模擬低溫對(duì)龍眼果實(shí)發(fā)育及其果皮H2O2代謝的影響

楊為海 鄒明宏 曾輝 萬繼鋒 張漢周 石勝友 陸超忠

摘 要 以3年生‘儲(chǔ)良龍眼盆栽樹為試驗(yàn)材料，于花后28 d時(shí)采取模擬低溫（晝夜15/10 ℃）處理，研究該處理對(duì)龍眼果實(shí)發(fā)育及其果皮過氧化氫（H2O2）含量、過氧化物酶（POD）活性與過氧化氫酶（CAT）活性的影響，以常溫（晝夜28/23 ℃）處理為對(duì)照。結(jié)果表明：模擬低溫處理后的龍眼成熟果實(shí)單果重明顯偏小、發(fā)育期顯著增加，主要是延長了果實(shí)發(fā)育前期，但其累積落果率與對(duì)照差異不顯著。模擬低溫期間，果實(shí)生長緩慢，落果較少，果皮POD、CAT活性與H2O2含量均低于對(duì)照；但從處理后43 d起開始解除模擬低溫后，果實(shí)發(fā)育迅速，落果劇烈，果皮POD、CAT活性及H2O2含量均呈先升后降的變化趨勢，且在果實(shí)發(fā)育中后期均明顯高于對(duì)照。這表明，模擬低溫抑制了果實(shí)生長、延長了果實(shí)發(fā)育期，溫度驟然回升引起果皮H2O2的爆發(fā)及果皮抗氧化酶活性的提高，進(jìn)而誘導(dǎo)了果實(shí)大量脫落。

關(guān)鍵詞 龍眼；果實(shí)發(fā)育；模擬低溫；過氧化氫

中圖分類號(hào) S667.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A

Abstract This study was to investigate the effects of simulated low temperature（15/10 ℃， day/night）， treated at 28 days after anthesis in the phytotron， on the fruit development and the pericarp hydrogen peroxide（H2O2）content and its peroxidase（POD）and catalase（CAT）activities in the three-year-old potted trees of longan（Dimocarpus longan Lour. cv. Chuliang）， and the treatment of warm temperature（28/23 ℃， day/night）was used as the control. The results showed that a smaller fruit at harvest and a longer period of fruit development chiefly due to a longer early fruit development were significantly occurred in the potted longan trees after treatment of simulated low temperature， while there was no significant difference in the cumulative fruit drop rate compared to those exposed to the control temperature regime. Accompanied by the slower fruit growth and the fewer fruit drop during simulated low temperature， the H2O2 content and POD， CAT activities of pericarp were also lower than those of the control. However， the rapid fruit development and the severe fruit abscission were obviously occurred after removing low temperature from 43 d after treatment， along with the distinctly changes of increasing firstly and decreasing later in the content of H2O2 and the activities of POD and CAT in pericarp which were clearly higher than those of the control in the mid-late stage of fruit growth， suggested that simulated low temperature repressed fruit growth and extended the period of fruit development， and an abrupt raised temperature caused the outburst of H2O2 and the increase of antioxidant enzymes activities in pericarp and thus induced the severe fruit abscission.

Key words longan； fruit development； simulated cold temperature； hydrogen peroxide

doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2017.03.008

龍眼（Dimocarpus longan Lour.）是原產(chǎn)中國南方的特色亞熱帶常綠果樹，主要分布在廣西、福建、海南等?。▍^(qū)）[1]。近十年來，中國龍眼種植面積略有下降，但收獲面積卻在逐年增加，已成為中國華南地區(qū)最具國際競爭力的水果之一。然而，由于正造龍眼的收獲期相對(duì)集中且鮮果不耐貯藏、貨架期短，產(chǎn)銷矛盾較突出，造成龍眼價(jià)格偏低、產(chǎn)業(yè)效益較低。應(yīng)用氯酸鉀誘導(dǎo)龍眼反季節(jié)成花，實(shí)現(xiàn)反季節(jié)龍眼生產(chǎn)，可延長鮮果供應(yīng)期，提高市場競爭力。但是，反季節(jié)龍眼開花、座果和果實(shí)發(fā)育均處于不利的氣候環(huán)境（秋冬季干旱、冬春季低溫和夏季高溫）下，造成反季節(jié)龍眼果實(shí)發(fā)育生理障礙現(xiàn)象十分嚴(yán)重，成為龍眼反季節(jié)生產(chǎn)的瓶頸[2-3]。

