胱氨酸類硒源對產(chǎn)蛋雞蛋品質(zhì)、抗氧化能力和蛋中硒含量的影響

龍 爍 張海軍 武書庚 王曉翠 王 晶 齊廣海(中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，農(nóng)業(yè)部飼料生物技術(shù)重點開放實驗室，生物飼料開發(fā)國家工程研究中心，北京100081)

胱氨酸類硒源對產(chǎn)蛋雞蛋品質(zhì)、抗氧化能力和蛋中硒含量的影響

龍 爍 張海軍*武書庚*王曉翠 王 晶 齊廣海
(中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，農(nóng)業(yè)部飼料生物技術(shù)重點開放實驗室，生物飼料開發(fā)國家工程研究中心，北京100081)

本試驗旨在研究飼糧中添加硒代胱氨酸(SeC)、L-硒甲基硒代半胱氨酸(L-MSC)、L-硒代半胱氨酸(L-SeCys)和亞硒酸鈉(SS)對產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)、抗氧化能力和蛋中硒含量的影響，以期為富硒雞蛋的生產(chǎn)提供依據(jù)。選用26周齡體況良好、產(chǎn)蛋率接近的海蘭灰蛋雞450只，隨機分為5個組，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)15只雞。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧(不額外補充硒)，其他4組飼糧在基礎(chǔ)飼糧中添加0.30 mg/kg硒，分別來自SeC、L-MSC、L-SeCys和SS，各組飼糧中硒含量實測值分別為0.08(對照組)、0.36(SeC組)、0.35(L-MSC組)、0.31(L-SeCys組)和0.37(SS組) mg/kg。預(yù)試期1周，正試期4周。結(jié)果表明：1)與SS組和對照組相比，胱氨酸類硒源各組產(chǎn)蛋雞的平均蛋重、產(chǎn)蛋率和料蛋比均無顯著差異(P>0.05)。L-SeCys組平均日采食量在試驗1～2周時顯著低于對照組(P<0.05)。2)與SS組和對照組相比，胱氨酸類硒源各組產(chǎn)蛋雞的蛋白高度、哈氏單位、蛋殼強度、蛋形指數(shù)、蛋黃和蛋白比例均無顯著差異(P>0.05)。試驗第4周末，SS組蛋黃顏色顯著高于其他各組(P<0.05)；SeC和SS組蛋殼厚度顯著高于其他各組(P<0.05)，L-MSC和L-SeCys組蛋殼厚度顯著高于對照組(P<0.05)；對照組蛋殼比例顯著低于各試驗組(P<0.05)。3)與SS組和對照組相比，胱氨酸類硒源各組產(chǎn)蛋雞的血漿谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性顯著升高(P<0.05)；SeC和SS組血漿總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性顯著高于對照組(P<0.05)；胱氨酸類硒源各組血漿丙二醛(MDA)含量與SS組相比無顯著差異(P>0.05)；對照組血漿總抗氧化能力(T-AOC)顯著低于其他各組(P<0.05)，L-MSC組的血漿T-AOC最高，顯著高于SS組(P<0.05)。4)與對照組相比，飼糧中添加胱氨酸類硒源顯著提高了蛋中硒含量(P<0.05)，其中L-MSC組最高；胱氨酸類硒源各組蛋中硒含量和硒轉(zhuǎn)化率均高于SS組(P>0.05)。由此可見，飼糧中添加3種胱氨酸類硒源可增強機體抗氧化水平，提高蛋中硒含量，其中SeC和L-MSC效果更好。

