• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    酸漿果實中多酚的提取及其抗氧化能力研究

    2017-05-18 03:10:05武乾英王曉聞郭瑜許惠芳王艷麗
    食品研究與開發(fā) 2017年10期
    關(guān)鍵詞:酸漿乙醇抗氧化

    武乾英,王曉聞,郭瑜,許惠芳,王艷麗

    (山西農(nóng)業(yè)大學食品科學與工程學院,山西太谷030801)

    酸漿果實中多酚的提取及其抗氧化能力研究

    武乾英,王曉聞*,郭瑜,許惠芳,王艷麗

    (山西農(nóng)業(yè)大學食品科學與工程學院,山西太谷030801)

    以酸漿果實為研究對象,對其多酚提取工藝進行優(yōu)化并分析其(Ferric reducing antioxidant power,F(xiàn)RAP)還原亞鐵離子的能力)。采用響應面法對乙醇體積分數(shù)、料液比、溫度、提取時間進行優(yōu)化,確定酸漿果實多酚的最佳提取條件,并采用FRAP對多酚提取物的體外抗氧化能力進行分析。結(jié)果表明:酸漿果實多酚的最佳提取條件為乙醇體積分數(shù)61.5%、料液比1∶15(g/mL)、浸提溫度59℃、提取時間102 min,所得多酚得率為0.899%DW,與預測值偏差不大。酸漿多酚10 mg/mL時FRAP值為0.495 mmol/L。研究表明酸漿果實中含有多酚類物質(zhì),且具有一定的還原亞鐵離子的能力。

    酸漿果實;多酚;提取;亞鐵離子還原能力

    酸漿 [Physalis alkekengi L.var.franchetii(Mast.)Makino]為茄科酸漿屬多年生草本植物,又名天泡果、燈籠草等,屬野生資源,目前被認為是一種具有較高營養(yǎng)價值的稀特果蔬[1]。酸漿的根及全草入藥,具有利咽、化痰、清熱、利尿等功能。由于其含有多種甾類化合物,所以中醫(yī)藥上可廣泛應用于解毒等[2]。

    酸漿果實中含有豐富的常量元素及多種微量元素[3-4]。同時酸漿果實中含有豐富多種的植物化學成分,目前對酸漿的研究多集中在酸漿苦素、皂苷類及生物堿類的活性分析,然而酸漿果實中的多酚類物質(zhì)的研究甚少。

    因此本研究采用響應曲面法對酸漿果實中多酚的提取條件進行優(yōu)化,并采用FRAP法分析其體外總抗氧能力,為提高酸漿的綜合利用率提供科學參考。

    1 材料與方法

    1.1 材料與儀器

    酸漿果實粉末:酸漿果實采自山西省大同市陽高縣。將新鮮酸漿果實脫萼、除雜、清洗后,榨汁并冷凍干燥,經(jīng)粉碎、40目過篩即得酸漿果實粉末,置于-80℃保存?zhèn)溆谩?/p>

    乙醇、乙醚、沒食子酸、碳酸鈉、FeSO4、醋酸緩沖液、鹽酸、三氯化鐵(均為AR級);2,4,6-三吡啶基三嗪(TPTZ)、Folin-Ciocalteu:北京索萊寶科技有限公司。

    JYZ-D51榨汁機:九陽股份有限公司;R-1001N旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、SHB-III循環(huán)水式真空泵、WB-200水浴鍋:鄭州長城科工貿(mào)有限公司;BS210S電子天平:北京賽多利斯天平有限公司;JDG-0.2真空冷凍干燥機:蘭州科近真空凍干技術(shù)有限公司。

    1.2 方法

    1.2.1 標準曲線的繪制及多酚含量的測定

    配制沒食子酸標準液濃度為0、20、40、60、80、100 μg/mL樣液。取樣液0.2 mL,加入2%Na2CO3溶液4 mL,福林試劑0.2 mL,搖勻置25℃恒溫水浴中放置30 min,765 nm下測定吸光值。得到吸光度值X與沒食子酸標準溶液濃度(Y,mg/mL)之間的回歸方程為:Y=0.033 54X-0.001 09,R2=0.999 52。

    1.2.2 酸漿果實中多酚的提取及其測定

    稱取1 g的酸漿果粉,按照一定的料液比1∶5、1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30(g/mL)加入一定體積分數(shù)的乙醇溶液(0%、20%、40%、60%、80%、100%),在一定溫度(20、30、40、50、60、70℃)下提取一定時間(40、60、80、100、120、140 min)后,離心除雜。收集上清液減壓濃縮,并用乙醚脫脂,采用福林酚法測定樣品中的多酚含量及其得率。將提取的酸漿果實多酚粗提液定容至100 mL,按照以上方法,取樣液0.2 mL,加入2%Na2CO3溶液4 mL,福林試劑0.2 mL,搖勻置25℃恒溫水浴中放置30 min,765 nm下測定吸光值,平行3次測定其吸光值,根據(jù)標準曲線測定其對應的多酚得率,結(jié)果按下式計算:

