• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    酸漿果實中多酚的提取及其抗氧化能力研究

    2017-05-18 03:10:05武乾英王曉聞郭瑜許惠芳王艷麗
    食品研究與開發(fā) 2017年10期
    關(guān)鍵詞:酸漿乙醇抗氧化

    武乾英,王曉聞,郭瑜,許惠芳,王艷麗

    (山西農(nóng)業(yè)大學食品科學與工程學院,山西太谷030801)

    酸漿果實中多酚的提取及其抗氧化能力研究

    武乾英,王曉聞*,郭瑜,許惠芳,王艷麗

    (山西農(nóng)業(yè)大學食品科學與工程學院,山西太谷030801)

    以酸漿果實為研究對象,對其多酚提取工藝進行優(yōu)化并分析其(Ferric reducing antioxidant power,F(xiàn)RAP)還原亞鐵離子的能力)。采用響應面法對乙醇體積分數(shù)、料液比、溫度、提取時間進行優(yōu)化,確定酸漿果實多酚的最佳提取條件,并采用FRAP對多酚提取物的體外抗氧化能力進行分析。結(jié)果表明:酸漿果實多酚的最佳提取條件為乙醇體積分數(shù)61.5%、料液比1∶15(g/mL)、浸提溫度59℃、提取時間102 min,所得多酚得率為0.899%DW,與預測值偏差不大。酸漿多酚10 mg/mL時FRAP值為0.495 mmol/L。研究表明酸漿果實中含有多酚類物質(zhì),且具有一定的還原亞鐵離子的能力。

    酸漿果實;多酚;提取;亞鐵離子還原能力

    酸漿 [Physalis alkekengi L.var.franchetii(Mast.)Makino]為茄科酸漿屬多年生草本植物,又名天泡果、燈籠草等,屬野生資源,目前被認為是一種具有較高營養(yǎng)價值的稀特果蔬[1]。酸漿的根及全草入藥,具有利咽、化痰、清熱、利尿等功能。由于其含有多種甾類化合物,所以中醫(yī)藥上可廣泛應用于解毒等[2]。

    酸漿果實中含有豐富的常量元素及多種微量元素[3-4]。同時酸漿果實中含有豐富多種的植物化學成分,目前對酸漿的研究多集中在酸漿苦素、皂苷類及生物堿類的活性分析,然而酸漿果實中的多酚類物質(zhì)的研究甚少。

    因此本研究采用響應曲面法對酸漿果實中多酚的提取條件進行優(yōu)化,并采用FRAP法分析其體外總抗氧能力,為提高酸漿的綜合利用率提供科學參考。

    1 材料與方法

    1.1 材料與儀器

    酸漿果實粉末:酸漿果實采自山西省大同市陽高縣。將新鮮酸漿果實脫萼、除雜、清洗后,榨汁并冷凍干燥,經(jīng)粉碎、40目過篩即得酸漿果實粉末,置于-80℃保存?zhèn)溆谩?/p>

    乙醇、乙醚、沒食子酸、碳酸鈉、FeSO4、醋酸緩沖液、鹽酸、三氯化鐵(均為AR級);2,4,6-三吡啶基三嗪(TPTZ)、Folin-Ciocalteu:北京索萊寶科技有限公司。

    JYZ-D51榨汁機:九陽股份有限公司;R-1001N旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、SHB-III循環(huán)水式真空泵、WB-200水浴鍋:鄭州長城科工貿(mào)有限公司;BS210S電子天平:北京賽多利斯天平有限公司;JDG-0.2真空冷凍干燥機:蘭州科近真空凍干技術(shù)有限公司。

    1.2 方法

    1.2.1 標準曲線的繪制及多酚含量的測定

    配制沒食子酸標準液濃度為0、20、40、60、80、100 μg/mL樣液。取樣液0.2 mL,加入2%Na2CO3溶液4 mL,福林試劑0.2 mL,搖勻置25℃恒溫水浴中放置30 min,765 nm下測定吸光值。得到吸光度值X與沒食子酸標準溶液濃度(Y,mg/mL)之間的回歸方程為:Y=0.033 54X-0.001 09,R2=0.999 52。

    1.2.2 酸漿果實中多酚的提取及其測定

    稱取1 g的酸漿果粉,按照一定的料液比1∶5、1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30(g/mL)加入一定體積分數(shù)的乙醇溶液(0%、20%、40%、60%、80%、100%),在一定溫度(20、30、40、50、60、70℃)下提取一定時間(40、60、80、100、120、140 min)后,離心除雜。收集上清液減壓濃縮,并用乙醚脫脂,采用福林酚法測定樣品中的多酚含量及其得率。將提取的酸漿果實多酚粗提液定容至100 mL,按照以上方法,取樣液0.2 mL,加入2%Na2CO3溶液4 mL,福林試劑0.2 mL,搖勻置25℃恒溫水浴中放置30 min,765 nm下測定吸光值,平行3次測定其吸光值,根據(jù)標準曲線測定其對應的多酚得率,結(jié)果按下式計算:

    式中:W為多酚的得率,%;C為由粗提液測定吸光值后,在標準曲線中所對應沒食子酸質(zhì)量濃度,mg/mL;V為提取液定容后的體積,100 mL;m為稱樣量,g。

    1.2.3 單因素試驗及其響應曲面法確定最佳提取工藝

    1.2.3.1 單因素試驗

    以1.2.2中4組因素做單因素試驗,每組試驗平行進行3次,確定各因素適宜的范圍。

    1.2.3.2 響應曲面法試驗設計確定最佳提取工藝

    在單因素試驗基礎上,確定中心組合試驗設計的自變量及水平。根據(jù)Box-Behnken中心組合試驗設計原理,以多酚含量為響應值,選取乙醇體積分數(shù)、料液比、提取時間、提取溫度4個因素,設計四因素三水平響應面分析試驗,用響應面分析方法對數(shù)據(jù)進行回歸分析及顯著性檢驗,來確定最佳工藝參數(shù)。

    1.2.4 亞鐵離子還原能力分析法(FRAP)測定酸漿多酚抗氧化能力

    FRAP工作液:2.5 mL10 mmol/L的TPTZ工作液(用40 mmol/L的鹽酸溶解),2.5 mL 20 mmol/L的FeCl3·6H2O和25 mL 0.3 mol/L的醋酸緩沖液(pH3.6)混合均勻即得。

    配制1 mmol/L的FeSO4溶液。在0~400 μL范圍內(nèi)取不同體積于試管中,加蒸餾水到2 mL,用FRAP工作液加到5 mL,搖勻,在室溫放置30 min,在593 nm處測吸光值。以吸光值為縱坐標,F(xiàn)eSO4濃度為橫坐標,得標準曲線回歸方程為Y=0.000 59X-0.012 31,R2= 0.996 42。

    將多酚粗提物進行純化后(純度為58.33%)配制為溶液,取同樣體積的不同濃度多酚樣品溶液,加蒸餾水到2 mL處,再加FRAP工作液至5 mL,搖勻,室溫放置30 min,不加樣品改為加蒸餾水作為參照,在593 nm處測吸光值,每個平行測定3次,取平均值。由還原力標準曲線,得出相同吸光度值處FeSO4的濃度,將此濃度的數(shù)值作為FRAP值。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 提取條件對多酚提取效果的影響

    2.1.1 乙醇濃度對酸漿多酚含量的影響

    精確稱取1 g酸漿果粉,按照1∶15(g/mL)的料液比加入一定體積分數(shù)的乙醇溶液(0%、20%、40%、60%、80%、100%),在60℃下提取100 min,乙醇濃度對酸漿多酚含量的影響結(jié)果見圖1。

    圖1 乙醇體積分數(shù)對酸漿多酚得率的影響Fig.1 Effect of ethanol concentration on the extraction of polyphenols

    由圖1可以看出,酸漿多酚提取量隨著乙醇體積分數(shù)的增大而先增加后減小,在60%時達到最大值,為7.654 mg/g,得率為0.765%。當乙醇濃度過高時,溶劑的極性過低,從而導致提取量下降,而且會導致酸漿苦素等其他物質(zhì)的提出,給之后的純化及其抗氧化試驗造成影響。因此,選擇60%的乙醇作為提取溶劑。后續(xù)響應面試驗乙醇體積分數(shù)確定為50%、60%、70%3個水平。

    2.1.2 料液比對酸漿多酚濃度的影響

    精確稱取1 g酸漿果粉,按照一定的料液比1∶5、1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30(g/mL)加入體積分數(shù)60%的乙醇溶液,在60℃下提取100 min,料液比對酸漿多酚含量的影響結(jié)果見圖2。

    圖2 料液比對酸漿多酚得率的影響Fig.2 Effect of solid-to-liquid ratio on the extraction of polyphenols

    由圖2可以看出,料液比在1∶10(g/mL)~1∶15(g/ mL)的范圍內(nèi),多酚的提取量得到了明顯提高,將料液比繼續(xù)提高對酸漿多酚的提取量無顯著性影響。除此之外,料液比過大能夠造成資源的浪費。因此,最佳料液比為1∶15(g/mL)。后續(xù)響應面試驗料液比確定為1∶10、1∶15、1∶20(g/mL)。

    2.1.3 提取時間對多酚含量的影響

    精確稱取1 g酸漿果粉,按照料液比1∶15(g/mL)加入體積分數(shù)60%的乙醇溶液,在60℃下提取一定時間(40、60、80、100、120、140 min),提取時間對酸漿多酚含量的影響結(jié)果見圖3。