蛋雞；硒源；抗氧化能力；蛋中硒含量

硒是動物機體的必需微量元素，作為谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-Px)活性中心的組成成分，硒可以調(diào)節(jié)體內(nèi)的氧化還原狀態(tài)，在機體抗氧化方面也有至關(guān)重要的作用[1]。硒還能維持公禽的精液質(zhì)量，有利于生育繁殖，可維持發(fā)育中胚胎的抗氧化系統(tǒng)[2]，且有抗癌作用[3]。硒在生物體內(nèi)主要以有機硒的形式存在，主要為含硒氨基酸和蛋白質(zhì)。其中，硒代氨基酸包括硒代胱氨酸(selenocystine，SeC)和硒代蛋氨酸(selenomethionine，SeMet)等。隨著對硒研究的不斷深入，人們逐漸意識到通過飲食攝入適量的硒對維持身體健康具有重要的意義，因此富硒雞蛋受到越來越廣泛的關(guān)注。國內(nèi)的補硒劑包括有機硒和以亞硒酸鈉(sodium selenite，SS)為主的無機硒化合物。SS的利用率和安全系數(shù)較低，有些國家已經(jīng)限制SS作為硒營養(yǎng)補充劑的應(yīng)用。與無機硒相比，有機硒更易在機體組織器官中存留[2]。作為硒代氨基酸，SeC是一種選擇性高、毒性低的抗腫瘤藥物，能誘導(dǎo)人類乳腺癌細胞凋亡[4]。硒代半胱氨酸(selencysteine，SeCys)可能是人體的第21種必需氨基酸[5]，L-硒代半胱氨酸(L-selencysteine，L-SeCys)是SeCys的左旋結(jié)構(gòu)。L-硒甲基硒代半胱氨酸(L-Se-methylselenocysteine，L-MSC)是SeCys的甲基化衍生物，為甲基硒的重要前體物質(zhì)，已被衛(wèi)生部批準(zhǔn)為新型營養(yǎng)強化劑(食品添加劑新品種2009年第9號公告)，作為第3代補硒營養(yǎng)強化劑和廣譜抗癌劑，其應(yīng)用前景廣闊[6]。缺硒會引發(fā)健康問題，硒過量也會對機體產(chǎn)生不良影響，我國飼料添加劑安全使用規(guī)范(農(nóng)業(yè)部公告第1224號)和歐洲管理執(zhí)行委員會(commission implementing regulation No.427/2013)[7]均推薦家禽配合飼料中硒的最高限量為0.5 mg/kg。研究表明，蛋中硒含量在飼喂含硒飼糧第4～21天內(nèi)增加[8-9]，飼糧中添加0.3 mg/kg硒[酵母硒(YSe)和SS]對生產(chǎn)性能影響不顯著，但顯著增加蛋中硒含量[10-12]。目前關(guān)于比較SeC、L-MSC、L-SeCys等有機硒與SS對蛋雞生產(chǎn)性能和蛋中硒含量影響的研究較少。鑒此，本研究旨在比較飼糧中添加相同劑量的SeC、L-MSC、L-SeCys和SS對產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)、抗氧化能力、蛋中硒含量和硒轉(zhuǎn)化率的影響，以期為開發(fā)新硒源和生產(chǎn)富硒雞蛋提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料與試驗動物

試驗用硒源見表1。試驗動物為26周齡體況良好、產(chǎn)蛋率接近的海蘭灰蛋雞。

表1 試驗用硒源

1.2 試驗飼糧與飼養(yǎng)管理

參照《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 33—2004)配制基礎(chǔ)飼糧，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表2。試驗雞采用4層立體籠養(yǎng)，每籠3只，采用隨機編號安排組位，避免環(huán)境和位置的影響。自由采食和飲水，自然光照加人工補光(16 h/d)，相對濕度50%～60%，自然通風(fēng)結(jié)合縱向負壓通風(fēng)；每天清糞2次，每周消毒1次，常規(guī)免疫。預(yù)試期1周，正試期4周。

1.3 試驗設(shè)計

試驗選用26周齡體況良好、產(chǎn)蛋率接近的海蘭灰蛋雞450只，隨機分為5組，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)15只雞。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧(不額外補充硒)，SeC、L-MSC、L-SeCys和SS組飼糧在基礎(chǔ)飼糧中以不同形式的硒源添加0.30 mg/kg硒，飼糧中硒含量實測值分別為0.08(對照組)、0.36(SeC組)、0.35(L-MSC組)、0.31(L-SeCys組)和0.37(SS組) mg/kg。

1.4 測定指標(biāo)與方法

1.4.1 生產(chǎn)性能

每天09:30收蛋，以重復(fù)為單位記錄蛋重、產(chǎn)蛋數(shù)、軟破蛋及異形蛋數(shù),計算平均蛋重和產(chǎn)蛋率。每周定時結(jié)料、稱重，以重復(fù)為單位計算平均日采食量和料蛋比。

平均蛋重(g)=總產(chǎn)蛋量/雞蛋總數(shù)；
產(chǎn)蛋率(%)=100×總產(chǎn)蛋數(shù)/(雞只數(shù)×天數(shù))；
平均日采食量(g)=總采食量/(雞只數(shù)×天數(shù))；
料蛋比=總耗料量/總蛋重。

表2 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1)維生素和礦物質(zhì)預(yù)混料為每千克飼糧提供 Vitamin and mineral premix provided the following per kg of the diet: VA 12 500 IU，VD34 125 IU，VE 15 IU，VK 2 mg，硫胺素 thiamine 1 mg，核黃素 riboflavin 8.5 mg，泛酸鈣 calcium pantothenate 50 mg，煙酸 niacin 32.5 mg，吡哆醇 pyridoxine 8 mg，生物素 biotin 2 mg，二氫葉酸 dihydrofolate 5 mg，VB125 mg，膽堿 choline 500 mg，Mn 65 mg，I 1 mg，F(xiàn)e 60 mg，Cu 8 mg，Zn 66 mg。

2)代謝能和有效磷為計算值，其余均為實測值。ME and AP were calculated values, while the others were measured values.