低溫、高溫、干旱等各種逆境是限制植物生長發(fā)育、影響作物產(chǎn)量與品質(zhì)形成的主要非生物脅迫因素。一般認(rèn)為，龍眼開花坐果的適宜日均溫約為20～25 ℃[4]，幼果發(fā)育期遇連續(xù)低溫或低溫陰雨天氣可導(dǎo)致嚴(yán)重落果[5]。與正造龍眼明顯不同，越冬反季節(jié)龍眼果實(shí)發(fā)育所經(jīng)歷的氣溫較低，尤其是果實(shí)發(fā)育早期遭遇了冬春季的低溫與溫濕度劇烈波動(dòng)的不利環(huán)境[6]。有研究表明，低溫脅迫不僅能誘導(dǎo)果實(shí)脫落[5-6]，還影響著果實(shí)發(fā)育進(jìn)程及其最終大小[7-8]。但目前國內(nèi)外對(duì)越冬反季節(jié)龍眼果實(shí)發(fā)育及其相關(guān)生理障礙發(fā)生機(jī)制的研究較少。

逆境脅迫下，植物體內(nèi)活性氧大量積累，導(dǎo)致細(xì)胞或組織受到氧化脅迫，造成生理性傷害[9-10]。H2O2是一種重要且相對(duì)穩(wěn)定的活性氧，可在細(xì)胞間通過跨膜運(yùn)輸方式迅速擴(kuò)散[11]。低溫脅迫期間，植物通過增加SOD等H2O2產(chǎn)生酶類的活性和抑制POD、CAT等H2O2清除酶類的活性來積累H2O2，但H2O2的過度積累可直接破環(huán)細(xì)胞大分子組份而造成氧化傷害，同時(shí)也通過信號(hào)分子功能調(diào)節(jié)許多生理過程中的基因表達(dá)[11-14]。研究表明，H2O2可促進(jìn)辣椒葉片[13]與豆葉柄[15]的脫落；在脫落誘導(dǎo)過程中，蘋果幼果[16]及橄欖成熟果實(shí)離層[17]中的H2O2含量不斷增加；而活性氧清除酶類活性的增加可延遲番茄花和果實(shí)的脫落[18]。這些研究暗示著H2O2參與了脫落調(diào)控，但其作用機(jī)制仍未清楚。

本試驗(yàn)通過人工氣候室模擬冬春季低溫，研究模擬低溫對(duì)龍眼果實(shí)發(fā)育的影響，探索低溫誘導(dǎo)龍眼果皮發(fā)生的相關(guān)生理變化，以期為越冬反季節(jié)龍眼栽培生產(chǎn)制定相關(guān)技術(shù)措施提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

于龍眼自然開花后28 d，將8株3年生的樹冠大小、開花坐果較一致的‘儲(chǔ)良龍眼盆栽樹放置人工氣候室進(jìn)行模擬試驗(yàn)。按照龍眼生長對(duì)積溫（≥10 ℃）的需求[19]，結(jié)合越冬反季節(jié)龍眼果實(shí)發(fā)育早期所處的溫度環(huán)境[6]，將其中4株盆栽樹模擬低溫處理，溫度設(shè)置方法為：處理后0 d將晝夜溫度分別調(diào)為20 ℃和15 ℃，處理后1 d時(shí)再分別降至15 ℃和10 ℃，并維持此晝夜溫度至處理后42 d；處理后43～46 d按日均約升溫3 ℃的程序?qū)円箿囟壬郎刂聊M常溫環(huán)境（晝夜溫度分別為28 ℃和23 ℃），并保持至處理后133 d果實(shí)成熟時(shí)。另4株盆栽樹為對(duì)照，始終置于模擬常溫環(huán)境下。兩個(gè)人工氣候室均模擬自然光照，光照強(qiáng)度約為15 000 lx，相對(duì)濕度維持在85%左右，并保持正常供水。