    圖3 提取時間對酸漿多酚得率的影響Fig.3 Effect of time on the extraction of polyphenols

    由圖3可以看出,在100 min內(nèi),多酚提取量隨著時間的變長而增大,當提取時間為100 min時,提取量最大為8.712 mg/g,得率為0.871%。時間較短時,結(jié)合氫鍵不能完全被破壞,時間過長時,則會引起其中多酚的損失。后續(xù)響應面試驗提取時間確定為80、100、120 min。

    2.1.4 提取溫度對多酚含量的影響

    精確稱取1 g酸漿果粉,按照1∶15(g/mL)的料液比加入體積分數(shù)為60%的乙醇溶液,在一定溫度(20、30、40、50、60、70℃)下提取100 min,提取溫度對酸漿多酚含量的影響結(jié)果見圖4。

    圖4 提取溫度對酸漿多酚得率的影響Fig.4 Effect of temperature on the extraction of polyphenols

    由圖4可以看出,在30℃~60℃范圍內(nèi),隨著溫度的升高,多酚提取量升高,在60℃達到最高點,提取量為8.318 mg/g,得率為0.832%。溫度進一步升高,高溫促使多酚類物質(zhì)的氧化變性,因此,多酚得率有著明顯的下降。因此,選擇60℃作為最佳提取溫度。后續(xù)響應面試驗確定提取溫度為50、60、70℃。

    2.2 響應面分析

    2.2.1 多元二次響應面回歸模型的建立

    因素水平編碼見表1。試驗結(jié)果如表2。

    表1 因素水平編碼表Table 1 The coding table of factors and levels

    表2 響應面分析試驗設計與結(jié)果Table 2 The design and results of response surface experiments

    續(xù)表2 響應面分析試驗設計與結(jié)果Continue table 2 The design and results of response surface experiments

    2.2.2 方差分析與顯著性檢驗

    通過Design Expert數(shù)據(jù)分析軟件進行回歸分析,得到的方差分析結(jié)果如表3所示。

    表3 方差分析結(jié)果Table 3 The results of variance analysis

    由表3可知,模型P<0.05,該二次方程模型達到顯著水平,模型失擬項P值為0.120 7>0.05,失擬項不顯著,說明其他情況對模型干擾程度小,該響應面回歸模型擬合度良好。在該模型中,對多酚含量有顯著影響的有 B、C、AD、A2、B2及D2,該模型信噪比為7.128,該值大于4則表明該模型可以用于預測,該模型擬合優(yōu)度R2和調(diào)整R2分別為0.145 8與0.569 8,兩者的差值在可以接受的范圍內(nèi)。對表2的試驗數(shù)據(jù)進行二次多項式回歸擬合,得到以乙醇濃度、料液比、提取時間、提取溫度為自變量的四元二次回歸方程:

    2.2.3 酸漿多酚提取量響應面分析

    酸漿多酚提取量響應面分析見圖5。通過Box-Behnken試驗得到的多元二次回歸模型所作的響應面圖及其高線圖可用于評價試驗因素對酸漿多酚得率影響的兩兩交互作用以及確定各個因素的最佳水平范圍。

    圖5 乙醇體積分數(shù)和提取溫度對酸漿多酚得率影響的響應面圖和等高線圖Fig.5 Response surface contour plots showing the effects of ethanol concentration and temperatureon the extraction of polyphenols

    圖5表明,固定乙醇體積分數(shù)、多酚得率隨著提取溫度的升高而增加,但是溫度過高容易使多酚發(fā)生氧化,從而降低得率;固定提取溫度,多酚得率隨乙醇體積分數(shù)的增加先增加后減小。

    通過數(shù)據(jù)分析,提取酸漿多酚最佳工藝條件為:乙醇體積分數(shù)61.53%、料液比1∶15.28(g/mL)、浸提溫度58.93℃、提取時間102.35 min,多酚的提取量為9.048 mg/g,得率為0.905%。考慮到可操作性,將條件調(diào)整為乙醇體積分數(shù)61.5%、料液比1∶15(g/mL)、浸提溫度59℃、提取時間102 min,進行驗證試驗得到多酚含量為8.986 mg/g,得率為0.899%。與理論值基本相符,進一步驗證了回歸模型的可靠性,因此響應面法對酸漿多酚提取的條件優(yōu)化是可行的。

    2.3 FRAP法測定酸漿多酚提取物抗氧化能力

    不同濃度酸漿多酚及其對應的FRAP值如圖6所示。

    圖6 多酚濃度與FRAP值的相關(guān)性Fig.6 The correlation between the polyphenols and ferric reducing antioxidant power