1.4.2 蛋品質(zhì)

試驗第2和4周末，每重復(fù)隨機取3枚蛋，測定蛋品質(zhì)。采用SONOVA蛋品質(zhì)自動分析儀(Egg AnalyzerTM，Orka Technology Ltd.)測定蛋重、蛋白高度、哈氏單位和蛋黃顏色；蛋殼強度分析儀(Egg Force Reader，Orka Technology Ltd.)測定蛋殼強度；蛋殼厚度測定儀(Eggshell Thickness Gauge，Orka Technology Ltd.)測定蛋殼厚度；蛋形指數(shù)測定儀(Egg Index Reader，F(xiàn)ujibira Industry Co., Ltd.)測量蛋形指數(shù)。蛋成分分析：全蛋、蛋殼、蛋黃和蛋清分別稱重，并統(tǒng)計蛋殼、蛋白和蛋黃比例。

1.4.3 血漿抗氧化指標(biāo)

試驗第4周末，每重復(fù)隨機取2只雞，空腹翅靜脈采集抗凝血，4 000 r/min、4 ℃離心10 min制備血漿，分裝，-20 ℃保存。比色法測定血漿GSH-Px活性和總抗氧化能力(T-AOC)，黃嘌呤氧化酶法測定血漿總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性，硫代巴比妥酸法測定血漿丙二醛(MDA)含量。上述指標(biāo)均采用南京建成生物工程研究所試劑盒測定，嚴格按照試劑盒說明書操作。

1.4.4 蛋中硒含量

利用氫化物-原子熒光光譜法(GB 5009.93—2010)測定全蛋液中硒含量。于試驗第4周末，每重復(fù)隨機取2枚蛋，去殼，蛋液混勻，凍干。電熱板加熱消解：稱凍干全蛋粉2 g，置消化瓶，加入10.0 mL混合酸(硝酸與高氯酸體積比為9∶1)，放幾粒玻璃珠，加蓋表面皿，靜置過夜，電熱板加熱，期間及時補加硝酸溶液，溶液變?yōu)榍辶翢o色，且有白煙時，繼續(xù)加熱至剩余2 mL，冷卻，加入5.0 mL鹽酸，繼續(xù)加熱至溶液變?yōu)榍辶翢o色并伴有白煙，此時將六價硒還原為四價。冷卻，轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶，定容，混勻備用。取10.0 mL消化液，于15 mL離心管，加鹽酸(6 mol/L)2.0 mL、鐵氰化鉀(100 g/L)1.0 mL，混勻。利用原子熒光光譜儀測定硒含量，同時設(shè)空白對照(超純水)和標(biāo)準(zhǔn)樣品對照(硒標(biāo)準(zhǔn)參照物GBW8551)。

1.4.5 蛋中硒轉(zhuǎn)化率

根據(jù)料蛋比，計算蛋中硒轉(zhuǎn)化率：

蛋中硒轉(zhuǎn)化率(%)=100×1 kg雞蛋硒含量/
生產(chǎn)1 kg雞蛋所攝入的總硒含量。

1.5 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 19.0進行單因素方差分析(one-way ANOVA)，采用Duncan氏法進行多重比較，以P<0.05作為顯著性標(biāo)準(zhǔn)，以P<0.01作為極顯著性標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 胱氨酸類硒源對產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能的影響

由表3可知，與SS組和對照組相比，胱氨酸類硒源各組產(chǎn)蛋雞的平均蛋重、產(chǎn)蛋率和料蛋比均無顯著差異(P>0.05)；L-SeCys組平均日采食量在試驗1～2周時顯著低于對照組(P<0.05)，其余各組平均日采食量無顯著差異(P>0.05)。結(jié)果表明，飼糧中添加相同水平的不同硒源，胱氨酸類硒源在一定程度上降低了產(chǎn)蛋雞的平均日采食量，而對產(chǎn)蛋率、平均蛋重和料蛋比均無顯著影響。

表3 飼糧中添加胱氨酸類硒源對產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

2.2 胱氨酸類硒源對產(chǎn)蛋雞蛋品質(zhì)的影響

由表4可知，與SS組和對照組相比，胱氨酸類硒源各組產(chǎn)蛋雞的蛋白高度、哈氏單位、蛋殼強度、蛋形指數(shù)、蛋黃和蛋白比例均無顯著差異(P>0.05)，但胱氨酸類硒源各組第4周末的哈氏單位均高于SS組，且各試驗組的蛋白高度均高于對照組。試驗第4周末，SS組蛋黃顏色顯著高于其他各組(P<0.05)；SeC和SS組蛋殼厚度顯著高于其他各組(P<0.05)，L-MSC和L-SeCys組蛋殼厚度顯著高于對照組(P<0.05)；對照組的蛋殼比例顯著低于各試驗組(P<0.05)。結(jié)果表明，蛋雞飼糧中補充適量硒能提高蛋黃顏色，增加蛋殼厚度和蛋殼比例，在一定程度上提高蛋白高度和哈氏單位。

