微波輔助酶法制備米糠蛋白工藝對(duì)黃曲霉毒素B₁脫除及酶解效果的影響

林耀盛 陳智毅 張友勝 唐小俊 魏振承 張業(yè)輝 劉學(xué)銘

摘 要 以受黃曲霉毒素B1（aflatoxin B1，AFB1）污染的米糠為原料，研究微波輔助酶法對(duì)米糠中AFB1脫除效果的影響。初始米糠中AFB1濃度為102.54 μg/kg，以料液比（g ∶ mL）1 ∶ 10、加酶量0.50%、α-淀粉酶和纖維素酶酶解液pH6.0、溫度50 ℃、處理時(shí)間2 h的工藝條件制備米糠蛋白。結(jié)果表明，米糠中AFB1殘留濃度為56.03 μg/kg（脫除率為45.36%），米糠中蛋白質(zhì)回收率為78.20%；基于該工藝研究，在單位體積微波功率750 W和處理時(shí)間10 min的條件下，由酶法提取的米糠蛋白制品中AFB1殘留濃度為4.21 μg/kg（脫除率為92.48%），符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（≤10 μg/kg），而蛋白質(zhì)回收率達(dá)到81.36%。本研究采用免疫親和柱凈化結(jié)合HPLC-FLD檢測(cè)法，提高AFB1的檢出限至0.10 μg/kg。微波處理不僅對(duì)米糠蛋白中AFB1有明顯的脫除效果，且有利于蛋白回收率的提高。該法操作簡(jiǎn)單，脫除效率高，可應(yīng)用于受黃曲霉毒素污染的米糠制品中。

關(guān)鍵詞 米糠蛋白；黃曲霉毒素B1；微波；脫除

中圖分類號(hào) F307.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A

Abstract In this study， the efficiency through the microwave-assisted enzyme treatment degradation of AFB1 in rice bran-protein was explored. Initial concentration of AFB1 was 102.54 μg/kg， and the conditions of the enzyme treatment were solid-liquid ratio（g ∶ mL）1 ∶ 10， enzyme dosage 0.50% of α-amylase and cellulase， pH 6.0， temperature 50 ℃ and treatment time 2 h. The results showed that the concentration of AFB1 decreased 45.36% during the preparation of rice-bran protein by the enzyme treatment， and the residual concentration of AFB1 was 56.03 μg/kg， and the recovery rate of protein was 78.20%. Based on the enzyme treatment， after the treatment of microwave power per unit volume 750 W for 7 min， the degradation rate of AFB1 was 92.48%， and the residual amount of AFB1 was 4.21 μg/kg， which meets the requirement of national standard（≤10 μg/kg）， and the recovery rate of protein was 81.36%. Immunoaffinity column clean-high performance liquid chromatography-fluorescence detection method could improve the detection limit of AFB1 to 0.10 μg/kg. Microwave-assisted enzyme treatment contributed to the degradation of AFB1 in rice bran-protein and was beneficial to the recovery rate of protein. This method was simple and efficient， and it could be applied to the crops contaminated with aflatoxin.

Key words Rice bran protein； aflatoxin B1； microwave； removal

doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2017.04.028

米糠是中國(guó)第一大糧食作物——稻米加工中主要副產(chǎn)品，是將糙米加工成精米過(guò)程中碾下的皮層以及少量米胚和碎米的混合物，約占稻谷重量的5.0%～5.5%[1]，米糠中蛋白含量超過(guò)15%，較普通精米高1倍[2]；中國(guó)每年的米糠總量超過(guò)1 000萬(wàn)噸，約占世界總量的1/3，來(lái)源豐富，可溶性蛋白含量較高，約占70%，與大豆蛋白接近，其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值可與牛乳和雞蛋相媲美。且目前大部分米糠仍作為動(dòng)物飼料，甚至直接以廢物形式丟棄，造成資源的浪費(fèi)。米糠雖然有較高的利用價(jià)值，但其收獲、生產(chǎn)、加工、儲(chǔ)藏和銷售過(guò)程中，常因管理不善而發(fā)生霉變。全球每年受到真菌毒素污染的糧食約占25%，其中最主要的真菌毒素污染就是黃曲霉毒素污染。在已知的黃曲霉毒素（Aflatoxins，AFT）中，常見(jiàn)且危害極大的有黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2（AFB1、AFB2、AFG1、AFG2），其中以AFB1致癌、致畸和誘變性最強(qiáng)[3]，已被國(guó)際癌癥機(jī)構(gòu)（IARC）確認(rèn)為Ι類致癌物[4]，中國(guó)規(guī)定米制品（如米糠蛋白）中黃曲霉毒素含量≤10.0 μg/kg[5]。因此，從米糠中尋求新的天然蛋白資源，有效控制發(fā)霉米糠中的黃曲霉毒素已成為增加米糠的附加價(jià)值的關(guān)鍵。