    式中:W為多酚的得率,%;C為由粗提液測定吸光值后,在標準曲線中所對應沒食子酸質(zhì)量濃度,mg/mL;V為提取液定容后的體積,100 mL;m為稱樣量,g。

    1.2.3 單因素試驗及其響應曲面法確定最佳提取工藝

    1.2.3.1 單因素試驗

    以1.2.2中4組因素做單因素試驗,每組試驗平行進行3次,確定各因素適宜的范圍。

    1.2.3.2 響應曲面法試驗設計確定最佳提取工藝

    在單因素試驗基礎上,確定中心組合試驗設計的自變量及水平。根據(jù)Box-Behnken中心組合試驗設計原理,以多酚含量為響應值,選取乙醇體積分數(shù)、料液比、提取時間、提取溫度4個因素,設計四因素三水平響應面分析試驗,用響應面分析方法對數(shù)據(jù)進行回歸分析及顯著性檢驗,來確定最佳工藝參數(shù)。

    1.2.4 亞鐵離子還原能力分析法(FRAP)測定酸漿多酚抗氧化能力

    FRAP工作液:2.5 mL10 mmol/L的TPTZ工作液(用40 mmol/L的鹽酸溶解),2.5 mL 20 mmol/L的FeCl3·6H2O和25 mL 0.3 mol/L的醋酸緩沖液(pH3.6)混合均勻即得。

    配制1 mmol/L的FeSO4溶液。在0~400 μL范圍內(nèi)取不同體積于試管中,加蒸餾水到2 mL,用FRAP工作液加到5 mL,搖勻,在室溫放置30 min,在593 nm處測吸光值。以吸光值為縱坐標,F(xiàn)eSO4濃度為橫坐標,得標準曲線回歸方程為Y=0.000 59X-0.012 31,R2= 0.996 42。

    將多酚粗提物進行純化后(純度為58.33%)配制為溶液,取同樣體積的不同濃度多酚樣品溶液,加蒸餾水到2 mL處,再加FRAP工作液至5 mL,搖勻,室溫放置30 min,不加樣品改為加蒸餾水作為參照,在593 nm處測吸光值,每個平行測定3次,取平均值。由還原力標準曲線,得出相同吸光度值處FeSO4的濃度,將此濃度的數(shù)值作為FRAP值。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 提取條件對多酚提取效果的影響

    2.1.1 乙醇濃度對酸漿多酚含量的影響

    精確稱取1 g酸漿果粉,按照1∶15(g/mL)的料液比加入一定體積分數(shù)的乙醇溶液(0%、20%、40%、60%、80%、100%),在60℃下提取100 min,乙醇濃度對酸漿多酚含量的影響結(jié)果見圖1。

    圖1 乙醇體積分數(shù)對酸漿多酚得率的影響Fig.1 Effect of ethanol concentration on the extraction of polyphenols

    由圖1可以看出,酸漿多酚提取量隨著乙醇體積分數(shù)的增大而先增加后減小,在60%時達到最大值,為7.654 mg/g,得率為0.765%。當乙醇濃度過高時,溶劑的極性過低,從而導致提取量下降,而且會導致酸漿苦素等其他物質(zhì)的提出,給之后的純化及其抗氧化試驗造成影響。因此,選擇60%的乙醇作為提取溶劑。后續(xù)響應面試驗乙醇體積分數(shù)確定為50%、60%、70%3個水平。

    2.1.2 料液比對酸漿多酚濃度的影響

    精確稱取1 g酸漿果粉,按照一定的料液比1∶5、1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30(g/mL)加入體積分數(shù)60%的乙醇溶液,在60℃下提取100 min,料液比對酸漿多酚含量的影響結(jié)果見圖2。

    圖2 料液比對酸漿多酚得率的影響Fig.2 Effect of solid-to-liquid ratio on the extraction of polyphenols

    由圖2可以看出,料液比在1∶10(g/mL)~1∶15(g/ mL)的范圍內(nèi),多酚的提取量得到了明顯提高,將料液比繼續(xù)提高對酸漿多酚的提取量無顯著性影響。除此之外,料液比過大能夠造成資源的浪費。因此,最佳料液比為1∶15(g/mL)。后續(xù)響應面試驗料液比確定為1∶10、1∶15、1∶20(g/mL)。

