現(xiàn)代生物技術(shù)在豬病診斷和防治中的應(yīng)用研究

張漢武

摘要：養(yǎng)豬業(yè)作為我國(guó)主要的肉食品來(lái)源，對(duì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展有重要的貢獻(xiàn)，而為了適應(yīng)市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，推動(dòng)了養(yǎng)豬業(yè)向產(chǎn)業(yè)化、集約化方向發(fā)展，但同時(shí)也加大了豬病的傳染性和危害性，而利用現(xiàn)代生物技術(shù)可以有效解決這一問(wèn)題，對(duì)此，本文對(duì)現(xiàn)代生物技術(shù)在豬病診斷和防治中的應(yīng)用進(jìn)行了分析。

關(guān)鍵詞：生物技術(shù)；豬病診斷技術(shù)；防治技術(shù)

中圖分類號(hào)：S858.28 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：2096-3637（2017）07-0015-02

1現(xiàn)代生物技術(shù)在豬病診斷中的應(yīng)用

1.1蛋白表達(dá)純化技術(shù)

在生物技術(shù)的發(fā)展，我國(guó)已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了蛋白表達(dá)純化技術(shù)，可以有效解決豬病診斷方面的難題，及時(shí)掌握豬的發(fā)病類型、發(fā)病原因，并制定正確的治療計(jì)劃，有利于降低養(yǎng)豬業(yè)的損失程度。另外，傳統(tǒng)的診斷方法不僅成本高，而且診斷效率差，不利于養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。例如，在進(jìn)行診斷時(shí)，需要對(duì)豬體內(nèi)的病毒進(jìn)行培養(yǎng)，了解病毒結(jié)構(gòu)，并根據(jù)其特點(diǎn)制定抗原，診斷需要一系列的過(guò)程，比較浪費(fèi)時(shí)間，還會(huì)加重豬的病情。而使用蛋白表達(dá)純化技術(shù)，具有較強(qiáng)的優(yōu)勢(shì)，可利用一些免疫抗原基因，當(dāng)豬在感染一些特殊的病原體時(shí)會(huì)發(fā)生一些劇烈的免疫反應(yīng)，從而判斷所感染的病菌類型，有利于制定正確的治療計(jì)劃，同時(shí)，可根據(jù)實(shí)際診斷需要，發(fā)展生物基因工程技術(shù)，加大對(duì)免疫抗原基因的開(kāi)發(fā)力度，使其可以應(yīng)用臨床診斷上，大大提高了診斷質(zhì)量和效率，降低養(yǎng)殖戶的損失程度。

1.2血清診斷技術(shù)

1.2.1沉淀診斷法

豬類常見(jiàn)疾病比較多，單一的診斷方法很難確保其實(shí)效性，因此，還需要沉淀診斷法來(lái)提供幫助，例如，部分細(xì)菌或毒素具有可溶性，能與血清、組織、抗原等相融合，對(duì)此，可在豬體上選取一部分組織或血液，使其與抗原融合，利用一些電解質(zhì)，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的變化，會(huì)形成一些白色的沉淀物，并對(duì)其進(jìn)行分析，可以有效診斷豬的病因。其主要適用范圍為：診斷鏈球菌感染、傳染性水皰、豬胸膜炎以及肺炎等方面，具有較好的效果。

1.2.2凝聚診斷法

這種診斷方法是與沉淀診斷法相對(duì)應(yīng)而存在的，通過(guò)將病毒或細(xì)菌吸附在細(xì)胞表面，使其與抗體進(jìn)行結(jié)合，并加入一些電解質(zhì)，在經(jīng)過(guò)一定的反應(yīng)時(shí)間后，會(huì)將各種病毒、細(xì)菌凝聚在一起，形成一個(gè)團(tuán)塊，對(duì)團(tuán)塊內(nèi)的物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，其吸附介質(zhì)不同，所診斷的項(xiàng)目?jī)?nèi)容也就不同（如表1）。

