蒙藥嘎木朱爾散對(duì)壓瘡缺血再灌注損傷大鼠抗氧化能力的影響△

包蘇布道 阿古拉

(1.北京中醫(yī)藥大學(xué)2013級(jí)博士研究生, 北京 100029；2. 內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010110)

蒙藥嘎木朱爾散對(duì)壓瘡缺血再灌注損傷大鼠抗氧化能力的影響△

包蘇布道1，2阿古拉2*

(1.北京中醫(yī)藥大學(xué)2013級(jí)博士研究生, 北京 100029；2. 內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010110)

目的：觀察蒙藥嘎木朱爾散對(duì)壓瘡缺血再灌注損傷模型大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量的影響，探討蒙藥嘎木朱爾散治療壓瘡的作用及其機(jī)制。方法: 將32只SD大鼠隨機(jī)分為4組，每組8只。正常組、模型組、云南白藥組和嘎木朱爾組，治療7d，最后1次給藥后，10%水合氯醛麻醉大鼠，腹主動(dòng)脈采集血液，測(cè)定大鼠血清SOD和MDA含量。結(jié)果:蒙藥嘎木朱爾組與云南白藥組皆可提高大鼠血清SOD含量(P<0.01)，降低 MDA含量(P<0.01), 蒙藥嘎木朱爾組和云南白藥組比較無(wú)明顯差異(P>0.05)。結(jié)論:蒙藥嘎木朱爾散對(duì)模型大鼠血清具有抗氧化作用。

蒙藥；嘎木朱爾；缺血再灌注損傷

壓瘡(pressure ulcer，PU)，舊稱褥瘡、又稱壓力性潰瘍，是身體局部組織長(zhǎng)期受壓，導(dǎo)致血液循環(huán)障礙，組織營(yíng)養(yǎng)缺乏，使皮膚失去正常功能而引起的組織破潰和壞死。因其損傷范圍較大，容易引起膿毒血癥、全身衰竭等，危及生命[1]。而其在造成病人痛苦的同時(shí)，還會(huì)加大機(jī)體消耗，影響原發(fā)疾病的恢復(fù)，增加醫(yī)療成本。壓瘡是長(zhǎng)期臥床病人在臨床上常見(jiàn)的并發(fā)癥,也是護(hù)理工作中較為棘手的問(wèn)題。本研究觀察了蒙藥嘎木朱爾散對(duì)大鼠壓瘡模型超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量的影響，旨在為其臨床上治療壓瘡提供實(shí)踐依據(jù)

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：SPF級(jí)SD大鼠，雄性，32只，體重280±20g，北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，許可證號(hào)：SCXK(京)2014-0013。

1.2 主要儀器：圓形鐵片：直徑25mm，厚度1.5mm硬幣大小。圓形磁鐵：直徑25mm，厚度2.5mm，硬幣大小。電子天平：賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公司提供。酶標(biāo)儀：深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司生產(chǎn)。HPX-9082型恒溫孵育箱：上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠。微量移液器：內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院臨床研究就中心提供。DZKW-4型電子恒溫水浴鍋：北京中興偉業(yè)儀器有限公司生產(chǎn)。

1.3 藥物與試劑：嘎木朱爾散：呼衛(wèi)制注字(97)001-141號(hào)，內(nèi)蒙古國(guó)際蒙醫(yī)醫(yī)院國(guó)家蒙藥制劑中心。云南白藥散：國(guó)藥準(zhǔn)字Z53020798 ，批號(hào)：ZJA1502，云南白藥集團(tuán)股份有限公司提供。水合氯醛：用0.9%生理鹽水稀釋配置成10%水合氯醛。天津市北聯(lián)精細(xì)化學(xué)品開發(fā)有限公司提供。硫化鈉：用0.9%生理鹽水稀釋配置成8%硫化鈉溶液。天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司提供。SOD試劑盒：南京建成生物工程研究所生產(chǎn)。生產(chǎn)批號(hào)：20160912。MDA試劑盒：南京建成生物工程研究所，生產(chǎn)批號(hào)：20160810