1.2 方法

1.2.1 果實(shí)發(fā)育動(dòng)態(tài)和落果發(fā)生情況調(diào)查 果實(shí)發(fā)育從處理后0 d起開始調(diào)查，直至果實(shí)成熟采收時(shí)結(jié)束。在每株龍眼盆栽樹上各選3個(gè)果穗進(jìn)行標(biāo)記，并在每個(gè)果穗上選擇2個(gè)果實(shí)作為調(diào)查果，測量其果實(shí)橫徑，并調(diào)查每一穗的落果數(shù)，計(jì)算累積落果率。與此同時(shí)，在每株盆栽樹未標(biāo)記的果穗上各取4個(gè)果實(shí)，去果柄后稱量其單果重，并立即分離出果皮，經(jīng)液氮速凍后置于-80 ℃冰箱中備用。

1.2.2 H2O2含量測定 參照Zhou等[20]的方法并有所改動(dòng)。取0.5 g果皮樣品，加入5 mL預(yù)冷的三氯乙酸溶液（5%，V/V）和0.2 g聚乙烯吡咯烷酮，待冰浴研磨后于4 ℃下離心20 min，將上清液用25%（V/V）氨水調(diào)pH值至8.4，即為H2O2粗提液。取1 mL粗提液，于30 ℃水浴30 min后，加入1 mL顯色液于500 nm處測定OD值，以1 mL粗提液中加入100 μg過氧化氫酶作為空白。顯色液的配制：將0.01 g 4-氨基安替吡啉與0.01 g苯酚溶于50 mL 0.1 mol/L醋酸緩沖液（pH5.6）中，再加入5 mg辣根過氧化物酶。標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：將5.7 μL 30 % H2O2溶于50 mL 5%三氯乙酸溶液（pH8.4），配制成1 mmol/L H2O2-三氯乙酸溶液，按0、50、100、150、200、250 μmol/L制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，重復(fù)3次。

1.2.3 過氧化物酶（POD）和過氧化氫酶（CAT）活性測定 稱取0.5 g果皮樣品，加入5 mL含1%聚乙烯吡咯烷酮的磷酸緩沖液（0.05 mol/L，pH7.8）進(jìn)行冰浴研磨，在10 000 ×g下離心15 min，上清液即為粗酶提取液。

POD活性測定參照曾韶西等[21]方法，略有改進(jìn)。取0.1 mL酶液、0.95 mL 0.2%愈創(chuàng)木酚和1.95 mL H2O2（0.1%，V/V），測定OD470 nm值在3分鐘內(nèi)的變化，以每min OD值變化0.01表示一個(gè)酶活力單位（U），按“酶活力單位/克鮮重分鐘（U/g FW·min）”表示酶活性。

CAT活性采用氧電極法[22]測定，在反應(yīng)槽內(nèi)注入2 mL含0.15% H2O2的磷酸緩沖液（50 mmol/L，pH7.8），打開磁力攪拌器，待氧信號(hào)穩(wěn)定2 min后，用進(jìn)樣器準(zhǔn)確注入100 μL待測酶液樣品，反應(yīng)3 min，記錄放氧動(dòng)態(tài)。所采用的氧電極儀為Hansatech Oxygraph，測定溫度為25 ℃。根據(jù)放氧曲線的斜率，計(jì)算酶活性，單位表示為nmol O2/g FW·min。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

數(shù)據(jù)以平均值表示，采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 模擬低溫和常溫處理的果實(shí)發(fā)育比較

對(duì)盆栽龍眼進(jìn)行模擬冬季低溫試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，在模擬前期低溫處理期間（處理后0～42 d）龍眼果實(shí)生長緩慢，其單果重和果實(shí)直徑僅分別增加了0.04 g和0.05 cm，但與此期相對(duì)應(yīng)的對(duì)照果實(shí)生長明顯較快，其單果重和果實(shí)直徑分別顯著增加了1.13 g和0.75 cm（p<0.05）；在解除模擬低溫、恢復(fù)至常溫環(huán)境后（處理后46～133 d），果實(shí)生長速率明顯加快，至果實(shí)成熟時(shí)其單果重和果實(shí)直徑分別達(dá)到了6.26 g和2.04 cm，但比對(duì)照成熟果實(shí)的單果重（7.30 g）和果實(shí)直徑（2.28 cm）分別下降了1.04 g和0.24 cm，并且二者之間的果實(shí)重量差異達(dá)到顯著性水平（圖1）（p<0.05）。