1.2.3免疫標(biāo)記診斷法

所謂的免疫標(biāo)記技術(shù)，就是利用酶、熒光素等物質(zhì)進(jìn)行抗體或抗原標(biāo)記，通過(guò)觀察其反應(yīng)，來(lái)獲得診斷結(jié)果（如表2）。

1.3免疫膠體金試紙條

免疫膠體金試紙條診斷法是一種以免疫滲透技術(shù)為基礎(chǔ)的免疫診斷法。具有較強(qiáng)的吸附性等特點(diǎn)，能將毒素、病菌、抗生素、免疫球蛋白等進(jìn)行結(jié)合，有利于提高技術(shù)人員的診斷質(zhì)量和效率，是我國(guó)目前主要的診斷方法之一，有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。一是，在診斷工作時(shí)，所需要使用的樣本數(shù)量和比較少，只需要100μl的樣本量即可滿足實(shí)驗(yàn)需求，可以有效減少對(duì)豬的傷害；二是，診斷方法更具備現(xiàn)場(chǎng)性，傳統(tǒng)的診斷方法往往需要大量的儀器設(shè)備進(jìn)行化驗(yàn)、檢測(cè)，不僅診斷周期長(zhǎng)，成本也比較高，而利用免疫膠體試紙條，可直接在現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行檢測(cè)，極大程度降低了診斷成本，有利于降低養(yǎng)殖戶的損失程度；三是，這種試紙條具備更高的安全性，既不會(huì)對(duì)環(huán)境造成影響，也不會(huì)對(duì)豬產(chǎn)生影響；四是，其檢測(cè)結(jié)果可以保留很長(zhǎng)時(shí)間，可為技術(shù)人員的科研工作提供保障，促使我國(guó)生物診斷技術(shù)的快速提高，對(duì)此，本文以PRRS（豬繁殖與呼吸綜合征）為例進(jìn)行研究。

1.3.1疫苗質(zhì)量檢測(cè)

我國(guó)的養(yǎng)殖戶為了避免豬患上疾病，需要在防疫站或獸醫(yī)站購(gòu)買PRRS疫苗，其質(zhì)量對(duì)豬的病患幾率有嚴(yán)重的影響，為了確保疫苗的質(zhì)量，本文需要采取實(shí)驗(yàn)的方法來(lái)進(jìn)行檢測(cè)。

為了保證實(shí)驗(yàn)的科學(xué)性，要保證所購(gòu)買的疫苗屬于同一批次、統(tǒng)一型號(hào)，并根據(jù)不同日齡的種豬、小豬、乳豬進(jìn)行PRRS疫苗接種，其接種數(shù)量為每種日齡豬各150頭，并在15d后進(jìn)行采血，并利用免疫膠體金試紙條進(jìn)行檢測(cè)，觀察每個(gè)試紙條的檢測(cè)結(jié)果（如表3）。

當(dāng)結(jié)果顯示為具備免疫病菌的功能時(shí)，則說(shuō)明本批次的疫苗質(zhì)量較好，當(dāng)檢測(cè)解耦過(guò)不具備免疫功能時(shí)，還需要進(jìn)行2方面的監(jiān)測(cè)，一是，確定接種疫苗的豬是否本身存在疾病情況，因?yàn)椋糠植【鷷?huì)干擾檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性；二是，判斷疫苗本身是否存在問(wèn)題，如果是疫苗質(zhì)量的問(wèn)題，則需要養(yǎng)殖戶更換PRRS疫苗廠家，并在購(gòu)買前進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)，避免增加損失程度。

1.3.2抗體質(zhì)量檢測(cè)