表4 飼糧中添加胱氨酸類硒源對產(chǎn)蛋雞蛋品質(zhì)的影響

續(xù)表4項目Items時間Time/周組別Groups對照Control硒代胱氨酸SeCL-硒甲基硒代半胱氨酸L?MSCL-硒代半胱氨酸L?SeCys亞硒酸鈉SSSEMP值P?value蛋黃顏色Yolkcolor24．72±0．254．99±0．194．92±0．164．75±0．315．08±0．410．0600．11145．06±0．49b5．30±0．61b5．25±0．32b5．08±0．17b6．08±0．50a0．1300．006蛋殼強度Eggshellstrength/(N/m2)236．57±5．1436．07±1．5635．48±2．4137．86±3．1939．56±3．460．7600．532439．78±3．1539．71±5．6240．29±2．5739．24±2．5839．30±2．010．9200．337蛋殼厚度Eggshellthickness/mm20．43±0．020．43±0．010．42±0．010．43±0．010．45±0．020．0030．19740．34±0．01c0．43±0．02a0．40±0．02b0．38±0．02b0．43±0．02a0．008<0．010蛋形指數(shù)Eggshapeindex21．31±0．021．33±0．011．32±0．021．32±0．011．34±0．010．0040．81241．33±0．011．32±0．001．33±0．021．34±0．031．33±0．010．0040．836蛋殼比例Eggshellpercentage/%29．34±0．57b10．08±0．27a10．63±0．21a10．54±0．49a10．46±0．17a0．140<0．01049．50±0．309．57±0．219．93±0．419．79±0．169．74±0．210．0650．207蛋黃比例Yolkpercentage/%226．27±0．7626．27±0．8226．83±0．8725．63±1．1825．90±1．330．2100．519426．49±0．9325．19±1．4925．86±0．7125．36±0．8626．38±1．480．2700．333蛋白比例Albumenpercentage/%264．38±0．8064．43±4．2262．63±0．7962．65±2．2962．59±2．220．4800．529463．39±1．4765．29±1．3964．21±0．7364．85±0．7363．87±1．650．2900．209

2.3 胱氨酸類硒源對產(chǎn)蛋雞血漿抗氧化指標(biāo)的影響

由表5可知，與SS組和對照組相比，胱氨酸類硒源各組產(chǎn)蛋雞的血漿GSH-Px活性顯著升高(P<0.05)，SeC、L-SeCys和L-MSC組的血漿GSH-Px活性分別比SS組提高了141.42%、83.59%和117.33%。胱氨酸類硒源各組的血漿T-SOD活性與SS組相比無顯著差異(P>0.05)，SeC和SS組血漿T-SOD活性顯著高于對照組(P<0.05)，L-SeCys和L-MSC組血漿T-SOD活性也高于對照組(P>0.05)。胱氨酸類硒源各組的血漿MDA含量與SS組相比無顯著差異(P>0.05)。對照組血漿T-AOC顯著低于其他各組(P<0.05)，L-MSC組的血漿T-AOC最高，顯著高于SS組(P<0.05)。結(jié)果表明，飼糧中添加硒源能提高產(chǎn)蛋雞的機體抗氧化水平。

2.4 胱氨酸類硒源對產(chǎn)蛋雞蛋中硒含量和硒轉(zhuǎn)化率的影響

由表6可知，與對照組相比，飼糧中添加胱氨酸類硒源顯著提高了蛋中硒含量(P<0.05)，其中L-MSC組最高；與SS組相比，SeC、L-MSC和L-SeCys組蛋中硒含量分別提高了12.00%、27.90%和4.63%(P>0.05)。硒源對蛋中硒轉(zhuǎn)化率有一定的影響，4種硒源蛋中硒轉(zhuǎn)化率順序為L-MSC>L-SeCys>SeC>SS；胱氨酸類硒源各組蛋中硒轉(zhuǎn)化率均高于SS組(P>0.05)。