模擬低溫處理和對(duì)照處理的龍眼果實(shí)發(fā)育期也存在明顯差異（圖1-A）。模擬低溫處理明顯延長了龍眼果實(shí)的發(fā)育期，其在處理后133 d（即花后161 d）時(shí)果實(shí)才達(dá)到成熟，比對(duì)照果實(shí)發(fā)育至成熟時(shí)（處理后98 d）的發(fā)育期（花后126 d）推遲了35 d。然而，這種發(fā)育期的差異主要表現(xiàn)在果實(shí)發(fā)育前期（即果實(shí)緩慢生長期），此期模擬低溫處理和對(duì)照處理的發(fā)育時(shí)間分別為106 d和70 d，二者相差36 d，而在果實(shí)發(fā)育后期（即果實(shí)快速生長期）二者的發(fā)育時(shí)間基本相當(dāng)。

2.2 模擬低溫和常溫處理的落果率比較

模擬低溫處理與對(duì)照處理的龍眼累積落果率均持續(xù)增加，但不同時(shí)期落果幅度差異較大（圖2）。在前期低溫模擬期間，果實(shí)脫落較少，其累積落果率僅為8.4%，而對(duì)照處理此期的累積落果率較大，達(dá)到31.2%，二者之間差異顯著；在解除模擬前期低溫處理、后期恢復(fù)至常溫環(huán)境后，其果實(shí)累積落果率迅速增加，至果實(shí)成熟時(shí)此期的累積落果率高達(dá)66.1%，明顯高于對(duì)照此期的累積落果率（40.6%）。就整個(gè)發(fā)育期而言，模擬低溫處理的累積落果率為74.5%，與對(duì)照累積落果率（71.8%）基本相當(dāng)，二者差異不明顯。這說明模擬前期低溫處理雖然減輕了果實(shí)脫落，但恢復(fù)至常溫環(huán)境后卻誘發(fā)大量落果。

2.3 模擬低溫和常溫處理的H2O2含量比較

模擬低溫處理的龍眼果皮H2O2含量變化與對(duì)照基本一致，總體呈波動(dòng)性下降的趨勢（圖3）。在模擬前期低溫處理期間，其果皮H2O2含量從處理后0 d時(shí)的46.31 μg/g FW下降至模擬低溫結(jié)束時(shí)（處理后42 d）的22.77 μg/g FW，但在解除低溫、剛恢復(fù)至常溫后（處理后46 d），其果皮H2O2含量迅速增加至峰值（34.70 μg/g FW），之后便持續(xù)下降。然而，對(duì)照果皮H2O2含量是在處理后0～22 d時(shí)由40.52 μg/g FW下降至27.79 μg/g FW，緊接著在果實(shí)剛開始轉(zhuǎn)入快速生長期時(shí)（處理后42 d），其果皮H2O2含量迅速增加至35.29 μg/g FW，此后便呈波動(dòng)下降趨勢。相比較之下，模擬低溫處理的龍眼果皮H2O2含量在前期低溫處理期間低于對(duì)照，而在后期恢復(fù)至常溫環(huán)境后其果皮H2O2含量明顯高于對(duì)照。

2.4 模擬低溫和常溫處理的果皮POD與CAT酶活性比較

模擬低溫處理的龍眼果皮POD活性變化與對(duì)照相類似，均呈先升高后下降的趨勢（圖4-A）。在處理后22 d 之前，處于模擬低溫處理的果皮POD活性和對(duì)照果實(shí)緩慢生長期的活性基本相當(dāng)。但從處理后42 d開始，模擬低溫處理的果皮POD活性因升溫至常溫后先緩慢后快速增加，至處理后102 d時(shí)達(dá)到高峰（9334 U/g FW·min）；而對(duì)照果實(shí)因開始轉(zhuǎn)入快速生長期，其果皮POD活性也迅速升高，至處理后64 d時(shí)達(dá)到高峰（7 872 U/g FW·min）。比較而言，在果實(shí)發(fā)育中后期，模擬低溫處理的果皮POD活性明顯高于對(duì)照。