    2.1.3 提取時間對多酚含量的影響

    精確稱取1 g酸漿果粉,按照料液比1∶15(g/mL)加入體積分數(shù)60%的乙醇溶液,在60℃下提取一定時間(40、60、80、100、120、140 min),提取時間對酸漿多酚含量的影響結(jié)果見圖3。

    圖3 提取時間對酸漿多酚得率的影響Fig.3 Effect of time on the extraction of polyphenols

    由圖3可以看出,在100 min內(nèi),多酚提取量隨著時間的變長而增大,當提取時間為100 min時,提取量最大為8.712 mg/g,得率為0.871%。時間較短時,結(jié)合氫鍵不能完全被破壞,時間過長時,則會引起其中多酚的損失。后續(xù)響應面試驗提取時間確定為80、100、120 min。

    2.1.4 提取溫度對多酚含量的影響

    精確稱取1 g酸漿果粉,按照1∶15(g/mL)的料液比加入體積分數(shù)為60%的乙醇溶液,在一定溫度(20、30、40、50、60、70℃)下提取100 min,提取溫度對酸漿多酚含量的影響結(jié)果見圖4。

    圖4 提取溫度對酸漿多酚得率的影響Fig.4 Effect of temperature on the extraction of polyphenols

    由圖4可以看出,在30℃~60℃范圍內(nèi),隨著溫度的升高,多酚提取量升高,在60℃達到最高點,提取量為8.318 mg/g,得率為0.832%。溫度進一步升高,高溫促使多酚類物質(zhì)的氧化變性,因此,多酚得率有著明顯的下降。因此,選擇60℃作為最佳提取溫度。后續(xù)響應面試驗確定提取溫度為50、60、70℃。

    2.2 響應面分析

    2.2.1 多元二次響應面回歸模型的建立

    因素水平編碼見表1。試驗結(jié)果如表2。

    表1 因素水平編碼表Table 1 The coding table of factors and levels

    表2 響應面分析試驗設計與結(jié)果Table 2 The design and results of response surface experiments

    續(xù)表2 響應面分析試驗設計與結(jié)果Continue table 2 The design and results of response surface experiments

    2.2.2 方差分析與顯著性檢驗

    通過Design Expert數(shù)據(jù)分析軟件進行回歸分析,得到的方差分析結(jié)果如表3所示。

    表3 方差分析結(jié)果Table 3 The results of variance analysis

    由表3可知,模型P<0.05,該二次方程模型達到顯著水平,模型失擬項P值為0.120 7>0.05,失擬項不顯著,說明其他情況對模型干擾程度小,該響應面回歸模型擬合度良好。在該模型中,對多酚含量有顯著影響的有 B、C、AD、A2、B2及D2,該模型信噪比為7.128,該值大于4則表明該模型可以用于預測,該模型擬合優(yōu)度R2和調(diào)整R2分別為0.145 8與0.569 8,兩者的差值在可以接受的范圍內(nèi)。對表2的試驗數(shù)據(jù)進行二次多項式回歸擬合,得到以乙醇濃度、料液比、提取時間、提取溫度為自變量的四元二次回歸方程:

    2.2.3 酸漿多酚提取量響應面分析

    酸漿多酚提取量響應面分析見圖5。通過Box-Behnken試驗得到的多元二次回歸模型所作的響應面圖及其高線圖可用于評價試驗因素對酸漿多酚得率影響的兩兩交互作用以及確定各個因素的最佳水平范圍。

    圖5 乙醇體積分數(shù)和提取溫度對酸漿多酚得率影響的響應面圖和等高線圖Fig.5 Response surface contour plots showing the effects of ethanol concentration and temperatureon the extraction of polyphenols

    圖5表明,固定乙醇體積分數(shù)、多酚得率隨著提取溫度的升高而增加,但是溫度過高容易使多酚發(fā)生氧化,從而降低得率;固定提取溫度,多酚得率隨乙醇體積分數(shù)的增加先增加后減小。

    通過數(shù)據(jù)分析,提取酸漿多酚最佳工藝條件為:乙醇體積分數(shù)61.53%、料液比1∶15.28(g/mL)、浸提溫度58.93℃、提取時間102.35 min,多酚的提取量為9.048 mg/g,得率為0.905%。考慮到可操作性,將條件調(diào)整為乙醇體積分數(shù)61.5%、料液比1∶15(g/mL)、浸提溫度59℃、提取時間102 min,進行驗證試驗得到多酚含量為8.986 mg/g,得率為0.899%。與理論值基本相符,進一步驗證了回歸模型的可靠性,因此響應面法對酸漿多酚提取的條件優(yōu)化是可行的。

    2.3 FRAP法測定酸漿多酚提取物抗氧化能力

    不同濃度酸漿多酚及其對應的FRAP值如圖6所示。

    圖6 多酚濃度與FRAP值的相關(guān)性Fig.6 The correlation between the polyphenols and ferric reducing antioxidant power

