微波消解—分光光度法測定乳制品和特殊膳食食品中的磷

田洪蕓　田棟　任雪梅

摘要[目的]探索測定乳制品和特殊膳食食品中磷含量的方法。[方法]建立了微波消解前處理-分光光度法測定特殊膳食食品和乳制品中磷的方法，并將檢驗結(jié)果與標準規(guī)定的濕法消解處理方式進行比對。[結(jié)果]使用該方法所獲得的檢驗結(jié)果具有檢出限低、精密度好、安全快捷、有機酸消耗量少的優(yōu)勢。經(jīng)驗證，該方法準確度符合國家相關(guān)標準的要求。[結(jié)論]該試驗建立的方法對設(shè)備要求簡單，且操作簡便可行，可以在檢驗機構(gòu)中推廣應(yīng)用。

關(guān)鍵詞特殊膳食食品；乳制品；微波消解；精密度；準確度

中圖分類號TS207文獻標識碼

A文章編號0517-6611（2017）20-0091-04

Abstract[Objective]To explore a method for determination of phosphorus content in dairy products and special dietary food.[Method]A method was developed for the determination of phosphorus in special dietary foods and dairy products by microwave digestion before treatment.The results were compared with the standard method of wet digestion.[Result] The test results obtained by this method had the advantages of low detection limit，good precision，safe and fast and less consumption of organic acids.It has been proved that the accuracy of this method meets the requirements of relevant national standards.[Conclusion]The method had the advantages of using simple equipments，operating conveniently，and can be popularized and applied in inspection institutions.

Key wordsSpecial dietary food；Dairy products；Microwave digestion；Accuracy；Precision

磷是人體骨骼和牙齒的重要組成成分，此外還參與核酸、細胞膜、磷蛋白及某些輔酶的組成，在人體代謝、維持酸堿平衡、維持腎臟正常機能和傳達神經(jīng)刺激中具有重要作用。由于磷具有上述重要生理功能[1-6]，GB 10765—2010《食品安全國家標

準嬰兒配方食品》、GB 10767—2010《食品安全國家標準 較大嬰兒和幼兒配方食品》、GB 25596—2010《食品安全國家標準 特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品通則》、GB 29922—2013《食品安全國家標準 特殊醫(yī)學用途配方食品通則》、GB 10769—2010《食品安全國家標準 嬰幼兒谷類輔助食品》等特殊膳食食品產(chǎn)品標準中均對磷作出了相應(yīng)的限量規(guī)定[7-11]。

目前，特殊膳食食品和乳制品中磷的測定方法標準為GB 5413.22—2010《食品安全國家標準 嬰幼兒食品和乳品中磷的測定》[12]，該方法采用濕法消解前處理-分光光度法測定。消解過程中要使用濃硝酸、高氯酸等有機酸至少20 mL，由于樣品中蛋白質(zhì)、脂肪、糖類等有機物含量高，長時間加熱樣品具有安全隱患，且濕法消解空白值高，影響檢驗結(jié)果的準確性[13]。筆者采用微波消解代替濕法消解前處理，具有檢測周期短、前處理簡單、空白值低、試劑消耗量少的優(yōu)點，能大大提高工作效率[14-17]。

1材料與方法

1.1材料Millipore 超純水制備裝置；Mars 5微波消解系統(tǒng)，美國CEM公司；紫外-可見分光光度計，美國熱電公司；電子分析天平，梅特勒公司。濃硝酸；高氯酸；鉬酸銨；偏釩酸銨；2，6-二硝基酚；30%優(yōu)級純過氧化氫；嬰兒配方乳粉；較大嬰兒配方乳粉；特殊醫(yī)學用途嬰兒配方乳粉；調(diào)制乳粉；嬰幼兒配方谷粉；全脂乳粉。