模擬低溫處理的龍眼果皮CAT活性變化與對(duì)照也較一致，大體上呈先升高后下降的趨勢（圖4-B）。在處理后42 d 之前，模擬低溫處理的果皮CAT活性比較穩(wěn)定；但從低溫解除、升溫至常溫后，其果皮CAT活性迅速增加，至處理后102 d時(shí)達(dá)到高峰。然而，對(duì)照果皮CAT活性在處理后0～64 d時(shí)快速升高，之后便下降。比較而言，模擬低溫處理的果皮CAT活性在其果實(shí)發(fā)育中后期要高于對(duì)照，而在其果實(shí)發(fā)育前期卻明顯低于對(duì)照。

3 討論

對(duì)大多數(shù)果樹而言，果實(shí)大小主要是由細(xì)胞數(shù)目和細(xì)胞體積決定的[23]。一般情況下，果實(shí)細(xì)胞分裂對(duì)果實(shí)重量的影響比細(xì)胞膨大更明顯[24-25]，但細(xì)胞分裂多發(fā)生在果實(shí)發(fā)育早期，故此期影響細(xì)胞分裂的因素均會(huì)影響果實(shí)大小[26]。在眾多環(huán)境因子中，溫度是影響果實(shí)大小形成的主要因子。研究表明，經(jīng)歷了較冷涼溫度的早花果實(shí)要比其晚花果實(shí)大[27-29]，并認(rèn)為果實(shí)發(fā)育前期的較冷涼溫度有利于其細(xì)胞分裂和大果的最終形成[29-30]。然而，越冬反季節(jié)龍眼成熟果實(shí)明顯偏小，被認(rèn)為是冬春季的不利氣候條件使得其果皮發(fā)育不良，進(jìn)而限制了果實(shí)生長[31]；經(jīng)套袋處理提高其早期果實(shí)發(fā)育的微環(huán)境溫度，可顯著增加其最終果實(shí)大小[32]。本研究中，龍眼果實(shí)發(fā)育早期由于遭遇了模擬低溫處理，抑制了早期果實(shí)的生長，而解除模擬低溫、恢復(fù)至常溫環(huán)境后其果實(shí)并沒有發(fā)生補(bǔ)償性快速生長，致使其成熟果實(shí)大小顯著減少。這表明晝夜15/10 ℃的模擬低溫使龍眼果實(shí)發(fā)育遭受到了脅迫，減少了果實(shí)生長潛力及其果實(shí)大小。

溫度也決定著果實(shí)發(fā)育的進(jìn)程。對(duì)柑橘[28]、荔枝[29，33]等果實(shí)的研究表明，較高的溫度可加快果實(shí)發(fā)育，使果實(shí)提前成熟。然而，溫度對(duì)果實(shí)發(fā)育進(jìn)程的影響體現(xiàn)在不同的果實(shí)發(fā)育時(shí)期。對(duì)‘Elstar蘋果果實(shí)發(fā)育的控溫試驗(yàn)表明，果實(shí)發(fā)育前期的溫度對(duì)其發(fā)育期的影響要比果實(shí)發(fā)育中后期的大[34]。Suzuki等[35]發(fā)現(xiàn)高溫（20 ℃和25 ℃）下日本杏‘Nanko的果實(shí)發(fā)育期比低溫（10 ℃和15 ℃）下的短10 d，其原因是相對(duì)的高溫條件縮短了果實(shí)發(fā)育的第Ⅰ期和第Ⅲ期。本研究結(jié)果表明，模擬低溫處理明顯增加了龍眼果實(shí)的發(fā)育期，并且主要是延長了果實(shí)發(fā)育前期，也說明果實(shí)發(fā)育前期的模擬低溫導(dǎo)致了龍眼果實(shí)發(fā)育緩慢，這種情形與越冬反季節(jié)龍眼相似[6]。