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 大鼠分組與缺血再灌注損傷Ⅲ期壓瘡模型的建立：大鼠分籠喂養(yǎng)，房間溫度保持在24℃左右，濕度保持在50%左右，明暗周期12h，自由飲水和進(jìn)食，適應(yīng)性飼養(yǎng)1wk。正常組不做任何手術(shù)處理，其余3組大鼠實(shí)驗(yàn)前8h禁食和禁水，實(shí)驗(yàn)當(dāng)日稱體質(zhì)量，用10%水合氯醛(300mg/kg)腹腔注射麻醉后，用8% 硫化鈉溶液在臀部進(jìn)行脫毛備皮，除正常組外，其余大鼠在其臀部做一深至筋膜的切口，鈍性分離，將鐵片(直徑25mm，厚度1.5mm)植入臀部，層次位于深筋膜下方，最后用 4-0 帶針絲線縫合全層切口。術(shù)后24h，體外采用磁鐵(直徑25mm，厚度2.5mm)間歇性施加壓力，造成局部皮膚缺血，每次缺血2h后，將外源磁鐵取下，讓局部血流恢復(fù)30mim，作為1個(gè)循環(huán)。每只大鼠每天進(jìn)行5個(gè)連續(xù)的循環(huán)。持續(xù)5d。期間每只大鼠單籠飼養(yǎng)，自由飲水與進(jìn)食。以大鼠皮膚變黑、變硬，針刺不出血作為判斷Ⅲ期壓瘡的標(biāo)準(zhǔn)[2，3]。

2.2 分組與給藥:分為正常組、模型組、蒙藥嘎木朱爾組和云南白藥組。正常組：未作任何手術(shù)處理,麻醉后取血。模型組：造模后基礎(chǔ)護(hù)理，但不給予任何方式的治療。蒙藥嘎木朱爾組：基礎(chǔ)護(hù)理后創(chuàng)面上撒嘎木朱爾散，1次/d，連續(xù)7d。云南白藥組：基礎(chǔ)護(hù)理后創(chuàng)面上撒云南白藥散，1次/d，連續(xù)7d?；A(chǔ)護(hù)理：從造模次日起，造模組和治療組大鼠均采用2% 碘酒及75% 乙醇消毒壓瘡創(chuàng)面周圍皮膚。

2.3 血清SOD和MDA的測(cè)定：在治療后的7d分別將各組大鼠以10%水合氯醛按腹腔注射麻醉，腹主動(dòng)脈采集血液，放入不含抗凝劑的5mL真空試管中，采完的動(dòng)脈血以3600r/min的轉(zhuǎn)速，在4℃下離心10min后取血清存進(jìn)-80℃的冰箱中冷凍待測(cè)。SOD采用WST-1法，MDA 采用TBA法測(cè)定。用酶標(biāo)儀嚴(yán)格按照試劑盒要求測(cè)定血清SOD和MDA的含量。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 嘎木朱爾散對(duì)壓瘡模型大鼠血清SOD 的影響：各組SOD活性比較，與正常組比較，其余3組活性明顯降低(P<0.01)；與模型組比較，嘎木朱爾組和云南白藥組SOD活性均能提高(P<0.01)。雖然嘎木朱爾組SOD含量高于云南白藥組，但兩組之間沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

3.2 嘎木朱爾散對(duì)壓瘡模型大鼠血清MDA的影響： 各組MDA含量比較，與正常組比較，其余3組活性明顯提高(P<0.01)；與模型組比較，嘎木朱爾組和云南白藥組MDA含量明顯降低(P<0.01)。但嘎木朱爾組和云南白藥組之間沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表1 各組大鼠血清SOD和MDA水平的比較

注：與正常組比較，*P<0.01；與模型組比較 #P<0.01

4 討論

蒙醫(yī)學(xué)認(rèn)為PU屬于“瘡瘍”病范圍，故治療時(shí)應(yīng)以調(diào)整三素平衡、活血通脈、清熱解毒、燥黃水，防腐生肌為治法。嘎木朱爾散是蒙醫(yī)傳統(tǒng)驗(yàn)方，又稱哈它各其-7散，由寒水石、朱砂、石決明、雄黃、銀朱、冰片、麝香等7味藥構(gòu)成。該方以雄黃防腐、消腫、愈傷為主；寒水石以解毒、滋補(bǔ)、調(diào)理體素為輔；配合銀珠與朱砂以防腐收斂；石明決以愈合創(chuàng)傷，燥黃水；冰片清熱；麝香殺黏。本方具有消炎止痛、清熱解毒、活血消腫、改善局部血液循環(huán)、生肌收斂、促進(jìn)肉芽組織增生、加速傷口愈合等作用[4，3]，適合于壓瘡的治療。更是近年來(lái)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明，蒙藥嘎木朱爾抑制炎癥，促進(jìn)傷口愈合，并對(duì)皮膚無(wú)刺激等的作用[6]。