提取米糠蛋白常用方法有堿法[6]、酶法[7]和物理法[8]，其中堿法是目前提取米糠蛋白最普遍的方法。雖然高濃度的堿液可以提取大部分的谷蛋白，但可能會(huì)使蛋白發(fā)生一些化學(xué)性質(zhì)的變化，影響到產(chǎn)品風(fēng)味和色澤（蛋白提取物的顏色深暗）。酶法提取，在加工過(guò)程中不會(huì)產(chǎn)生有害物質(zhì)，是未來(lái)食品加工發(fā)展的方向，也可有效避免堿法的缺點(diǎn)，因酶反應(yīng)的料液比較小，有利于提取液中固形物含量的提高，降低能耗，因此采用酶法來(lái)提取米糠蛋白越來(lái)越得到重視[9]。米糠蛋白的溶解性質(zhì)復(fù)雜，很難有合適的單一提取方法，Tang等[10]研究表明，物理法可以使細(xì)胞破碎，從而給酶催化提供合適的環(huán)境或者增加蛋白溶解性。微波熱效率高，升溫時(shí)間短，在較短的時(shí)間內(nèi)即達(dá)到所需的反應(yīng)溫度，提高生產(chǎn)效率，而微波物理法提取蛋白[11]，主要通過(guò)引起極性分子振動(dòng)來(lái)破碎細(xì)胞，從而對(duì)釋放蛋白產(chǎn)生顯著影響效果[12]。

目前針對(duì)食品中黃曲霉毒素的脫毒方法有很多，基本可分為物理、化學(xué)、生物酶解法，但這些脫毒方法都存在安全性及食品營(yíng)養(yǎng)損失等問(wèn)題[13-14]。關(guān)于米糠蛋白的去毒目前缺乏研究，微波處理技術(shù)對(duì)某些食品物料中黃曲霉毒素的脫除效果引起關(guān)注[15-16]。本研究應(yīng)用微波輔助酶法處理技術(shù)制備安全的米糠蛋白，通過(guò)免疫親和柱凈化結(jié)合HPLC-FLD的檢測(cè)方法，探索微波處理對(duì)米糠蛋白中AFB1的脫除作用，確定最佳工藝，以期消除米糠中的黃曲霉毒素并提高米糠蛋白的回收率。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)樣品 米糠樣品：在廣州市天平架糧油市場(chǎng)收集米糠原料，研磨粉碎過(guò)80～100目，將篩下物密封并于4 ℃冷藏，經(jīng)測(cè)定，蛋白質(zhì)含量為16.72%（干基），染毒米糠中黃曲霉毒素B1含量（102.54±0.83）μg/kg（≥10 μg/kg）。AFB1標(biāo)準(zhǔn)品：純度>99.0%，Alexis；α-淀粉酶（4 000 U/g）和纖維素酶（1 800 U/g）均購(gòu)自廣州市齊云生物技術(shù)有限公司。