龍眼在一般年份自然落果并不嚴(yán)重，主要集中在果實(shí)發(fā)育早期（花后24 d之前）和假種皮快速膨大期（花后66 d之后），其原因主要分別與授粉受精和樹體營養(yǎng)狀況有關(guān)[36]。然而，越冬反季節(jié)龍眼果實(shí)發(fā)育期間遭遇的冬春季低溫是導(dǎo)致其劇烈落果的主要原因[3，6]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，對(duì)照龍眼果實(shí)脫落主要發(fā)生在其幼果發(fā)育的花后28～40 d（即處理后12 d之前）以及假種皮快速膨大的花后74 d（即處理后46 d）之后，相對(duì)于黃輝白等[36]的報(bào)道有所推遲，可能與模擬的光照與溫度（28/23 ℃）均不及于其自然環(huán)境而導(dǎo)致光合效能較低、同化物積累不足有關(guān)。然而，在恒定低溫（15/10 ℃）模擬期間（處理后42 d前），龍眼果實(shí)脫落較少發(fā)生，而解除模擬低溫后溫度的驟然回升則誘發(fā)大量落果，但并未出現(xiàn)比對(duì)照或者自然越冬反季節(jié)龍眼更為嚴(yán)重的落果[6]。這可能有多方面的原因：其一，模擬的溫度不夠低，未能造成嚴(yán)重的脅迫反應(yīng)；其二，模擬的是相對(duì)恒定的低溫，而非如越冬反季節(jié)龍眼經(jīng)歷多次寒潮且伴隨溫度的劇變。

H2O2是植物體響應(yīng)低溫脅迫所產(chǎn)生的一種非常重要的活性氧，可通過主動(dòng)提高抗氧化酶（CAT、POD等）的活性以減少體內(nèi)H2O2積累所造成的氧化損傷[10-12，14]。但H2O2的過度積累不僅使植物細(xì)胞功能遭受不可修復(fù)性的喪失，還對(duì)植物器官脫落具有重要的調(diào)控作用[13，15-18]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，模擬低溫處理與對(duì)照的龍眼果皮H2O2含量均隨果實(shí)發(fā)育呈波動(dòng)下降趨勢。然而，對(duì)照果皮H2O2含量在其果實(shí)剛開始轉(zhuǎn)入快速生長期時(shí)（處理后42 d）達(dá)到一個(gè)高峰，可能是因其快速生長時(shí)果皮須承受來自假種皮迅速膨大產(chǎn)生的機(jī)械脅迫所引起的，因?yàn)橐延袡C(jī)械脅迫誘發(fā)H2O2大量發(fā)生的報(bào)道[37-38]。同樣，模擬低溫處理的果皮H2O2在由模擬低溫恢復(fù)至常溫時(shí)（處理后46 d）也驟然爆發(fā)，這可能是其溫度驟然大幅升高所誘導(dǎo)產(chǎn)生的。與果皮H2O2含量變化趨勢相反，模擬低溫處理與對(duì)照的果皮CAT及POD活性在果實(shí)成熟前是呈不斷增加的態(tài)勢。但是，當(dāng)果皮H2O2含量發(fā)生高峰時(shí)，二者果皮的POD及CAT活性則開始劇烈增加，說明H2O2的大量產(chǎn)生會(huì)誘導(dǎo)抗氧化酶類活性的提高[12]；同時(shí)，此期也正值二者的累積落果率開始進(jìn)入迅速增長階段，這表明龍眼果皮H2O2爆發(fā)，造成果實(shí)受到了氧化損害，并誘導(dǎo)了果實(shí)脫落。

參考文獻(xiàn)

[1] 盧美英， 歐世金， 徐炯志， 等. 大烏圓龍眼果實(shí)生長發(fā)育特性和生理落果規(guī)律觀察[J]. 中國南方果樹， 2004， 33（4）： 28-29.

[2] 曾祥有， 黎華壽， 曾運(yùn)友.不同季節(jié)施用KCIO3化學(xué)調(diào)控劑對(duì)龍眼促花與果實(shí)品質(zhì)的影響[J]. 生態(tài)科學(xué)， 2002， 21（3）： 220-222.