3 討 論

3.1 胱氨酸類硒源對產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能的影響

硒是人和動物機體必需的微量元素之一，缺硒會引發(fā)克山病、骨節(jié)病和地氟病等疾病，硒還具有抗氧化、抗應(yīng)激、提高免疫力和抗癌等功能[12]。本試驗表明，與SS組相比，飼糧中添加0.3 mg/kg硒(胱氨酸類硒源)對產(chǎn)蛋雞的生產(chǎn)性能無顯著影響。研究表明，飼糧中添加0.3 mg/kg硒(SeMet、YSe和SS)對蛋雞的生產(chǎn)性能無顯著影響，0.1、0.3和0.5 mg/kg硒(SeMet)對蛋雞的生產(chǎn)性能也無顯著影響[8]；有機硒或無機硒對蛋雞的生產(chǎn)性能也無顯著影響[10-11,13]；富硒益生菌能顯著增加蛋雞的產(chǎn)蛋率和平均蛋重，降低料蛋比，這與益生菌直接相關(guān)[14]。蛋雞的生產(chǎn)性能和對硒元素的敏感性受飼糧和蛋雞的品種、日齡及機體代謝情況等因素的影響，所以飼糧中添加不同來源和水平的硒對生產(chǎn)性能的影響有別[15]。本試驗選用了開產(chǎn)到高峰期過度的海蘭灰蛋雞，雞體內(nèi)的代謝和抗氧化能力均處于旺盛時期，生產(chǎn)性能受外界飼糧因素的影響較?。辉囼?～2周，L-SeCys組的平均日采食量顯著低于對照組，但與SS組相比無顯著差異，可能是因為試驗初期蛋雞未適應(yīng)飼糧中添加的硒源；隨著飼喂時間的延長，各組的平均日采食量無顯著差異，產(chǎn)蛋率和平均蛋重均在增加，與SS相比，SeC、L-MSC、L-SeCys對蛋雞生產(chǎn)性能的改善作用更強。

表5 飼糧中添加胱氨酸類硒源對產(chǎn)蛋雞血漿抗氧化指標(biāo)的影響

表6 飼糧中添加胱氨酸類硒源對產(chǎn)蛋雞蛋中硒含量和硒轉(zhuǎn)化率的影響

3.2 胱氨酸類硒源對產(chǎn)蛋雞蛋品質(zhì)的影響

蛋雞品種、產(chǎn)蛋日齡、營養(yǎng)水平和疾病等均影響蛋品質(zhì)。蛋白高度和哈氏單位是衡量雞蛋蛋白質(zhì)量和新鮮度的重要指標(biāo)[14]。研究表明，飼糧中添加0.3 mg/kg硒，YSe組蛋雞的哈氏單位高于SS組，但差異不顯著[11]。本試驗研究表明，胱氨酸類硒源各組第4周末產(chǎn)蛋雞的哈氏單位均高于SS組，且各試驗組的蛋白高度均高于對照組，說明胱氨酸類硒源有提高哈氏單位的趨勢。孫慶艷等[15]研究表明，飼糧添加不同來源和水平的硒，對常規(guī)蛋品質(zhì)均無顯著影響，但與對照組相比，添加硒組的蛋殼厚度略有增加，蛋黃顏色均有加深。本試驗研究表明，飼糧中添加胱氨酸類硒源和SS對產(chǎn)蛋雞的蛋形指數(shù)和蛋殼強度均無顯著影響；試驗第4周，SeC和SS組蛋殼厚度相同，顯著高于其他各組，L-MSC和L-SeCys組蛋殼厚度顯著低于SS組，對照組的蛋殼厚度顯著低于各試驗組。研究表明，YSe能夠增加蛋殼厚度，但無顯著差異[14]，說明硒能改善雞蛋的蛋殼品質(zhì)，可能是通過提高抗氧化能力來保護蛋殼[15]，SeC和SS對蛋殼厚度的作用效果優(yōu)于L-MSC和L-SeCys。

3.3 胱氨酸類硒源對產(chǎn)蛋雞血漿抗氧化能力的影響

T-AOC是衡量機體抗氧化能力的綜合指標(biāo)[15]，食用有機硒能極顯著提高肝臟的T-AOC[18]。本試驗結(jié)果表明，胱氨酸類硒源各組產(chǎn)蛋雞的血漿T-AOC均高于SS組，其中L-MSC組的血漿T-AOC最高，顯著高于SS組；與對照組相比，飼糧中添加不同硒源均顯著提高了血漿T-AOC。有機硒提高T-AOC，主要與GSH-Px活性的提高有關(guān)，有機硒中的硒比SS更容易構(gòu)成GSH-Px的活性中心[18]。

MDA是機體脂質(zhì)過氧化的產(chǎn)物，隨著體內(nèi)氧自由基的活性增強，氧化作用增強，MDA含量升高，抗氧化作用減弱。研究表明，YSe可極顯著降低血清MDA含量[15,19]，顯著降低肝臟MDA含量，提高肉雞血漿GSH-Px活性，極顯著提高肝臟T-AOC[18]。本試驗結(jié)果表明，胱氨酸類硒源各組的血漿MDA含量與SS組相比無顯著差異；與對照組相比，飼糧中添加不同硒源均降低了血漿MDA含量。因為飼糧中添加一定量硒元素能提高GSH-Px和T-SOD的活性，后者能抑制MDA的產(chǎn)生，從而減少過多自由基對機體的傷害[19]。血液中硒含量與飼糧中硒水平呈顯著線性關(guān)系(R2=0.968，P<0.001)[7]。