    從圖6可以看出,隨著酸漿多酚濃度的增加,F(xiàn)RAP值也在不斷增加,即抗氧化活性不斷增加。酸漿多酚還原亞鐵離子的能力與其濃度總體呈依賴關(guān)系。當酸漿多酚濃度為10 mg/mL時FRAP值為0.495 mmol/mL,表明其有潛在的體外抗氧化能力。

    3 結(jié)論

    經(jīng)優(yōu)化后,酸漿多酚的提取條件為乙醇體積分數(shù)61.5%、料液比1∶15(g/mL)、浸提溫度59℃、提取時間102 min,進行驗證試驗得到多酚含量為8.986 mg/g,得率為0.899%,與理論值基本相符,進一步驗證了回歸模型的可靠性。之后將酸漿多酚粗提物純化后純度為58.33%。同時研究表明酸漿多酚濃度為10 mg/mL時FRAP值為0.495 mmol/mL,對亞鐵離子有一定的還原能力,該提取物具有一定的體外抗氧化能力。

    [1] 胡春霞,佟鳳琴.酸漿果實皮色素的提取及穩(wěn)定性研究[J].遼寧師專學報(自然科學版),2001,3(2):91-93

    [2] 孟慶然,李立博,王曉聞.酸漿宿萼總皂苷體外抑菌效果研究[J].食品科學,2013,34(19):84-87

    [3]楊曉虹,陳滴,周曉平.酸漿果實無機元素和氨基酸的含量測定[J].人參研究.2000,12(2):34-36

    [4]張初航.錦燈籠的活性成分及質(zhì)量評價研究[D].沈陽:沈陽藥科大學,2009

    [5] 龔珊,單立冬,張玉英,等.掛金燈鎮(zhèn)痛作用的實驗[J].蘇州大學學報(醫(yī)學版),2002,22(4):380-382

    [6]陳榮,梁敬鈺,楊洋,等.酸漿化學成分及酸漿苦素G的結(jié)構(gòu)訂正[J].中國天然藥物,2007,5(3):186-189

    [7] Matsuura T,Kawai M,Nakashima R,et al.Structure of physalin A and physalin B,13,14-seco-16,24-cyclo-steroids from Physalis alkekengi Var.Francheti[J].Chem Soc C,1970,5:664-670

    [8] Lin Y S,Chiang H C.Immunondulatory activity of various fractions derived from Physalia angulata L.extract[J].Am J Chin Med,2002,20 (3/4):233-243

    [9]張英蕾.毛酸漿免疫活性物質(zhì)的精制及評價[D].哈爾濱:東北林業(yè)大學,2010

    [10]王曉聞,張魯,任石濤.酸漿宿萼抗氧化活性研究[J].中國食品學報,2010,10(4):136-140

    [11]張國治,薛慧.芒果皮中多酚提取工藝的優(yōu)化[J].河南工業(yè)大學學報(自然科學版),2011,32(3):35-40,55

    [12]SPIGNO G,TRAMELLI L,FAVERIMDD.Effects of extraction time, temperature and solvent on concentration and antioxidant activity of grape marc phenolics[J].Journal of Food Engineering,2007,81:200-208

    Extraction and Antioxidant Activity of Polyphenols from Physalis alkekengi Fruit

    WU Qian-ying,WANG Xiao-wen*,GUO Yu,XU Hui-fang,WANG Yan-li
    (College of Food Science and Engineering,Shanxi Agricultural University,Taigu 030801,Shanxi,China)

    The optimal extraction conditions and FRAP(ferric reducing antioxidant power)of polyphenols from Physalis alkekengi L.vdx.franchetii(Mast)Makino fruit were investigated.Response surface methodology was employed to optimize extraction process of polyphenols from P.alkekengi fruit by taking ethanol concentration,solid-liquid ratio,extraction temperature and extraction time as factors,and its antioxidant activity was investigated by observing its FRAP.The optimized conditions were as follows:the ethanol concentration was 61.5%,theproportionofsolid-liquidwas1∶15(g/mL),theextractiontemperaturewas59℃,andtheextractiontime was 102 min.Under the optimal conditions,the maximum extraction amounts of polyphenols was 0.899%DW.For polyphenols from P.alkekengi fruit,the maximum FRAP value was 0.495mmol/L at a concentration of 10 mg/mL.The results demonstrated that P.alkekengi fruit rich in polyphenols had a certain in ferric reducing antioxidant power.