第一，當(dāng)養(yǎng)殖場(chǎng)的母豬在分娩時(shí)，需要對(duì)母豬的抗體質(zhì)量進(jìn)行檢測(cè)，當(dāng)免疫膠體金試紙條只顯示一條控帶時(shí)，說(shuō)明母豬的抗體水平比較高，容易感染病毒，在這種情況下，需要養(yǎng)殖戶為母豬接種疫苗，來(lái)提高其抗體水平，避免出現(xiàn)豬病等情況。而當(dāng)檢測(cè)結(jié)果現(xiàn)實(shí)兩條控帶時(shí)，則表明母豬的抗體質(zhì)量比較高，抵抗力也比較強(qiáng)，可以避免PRRS病毒的入侵，不需要接種疫苗。

第二，部分養(yǎng)殖戶為了發(fā)展需要，要從外部購(gòu)進(jìn)一些豬，豬的抗體質(zhì)量很難把握，還會(huì)存在病豬的可能，如果不進(jìn)行檢測(cè)，會(huì)給養(yǎng)殖戶帶來(lái)嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，對(duì)此，要求對(duì)外購(gòu)豬進(jìn)行抗體水平檢測(cè)。為了保證檢測(cè)的效率和質(zhì)量，可采用采樣調(diào)查的方式，根據(jù)日齡進(jìn)行分類，選出具有代表性的一部分豬進(jìn)行檢測(cè)，可通過(guò)采血檢驗(yàn)的方法，根據(jù)免疫膠體金試紙條的結(jié)果判斷外購(gòu)豬群的整體抗體水平，從而確定是否進(jìn)行疫苗接種，可以有效防止PRRS的發(fā)病幾率，保證養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)效益。

第三，在進(jìn)行日常養(yǎng)殖管理時(shí)，當(dāng)發(fā)現(xiàn)個(gè)別豬有PRRS發(fā)病現(xiàn)象時(shí)，可及時(shí)進(jìn)行診斷，通過(guò)采集主體身上的血液樣本，利用免疫膠體金試紙條進(jìn)行檢測(cè)，根據(jù)診斷結(jié)果進(jìn)行防治處理，當(dāng)發(fā)現(xiàn)豬只存在PRSS病毒時(shí)，要及時(shí)進(jìn)行隔離，避免傳染給豬群，降低損失程度，并進(jìn)一步制定醫(yī)治措施。

2 現(xiàn)代生物技術(shù)在豬病防治工作中的應(yīng)用

2.1活載體疫苗

2.1.1非復(fù)制性活載體

這種載體疫苗具有較強(qiáng)的免疫能力，豬在接種后，受到強(qiáng)度攻擊時(shí)，會(huì)對(duì)保護(hù)免疫系統(tǒng)進(jìn)行刺激，從而起到防護(hù)作用，具有較好的免疫效果。在進(jìn)行活載體疫苗研發(fā)時(shí)，要具備區(qū)分禽畜疫苗和人用疫苗的關(guān)系，禽畜疫苗的研發(fā)要在保證安全性的情況下降低生產(chǎn)成本，從而提高經(jīng)濟(jì)效益，而人用疫苗的主要問(wèn)題就是安全性。另外，活載體疫苗的質(zhì)量受載體的影響較大，一般情況，病毒基因組越長(zhǎng)越適合用作載體，主要是因?yàn)榛蚪M長(zhǎng)，能容納外源基因片段，使其刺激細(xì)胞的免疫能力，從而獲得免疫效果，因此，非復(fù)制性活載體疫苗還具備很多的優(yōu)點(diǎn)。一是，在活載體疫苗的作用下，可刺激豬體內(nèi)機(jī)能的細(xì)胞免疫系統(tǒng)和體液免疫系統(tǒng)，全方面防止病毒入侵，可以有效降低豬病的發(fā)生幾率；二是，這種疫苗只需要很少的用量即可滿足豬免疫保護(hù)的需要，同時(shí)，疫苗的藥效長(zhǎng)，效果好，可以有效降低接種疫苗的成本。但同時(shí)，非復(fù)制性活載體還有一定的缺點(diǎn)，豬PRV基因缺失會(huì)與其他病毒進(jìn)行重組，會(huì)加劇病毒的毒害性，人在使用這種肉產(chǎn)品會(huì)造成嚴(yán)重的安全隱患。相關(guān)學(xué)者以40例豬為例，展開(kāi)了對(duì)比試驗(yàn)研究，隨機(jī)分組，分成2組，各20例，其中對(duì)照組給予常規(guī)治療，研究組給予非復(fù)制性活載體疫苗，其結(jié)果顯示，研究組的防治效果為100%，明顯高于對(duì)照組，差異顯著。