3.4 胱氨酸類硒源對產(chǎn)蛋雞蛋中硒含量和硒轉(zhuǎn)化率的影響

硒是人體必需的微量元素之一，主要源于食物。雞蛋是人類膳食的重要組成部分，故可通過提高雞蛋中硒含量來達到補充硒的目的。研究表明，雞蛋中硒含量與飼糧中硒水平呈線性關(guān)系[10,14,20]。飼喂含硒飼糧后，蛋中硒元素在2 d后開始沉積，7 d達到高峰[21]；更換飼糧4周后，蛋中硒含量下降到正常水平[22]。白來航蛋雞飼糧中添加0.3 mg/kg硒的不同硒源均能顯著提高蛋中硒含量[4]。研究表明，飼糧中添加相同水平(0.3 mg/kg硒)的4種硒源均能顯著提高蛋中硒的沉積量[15]，提高第4和8周末蛋中硒含量[13]。飼糧中添加0～0.5 mg/kg硒，蛋中硒含量呈線性增加[7]。本研究表明，與SS組相比，飼糧中添加0.3 mg/kg硒(SeC、L-MSC和L-SeCys)均提高了蛋中硒含量，其中，L-MSC組的蛋中硒含量最高；與對照組相比，飼糧中添加胱氨酸類硒源均提高了蛋中硒含量。前人研究表明，飼糧中添加相同水平的不同硒源，有機硒組蛋中硒含量顯著高于無機硒組[11,13]。

富硒蛋中硒含量為200～500 μg/kg(DB36/T 566—2009、DB6124.01—2010)，本試驗SeC、L-MSC、L-SeCys、SS組蛋中硒含量分別為200.70、229.20、187.50和179.20 μg/kg，均達到或接近富硒蛋標(biāo)準(zhǔn)。關(guān)于硒攝入的每日推薦量，不同地區(qū)的規(guī)定有別。我國《營養(yǎng)素補充劑申報與審評規(guī)定(試行)》中規(guī)定，硒的攝取量最低為15 μg/d；國際學(xué)術(shù)組織聯(lián)合會(FAO/WHO/IAEA)規(guī)定男女成人膳食中硒最低需要量分別為21和16 μg/d，建議膳食中硒最適生理需要量為41 μg/d[23]；美國科學(xué)院食物及營養(yǎng)組提出美國男女成人每日膳食中硒供給量分別為70及55 μg/d[24]。每天食用2～3枚L-MSC組雞蛋即能滿足機體對硒的需要量。

有研究指出，硒在小腸中被吸收，有機硒可主動穿過腸壁，生物利用率高，無機硒只能通過被動擴散進入腸壁[3]，故有機硒的沉積效果遠優(yōu)于無機硒[7,10]，所以本試驗中有機硒各組的蛋中硒轉(zhuǎn)化率高于SS組，與前人的研究結(jié)果一致[12,14-15]。本研究結(jié)果也表明，各試驗組蛋中硒轉(zhuǎn)化率均顯著低于對照組，這與胡華鋒等[25]研究結(jié)果相一致。硒供應(yīng)不足時，家禽會動員體內(nèi)儲存的硒來維持健康[26]，滿足部分需要；家禽也會更好地利用攝入的有限的硒源維持蛋中硒含量，故對照組蛋中硒轉(zhuǎn)化率最高。

本研究表明，L-MSC和SeC作為飼糧中硒源補充劑能夠顯著提高產(chǎn)蛋雞蛋中硒含量，具有實踐應(yīng)用性。L-MSC具有抗氧化、抗衰老、治療心腦血管疾病和解重金屬毒等作用[4]，還是一種有效的細胞增長抑制劑，能有效抑制腫瘤細胞的增殖并誘導(dǎo)其凋亡，能抑制多種癌基因的表達[27]。2002年，L-MSC被美國食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)認定為最新一代硒源類飲食補充劑，2009年被我國批準(zhǔn)為新型食品營養(yǎng)強化劑。所以富含L-MSC的雞蛋不僅可以增強機體的抗氧化能力，也具有一定的防癌功效。

4 結(jié) 論

① 與SS相比，飼糧中添加0.3 mg/kg硒(SeC、L-MSC、L-SeCys)，未見顯著影響海蘭灰蛋雞的生產(chǎn)性能和除蛋殼厚度、蛋黃顏色以外的蛋品質(zhì)指標(biāo)。

② 與SS相比，3種胱氨酸類硒源均可提高產(chǎn)蛋雞的血漿GSH-Px活性和T-AOC，顯著增強機體抗氧化水平，其中SeC和L-MSC效果更好。

③ 3種胱氨酸類硒源均能提高蛋中硒含量，L-MSC在蛋中沉積效果更好。

[1] LI F,LUTZ P B,PEPELYAYEVA Y,et al.Redox active motifs in selenoproteins[J].Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America,2014,111(19):6976-6981.