    Physalis alkekengi fruit;polyphenols;extraction;ferric reducing antioxidant power

    10.3969/j.issn.1005-6521.2017.10.008

    2016-08-19

    山西省國際科技合作項目(2015081024);山西省科技攻關(guān)項目(20150311020-2);山西省回國留學人員科研資助項目(2016-073)

    武乾英(1991—),男(漢),碩士研究生,研究方向:食品營養(yǎng)與安全。

    *通信作者:王曉聞(1968—),女(漢),教授,碩士生導師,博士,研究方向:食品營養(yǎng)與安全。

    猜你喜歡
    酸漿乙醇抗氧化
    酸漿草
    乙醇和乙酸常見考點例忻
    6000倍抗氧化能力,“完爆”維C!昶科將天然蝦青素研發(fā)到極致
    酸漿苦素B的研究進展
    中成藥(2018年7期)2018-08-04 06:04:14
    酸漿苦味素B對人乳腺癌MDA-MB-231細胞的抑制作用
    中成藥(2017年7期)2017-11-22 07:33:54
    楊木發(fā)酵乙醇剩余物制備緩釋肥料
    白地霉不對稱還原1-萘乙酮制備(S) -1-萘基-1-乙醇
    豬皮膠原蛋白抗氧化肽的分離純化及體外抗氧化活性研究
    乳清低聚肽的制備及其抗氧化活性
    綠茶抗氧化肽的分離純化與抗氧化活性研究
    亚洲精品日本国产第一区| 一本色道久久久久久精品综合| 欧美激情高清一区二区三区| 久久精品国产亚洲av涩爱| 中文字幕制服av| 日本欧美国产在线视频| 91精品国产国语对白视频| 国产激情久久老熟女| 国产成人免费观看mmmm| 国产黄色免费在线视频| 大香蕉久久网| 另类亚洲欧美激情| av线在线观看网站| 中文字幕制服av| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 在线 av 中文字幕| 丁香六月欧美| 男女国产视频网站| 国产97色在线日韩免费| 制服诱惑二区| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 亚洲av日韩精品久久久久久密 | 国产欧美日韩一区二区三 | 丰满少妇做爰视频| 日日夜夜操网爽| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 欧美黄色淫秽网站| 国产成人一区二区三区免费视频网站 | 久久人人爽人人片av| 亚洲国产最新在线播放| 亚洲国产欧美网| 国产一区二区 视频在线| 搡老乐熟女国产| xxx大片免费视频| 极品人妻少妇av视频| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 亚洲欧美精品自产自拍| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 欧美日韩综合久久久久久| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 在线观看免费视频网站a站| 999久久久国产精品视频| 久久精品久久久久久久性| 国产精品99久久99久久久不卡| 亚洲精品国产av成人精品| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 大片免费播放器 马上看| 亚洲色图综合在线观看| 国产激情久久老熟女| www.熟女人妻精品国产| 啦啦啦在线观看免费高清www| 桃花免费在线播放| 在线av久久热| 国产成人欧美在线观看 | 又大又爽又粗| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 久久中文字幕一级| 啦啦啦 在线观看视频| 国产三级黄色录像| 国产精品二区激情视频| 国产精品久久久人人做人人爽| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 91字幕亚洲| 悠悠久久av| 欧美日韩黄片免| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 又紧又爽又黄一区二区| a 毛片基地| 欧美精品啪啪一区二区三区 | 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 亚洲精品自拍成人| 免费高清在线观看日韩| 黑丝袜美女国产一区| 亚洲av欧美aⅴ国产| 免费人妻精品一区二区三区视频| 亚洲av欧美aⅴ国产| 久久99一区二区三区| 国产成人精品久久久久久| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 国产精品九九99| 五月开心婷婷网| 黄色视频不卡| 最近中文字幕2019免费版| videosex国产| 人妻一区二区av| 国产精品国产av在线观看| 美女午夜性视频免费| 国产成人系列免费观看| 日本五十路高清| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 丁香六月天网| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 日韩大片免费观看网站| 黄色片一级片一级黄色片| 国产精品国产三级专区第一集| 亚洲国产看品久久| 日本91视频免费播放| 在线 av 中文字幕| 97人妻天天添夜夜摸| 亚洲精品日本国产第一区| 99国产精品一区二区三区| 热99国产精品久久久久久7| 欧美国产精品va在线观看不卡| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 一级毛片我不卡| 老司机深夜福利视频在线观看 | 最近手机中文字幕大全| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 丝袜脚勾引网站| 亚洲熟女毛片儿| 欧美亚洲日本最大视频资源| 中文字幕亚洲精品专区| 人人妻,人人澡人人爽秒播 | 19禁男女啪啪无遮挡网站| 十八禁网站网址无遮挡| 看十八女毛片水多多多| 久久女婷五月综合色啪小说| 久久国产精品大桥未久av| 老司机影院毛片| 国产福利在线免费观看视频| 伊人亚洲综合成人网| 制服诱惑二区| 视频区图区小说| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 国产片内射在线| 脱女人内裤的视频| 好男人视频免费观看在线| 中文字幕av电影在线播放| 精品国产国语对白av| 老司机影院成人| 黄色一级大片看看| av在线播放精品| 国产精品一区二区免费欧美 | 久久av网站| 欧美黑人欧美精品刺激| 免费高清在线观看日韩| 精品久久久久久电影网| av国产久精品久网站免费入址| www.