漁用麻醉劑使用現(xiàn)狀和檢測技術(shù)研究進(jìn)展

李曉芹 朱振華 翟紋靜 王莉莉

摘要 隨著水產(chǎn)品交易市場的不斷擴大，為了保證水產(chǎn)品品質(zhì)及鮮活程度，麻醉劑的使用愈發(fā)普遍，其中漁用麻醉劑的安全隱患愈發(fā)受到關(guān)注，而我國在漁用麻醉劑方面的監(jiān)管卻突顯不足，對動物體內(nèi)麻醉劑殘留檢測技術(shù)的研究也比較缺乏。通過研究各國漁用麻醉劑使用現(xiàn)狀，提出我國建立相應(yīng)監(jiān)管措施的必要性。目前市場上漁用麻醉劑已被普遍使用，包括間氨基苯甲酸乙酯甲烷磺酸鹽（MS-222）和丁香酚類化合物，但我國還未建立相應(yīng)的檢測標(biāo)準(zhǔn)或基準(zhǔn)方法。對國內(nèi)外相關(guān)檢測方法進(jìn)行總結(jié)和比較，為后續(xù)方法研究提供理論支持。

關(guān)鍵詞 水產(chǎn)品；麻醉劑；使用現(xiàn)狀；檢測技術(shù)

中圖分類號 TS254.7 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A 文章編號 0517-6611（2017）29-0072-02

Research Progress in Detection Technology and Current Situation of Anesthetic Residues in Aquatic Products

LI Xiaoqin1，2，ZHU Zhenhua1，ZHAI Wenjing1，2 et al

（1. Suzhou Entryexit Inspection and Quarantine Bureau，Suzhou，Jiangsu 215104；2.Suzhou World Standard Testing Technology Co.， Ltd.， Suzhou，Jiangsu 215104）

Abstract With the expansion of the aquatic products trading market， the use of narcotics is becoming more and more common in order to ensure the quality and freshness of aquatic products. The safety concerns of fishery anesthetics have been paid more and more attention. However， the regulation of fishery anesthetics in China has been insufficient， and the research on detection techniques of anesthetic residues in animals is also scarce. By studying the current situation of the use of fishery anesthetics in various countries，it is necessary to establish corresponding regulatory measures in china. The article reviews the current detections of anesthetic residues with emphasis on MS-222 and phenol drug residues analytical techniques which are commonly used at present. The domestic and foreign relevant testing methods are compared， and summarize and provide theory support for the subsequent research.

Key words Aquatic products；Anesthetic residues；Current situation；Analytical techniques

基金項目 江蘇出入境檢驗檢疫局科技計劃項目（2017KJ21）。

作者簡介 李曉芹（1987—），女，江蘇徐州人，工程師，碩士，從事食品安全分析研究。

收稿日期 2017-08-11

水產(chǎn)品營養(yǎng)均衡，更符合現(xiàn)代人的健康生活飲食理念。隨著居民生活水平的不斷提高，對水產(chǎn)品的要求不僅停留在對數(shù)量、種類的追求上，在品質(zhì)、鮮活程度等方面的要求也不斷提高。近年來，鮮活水產(chǎn)的交易量不斷增長。

在物流過程中高密度活體裝卸、運輸，鮮活水產(chǎn)品處于不良環(huán)境中，如空間擁擠、溫度改變、氧氣消耗以及代謝廢物的積累等，這些不利的外部因素會導(dǎo)致魚體損傷，甚至出現(xiàn)死亡，降低商品價值，進(jìn)而影響其流通與銷售[1]。因此，在長途運輸中對水產(chǎn)品進(jìn)行有效地?；罹惋@得更為重要。長途運輸過程中對水產(chǎn)品保持鮮活是一個難題，低溫、給水、給氧、給二氧化碳、給藥都是常見的保鮮方式。有研究指出，在流通環(huán)節(jié)，水產(chǎn)品合格率明顯低于產(chǎn)地檢測的結(jié)果，表明在此環(huán)節(jié)中水產(chǎn)品可能存在使用違禁物質(zhì)或非食用添加物現(xiàn)象[2]。

麻醉劑具有鎮(zhèn)靜、安眠的作用，是一種降低傷亡、避免水產(chǎn)鮮度和品質(zhì)下降的有效方法，越來越廣泛地應(yīng)用到水產(chǎn)流通領(lǐng)域。筆者結(jié)合國內(nèi)外漁用麻醉劑使用現(xiàn)狀和研究進(jìn)展，從水產(chǎn)領(lǐng)域常見麻醉劑的種類、安全隱患、分析檢測技術(shù)等方面對漁用麻醉劑殘留研究現(xiàn)狀進(jìn)行概述。