1.1.2 試劑和儀器 試劑：NaOH、鹽酸、正己烷、三氟乙酸、甲醇均為國(guó)產(chǎn)分析純；乙腈、甲醇為色譜純。

儀器：Milli-Q Integral 5超純水系統(tǒng)（Merk Millpore/德國(guó)）；Sartorius BSA224S 電子天平（德國(guó)賽多利斯科學(xué)儀器有限公司）；精密數(shù)顯pH計(jì)（德國(guó)賽多利斯公司）；SB25-12 DTD超聲波清洗機(jī)（寧波新芝生物科技股份有限公司）；CW-2000型超聲-微波協(xié)同萃取儀（中國(guó)-上海新拓微波溶樣測(cè)試技術(shù)有限公司）；SB-1100水浴鍋（上海愛(ài)朗儀器有限公司）；真空冷凍干燥機(jī)（美國(guó)Labconco公司）；Agilent 1260高效液相色譜儀（美國(guó)安捷倫科技公司）；K8400蛋白質(zhì)分析儀（FOSS ANALYTICALAB/瑞典）。

1.2 方法

1.2.1 米糠蛋白制備工藝 本研究采用微波輔助酶法制備米糠蛋白，具體制備工藝流程見(jiàn)圖1。

（1）添加稀堿液：在室溫下，取受黃曲霉毒素污染的米糠，粉碎過(guò)篩后，以1 ∶ 10（g ∶ mL）料液比加入0.08 mol/L稀NaOH溶液，調(diào)節(jié)pH至8.20，然后水浴下攪拌30～60 min；（2）加入α-淀粉酶和纖維素酶（m ∶ m=1 ∶ 1），根據(jù)預(yù)備試驗(yàn)和酶的活性確立了復(fù)合酶添加量為0.50%，將溶液調(diào)節(jié)pH至6.00，加入過(guò)量的α-淀粉酶和纖維素酶（經(jīng)溶解過(guò)濾稀釋測(cè)定，4 000 U/g和1 800 U/g）進(jìn)行水解，以除去淀粉和纖維等雜質(zhì)，得到酶解液；（3）微波處理：以單位體積微波功率750 W和時(shí)間10 min的條件對(duì)上述混合溶液進(jìn)行處理，并不斷攪拌；（4）離心：將步驟（3）所得溶液在10 ℃、10 000 r/min的條件下離心，取上清液；（5）調(diào)酸與干燥：往所得上清液中加入0.10 mol/L鹽酸，調(diào)pH至4.50，產(chǎn)生白色沉淀，酸沉后，冷卻至室溫，離心，收集蛋白沉淀，水洗3次，經(jīng)真空冷凍干燥后制得米糠蛋白制品。

1.2.2 微波輔助酶法制備米糠蛋白脫除AFB1工藝優(yōu)化 在酶法制備米糠蛋白基礎(chǔ)上，以AFB1脫除率和米糠蛋白得率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，分別考察不同微波功率與時(shí)間、酶解條件對(duì)米糠AFB1的脫除率和米糠蛋白得率的影響，探索AFB1脫除的最佳工藝條件。

1.2.3 AFB1含量測(cè)定 （1）樣品前處理。將霉變米糠5 g經(jīng)上述米糠蛋白制備工藝得到米糠蛋白制品，配制70%的甲醇水（含4%NaCl），加入15 mL 70%的甲醇水，于50 ℃超聲處理20 min，以10 000 r/min、10 ℃離心10 min，取上清液，共提取3次；合并上清液并濃縮至15 mL，取4 mL溶液，加入2 mL石油醚，漩渦振蕩混勻，靜置分層；取下層液3 mL，將溶液稀釋至8 mL，用0.22 μm有機(jī)濾膜過(guò)濾，得到過(guò)濾液。

（2）免疫親和柱凈化。將親和柱從4 ℃冰箱取出，待溫度恢復(fù)至室溫，倒掉柱子中保護(hù)液，用純水清洗4～5次（每次8～10 mL）；精確加入8 mL過(guò)濾液，最后用純水8～10 mL淋洗；待液體流干后，精確移取1 mL色譜純甲醇洗脫，用棕色小瓶收集洗脫液。

（3）樣品衍生。將洗脫液在60 ℃水浴中氮吹至近干，加200 μL正己烷和100 μL三氟乙酸，加蓋蓋緊，振蕩30 s；于40 ℃水浴衍生20 min，然后再氮吹至干；最后用15%乙腈水定容至1 mL，混勻，用高效液相色譜儀檢測(cè)。