自偷自拍.com| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 黑人猛操日本美女一级片| 狂野欧美激情性bbbbbb| 国产精品九九99| 一区二区av电影网| 99国产精品一区二区三区| 国产xxxxx性猛交| 欧美在线一区亚洲| xxxhd国产人妻xxx| 国产成人系列免费观看| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 国产人伦9x9x在线观看| 老熟女久久久| 日韩人妻精品一区2区三区| 欧美精品av麻豆av| 久久精品国产a三级三级三级| 欧美激情高清一区二区三区| 黑人猛操日本美女一级片| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 久久久久精品人妻al黑| 日韩大片免费观看网站| a 毛片基地| 国产免费一区二区三区四区乱码| 成年女人毛片免费观看观看9 | 欧美日韩黄片免| 美女大奶头黄色视频| 人人妻人人澡人人看| 日日爽夜夜爽网站| 免费黄频网站在线观看国产| cao死你这个sao货| 国产精品亚洲av一区麻豆| 日韩免费高清中文字幕av| 国产又爽黄色视频| 国产成人影院久久av| 色视频在线一区二区三区| www.自偷自拍.com| 一级片免费观看大全| 国产精品三级大全| 成年av动漫网址| 视频区欧美日本亚洲| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 美女国产高潮福利片在线看| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 亚洲专区中文字幕在线| 成年美女黄网站色视频大全免费| 国产成人免费无遮挡视频| 999久久久国产精品视频| 国产精品av久久久久免费| 少妇的丰满在线观看| 亚洲欧美一区二区三区国产| 久久精品人人爽人人爽视色| svipshipincom国产片| 欧美日韩精品网址| 女性生殖器流出的白浆| 欧美中文综合在线视频| 成年av动漫网址| 久久99一区二区三区| 中国国产av一级| 18禁观看日本| 一级,二级,三级黄色视频| 免费av中文字幕在线| 亚洲精品国产区一区二| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 18禁观看日本| 18在线观看网站| 脱女人内裤的视频| 午夜福利乱码中文字幕| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 老司机深夜福利视频在线观看 | 欧美日韩成人在线一区二区| 亚洲欧美清纯卡通| 久久精品国产亚洲av涩爱| 99久久精品国产亚洲精品| 下体分泌物呈黄色| 精品久久久久久久毛片微露脸 | 国精品久久久久久国模美| 丁香六月天网| 成人黄色视频免费在线看| 精品久久久精品久久久| 91字幕亚洲| 99九九在线精品视频| 国产午夜精品一二区理论片| 美女中出高潮动态图| 亚洲伊人色综图| 国产真人三级小视频在线观看| 久久精品成人免费网站| 日韩免费高清中文字幕av| a级片在线免费高清观看视频| 人人妻人人澡人人看| 下体分泌物呈黄色| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 91字幕亚洲| 伊人亚洲综合成人网| 亚洲 欧美一区二区三区| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 最黄视频免费看| 欧美日韩av久久| 国产欧美亚洲国产| 国产片内射在线| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 嫁个100分男人电影在线观看 | 精品少妇黑人巨大在线播放| 日韩av免费高清视频| 国产成人欧美| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o | 在线看a的网站| 我的亚洲天堂| 国产不卡av网站在线观看| 亚洲国产av新网站| 亚洲精品国产区一区二| 视频在线观看一区二区三区| 无限看片的www在线观看| a级片在线免费高清观看视频| 国产97色在线日韩免费| 久久久久久人人人人人| 久久精品亚洲av国产电影网| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 成年人免费黄色播放视频| av网站在线播放免费| 国产高清视频在线播放一区 | 国产成人啪精品午夜网站| 纯流量卡能插随身wifi吗| a级毛片在线看网站| 丝袜美足系列| 精品少妇黑人巨大在线播放| 中文字幕最新亚洲高清| 亚洲国产看品久久| 99热网站在线观看| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 免费高清在线观看视频在线观看| a级毛片黄视频| 国产三级黄色录像| 两个人看的免费小视频| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 狂野欧美激情性bbbbbb| 精品免费久久久久久久清纯 | 高清黄色对白视频在线免费看| av国产精品久久久久影院| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 日韩伦理黄色片| 亚洲欧美一区二区三区国产| 大型av网站在线播放| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 蜜桃在线观看..