    從圖6可以看出,隨著酸漿多酚濃度的增加,F(xiàn)RAP值也在不斷增加,即抗氧化活性不斷增加。酸漿多酚還原亞鐵離子的能力與其濃度總體呈依賴關(guān)系。當酸漿多酚濃度為10 mg/mL時FRAP值為0.495 mmol/mL,表明其有潛在的體外抗氧化能力。

    3 結(jié)論

    經(jīng)優(yōu)化后,酸漿多酚的提取條件為乙醇體積分數(shù)61.5%、料液比1∶15(g/mL)、浸提溫度59℃、提取時間102 min,進行驗證試驗得到多酚含量為8.986 mg/g,得率為0.899%,與理論值基本相符,進一步驗證了回歸模型的可靠性。之后將酸漿多酚粗提物純化后純度為58.33%。同時研究表明酸漿多酚濃度為10 mg/mL時FRAP值為0.495 mmol/mL,對亞鐵離子有一定的還原能力,該提取物具有一定的體外抗氧化能力。

    [1] 胡春霞,佟鳳琴.酸漿果實皮色素的提取及穩(wěn)定性研究[J].遼寧師專學報(自然科學版),2001,3(2):91-93

    [2] 孟慶然,李立博,王曉聞.酸漿宿萼總皂苷體外抑菌效果研究[J].食品科學,2013,34(19):84-87

    [3]楊曉虹,陳滴,周曉平.酸漿果實無機元素和氨基酸的含量測定[J].人參研究.2000,12(2):34-36

    [4]張初航.錦燈籠的活性成分及質(zhì)量評價研究[D].沈陽:沈陽藥科大學,2009

    [5] 龔珊,單立冬,張玉英,等.掛金燈鎮(zhèn)痛作用的實驗[J].蘇州大學學報(醫(yī)學版),2002,22(4):380-382

    [6]陳榮,梁敬鈺,楊洋,等.酸漿化學成分及酸漿苦素G的結(jié)構(gòu)訂正[J].中國天然藥物,2007,5(3):186-189

    [7] Matsuura T,Kawai M,Nakashima R,et al.Structure of physalin A and physalin B,13,14-seco-16,24-cyclo-steroids from Physalis alkekengi Var.Francheti[J].Chem Soc C,1970,5:664-670

    [8] Lin Y S,Chiang H C.Immunondulatory activity of various fractions derived from Physalia angulata L.extract[J].Am J Chin Med,2002,20 (3/4):233-243

    [9]張英蕾.毛酸漿免疫活性物質(zhì)的精制及評價[D].哈爾濱:東北林業(yè)大學,2010

    [10]王曉聞,張魯,任石濤.酸漿宿萼抗氧化活性研究[J].中國食品學報,2010,10(4):136-140

    [11]張國治,薛慧.芒果皮中多酚提取工藝的優(yōu)化[J].河南工業(yè)大學學報(自然科學版),2011,32(3):35-40,55

    [12]SPIGNO G,TRAMELLI L,FAVERIMDD.Effects of extraction time, temperature and solvent on concentration and antioxidant activity of grape marc phenolics[J].Journal of Food Engineering,2007,81:200-208

    Extraction and Antioxidant Activity of Polyphenols from Physalis alkekengi Fruit

    WU Qian-ying,WANG Xiao-wen*,GUO Yu,XU Hui-fang,WANG Yan-li
    (College of Food Science and Engineering,Shanxi Agricultural University,Taigu 030801,Shanxi,China)

    The optimal extraction conditions and FRAP(ferric reducing antioxidant power)of polyphenols from Physalis alkekengi L.vdx.franchetii(Mast)Makino fruit were investigated.Response surface methodology was employed to optimize extraction process of polyphenols from P.alkekengi fruit by taking ethanol concentration,solid-liquid ratio,extraction temperature and extraction time as factors,and its antioxidant activity was investigated by observing its FRAP.The optimized conditions were as follows:the ethanol concentration was 61.5%,theproportionofsolid-liquidwas1∶15(g/mL),theextractiontemperaturewas59℃,andtheextractiontime was 102 min.Under the optimal conditions,the maximum extraction amounts of polyphenols was 0.899%DW.For polyphenols from P.alkekengi fruit,the maximum FRAP value was 0.495mmol/L at a concentration of 10 mg/mL.The results demonstrated that P.alkekengi fruit rich in polyphenols had a certain in ferric reducing antioxidant power.

