三级| 一级爰片在线观看| 精品久久久久久久久av| a级一级毛片免费在线观看| 欧美国产精品一级二级三级 | 久久久色成人| 午夜福利网站1000一区二区三区| 国产成人aa在线观看| 亚洲精品aⅴ在线观看| 亚洲欧美一区二区三区国产| 只有这里有精品99| 欧美日韩亚洲高清精品| 日韩精品有码人妻一区| 中文字幕亚洲精品专区| 亚洲欧洲国产日韩| 成年av动漫网址| 在线观看一区二区三区| 韩国高清视频一区二区三区| 中文欧美无线码| 免费看av在线观看网站| 国产 一区精品| 晚上一个人看的免费电影| 婷婷色综合大香蕉| 成人亚洲精品av一区二区| 少妇丰满av| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| av免费观看日本| 中文字幕制服av| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 男人爽女人下面视频在线观看| 插逼视频在线观看| 精品久久久久久久末码| 国产男女超爽视频在线观看| 国精品久久久久久国模美| 欧美+日韩+精品| 青春草亚洲视频在线观看| 久久这里有精品视频免费| 亚洲最大成人av| 中文资源天堂在线| 色视频在线一区二区三区| 久久久精品免费免费高清| 在线观看三级黄色| 亚洲天堂国产精品一区在线| 国内揄拍国产精品人妻在线| 欧美极品一区二区三区四区| 中文欧美无线码| 亚洲av不卡在线观看| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 免费黄频网站在线观看国产| 777米奇影视久久| 亚洲丝袜综合中文字幕| 久久久精品94久久精品| 欧美日本视频| 日本爱情动作片www.在线观看| 看免费成人av毛片| 国产成人a∨麻豆精品| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 亚洲最大成人av| 国产伦精品一区二区三区四那| 听说在线观看完整版免费高清| 色5月婷婷丁香| 视频中文字幕在线观看| 天天一区二区日本电影三级| 91在线精品国自产拍蜜月| 女人久久www免费人成看片| 毛片一级片免费看久久久久| 久久久久久久久久久免费av| 成人无遮挡网站| 永久网站在线| 麻豆乱淫一区二区| 亚洲精品日韩av片在线观看| 亚洲国产成人一精品久久久| 亚洲怡红院男人天堂| 国产日韩欧美亚洲二区| 99热网站在线观看| av在线老鸭窝| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 亚洲av成人精品一区久久| 亚洲内射少妇av| 91精品一卡2卡3卡4卡| av在线天堂中文字幕| 精品少妇黑人巨大在线播放| 91久久精品国产一区二区成人| av天堂中文字幕网| 大香蕉97超碰在线| 91久久精品电影网| 国产视频内射| 少妇丰满av| 老女人水多毛片| 精品久久国产蜜桃| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 校园人妻丝袜中文字幕| 亚洲av二区三区四区| 插阴视频在线观看视频| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 最近2019中文字幕mv第一页| 黄片无遮挡物在线观看| 熟妇人妻不卡中文字幕| 色吧在线观看| 成人欧美大片| 视频中文字幕在线观看| 欧美最新免费一区二区三区| 大香蕉97超碰在线| 亚洲精品aⅴ在线观看| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 免费看a级黄色片| 99热这里只有精品一区| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频 | 日本wwww免费看| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 欧美精品国产亚洲| 欧美日本视频| 国产成人免费无遮挡视频| 肉色欧美久久久久久久蜜桃 | 久久久亚洲精品成人影院| 嘟嘟电影网在线观看| 久久久久久久久大av| 久久久精品免费免费高清| 嫩草影院新地址| 在线天堂最新版资源| 国产黄色视频一区二区在线观看| 精品人妻视频免费看| 亚洲精品一区蜜桃| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 久久亚洲国产成人精品v| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 日本免费在线观看一区| 51国产日韩欧美| eeuss影院久久| 99热这里只有是精品50| 搡老乐熟女国产| 成人免费观看视频高清| 色婷婷久久久亚洲欧美| 亚洲自拍偷在线| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 一级片'在线观看视频|