[3] 黃旭明， 陸潔梅， 王惠聰. 氯酸鹽在龍眼生產(chǎn)上的運(yùn)用和研究現(xiàn)狀[J]. 中國南方果樹， 2004， 33（3）： 29-30.

[4] 鐘思強(qiáng)， 黃黨源. 影響龍眼開花結(jié)果的因素及增產(chǎn)措施[J]. 廣西科學(xué)院學(xué)報(bào)， 2001， 17（1）： 27-32.

[5] 鄧九生， 黃在猛. 龍眼荔枝的果實(shí)發(fā)育與調(diào)控[J]. 廣西熱作科技， 1998， （2）： 1-5.

[6] Yang W H， Zhu X C， Deng S C， et al. Developmental problems in over-winter off-season longan fruit. I： Effect of temperatures[J]. Scientia Horticulturae， 2010a， 126： 351-358.

[7] 耿秀芬， 周廣學(xué). 溫度條件對(duì)草莓生長發(fā)育及果實(shí)膨大的影響[J]. 遼寧農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報(bào)， 2004， 6（3）： 18-20.

[8] 李建國， 黃輝白， 黃旭明. 妃子笑荔枝早花果和晚花果大小不同與溫度的關(guān)系[J]. 果樹學(xué)報(bào)， 2004， 21（1）： 37-41.

[9] Miller G， Suzuki N， Ciftci-Yilmaz S， et al. Reactive oxygen species homeostasis and signalling during drought and salinity stresses[J]. Plant Cell Environment， 2010， 33： 453-467.

[10] Petrov V， Hille J， Mueller-Roeber B， et al. ROS-mediated abiotic stress-induced programmed cell death in plants[J]. Frontier in Plant Science， 2015， 6： 69.

[11] Saxena I， Srikanth S， Chen Z. Cross talk between H2O2 and interacting signal molecules under plant stress response[J]. Frontier in Plant Science， 2016， 7： 570

[12] Prasad T K， Anderson M D， Martin B A， et al. Evidence for chilling-induced oxidative stress in maize seedlings and a regulatory role for hydrogen peroxide[J]. The Plant Cell， 1994， 6： 65-74.

[13] Sakamoto M， Munemura I， Tomita R， et al. Involvement of hydrogen peroxide in leaf abscission signaling， revealed by analysis with an in vitro abscission system in Capsicum plants[J]. The Plant Journal， 2008， 56 （1）： 13-27.

[14] 楊 楊， 申 琳， 生吉萍， 等. 外源NO對(duì)采后芒果果實(shí)低溫脅迫后H2O2代謝的影響[J]. 中國農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào)， 2013， 15（2）： 131-136.

[15] Ueda J， Morita Y， Kato J. Promotive effect of C18-unsaturated fatty acids on the abscission of bean petiole explants[J]. Plant and Cell Physiology， 1991， 32（7）： 983-987.

[16] Botton A， Eccher G， Forcato C， et al. Signaling pathways mediating the induction of apple fruitlet abscission[J]. Plant Physiology， 2011， 155（1）： 185-208.

[17] Gil-Amado J A， Gomez-Jimenez M C. Regulation of polyamine metabolism and biosynthetic gene expression during olive mature-fruit abscission[J]. Planta， 2012， 235 （6）： 1 221-1 237.

[18] Shanker A K， Djanaguiraman M， Sudhagar R， et al. Differential antioxidative response of ascorbate glutathione pathway enzymes and metabolites to chromium speciation stress in green gram （Vigna radiata （L.） R.Wilczek. cv CO4） roots[J]. Plant Science， 2004， 166 （4）： 1 035-1 043.

[19] 黃致遠(yuǎn)， 李隆華， 張義剛. 龍眼北緣區(qū)幼齡果園春季管理技術(shù)要點(diǎn)[J]. 西南園藝， 2005， 33（1）： 43-44.

[20] Zhou B Y， Wang J H， Guo Z F， et al. A simple colorimetric method for determination of hydrogen peroxide in plant tissues[J]. Plant Growth Regulation， 2006， 49（2-3）： 113-118.