    Physalis alkekengi fruit;polyphenols;extraction;ferric reducing antioxidant power

    10.3969/j.issn.1005-6521.2017.10.008

    2016-08-19

    山西省國際科技合作項目(2015081024);山西省科技攻關(guān)項目(20150311020-2);山西省回國留學人員科研資助項目(2016-073)

    武乾英(1991—),男(漢),碩士研究生,研究方向:食品營養(yǎng)與安全。

    *通信作者:王曉聞(1968—),女(漢),教授,碩士生導師,博士,研究方向:食品營養(yǎng)與安全。

    猜你喜歡
    酸漿乙醇抗氧化
    酸漿草
    乙醇和乙酸常見考點例忻
    6000倍抗氧化能力,“完爆”維C!昶科將天然蝦青素研發(fā)到極致
    酸漿苦素B的研究進展
    中成藥(2018年7期)2018-08-04 06:04:14
    酸漿苦味素B對人乳腺癌MDA-MB-231細胞的抑制作用
    中成藥(2017年7期)2017-11-22 07:33:54
    楊木發(fā)酵乙醇剩余物制備緩釋肥料
    白地霉不對稱還原1-萘乙酮制備(S) -1-萘基-1-乙醇
    豬皮膠原蛋白抗氧化肽的分離純化及體外抗氧化活性研究
    乳清低聚肽的制備及其抗氧化活性
    綠茶抗氧化肽的分離純化與抗氧化活性研究
    国产精品一区二区在线不卡| 久久狼人影院| 久久中文看片网| 性色av乱码一区二区三区2| 操出白浆在线播放| 国产1区2区3区精品| 亚洲五月色婷婷综合| 国产xxxxx性猛交| 大陆偷拍与自拍| 女警被强在线播放| 男男h啪啪无遮挡| 国产亚洲av高清不卡| 丁香欧美五月| 日本免费a在线| bbb黄色大片| 亚洲情色 制服丝袜| 久久国产精品影院| 国产91精品成人一区二区三区| 欧美在线一区亚洲| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 久久久久久久午夜电影| 香蕉国产在线看| 国产片内射在线| 国产精品国产高清国产av| 久久人人精品亚洲av| 90打野战视频偷拍视频| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 亚洲精品av麻豆狂野| 国产午夜福利久久久久久| 精品国产美女av久久久久小说| 久久久久久久精品吃奶| 日本三级黄在线观看| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 91成人精品电影| 嫩草影院精品99| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 一级毛片女人18水好多| 免费在线观看影片大全网站| 色综合站精品国产| 欧美黄色淫秽网站| 美女国产高潮福利片在线看| 午夜福利欧美成人| 欧美成人性av电影在线观看| 多毛熟女@视频| 欧美不卡视频在线免费观看 | ponron亚洲| 一二三四社区在线视频社区8| 禁无遮挡网站| 看免费av毛片| 国产精品影院久久| 国产精品av久久久久免费| 亚洲人成电影免费在线| 久久青草综合色| 色哟哟哟哟哟哟| 欧美黑人欧美精品刺激| 99精品久久久久人妻精品| 免费观看精品视频网站| 亚洲伊人色综图| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 国产单亲对白刺激| 亚洲av五月六月丁香网| 色综合亚洲欧美另类图片| 亚洲国产欧美一区二区综合| svipshipincom国产片| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 在线永久观看黄色视频| 好男人在线观看高清免费视频 | 亚洲成人免费电影在线观看| 久久精品影院6| 在线观看日韩欧美| 亚洲一区二区三区不卡视频| 丁香欧美五月| 久久久久国内视频| 国产在线精品亚洲第一网站| 亚洲全国av大片| 精品久久久久久久毛片微露脸| 热99re8久久精品国产| 国产成人免费无遮挡视频| 18禁观看日本| 露出奶头的视频| 亚洲人成伊人成综合网2020| 欧美国产精品va在线观看不卡| 亚洲第一av免费看| a级毛片在线看网站| 在线播放国产精品三级| 麻豆久久精品国产亚洲av| 一二三四社区在线视频社区8| 99香蕉大伊视频| 看片在线看免费视频| 日韩精品青青久久久久久| 亚洲人成77777在线视频| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 午夜福利影视在线免费观看| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 色播亚洲综合网| 国产av一区在线观看免费| 麻豆成人av在线观看| 精品乱码久久久久久99久播| 国产国语露脸激情在线看| 亚洲中文日韩欧美视频| 亚洲国产精品999在线| 国产成人精品久久二区二区91| 精品日产1卡2卡| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 国产91精品成人一区二区三区| 亚洲精品国产色婷婷电影| 亚洲欧美激情在线| 90打野战视频偷拍视频| 日韩欧美在线二视频| 欧美成人午夜精品| 视频区欧美日本亚洲| 极品人妻少妇av视频| 成人永久免费在线观看视频| 国产主播在线观看一区二区| 波多野结衣一区麻豆| 丁香六月欧美| 国产xxxxx性猛交| 色精品久久人妻99蜜桃| 黄片播放在线免费| 久久婷婷成人综合色麻豆| 国产午夜精品久久久久久| 精品国产一区二区久久| av免费在线观看网站| 久久精品国产清高在天天线| 美女 人体艺术 gogo| 亚洲专区字幕在线| 18禁国产床啪视频网站| 中文字幕人妻熟女乱码| 岛国在线观看网站| 亚洲久久久国产精品| 女警被强在线播放| 超碰成人久久| 亚洲久久久国产精品| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 