[2] SURAI P F,FISININ V I.Selenium in poultry breeder nutrition:an update[J].Animal Feed Science and Technology,2014,191:1-15.

[4] CHEN T F,WONG Y S.Selenocystine induces caspase-independent apoptosis in MCF-7 human breast carcinoma cells with involvement of p53 phosphorylation and reactive oxygen species generation[J].The International Journal of Biochemistry & Cell Biology,2009,41(3):666-676.

[5] SONG Y X,HOU J X,ZHANG L,et al.Effect of dietary selenomethionine supplementation on growth performance,tissue se concentration,and blood glutathione peroxidase activity in kid boer goats[J].Biological Trace Element Research,2015,167(2):242-250.

[6] 劉建群,趙元,張銳,等.新型營養(yǎng)強化劑L-硒甲基硒代半胱氨酸的研究進展[J].中國食品添加劑,2011(2):152-156.

[7] DELEZIE E,ROVERS M,VAN DER AA A,et al.Comparing responses to different selenium sources and dosages in laying hens[J].Poultry Science,2014,93(12):3083-3090.

[8] JING C L,DONG X F,WANG Z M,et al.Comparative study ofDL-selenomethionine vs. sodium selenite and seleno-yeast on antioxidant activity and selenium status in laying hens[J].Poultry Science,2015,94(5):965-975.

[10] LEESON S,NAMKUNG H,CASTON L,et al.Comparison of selenium levels and sources and dietary fat quality in diets for broiler breeders and layer hens[J].Poultry Science,2008,87(12):2605-2612.

[11] PAYNE R L,LAVERGNE T K,SOUTHERN L.Effect of inorganic versus organic selenium on hen production and egg selenium concentration[J].Poultry Science,2005,84(2):232-237.

[12] RICHIE J P JR,DAS A,CALCAGNOTTO A M,et al.Comparative effects of two different forms of selenium on oxidative stress biomarkers in healthy men:a randomized clinical trial[J].Cancer Prevention Research,2014,7(8):796-804.

[13] UTTERBACK P L,PARSONS C M,YOON I,et al.Effect of supplementing selenium yeast in diets of laying hens on egg selenium content[J].Poultry Science,2005,84(12):1900-1901.

[14] PAN C L,ZHAO Y X,LIAO S F,et al.Effect of selenium-enriched probiotics on laying performance,egg quality,egg selenium content,and egg glutathione peroxidase activity[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry,2011,59(21):11424-11431.

[15] 孫慶艷,武書庚,張海軍,等.飼糧中添加不同硒源對產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能和抗氧化能力的影響[J].動物營養(yǎng)學(xué)報,2016,28(4):1177-1185.

[16] URSINI F,HEIM S,KIESS M,et al.Dual function of the selenoprotein PHGPx during sperm maturation[J].Science,1999,285(5432):1393-1396.

[17] 瞿祥虎,黃開勛,高中洪,等.谷胱甘肽過氧化物酶的硒代半胱氨酸插入元件[J].中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)報,1999,15(2):274-278.

[18] 邱榕生,咼于明.有機鎂與有機硒對肉雞機體組織抗氧化機能的影響[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報,2003,34(6):542-547.

[19] MOORE M A,WANDERA R C,XIA Y M,et al.Selenium supplementation of Chinese women with habitually low selenium intake increases plasma selenium,plasma glutathione peroxidase activity,and milk selenium,but not milk glutathione peroxidase activity[J].The Journal of Nutritional Biochemistry,2000,11(6):341-347.

[20] BENNETT D C,CHENG K M.Selenium enrichment of table eggs[J].Poultry Science,2010,89(10):2166-2172.

[21] HANTIRATIKUL A,CHINRASRI O, CHANTIRATIKUL P.Effect of sodium selenite and zinc-L-selenomethionine on performance and selenium concentrations in eggs of laying hens[J].Asian-Australasian Journal of Animal Sciences,2008,21(7):1048-1052.

[22] ORT J F,LATSHAW J D.The toxic level of sodium selenite in the diet of laying chickens[J].Journal of Nutrition,1978,108(7):1114-1120.

[23] LEVANDER O A.Selenium requirements as discussed in the 1996 joint FAO/IAEA/WHO expert consultation on trace elements in human nutrition[J].Biomedical and Environmental Sciences,1997,10(2/3):214-219.

[24] NRC.Recommended dietary allowances[S].10th ed.Washington,D. C.: National Academy Press, 1989.

[25] 胡華鋒,黃炎坤,介曉磊,等.3種硒源對蛋雞生產(chǎn)性能、蛋硒含量及轉(zhuǎn)化率的影響[J].動物營養(yǎng)學(xué)報,2013,25(7):1603-1609.