[21] 曾韶西， 王以柔， 劉鴻先. 不同脅迫處理提高水稻幼苗抗旱性期間膜保護(hù)系統(tǒng)的變化比較[J]. 植物學(xué)報(bào)， 1997， 39（4）： 308-314.

[22] Rio L A D， Ortega M G， Lopez A L， et al. A more sensitive modification of the catalase assay with the Clark oxygen electrode： Application to the kinetic study of the pea leaf enzyme[J]. Analytical Biochemistry， 1977， 80（2）： 409-415.

[23] 曾 驤. 果樹生理學(xué)[M]. 北京： 北京農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社， 1992.

[24] Higashi K， Hosoya K， Ezura H. Histological analysis of fruit devlopment between two melon （Cucumis melo L. reticulatus） genotypes setting a different size of fruit[J]. Journal of Experimental Botany， 1999， 50： 1 593-1 597.

[25] 李建國， 黃旭明， 黃輝白， 等. 大果型和小果型荔枝品種果實(shí)發(fā)育細(xì)胞學(xué)和生理學(xué)比較[J]. 果樹學(xué)報(bào)， 2002， 19（3）： 158-162.

[26] Harada T， Kurahashi W， Yanai M， et al. Involvement of cell proliferation and cell enlargement in increasing the fruit size of Malus species[J]. Scientia Horticulturae， 2005， 105： 447-456.

[27] Cruz-Castillo J G， Laws G S， Woolley D J. The influence of the time of anthesis， seed factor（s）， and the application of a growth regulator mixture on the growth of kiwifruit[J]. Acta Horticulturae， 1991， 297： 475-480.

[28] Marsh K B， Richardson A C， Macrae E A. Early- and mid-season temperature effects on the growth and composition of satsuma mandarins[J]. Journal of Horticultural Science and Biotechnology， 1999， 74（4）： 443-451.

[29] 李建國， 黃輝白， 黃旭明. 妃子笑荔枝早花果和晚花果大小不同與溫度的關(guān)系[J]. 果樹學(xué)報(bào)， 2004， 21（1）： 37-41.

[30] Greybe E， Bergh O. The effect of winter chilling on cell division and multiplication pre-anthesis and thus on final fruit size of Royal Gala apples in South Africa[J]. Acta Horticulturae， 2000， 519： 113-120.

[31] Yang W H， Deng S C， Zhu X C， et al. Developmental problems in over-winter off-season longan fruit. II： Development of pericarp structure[J]. Scientia Horticulturae， 2010b， 126： 359-365.

[32] Yang W H， Zhu X C， Bu J H， et al. Effects of bagging on fruit development and quality in cross-winter off-season longan[J]. Scientia Horticulturae， 2009， 120： 194-200.

[33] 譚宗琨， 何 燕， 歐釗榮， 等. “禾荔” 荔枝果實(shí)發(fā)育進(jìn)程與溫度條件的關(guān)系[J]. 氣象， 2006， 32（12）： 96-101.

[34] Tromp J， Romer C A R. Influence of temperature on fruit ripeness at harvest is other than expected[J]. Fruitteelt Den Haag， 1995， 85（50）： 14-15.

[35] Suzuki N， Wang X， Inoue H.Effects of temperature on fruit development in Japanese apricot cv. Nanko[J]. Environment Control in Biology （Japanese）， 1995， 33（4）： 245-251.

[36] 黃輝白. 熱帶南亞熱帶果樹栽培學(xué)[M]. 北京： 高等教育出版社， 2003， 48-74

[37] 劉 艷， 黃衛(wèi)東， 戰(zhàn)吉宬， 等.機(jī)械傷害和外源茉莉酸誘導(dǎo)豌豆幼苗H2O2系統(tǒng)性產(chǎn)生[J]. 中國科學(xué)， 2004， 34（6）： 501-509.

[38] 張 雯， 沈應(yīng)柏， 沈瑗瑗. 機(jī)械損傷對(duì)復(fù)葉槭葉片過氧化氫含量的影響[J]. 林業(yè)科學(xué)研究， 2007， 20（1）： 25-129.