1 麻醉劑作用機理

麻醉劑作用于機體的神經(jīng)系統(tǒng)，在一定時間內(nèi)使生物體維持在低消耗、低應(yīng)激的休眠狀態(tài)，新陳代謝減緩，同時降低氧氣消耗，減少二氧化碳及氨的排放。鮮活水產(chǎn)品在運輸?shù)倪^程中使用麻醉劑，可有效減弱對外界的反應(yīng)，降低死亡率，從而使運輸?shù)慕?jīng)濟效益最大化[1]。

2 漁用麻醉劑使用現(xiàn)狀概述

2.1 常見漁用麻醉劑種類

目前，國際上在漁業(yè)生產(chǎn)和科學(xué)研究中對漁用麻醉劑的應(yīng)用極為廣泛[3]。各國應(yīng)用于水產(chǎn)品保鮮作用中的麻醉劑種類很多，如間氨基苯甲酸乙酯甲烷磺酸鹽（MS-222）、丁香酚、鹽酸苯佐卡因、液態(tài)二氧化碳、苯唑卡因、芐咪甲酯、喹哪啶、2-苯氧乙醇、尿烷、三氯乙醛等近30種，其中大部分麻醉劑都因其安全隱患、成本或其他缺陷而沒有得到較好地應(yīng)用[3]。目前，水產(chǎn)領(lǐng)域使用最多的麻醉劑是MS-222和丁香酚類化合物。

2.2 MS-222

商品名稱有Finquel、Metacaine、魚安定、魚夫?qū)毜?，化學(xué)名稱為間氨基苯甲酸乙酯甲烷磺酸鹽，白色結(jié)晶或粉末，易溶于水，水溶液透明無色，耐高溫，其用藥濃度低、入麻快、復(fù)蘇快、無毒副作用。但由于價格較高，目前主要在金魚、中華鱘、施氏鱘、斑馬魚等觀賞魚和經(jīng)濟價值較高的魚類上使用[1]。

安全方面，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，MS-222進(jìn)入魚體后，主要蓄積于脾臟和肝臟，在肌肉中的含量甚微。MS-222在發(fā)達(dá)國家應(yīng)用比較廣泛，美國、歐盟、加拿大等國家允許其作為漁用麻醉劑在水產(chǎn)動物中使用。美國要求使用過MS-222的魚休藥期為21 d[4]，最大殘留量為1 μg/mL；加拿大要求休藥期為5 d。但這種藥物在許多國家仍然沒有被允許用作獸藥。如果水產(chǎn)品被宰殺之前使用了MS-222，其加工后的產(chǎn)品中可能存有殘留，攝入人體后會在人體中蓄積，導(dǎo)致產(chǎn)生一定的損害。副反應(yīng)表現(xiàn)為過敏、尿和造血紊亂，甚至可能致癌。

2.3 丁香酚類化合物

丁香酚類化合物包括丁香酚、甲基丁香酚、異丁香酚、甲基異丁香酚、乙酸丁香酚酯等，因其在漁用麻醉方面較其他麻醉劑具有成本低、效果好、殘留期短等特點，近年來受較多關(guān)注，主要產(chǎn)品如丁香油、AQUI-S。

丁香酚主要來自于丁香、肉豆蔻等植物花蕾及莖、葉提取的精油，無色或蒼黃色液體，有強烈丁香香氣，難溶于水，被廣泛應(yīng)用于牙科鎮(zhèn)痛和香料用食品添加劑。丁香酚類化合物具有很強的揮發(fā)性，藥效會隨著揮發(fā)逐漸減弱，與MS-222相比，其入麻時間和復(fù)蘇時間相對較長。

安全方面，日本、新西蘭、澳大利亞、智利、芬蘭等允許丁香油作為漁用麻醉劑，澳大利亞、智利、韓國、新西蘭等批準(zhǔn)異丁香酚作為漁用麻醉劑。日本肯定列表中規(guī)定丁香酚類化合物在水產(chǎn)品中的最高殘留量設(shè)定為50 ng/mL，規(guī)定休藥期為7 d。新西蘭曾規(guī)定食用魚中丁香酚的最高殘留限量為100 ng/mL，但隨后又予以撤銷。GB 2760—2014《食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》、美國香味料和萃取物制造者協(xié)會、歐洲食品安全局的香料物質(zhì)清單中均有丁香酚[5]。而美國和加拿大拒絕批準(zhǔn)丁香酚作為漁用麻醉劑使用。美國國家毒理學(xué)計劃認(rèn)為，丁香酚類化合物對嚙齒動物是致癌物或潛在的致癌物，其安全性值得懷疑，并將其劃分為第3類致癌物。此外，甲基丁香酚?；旌嫌诙∠阌?、AQUI-S等麻醉劑產(chǎn)品中，可能會對食品安全性造成影響。