| 一本色道久久久久久精品综合| 免费在线观看影片大全网站 | 女性被躁到高潮视频| 视频区欧美日本亚洲| 精品第一国产精品| 成人午夜精彩视频在线观看| 国产一区亚洲一区在线观看| 久久久国产欧美日韩av| 99久久精品国产亚洲精品| 老汉色∧v一级毛片| 人成视频在线观看免费观看| 一本大道久久a久久精品| 亚洲精品美女久久av网站| √禁漫天堂资源中文www| 日本五十路高清| 美女主播在线视频| 激情视频va一区二区三区| 永久免费av网站大全| 亚洲av片天天在线观看| 黄色视频不卡| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 免费看不卡的av| 国产成人欧美在线观看 | 2018国产大陆天天弄谢| 无遮挡黄片免费观看| 美女主播在线视频| 国产一级毛片在线| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 午夜激情av网站| 久久人妻熟女aⅴ| 中文字幕高清在线视频| 在线天堂中文资源库| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 久久久国产欧美日韩av| 成人国产av品久久久| 一区二区三区四区激情视频| 考比视频在线观看| 一边亲一边摸免费视频| 日本欧美视频一区| 久久久久视频综合| 国产亚洲精品第一综合不卡| 桃花免费在线播放| av天堂在线播放| 日本午夜av视频| 一边摸一边做爽爽视频免费| 男女边摸边吃奶| 国产精品熟女久久久久浪| 极品人妻少妇av视频| 国产精品久久久久久精品古装| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 亚洲欧美精品自产自拍| 亚洲欧美清纯卡通| 黄频高清免费视频| 好男人视频免费观看在线| 黄色一级大片看看| 亚洲 欧美一区二区三区| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 国产淫语在线视频| 亚洲综合色网址| 男女午夜视频在线观看| 国产一区二区在线观看av| 999久久久国产精品视频| 99精品久久久久人妻精品| 啦啦啦啦在线视频资源| 欧美日韩视频精品一区| 亚洲精品国产av蜜桃| 精品熟女少妇八av免费久了| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 99精品久久久久人妻精品| 飞空精品影院首页| 少妇人妻 视频| 午夜视频精品福利| 日本wwww免费看| 免费在线观看影片大全网站 | 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 十八禁人妻一区二区| 欧美日韩精品网址| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 一级a爱视频在线免费观看| 一级片免费观看大全| 国产黄色视频一区二区在线观看| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 亚洲国产精品成人久久小说| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 亚洲七黄色美女视频| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 丝袜美腿诱惑在线| 老司机亚洲免费影院| 性色av乱码一区二区三区2| 日韩免费高清中文字幕av| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 国产在视频线精品| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 久久久精品区二区三区| 国产精品一国产av| 亚洲精品国产区一区二| 日本一区二区免费在线视频| 国产深夜福利视频在线观看| 桃花免费在线播放| 久久狼人影院| 中国国产av一级| 99re6热这里在线精品视频| 亚洲国产精品一区三区| 十八禁网站网址无遮挡| 国产免费视频播放在线视频| 久久国产精品大桥未久av| 午夜91福利影院| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 我要看黄色一级片免费的| 在线看a的网站| 老司机在亚洲福利影院| 又大又爽又粗| 婷婷色av中文字幕| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 18禁观看日本| 亚洲精品乱久久久久久| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 色视频在线一区二区三区| 岛国毛片在线播放| 午夜91福利影院| 精品免费久久久久久久清纯 | 亚洲人成电影免费在线| 亚洲少妇的诱惑av| 日韩av免费高清视频| 热99久久久久精品小说推荐| 久久精品久久精品一区二区三区| 免费高清在线观看日韩| 午夜福利影视在线免费观看| 亚洲一码二码三码区别大吗| 又紧又爽又黄一区二区| 欧美精品一区二区免费开放| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| e午夜精品久久久久久久| tube8黄色片| 午夜久久久在线观看| 国产精品久久久人人做人人爽| 国产高清国产精品国产三级| 国产一区二区三区综合在线观看| 丝袜美足系列| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 国产视频一区二区在线看| 91国产中文字幕| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 亚洲伊人久久精品综合| 精品一品国产午夜福利视频| 青春草亚洲视频在线观看| 亚洲,欧美,日韩| 91精品伊人久久大香线蕉| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 五月天丁香电影| 久久人妻福利社区极品人妻图片 | 国产一区二区三区av在线| 18禁观看日本| 大码成人一级视频| 国产精品久久久人人做人人爽| 欧美少妇被猛烈插入视频| 熟女av电影| 久久精品久久精品一区二区三区| 国产熟女欧美一区二区| 欧美精品亚洲一区二区| 国产色视频综合| 成人国产一区最新在线观看 | 午夜免费男女啪啪视频观看| 