（4）HPLC-FLD法測(cè)定AFB1。液相色譜柱為Agilent ZORBAX SB-C18（4.6 mm×250 mm×5 μm）。流動(dòng)相：A（甲醇） ∶ B（乙腈） ∶ C（水）=15 ∶ 17 ∶ 68（V ∶ V ∶ V），采用等度洗脫分離；檢測(cè)器：熒光檢測(cè)器（λ激發(fā)=360 nm，λ發(fā)射=440 nm）、紫外檢測(cè)器（λ=365 nm）；流動(dòng)相流速0.80 mL/min，柱溫35 ℃，進(jìn)樣量20 μL。

1.2.4 米糠蛋白回收率測(cè)定及AFB1脫除率的計(jì)算公式

純度（P）/%=米糠蛋白制品中蛋白含量/米糠蛋白制品質(zhì)量×100 （2）

回收率（R）/%=米糠蛋白制品含量×純度（P）/米糠中總蛋白質(zhì)含量×100 （3）

1.3 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)重復(fù)3次，采用OriginPro 8.6作圖和SPSS19.0進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

米糠中的AFB1檢測(cè)方法采用HPLC-FLD法，結(jié)合免疫親和柱對(duì)樣品進(jìn)行凈化和濃縮。運(yùn)用甲醇-乙腈-水混合液，其中流動(dòng)相組成會(huì)影響分離度、產(chǎn)物以及產(chǎn)物的熒光發(fā)射強(qiáng)度[17]，運(yùn)用熒光檢測(cè)器檢測(cè)AFB1，由于雙呋喃環(huán)上具有不飽和雙鍵的AFB1的靈敏度較低[18]，熒光強(qiáng)度較弱，直接測(cè)定會(huì)影響其靈敏度和準(zhǔn)確度，滿足不了對(duì)AFB1以ppb為單位的限量要求的監(jiān)控，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)采用強(qiáng)氧化劑三氟乙酸，衍生熒光物質(zhì)AFB2a，從而增強(qiáng)檢測(cè)信號(hào)，其靈敏度比衍生前提高25～50倍，檢出限為0.1 μg/kg，適合定量分析。

2.1 酶法制備米糠蛋白對(duì)蛋白回收率的影響

樣品分別在不同的pH、酶解溫度、酶解時(shí)間下，分析其對(duì)米糠蛋白酶解效果的影響，以提高蛋白回收率為指標(biāo)，探索米糠蛋白制備最佳工藝，提高其蛋白回收率。

2.1.1 不同pH對(duì)米糠蛋白回收率的影響 結(jié)果見(jiàn)圖2，當(dāng)pH<6.0時(shí)，米糠中蛋白質(zhì)回收率隨著pH值的升高而升高；當(dāng)pH>6.0時(shí)，回收率隨之降低。不同的pH會(huì)影響酶分子活性中心的催化基團(tuán)的穩(wěn)定性，進(jìn)而影響整個(gè)反應(yīng)體系的酶解速率。當(dāng)pH=6.0時(shí)，米糠中蛋白質(zhì)回收率達(dá)到67.75%，在最適pH值下酶的活力最大。

2.1.2 混合酶解溫度對(duì)米糠蛋白回收率的影響

結(jié)果見(jiàn)圖3，酶解溫度會(huì)影響到酶的活性及反應(yīng)速率。在50 ℃時(shí)，α-淀粉酶+纖維素酶預(yù)處理對(duì)米糠中蛋白含量影響較大，米糠中蛋白質(zhì)回收率達(dá)到76.25%?？赡苁窃诿附夥磻?yīng)中，溫度與酶穩(wěn)定性及反應(yīng)速率有關(guān)。當(dāng)溫度升高時(shí)，反應(yīng)速率加快，有利于酶解的進(jìn)行，而在50 ℃之后，隨著酶解溫度的提高，對(duì)米糠中蛋白質(zhì)的影響反而減弱。因?yàn)闇囟瘸^(guò)55 ℃時(shí)，淀粉出現(xiàn)了糊化，原來(lái)的懸濁液變成了黏性很強(qiáng)的淀粉糊，阻礙了蛋白質(zhì)的釋出，導(dǎo)致蛋白質(zhì)的回收率下降[19]。