2.4 我國漁用麻醉劑使用現(xiàn)狀

我國水產(chǎn)品質(zhì)量安全問題主要集中在生產(chǎn)和流通環(huán)節(jié)。目前，我國比較重視水產(chǎn)養(yǎng)殖過程中獸藥的使用，制定了相對完備的使用規(guī)范和限量標(biāo)準(zhǔn)。隨著漁業(yè)的發(fā)展，流通環(huán)節(jié)占據(jù)越來越重要的位置，獸藥在水產(chǎn)流通領(lǐng)域的應(yīng)用成為一種必然的趨勢，國際上也已普遍使用麻醉劑來進(jìn)行大規(guī)模的活魚運輸。

在我國，多家單位的聯(lián)合調(diào)研表明[5]，部分品種麻醉劑已經(jīng)在市面上悄然使用。但同時，我國對MS-222、丁香酚等麻醉劑在水產(chǎn)品中的使用并沒有制定相關(guān)的限量標(biāo)準(zhǔn)或政策法規(guī)，這給我國水產(chǎn)品中MS-222、丁香酚等的使用及監(jiān)管帶來不便。2010年廈門查獲一起用丁香酚麻醉活魚的案件，我國相關(guān)法規(guī)和信息缺乏的問題突顯出來。目前我國水產(chǎn)領(lǐng)域使用最多的麻醉劑是MS-222和丁香酚，但農(nóng)業(yè)部235公告中并無對MS-222和丁香酚使用的限量要求，也未查找到相應(yīng)的檢測方法。

3 漁用麻醉劑檢測方法概述

目前，國內(nèi)外用于獸藥殘留檢測的方法主要有氣相色譜法、高效液相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、高效毛細(xì)管電泳法、分光光度法等。國內(nèi)關(guān)于水產(chǎn)品中麻醉劑殘留檢測技術(shù)與方法的研究及應(yīng)用報道并不多見。

3.1 MS-222檢測技術(shù)

比色法檢測MS-222在較早的研究中有涉及，背景色干擾比較大，影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。液相色譜法也由于魚、蝦等基質(zhì)復(fù)雜，易受雜質(zhì)干擾，影響靈敏度[6]。Scherpenisse 等[7]采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用的方法測定魚體內(nèi)MS-222的殘留量，該方法靈敏較高，前處理繁瑣，MS-222在虹鱒、三文魚、羅非魚中的檢出限分別是05、06、0.6 μg/kg。朱敏等[8]建立了液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定水產(chǎn)品中MS-222殘留量的方法，使用50%的甲醇及乙酸-乙酸鈉緩沖溶液提取，提取液經(jīng)固相萃取柱凈化處理后用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行測定，檢出限為1.0 μg/kg。劉海新等[9]采用氣相色譜-質(zhì)譜法測定魚肉中MS-222殘留量，固相萃取柱凈化，檢出限為2.5 μg/kg。

3.2 丁香酚類化合物檢測技術(shù)

國內(nèi)外報道丁香酚類化合物的檢測多為生物樣品及藥品，主要有高效液相色譜法、氣相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用、薄層色譜法和毛細(xì)管電泳法等。目前針對MS-222和丁香酚類物質(zhì)的色譜檢測方法前處理比較簡單，有機提取溶劑提取后直接上機檢測，雜質(zhì)干擾重，檢出限較高，無法滿足復(fù)雜的水產(chǎn)品基質(zhì)中殘留限量的要求。

陳煥等[10]建立了同時檢測水產(chǎn)品中丁香酚、異丁香酚、甲基丁香酚、甲基異丁香酚、乙酰基異丁香酚5種丁香酚類麻醉劑殘留量的高效液相色譜方法。樣品經(jīng)提取、脫脂后，采用高效液相色譜進(jìn)行分析。丁香酚、異丁香酚和甲基異丁香酚定量限為0.05 mg/kg，甲基丁香酚、乙?；惗∠惴佣肯逓?.10 mg/kg。陳煥等[11]還建立了同時檢測羅非魚、南美白對蝦、鰻鱺以及梭子蟹肌肉樣品中水產(chǎn)品中丁香酚、甲基丁香酚、異丁香酚、甲基異丁香酚、乙酸丁香酚酯、乙酰基異丁香酚6種丁香酚類麻醉劑殘留量的分散固相萃取-氣相色譜檢測方法。丙酮提取后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮定容，分散固相萃取凈化，氣相色譜儀進(jìn)行測定。6種丁香酚類化合物定量限均為0.1 mg/kg。液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定丁香酚殘留量也有報道[5]。