[26] OLIVEIRA T F B,RIVERA D F R,MESQUITA F R,et al.Effect of different sources and levels of selenium on performance,meat quality,and tissue characteristics of broilers[J].Journal of Applied Poultry Research,2014,23(1):15-22.

[27] UNNI E,KITTRELL F S,SINGH U,et al.Osteopontinis a potential target gene in mouse mammary cancer chemoprevention by Se-methylselenocysteine[J].Breast Cancer Research,2004,6(5):586-592.

*Corresponding authors: ZHANG Haijun, associate professor, E-mail: fowlfeed@163.com; WU Shugeng, professor, E-mail: wushugeng@caas.cn

(責(zé)任編輯 李慧英)

Effects of Cystine Selenium Sources on Egg Quality, Antioxidant Capacity and Egg Selenium Content of Laying Hens

LONG Shuo ZHANG Haijun*WU Shugeng*WANG Xiaocui WANG Jing QI Guanghai
(KeyLaboratoryofFeedBiotechnologyofMinistryofAgriculture,NationalEngineeringResearchCenterofBiologicalFeed,FeedResearchInstitute,ChineseAcademyofAgriculturalScience,Beijing100081,China)

This study was conducted to investigate the effects of dietary selenocystine (SeC),L-Se-methyselenocysteine (L-MSC),L-selencysteine (L-SeCys) and sodium selenite (SS) on performance, egg quality, antioxidant capacity and egg selenium content of laying hens, with the aim to provide basis for the production of selenium enriched eggs. Four hundred and fifty healthy 26-week-old Hy-Line Grey laying hens with similar laying rate were randomly allotted into 5 groups with 6 replicates per group and 15 hens per replicate. The laying hens in control group were fed a basal diet without adding exogenous selenium source, and the other four groups were fed the basal diet supplemented with SeC,L-MSC,L-SeCys or SS containing 0.30 mg/kg selenium. The measured values of selenium content in diets were 0.08 (control group), 0.36 (SeC group), 0.35 (L-MSC group), 0.31 (L-SeCys group) and 0.37 (SS group) mg/kg, respectively. The pre-test period lasted for one week and the test period lasted for four weeks. The results showed as follows: 1)compared with SS and control groups, the average egg weight, laying rate and the ratio of feed to egg of laying hens in all cystine selenium source groups had no significant differences (P>0.05). The average daily feed intake (ADFI) inL-SeCys group was significantly lower than that in control group during 1 to 2 weeks (P<0.05). 2) Compared with SS and control groups, the albumen height, Haugh unit, eggshell strength, egg shape index and the percentages of yolk and albumen of laying hens in all cystine selenium source groups had no significant differences (P>0.05). At the end of 4th week, the yolk color in SS group was significantly higher than that in the other groups (P<0.05); the eggshell thickness in SeC and SS groups was significantly higher than that in the other groups (P<0.05), and the eggshell thickness inL-MSC andL-SeCys groups was significantly higher than that in control group (P<0.05); the egg shell percentage in control group was significantly lower than that in the other groups (P<0.05). 3) Compared with SS and control groups, the activity of glutathione peroxidase (GSH-Px) in plasma of laying hens in all cystine selenium source groups was significantly increased (P<0.05). The activity of total superoxide dismutase activity (T-SOD) in plasma in SeC and SS groups was significantly higher than that in control group (P<0.05). There was no significant difference in the content of malondialdebyde (MDA) in plasma between all cystine selenium source groups and SS group (P>0.05). The total antioxidant capacity (T-AOC) in plasma in control group was significantly lower than that in the other groups (P<0.05), and the T-AOC inL-MSC group was highest and was significantly higher than that in SS group (P<0.05). 4)Compared with control group, dietary cystine selenium sources significantly increased egg selenium content (P<0.05), and egg selenium content inL-MSC group was the highest. The egg selenium content and selenium conversion rate in all cystine selenium source groups were higher than that in SS group (P>0.05). In conclusion, dietary three cystine selenium sources can improve the antioxidant capacity and egg selenium content, and SeC andL-MSC have the better effects.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2017, 29(5)：1600-1609]

laying hens; selenium sources; antioxidant capacity; egg selenium content

10.3969/j.issn.1006-267x.2017.05.019

2016-11-18

現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(CARS-41-K13)；家禽產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系北京市創(chuàng)新團隊(CARS-PSTP)

龍 爍(1993—)，女，山東臨沂人，碩士研究生，從事家禽營養(yǎng)與飼料科學(xué)研究。E-mail: maplega@163.com

*通信作者：張海軍，副研究員，碩士生導(dǎo)師，E-mail: fowlfeed@163.com；武書庚，研究員，碩士生導(dǎo)師，E-mail: wushugeng@caas.cn

S831.5

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1006-267X(2017)05-1600-10