2.1.2復(fù)制性活載體

這種疫苗主要是利用生物基因工程技術(shù)，對(duì)一種病毒或細(xì)菌的相關(guān)基因進(jìn)行免疫，病將其整合到另一種活載體的病毒或細(xì)菌中，對(duì)其進(jìn)行重組，并通過(guò)接種疫苗的方式來(lái)刺激豬體內(nèi)的免疫機(jī)能，從而達(dá)到增強(qiáng)免疫能力的效果。

2.2亞單位疫苗

所謂的亞單位疫苗主要指的是利用微生物的表面抗原成分，使其形成一種不具有核酸，但能激發(fā)豬體內(nèi)機(jī)能免疫力的疫苗，將這一類的疫苗統(tǒng)稱為他單位疫苗，這種疫苗具有較高的實(shí)效性，能有效控制豬的病情，并在豬圓環(huán)病毒等方面能起到很好的防治作用。

2.3加強(qiáng)豬群管理

在豬的常見(jiàn)疾病中，豬偽狂犬病是比較難治愈的病種，但發(fā)病后造成較高的發(fā)病率，對(duì)養(yǎng)殖戶造成了嚴(yán)重的損失，對(duì)此，養(yǎng)殖戶要不斷對(duì)豬群的健康情況進(jìn)行檢測(cè)，可利用采血檢測(cè)法進(jìn)行診斷，當(dāng)檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性時(shí)，要對(duì)相關(guān)的豬進(jìn)行淘汰，每隔1個(gè)月進(jìn)行檢測(cè)1次，一直到連續(xù)2次檢測(cè)結(jié)果全為陰性為止，可以有效保證豬群的健康水平，避免出現(xiàn)發(fā)病情況。

2.4制備豬用干擾素

有關(guān)干擾素制備的研究，在世界范圍內(nèi)最早開(kāi)始于上世紀(jì)五十年代末期的英國(guó)當(dāng)中。通過(guò)制備豬用干擾素可以針對(duì)個(gè)別疑難雜癥類型的豬病病癥，提升對(duì)其進(jìn)行提前抵御和防備的工作診療能力。在通常情況下，豬用干擾素的研發(fā)和應(yīng)用，可以根據(jù)其針對(duì)診療病癥的各不相同，進(jìn)一步劃分為不同類型的組織存在模式。一型干擾素和二型干擾素等，是目前國(guó)內(nèi)用于診治豬病病毒比較具有代表性的干擾素存在形態(tài)。相比一型干擾素的免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)，二型干擾素的抗病毒能力更加突出。

結(jié)束語(yǔ)

隨著市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，我國(guó)的養(yǎng)豬業(yè)得到了快速發(fā)展，開(kāi)始向規(guī)?；a(chǎn)業(yè)化方向發(fā)展，促使我國(guó)國(guó)民經(jīng)濟(jì)快速發(fā)展，但同時(shí)，加大了病毒的破壞性與傳染性，會(huì)給養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)非常嚴(yán)重的影響，對(duì)此，需要養(yǎng)殖戶提高防范意識(shí)，做好管理工作，防止出現(xiàn)病豬等情況，同時(shí)，要使用先進(jìn)的診斷技術(shù)，保證診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性，并制定相應(yīng)的醫(yī)治措施，從而促使我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)快速發(fā)展。