3.3 漁用麻醉劑檢測技術(shù)發(fā)展趨勢

樣品前處理是麻醉劑殘留檢測的關(guān)鍵步驟。由于水產(chǎn)品樣品種類多，具有基質(zhì)復(fù)雜、干擾物質(zhì)多等特點，給麻醉劑殘留的分析與檢測帶來了一定的困難。高效、快速的樣品前處理與制備方法是漁用麻醉劑檢測技術(shù)研究重點之一[12]。固相萃取技術(shù)和分散固相萃取技術(shù)操作簡單、凈化效果好、成本低，是目前相關(guān)實驗室使用較廣泛、效果較好、易復(fù)制的前處理方法。

MS-222和丁香酚無明顯的色譜特征，而水產(chǎn)樣品很難達(dá)到凈化完全，導(dǎo)致結(jié)果易受本底干擾。質(zhì)譜法特異性強，對樣品凈化要求不高，在獸藥殘留檢測中，色譜質(zhì)譜聯(lián)用法以高靈敏度、抗基質(zhì)干擾性、高準(zhǔn)確性和高穩(wěn)定性成為權(quán)威的檢測方法。

4 結(jié)論

我國目前在水產(chǎn)流通領(lǐng)域監(jiān)管滯后，缺乏對漁用麻醉劑使用安全性的權(quán)威判定，如不及時加以引導(dǎo)和監(jiān)管，可能會引起公眾對漁用麻醉劑安全性的 擔(dān)憂和恐慌，不利于漁業(yè)經(jīng)濟的健康發(fā)展。因此，應(yīng)盡快制定漁用麻醉劑相關(guān)規(guī)范和制度，建立相應(yīng)檢測標(biāo)準(zhǔn)，健全管理規(guī)范，防止濫用的情況發(fā)生，并積極組織科研力量開發(fā)高效、低價、安全的漁用麻醉劑，從而對我國漁業(yè)流通及食品安全起到重要的保障作用[4]。

參考文獻(xiàn)

[1] 呂海燕，王群，劉歡，等.魚用麻醉劑安全性研究進(jìn)展[J].中國漁業(yè)質(zhì)量與標(biāo)準(zhǔn)，2013，3（2）：24-28.

[2]付曉蘋，彭婕，李晉成，等.流通環(huán)節(jié)水產(chǎn)品及暫養(yǎng)水中孔雀石綠和麻醉劑風(fēng)險監(jiān)測[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報，2016，7（12）：5040-5045.

[3] 呂書為，雷紅濤，孫遠(yuǎn)明.魚用麻醉劑安全性研究進(jìn)展[J].食品科學(xué)，2012，33（11）：267-270.

[4] 李亞菲.淺析麻醉劑在水產(chǎn)品中的研究現(xiàn)狀及措施[J].陜西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015，61（12）：66-67.

[5]趙東豪，王強，王旭峰，等.超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測魚肉和暫養(yǎng)水中丁香酚殘留量[J].食品科學(xué)，2016，37（24）：252-256.

[6] KIESSLING A，JOHANSSON D，ZAHL I H，et al.Pharmacokinetics，plasma cortisol and effectiveness of benzocaine，MS-222 and isoeugenol measured in individual dorsal aortacannulated Atlantic salmon（Salmo salar）following bath administration[J].Aquaculture，2009，286（3/4）：301-308.

[7] SCHERPENISSE P，BERGWERFF A.Determination of residues oftricaine in fish using liquid chromatography tandem mass spectrometry[J].Analytica chimica acta，2007，586（1/2）：407-410

[8] 朱敏，孫偉紅，邢麗紅，等.液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定水產(chǎn)品中麻醉劑MS-222殘留[J].分析試驗室，2012，31（6）：59-62.

[9] 劉海新，張農(nóng)，余穎，等.氣相色譜-質(zhì)譜法檢測魚肉中MS-222殘留[J].福建水產(chǎn)，2013，35（6）：441-447.

[10] 陳煥，黃和，高平，等.高效液相色譜法測定水產(chǎn)品中丁香酚類麻醉劑的殘留量[J].食品與發(fā)酵工業(yè)，2014，40（12）：156-160.

[11] 陳煥，黃和，高平，等.分散固相萃取-氣相色譜法同時測定水產(chǎn)品中六種丁香酚類麻醉劑的殘留量[J].食品工業(yè)科技，2015，36（8）：88-92.

[12] 李晉成，劉歡，吳立冬，等.動物體內(nèi)麻醉劑殘留檢測技術(shù)研究進(jìn)展[J].食品科學(xué)，2014，35（5）：251-256.