2.1.3 不同酶解時(shí)間對(duì)米糠蛋白回收率的影響

結(jié)果見(jiàn)圖4，酶解時(shí)間同樣影響到酶的活性及反應(yīng)速率。在2.0 h內(nèi)，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，α-淀粉酶+纖維素酶預(yù)處理對(duì)米糠中蛋白質(zhì)影響隨之增大，可能是由于酶與底物的充分反應(yīng)需要一定的時(shí)間，時(shí)間很短時(shí)，酶分子與底物結(jié)合程度較低，酶解效果不理想；延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間，酶與底物充分結(jié)合，此時(shí)，酶解效果最佳；在2.0 h蛋白質(zhì)回收率達(dá)到最大，繼續(xù)延長(zhǎng)酶解時(shí)間效果不顯著?？赡苁怯捎诿敢逊磻?yīng)完全，活性降低。故試驗(yàn)選定α-淀粉酶+纖維素酶雙酶酶解時(shí)間為2.0 h。當(dāng)pH=6.0、酶解溫度50 ℃、酶解時(shí)間2.0 h時(shí)，米糠中蛋白質(zhì)回收率達(dá)到78.20%。

2.2 微波處理法對(duì)制備米糠蛋白過(guò)程中AFB1的影響

在酶法制備米糠蛋白工藝的基礎(chǔ)上，以AFB1脫除率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，分別考察微波功率和微波處理時(shí)間對(duì)AFB1脫除率的影響，探索微波輔助處理對(duì)AFB1脫除的最優(yōu)條件，重復(fù)操作（n=3）。

2.2.1 不同微波功率對(duì)AFB1脫除率的影響 結(jié)果見(jiàn)圖5，在微波功率150～900 W、微波時(shí)間10 min的條件下，米糠AFB1脫除率隨微波功率的增加而提高，至P=750 W時(shí)脫除率增加幅度不明顯，此時(shí)微波處理對(duì)米糠中AFB1的脫除率達(dá)到84.76%。微波處理能夠引起極性分子振動(dòng)，從而對(duì)食品物料產(chǎn)生影響，被廣泛應(yīng)用于某些食品物料中黃曲霉毒素的脫除[20-21]。米糠中AFB1的脫除，主要原因可能一方面是由于微波的熱效應(yīng)，內(nèi)外同步加熱，引起分子快速振動(dòng)，從而產(chǎn)生巨大熱量；另一方面是由于微波的電磁震蕩效應(yīng)，使物料的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)變得疏松，增大與AFB1接觸面積，共同促進(jìn)AFB1的脫除[22-23]。同時(shí)考慮實(shí)際生產(chǎn)成本及效益，750 W時(shí)較為合適，故試驗(yàn)選定微波功率為750 W。

2.2.2 不同微波處理時(shí)間對(duì)AFB1脫除率的影響

結(jié)果見(jiàn)圖6，微波功率為2～10 min時(shí)AFB1脫除率隨著時(shí)間的遞增變化較大，當(dāng)微波處理10 min時(shí)，AFB1脫除率為92.48%；10 min后，微波處理時(shí)間對(duì)AFB1脫除率的影響不顯著。其原因[24-25]如下：微波時(shí)間延長(zhǎng)，微波熱效應(yīng)使溫度提高，對(duì)AFB1脫除起促進(jìn)效應(yīng)；而處理時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，物料吸收熱增多，吸收微波的能力反而降低，導(dǎo)致10 min后促進(jìn)效應(yīng)不顯著。同時(shí)考慮到實(shí)際生產(chǎn)成本及效益，故試驗(yàn)選定微波時(shí)間為10 min。

在酶法制備蛋白工藝的基礎(chǔ)上，考慮工藝的成本和效率，選取微波功率750 W、微波時(shí)間10 min時(shí)，黃曲霉B1脫除率達(dá)92.48%，此時(shí)米糠中AFB1的殘留濃度為4.21 μg/kg，蛋白質(zhì)回收率達(dá)到81.36%。