1.2微波消解條件

準確稱取0.5 g（精確至0.000 1 g）樣品于聚四氟乙酸微波消解內(nèi)罐中，加入6 mL濃硝酸，2 mL過氧化氫于微波消解儀中消解，室溫放置10 min，蓋上內(nèi)蓋，旋緊外蓋，具體消解程序見表1。樣品消解完全后冷卻，將消解液轉(zhuǎn)移至試管中并于140 ℃趕酸，將消解液轉(zhuǎn)移至25 mL容量瓶中，定容、搖勻得到樣品溶液，同時做空白試驗。

1.3分光光度法測定樣品中的磷

樣品中磷的測定步驟參照GB 5413.22—2010《食品安全國家標準 嬰幼兒食品和乳品中磷的測定》。

2結(jié)果與分析

2.1前處理條件的選擇

磷屬于易揮發(fā)元素，特殊膳食食品和乳制品基質(zhì)蛋白質(zhì)、脂肪和糖類等有機化合物含量高，使用濕法消解前處理，有機酸消耗量大、檢測周期長、安全隱患多且空白值高，影響檢測結(jié)果的準確性。使用密閉的微波消解罐消解，有機酸消耗量小、安全高效且空白值低。通過程序控制前處理條件，可大大提高工作效率[18-19]。

2.2線性關(guān)系及樣品的檢出限、定量限

在波長660 nm處測定鉬藍的吸光度值對磷濃度繪制標準曲線（圖1），磷濃度在0～2.4 μg/mL范圍呈良好的一次線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)r為0.999 8，樣品檢測限（LOD）為20 mg/kg，樣品定量限（LOQ）為60 mg/kg。

2.3精密度試驗

采用該方法測定嬰兒配方乳粉、較大嬰兒配方乳粉、嬰幼兒配方谷粉、特殊醫(yī)學用途嬰兒配方乳粉、調(diào)制乳粉、液體乳樣品6份，計算磷元素含量的相對標準偏差（RSD），RSD范圍在0.004%～0.320% ，均小于5%，說明該方法精密度較高，結(jié)果詳見表2。

由表2可知，精密度試驗樣品的回收率符合GB/T27404—2008《實驗室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測》中對精密度試驗的要求[20]。

2.4加標回收試驗

在已知本底含量的考核樣品中，分別加入磷標準1 000 μg，按照“1.2”處理加標樣品，結(jié)果見表3。

由表3可知，加標回收試驗樣品的回收率符合GB/T27404—2008《實驗室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測》中對回收率試驗的要求。

2.5方法間比對結(jié)果

采用濕法消解和微波消解分別處理乳制品、特殊膳食食品和國家標準物質(zhì)，利用分光光度法測定樣品中磷含量，結(jié)果見表4、5。

由表4可知，將濕法消解和微波消解前處理獲得消解液使用分光光度法進行樣品中磷的測定，所得結(jié)果的相對偏差符合GB/T27404—2008《實驗室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測》中的要求。

由表5可知，使用2種前處理方法對特殊膳食食品和乳制品質(zhì)控樣品中的磷進行測定，2種方法所得數(shù)據(jù)的相對偏差符合GB/T27404—2008《實驗室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測》中的要求。

3結(jié)論

該試驗探索建立微波消解-分光光度法測定乳制品和特殊膳食食品中磷的方法，并將檢驗結(jié)果與標準規(guī)定的濕法消解處理方式進行比對。結(jié)果表明，使用微波消解前處理-分光光度法測定所獲得的檢驗結(jié)果具有檢出限低、精密度好、安全快捷、有機酸消耗量少的優(yōu)勢。該方法適用于蛋白質(zhì)、脂肪、糖類物質(zhì)含量高的樣品的測定，既能克服傳統(tǒng)濕熱消解有毒試劑消耗量大、安全隱患高、效率低的缺點，又可防止消解過程中磷的揮發(fā)損失，具有環(huán)保、安全、準確、高效的優(yōu)點，同時可以降低空白值，保證結(jié)果準確[21-23]。

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