国产乱人伦免费视频| 18禁国产床啪视频网站| 欧美色欧美亚洲另类二区 | 麻豆av在线久日| 黑人欧美特级aaaaaa片| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 午夜免费激情av| 啦啦啦韩国在线观看视频| 亚洲精品在线观看二区| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 久久久精品欧美日韩精品| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 动漫黄色视频在线观看| 俄罗斯特黄特色一大片| 日本三级黄在线观看| 亚洲一区二区三区色噜噜| 久久精品人人爽人人爽视色| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| ponron亚洲| 制服丝袜大香蕉在线| 色综合欧美亚洲国产小说| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 欧美午夜高清在线| aaaaa片日本免费| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 精品国产一区二区三区四区第35| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 婷婷六月久久综合丁香| 在线观看日韩欧美| 在线观看66精品国产| 国产精品九九99| 欧美丝袜亚洲另类 | 日本 欧美在线| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 一进一出抽搐gif免费好疼| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 午夜久久久在线观看| 亚洲成人免费电影在线观看| 免费看美女性在线毛片视频| 淫妇啪啪啪对白视频| 久久欧美精品欧美久久欧美| 色播亚洲综合网| 免费观看精品视频网站| 久久国产乱子伦精品免费另类| a级毛片在线看网站| 啦啦啦观看免费观看视频高清 | 日本三级黄在线观看| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 久久久久久久久久久久大奶| 日日夜夜操网爽| 午夜影院日韩av| 免费人成视频x8x8入口观看| 精品久久久久久久人妻蜜臀av | 久久久国产成人免费| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 日本 av在线| 午夜精品在线福利| 欧美性长视频在线观看| 99精品欧美一区二区三区四区| 国产麻豆69| 国产精品一区二区精品视频观看| 国产一区二区在线av高清观看| 亚洲免费av在线视频| 97人妻天天添夜夜摸| 国产一区二区三区综合在线观看| www.精华液| 黄色 视频免费看| 搡老妇女老女人老熟妇| 看片在线看免费视频| 在线观看一区二区三区| 可以在线观看的亚洲视频| 亚洲专区字幕在线| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 很黄的视频免费| 麻豆成人av在线观看| 亚洲人成77777在线视频| 国产精品永久免费网站| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 久久人妻熟女aⅴ| av天堂久久9| 18禁观看日本| 1024视频免费在线观看| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 精品乱码久久久久久99久播| 中出人妻视频一区二区| 自线自在国产av| 99国产综合亚洲精品| 在线播放国产精品三级| 国产xxxxx性猛交| 好男人在线观看高清免费视频 | 欧美日本亚洲视频在线播放| 在线观看免费午夜福利视频| www日本在线高清视频| 黄片小视频在线播放| 欧美黄色淫秽网站| 亚洲全国av大片| 欧美在线一区亚洲| 在线观看舔阴道视频| 少妇被粗大的猛进出69影院| av片东京热男人的天堂| 亚洲中文字幕日韩| 18禁美女被吸乳视频| 脱女人内裤的视频| 在线免费观看的www视频| 国产97色在线日韩免费| 纯流量卡能插随身wifi吗| 99国产精品一区二区蜜桃av| 国产亚洲精品一区二区www| 国产精品,欧美在线| 国内精品久久久久久久电影| 999精品在线视频| av视频在线观看入口| 免费观看精品视频网站| 亚洲第一青青草原| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 老熟妇仑乱视频hdxx| 国产精品免费一区二区三区在线| 亚洲欧美精品综合久久99| 老司机靠b影院| 久久久久久久精品吃奶| 国产成+人综合+亚洲专区| 男女床上黄色一级片免费看| 国产片内射在线| 精品久久久久久,| 一级作爱视频免费观看| 一区二区三区激情视频| 国产成人精品无人区| 久久 成人 亚洲| 少妇被粗大的猛进出69影院| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| www.自偷自拍.com| 在线观看日韩欧美| 国产一区二区三区视频了| 最近最新中文字幕大全免费视频| 久久国产亚洲av麻豆专区| 国产成人系列免费观看| 欧美日韩福利视频一区二区| 亚洲国产高清在线一区二区三 | 麻豆av在线久日| 中文字幕精品免费在线观看视频| 成人免费观看视频高清| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 亚洲人成电影观看| 在线观看66精品国产| 精品免费久久久久久久清纯| 国产精品亚洲美女久久久| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 亚洲第一电影网av| av在线播放免费不卡| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 国产成人精品无人区| 黑人操中国人逼视频| 欧美日本中文国产一区发布| 国产成人av激情在线播放| 一区福利在线观看| 