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)微波輔助酶法制備米糠蛋白質(zhì)，提高單純以酶法制備蛋白質(zhì)的得率，同時(shí)，該方法反應(yīng)條件溫和，不會(huì)產(chǎn)生多余的有害物質(zhì)，更大程度地保留了蛋白質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。微波作為一種輔助物理處理方法，由于微波的熱效應(yīng)，蛋白質(zhì)分子之間發(fā)生了交聯(lián)，小分子聚集成大分子，而且交聯(lián)部位很可能集中于疏水基團(tuán)，使得米糠蛋白的親水性提高，溶解性提高[26]。

3 討論

本研究通過(guò)應(yīng)用微波輔助酶法處理技術(shù)制備安全的米糠蛋白，AFB1殘留濃度為4.21 μg/kg，符合國(guó)家限量標(biāo)準(zhǔn)（≤10 μg/kg），而蛋白質(zhì)回收率提高到81.36%。由于微波的熱效應(yīng)，使物料的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)變得疏松，增加堿液與黃曲霉毒素的接觸面積，有利于黃曲霉毒素與堿作用，黃曲霉毒素的脫除率提高到92.48%；同時(shí)，在弱堿性環(huán)境下進(jìn)行反應(yīng)，有效避免傳統(tǒng)制備方法帶來(lái)的強(qiáng)堿對(duì)蛋白質(zhì)的變性作用以及大量鈉鹽離子的帶入，溫和無(wú)刺激性酶法，輔以微波處理作用，可產(chǎn)生電磁震蕩效應(yīng)，使得蛋白分子之間發(fā)生了交聯(lián)，小分子聚集成大分子，而且交聯(lián)部位很可能集中于疏水基團(tuán)，使得米糠蛋白親水性提高，溶解性也隨之提高。通過(guò)微波處理?xiàng)l件和酶解條件前后試驗(yàn)對(duì)比發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過(guò)酶解后再進(jìn)行微波處理對(duì)米糠提取物中黃曲霉脫除率的提高效果更佳，所以，在確認(rèn)最優(yōu)酶解條件后，利用微波輔助制備米糠蛋白工藝，制備出來(lái)的米糠蛋白產(chǎn)品不僅黃曲霉毒素含量低，而且米糠蛋白的溶解性有所提高，有效地解決了傳統(tǒng)制備工藝成本高而蛋白質(zhì)溶解性不高的難題，運(yùn)用該工藝操作方便，節(jié)省添加大量強(qiáng)堿等成本，可實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化水平生產(chǎn)。這與王勇等[23]利用微波處理對(duì)稻米中黃曲霉降解的影響效果基本一致。

由于米糠中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與其細(xì)胞壁結(jié)合在一起，造成其溶解性差，難以被利用。經(jīng)本課題組前期預(yù)備試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，采用傳統(tǒng)的“堿溶酸沉”蛋白制備工藝時(shí)，制備出來(lái)的米糠蛋白產(chǎn)品，一方面黃曲霉毒素AFB1脫除率只達(dá)到40.65%～49.52%，殘留量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)10 μg/kg的國(guó)家限量標(biāo)準(zhǔn)；另外，“堿溶”采用的高pH導(dǎo)致蛋白變性甚至產(chǎn)生有毒物質(zhì)，“酸沉”帶入過(guò)多的無(wú)機(jī)鹽，而脫鹽會(huì)造成蛋白質(zhì)損失，制備出來(lái)的米糠蛋白，由于其自身含有較多的二硫鍵，影響了其在水溶液中的溶解性，導(dǎo)致米糠蛋白提取率降低，而且成本高，難以實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化水平生產(chǎn)。

本研究中，利用微波輔助酶法制備米糠蛋白結(jié)果表明，在料液比1 ∶ 10、微波功率750 W、微波時(shí)間10 min、α-淀粉酶和纖維素酶酶解pH6.0、酶解溫度50 ℃、加酶量0.50%、酶解時(shí)間2 h的條件下，米糠中AFB1的脫除率為92.48%，降低單純以酶法提取的米糠蛋白制品中AFB1的殘留濃度，降至4.21 μg/kg，符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（≤10 μg/kg），而且蛋白質(zhì)回收率提高到81.36%。該工藝操作簡(jiǎn)單，AFB1脫除效率高，可應(yīng)用于受黃曲霉毒素污染的米糠蛋白制品中。

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