久久久久久久精品精品| 亚洲久久久国产精品| 亚洲成人手机| 国产亚洲欧美在线一区二区| 又黄又粗又硬又大视频| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o | 爱豆传媒免费全集在线观看| 午夜福利乱码中文字幕| 亚洲精品久久午夜乱码| 最近中文字幕2019免费版| 女性被躁到高潮视频| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 欧美成人精品欧美一级黄| 亚洲av男天堂| 人妻 亚洲 视频| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 久久鲁丝午夜福利片| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 交换朋友夫妻互换小说| 蜜桃国产av成人99| 国产精品亚洲av一区麻豆| 少妇被粗大的猛进出69影院| 国产1区2区3区精品| 日本a在线网址| 亚洲三区欧美一区| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 国产免费又黄又爽又色| 久久影院123| 国产三级黄色录像| 成年人午夜在线观看视频| 中文欧美无线码| 嫩草影视91久久| 大码成人一级视频| 国产精品二区激情视频| 亚洲欧美一区二区三区久久| 视频在线观看一区二区三区| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 亚洲欧洲日产国产| av有码第一页| 欧美日韩av久久| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 久久久国产欧美日韩av| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 久久精品人人爽人人爽视色| 午夜激情av网站| 最黄视频免费看| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 人人澡人人妻人| 欧美日韩综合久久久久久| 一二三四在线观看免费中文在| 精品国产乱码久久久久久小说| 亚洲第一av免费看| 久久综合国产亚洲精品| 欧美日韩综合久久久久久| 少妇 在线观看| 免费在线观看黄色视频的| 欧美97在线视频| 看免费av毛片| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 人人澡人人妻人| 成人亚洲欧美一区二区av| 亚洲专区国产一区二区| 日本一区二区免费在线视频| 欧美黑人精品巨大| 国产av国产精品国产| 亚洲一码二码三码区别大吗| 国产高清视频在线播放一区 | 五月天丁香电影| 亚洲熟女精品中文字幕| tube8黄色片| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 国产精品久久久人人做人人爽| 国产精品一区二区在线不卡| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 久热爱精品视频在线9| 免费人妻精品一区二区三区视频| 久久精品久久久久久久性| 久久这里只有精品19| 成年动漫av网址| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 亚洲av综合色区一区| 精品久久蜜臀av无| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 亚洲精品日本国产第一区| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 日本91视频免费播放| 久久午夜综合久久蜜桃| 亚洲九九香蕉| 国产精品久久久久久精品古装| 777米奇影视久久| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 日本欧美国产在线视频| 波多野结衣一区麻豆| 国产成人系列免费观看| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 久久人妻熟女aⅴ| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 成人免费观看视频高清| 日韩 亚洲 欧美在线| 人人妻人人澡人人看| 久久毛片免费看一区二区三区| 亚洲中文日韩欧美视频| 日韩av在线免费看完整版不卡| 久久人人97超碰香蕉20202| 精品一区在线观看国产| 国产三级黄色录像| 久久国产精品影院| 性少妇av在线| 久久亚洲国产成人精品v| 美国免费a级毛片| 大香蕉久久成人网| 国产xxxxx性猛交| 亚洲,一卡二卡三卡| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 黑人欧美特级aaaaaa片| 国产成人精品无人区| 中文字幕亚洲精品专区| 欧美中文综合在线视频| 黑丝袜美女国产一区| 国产精品国产三级国产专区5o| 一级毛片 在线播放| 久久精品国产亚洲av涩爱| 丝袜脚勾引网站| 亚洲欧洲国产日韩| 亚洲成人国产一区在线观看 | 嫁个100分男人电影在线观看 | 我的亚洲天堂| 人成视频在线观看免费观看| 亚洲国产精品国产精品| 丰满迷人的少妇在线观看| 99精国产麻豆久久婷婷| 性色av一级| 亚洲国产欧美在线一区| 黄色视频不卡| 国产视频一区二区在线看| 久久久久国产一级毛片高清牌| 国产亚洲欧美在线一区二区| 一边摸一边做爽爽视频免费| 久久久久国产一级毛片高清牌| 国产精品.久久久| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 少妇的丰满在线观看| 国产一区二区激情短视频 | 欧美人与善性xxx| 国产老妇伦熟女老妇高清| 99热国产这里只有精品6| 18禁国产床啪视频网站| 女性被躁到高潮视频| 精品久久久久久电影网| 久久av网站| 亚洲精品日本国产第一区| 精品久久久久久电影网| 91精品三级在线观看| 一二三四在线观看免费中文在| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| www.999成人在线观看| 亚洲国产精品成人久久小说|