大码成人一级视频| 午夜福利18| 日本一区二区免费在线视频| 久久婷婷成人综合色麻豆| 一边摸一边抽搐一进一小说| 国产精品99久久99久久久不卡| 欧美激情高清一区二区三区| 热re99久久国产66热| www.999成人在线观看| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 国产精品久久久av美女十八| 亚洲免费av在线视频| 自线自在国产av| 真人一进一出gif抽搐免费| 国产精品99久久99久久久不卡| 久久人妻熟女aⅴ| 9191精品国产免费久久| 成人免费观看视频高清| 久久青草综合色| 亚洲第一青青草原| 中文字幕最新亚洲高清| 91麻豆精品激情在线观看国产| 欧美一级毛片孕妇| 亚洲国产精品999在线| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 12—13女人毛片做爰片一| 久久久久国内视频| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 久久精品国产综合久久久| 亚洲精品粉嫩美女一区| 精品国内亚洲2022精品成人| www.999成人在线观看| 久久影院123| 国产av一区二区精品久久| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 亚洲第一av免费看| 午夜福利成人在线免费观看| av欧美777| 久久久国产成人精品二区| 欧美一区二区精品小视频在线| 亚洲成av人片免费观看| 激情视频va一区二区三区| 日韩av在线大香蕉| 亚洲色图av天堂| 国产高清有码在线观看视频 | 性少妇av在线| www.自偷自拍.com| 99久久精品国产亚洲精品| 欧美+亚洲+日韩+国产| 99香蕉大伊视频| 国产成人欧美| 久9热在线精品视频| 999久久久精品免费观看国产| 日韩高清综合在线| 欧美成人午夜精品| 给我免费播放毛片高清在线观看| 日韩中文字幕欧美一区二区| 午夜福利视频1000在线观看 | 亚洲人成伊人成综合网2020| 国产男靠女视频免费网站| 欧美日韩福利视频一区二区| 欧美+亚洲+日韩+国产| 可以在线观看的亚洲视频| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 人人妻人人澡人人看| 午夜视频精品福利| 热99re8久久精品国产| 18禁观看日本| 欧美色欧美亚洲另类二区 | 国产精品 欧美亚洲| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 国产亚洲欧美精品永久| 久久亚洲精品不卡| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 国产高清激情床上av| 亚洲avbb在线观看| 免费av毛片视频| 日本在线视频免费播放| 黄片小视频在线播放| 九色国产91popny在线| 久久中文看片网| xxx96com| 老汉色av国产亚洲站长工具| 看片在线看免费视频| 女性生殖器流出的白浆| 欧美日本视频| 久久精品国产亚洲av高清一级| 欧美乱色亚洲激情| а√天堂www在线а√下载| 国产免费男女视频| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 亚洲最大成人中文| 色精品久久人妻99蜜桃| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 中文字幕人妻熟女乱码| 久久久久亚洲av毛片大全| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 国产av在哪里看| 操美女的视频在线观看| 欧美在线黄色| 国产高清videossex| 一进一出好大好爽视频| 黑人欧美特级aaaaaa片| 久久香蕉国产精品| 亚洲av片天天在线观看| 亚洲av第一区精品v没综合| 又黄又爽又免费观看的视频| 丝袜人妻中文字幕| 麻豆久久精品国产亚洲av| 99精品久久久久人妻精品| 91字幕亚洲| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 精品久久久久久成人av| 国产精品免费一区二区三区在线| 亚洲色图综合在线观看| 精品久久久久久久毛片微露脸| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产亚洲精品久久久久5区| 超碰成人久久| 1024视频免费在线观看| 999精品在线视频| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 久久人人精品亚洲av| 亚洲欧美精品综合久久99| 国产主播在线观看一区二区| 国产在线精品亚洲第一网站| 视频区欧美日本亚洲| 亚洲一区二区三区不卡视频| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 成人三级黄色视频| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 精品乱码久久久久久99久播| 91精品国产国语对白视频| av在线天堂中文字幕| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 日韩av在线大香蕉| 激情视频va一区二区三区| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 国产精品影院久久| 校园春色视频在线观看| 99热只有精品国产| 黄色毛片三级朝国网站| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 少妇熟女aⅴ在线视频| 国产精品 国内视频| 久久久国产欧美日韩av| 日本在线视频免费播放| 国产一区二区三区综合在线观看| 欧美日本视频| 母亲3免费完整高清在线观看| 国产精品亚洲一级av第二区| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | a在线观看视频网站| 动漫黄色视频在线观看| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 十分钟在线观看高清视频www| 一进一出抽搐gif免费好疼| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 午夜福利影视在线免费观看| 色综合站精品国产| 脱女人内裤的视频| 亚洲视频免费观看视频| 亚洲国产中文字幕在线视频| 免费少妇av软件| 在线av久久热| 午夜福利18| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 此物有八面人人有两片| 成熟少妇高潮喷水视频| 国产私拍福利视频在线观看| 亚洲色图综合在线观看| 黄频高清免费视频| 久久香蕉精品热| 亚洲人成电影免费在线| 搡老岳熟女国产| www.