生物體有一個(gè)完整的抗氧化防御系統(tǒng)， SOD是生物體內(nèi)重要的抗氧化酶，廣泛分布于各種生物體內(nèi)，具有特殊的生理活性，是生物體內(nèi)清除自由基的首要物質(zhì)，它可對(duì)抗與阻斷因氧自由基對(duì)細(xì)胞造成的損害，并及時(shí)修復(fù)受損細(xì)胞。MDA是自由基對(duì)生物細(xì)胞膜損傷的主要代謝產(chǎn)物，能使生物膜變性、壞死，使 DNA 發(fā)生突變、交鏈，同時(shí)使 SOD 活性降低，而造成自由基連鎖反應(yīng)的惡性循環(huán)。測(cè)定MDA 的量常常反映體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化的程度，間接地反映出細(xì)胞損傷的程度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，蒙藥嘎木朱爾散可提高大鼠血清SOD含量 (P<0.01)，降低MDA含量(P<0.01)，表明，蒙藥嘎木朱爾具有減輕脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，提高降低的抗氧化酶活性，清除自由基。

綜上所述，蒙藥嘎木朱爾散具有較強(qiáng)的抗氧化應(yīng)激作用，這也為其能作用于壓瘡奠定了物質(zhì)基礎(chǔ)；同時(shí)，也可以推斷蒙藥嘎木朱爾散對(duì)壓瘡的修復(fù)作用與其具有清熱解毒、消炎止痛、活血消腫的蒙藥攻效密切相關(guān)。

[1]李小寒，尚少梅. 基礎(chǔ)護(hù)理學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2006:81-82.

[2] Peirce SM，Skalak TC，Rieger JM，et al． Select ive A( 2A) adenosine recept or act ivation reduces skin pressure ulcer format ion and inflammat ion[J]. Am J Physiol Heart Circ Physiol，2001，281(1):H67-H74.

[3]黃倩，島玉芳，魏雨麗，等．大鼠壓瘡缺血再灌注模型構(gòu)建及相關(guān)指標(biāo)觀察[J].齊魯醫(yī)學(xué)雜志，2013，28(4)，365-367.

[4]吳藤清.外用潰瘍散輔治II度壓瘡療效觀察[J].,臨床合理用,2013,6(1):58.

[5]云寶英.蒙藥嘎木朱爾治療深度壓瘡的護(hù)理[J].中國(guó)民族醫(yī)藥雜志，2010：2：77.

[6]白煒，盛惟.嘎木朱爾婦康片劑局部用藥的毒性研究[J].中國(guó)民族醫(yī)藥雜志，2009：8：54.

2017年2月7日收稿

Antioxidant effect of Gamuzhuer powder on pressure ulcers with ischemia-reperfusion injury in rats

Baosubudao1,2Agula1

1.Beijing University of Chinese Medicine ,Beijing 100029 2. Inner MongoliaMedical University, Inner Mongolia Hohhot 010110

Objective:To observe the effect of serum SOD and MDA contents of on pressure ulcer with ischemia-reperfusion injury in rats, and to explore its mechanism for treatment of pressure ulcers. Methods: 32 SD rats were randomly divided into four groups, each group of eight. Normal group, model group, yunnanbaiyao group and gamuzhuer group , treating for 7 days ,after the last dose, 10% chloral hydrate anesthesia in rats, abdominal aortic blood was collected, to determine serum SOD and MDA in rats. Results: SOD contents of yunnanbaiyao group and gamuzhuer group were significantly increased (P<0.01).MDA contents were significantly decreased (P<0.01.There was no statistically difference between Hatageqi-7 group and YunnanBaiyao group(P>0.05. Conclusion: Gamuzhuer powder had antioxidant effect on pressure ulcer with ischemia-reperfusion injury rats.

Mongolian medicine pharmacy, Gamuzhuer, Ischemia-reperfusion injury

△項(xiàng)目來(lái)源： 內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)青年創(chuàng)新基金項(xiàng)目“蒙藥嘎木朱爾對(duì)壓瘡缺血再灌注損傷大鼠血清SOD、MDA的影響”項(xiàng)目編號(hào)：YKD2015QNCX010

R291.2

A

1006-6810(2017)03-0052-02