熟女人妻精品国产| 亚洲精品美女久久av网站| 国产亚洲精品av在线| cao死你这个sao货| 老汉色∧v一级毛片| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 一a级毛片在线观看| 欧美久久黑人一区二区| 黑丝袜美女国产一区| 老司机在亚洲福利影院| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 午夜福利18| 伦理电影免费视频| 欧美激情极品国产一区二区三区| 天天一区二区日本电影三级 | 在线十欧美十亚洲十日本专区| 日韩大码丰满熟妇| 成人国产一区最新在线观看| 99久久综合精品五月天人人| 亚洲成人国产一区在线观看| 亚洲av成人一区二区三| 日本 欧美在线| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 国产精品亚洲av一区麻豆| 精品国产美女av久久久久小说| 丁香六月欧美| 欧美成人性av电影在线观看| 亚洲精品国产区一区二| 国产亚洲欧美98| 精品人妻在线不人妻| 国产精品电影一区二区三区| 国产亚洲精品久久久久5区| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 无人区码免费观看不卡| 最好的美女福利视频网| 操美女的视频在线观看| 多毛熟女@视频| 男女下面进入的视频免费午夜 | 日韩大码丰满熟妇| 国产精品1区2区在线观看.| 啪啪无遮挡十八禁网站| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 91av网站免费观看| 又黄又粗又硬又大视频| 男女之事视频高清在线观看| 搞女人的毛片| 久久人妻熟女aⅴ| 欧美国产精品va在线观看不卡| 高清黄色对白视频在线免费看| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 狠狠狠狠99中文字幕| 女性被躁到高潮视频| 最近最新中文字幕大全免费视频| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 啪啪无遮挡十八禁网站| 一级a爱视频在线免费观看| 久久精品成人免费网站| 女同久久另类99精品国产91| 亚洲精品久久国产高清桃花| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 青草久久国产| 纯流量卡能插随身wifi吗| 人人妻人人澡人人看| 99国产极品粉嫩在线观看| 精品无人区乱码1区二区| 最好的美女福利视频网| 两个人看的免费小视频| 日韩欧美免费精品| 日韩中文字幕欧美一区二区| 亚洲免费av在线视频| 黄片小视频在线播放| 国产精品亚洲美女久久久| 一区二区三区精品91| 亚洲成人精品中文字幕电影| 国产人伦9x9x在线观看| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 久久香蕉精品热| 十分钟在线观看高清视频www| 亚洲,欧美精品.| 一本综合久久免费| 桃红色精品国产亚洲av| 亚洲欧美日韩无卡精品| 啦啦啦观看免费观看视频高清 | 国产一区二区三区视频了| 狂野欧美激情性xxxx| 88av欧美| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 在线观看日韩欧美| 国产高清激情床上av| 一区二区三区国产精品乱码| 一级片免费观看大全| 波多野结衣高清无吗| 亚洲天堂国产精品一区在线| 香蕉丝袜av| 色哟哟哟哟哟哟| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 精品福利观看| 亚洲欧美激情综合另类| 亚洲av美国av| netflix在线观看网站| 亚洲人成电影观看| 亚洲国产精品999在线| 啦啦啦韩国在线观看视频| 女性生殖器流出的白浆| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 成人欧美大片| 久久精品国产清高在天天线| 国产高清videossex| 日韩欧美一区视频在线观看| 怎么达到女性高潮| 99国产综合亚洲精品| 曰老女人黄片| 一区在线观看完整版| 久久久国产欧美日韩av| 亚洲国产精品久久男人天堂| 国产精品一区二区三区四区久久 | 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 久久这里只有精品19| 国产精品综合久久久久久久免费 | 久久久国产成人精品二区| 波多野结衣高清无吗| 香蕉国产在线看| 一区二区三区激情视频| 久久精品成人免费网站| 亚洲国产精品合色在线| 黄色视频,在线免费观看| 日日爽夜夜爽网站| 在线天堂中文资源库| 久久午夜综合久久蜜桃| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 美女扒开内裤让男人捅视频| 国产成人系列免费观看| 女人被狂操c到高潮| 午夜福利18| 欧美丝袜亚洲另类 | 国产三级黄色录像| 高清在线国产一区| 久热这里只有精品99| 成人三级做爰电影| 国产在线观看jvid| 最新在线观看一区二区三区| 好男人电影高清在线观看|