單瓣茉莉繼代生根培養(yǎng)基優(yōu)化及移栽基質(zhì)的篩選

黃昌艷+盧家仕+李春牛+王曉國++閆海霞++卜朝陽+??

摘要：以單瓣茉莉組培苗為試驗材料，研究不同基本培養(yǎng)基、不同激素濃度對茉莉繼代生根的影響；此外，以優(yōu)良的組培苗為材料，研究不同基質(zhì)對茉莉組培苗移栽成活率、生長狀況的影響。結(jié)果表明，適宜茉莉繼代增殖的培養(yǎng)基為MS+5.0 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA，適宜茉莉生根的培養(yǎng)基為1/2 MS+0.8 mg/L IBA，移栽基質(zhì)以純泥炭較佳，移栽成活率可達(dá)100.0%，且生長狀況最佳。

關(guān)鍵詞：單瓣茉莉；繼代培養(yǎng)；生根；移栽；基質(zhì)篩選

中圖分類號： S685.160.4+3文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號：1002-1302（2017）03-0116-03

收稿日期：2015-12-11

基金項目：國家星火計劃（編號：2014GA790015）；生態(tài)廣西建設(shè)引導(dǎo)基金[編號：桂財建函（2014）139]；廣西農(nóng)業(yè)科技重點項目（編號：201411）；廣西戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)專項[編號：桂發(fā)改高科（2015）553號]。

作者簡介：黃昌艷（1985—），女，廣西梧州人，碩士，助理研究員，從事花卉組織培養(yǎng)工作。E-mail：hcy23007@163.com。

通信作者：卜朝陽，碩士，研究員，從事花卉育種研究。E-mail：yangnv@126.com。

茉莉[Jasminum sambac （L.） Aiton]為木犀科茉莉?qū)俪＞G灌木，樹冠呈直立狀或半開展?fàn)頪1]，原產(chǎn)于熱帶、亞熱帶地區(qū)。常見的茉莉品種有蔓生茉莉、木本茉莉、寶珠茉莉、洋茉莉等60多種，依其花形構(gòu)造可分為單瓣茉莉、雙瓣茉莉、多瓣茉莉3種。中國是世界上茉莉產(chǎn)量最多的國家，年產(chǎn)量占世界總產(chǎn)量的60%以上，現(xiàn)以廣西、福建、廣東、云南等地種植最為廣泛，其中廣西是我國茉莉花最大的產(chǎn)地，占全國產(chǎn)量的80%[2]。單瓣茉莉是茉莉的一種，植株矮小，高70～90 cm，莖枝較細(xì)，呈藤蔓型，故有“藤本茉莉”之稱，其香氣濃郁，是其他茉莉品種所不及的[3]。3個茉莉品種的香氣濃郁度依次為單瓣茉莉>雙瓣茉莉>多瓣茉莉[4]。然而，茉莉花栽培品種單一，長期以來僅栽培廣西橫縣當(dāng)?shù)仉p瓣茉莉，且病蟲害逐漸增多，如白絹病已開始蔓延；茉莉自然結(jié)實率低，如雙瓣茉莉僅為0.19%[5]；有性繁殖后代分離嚴(yán)重，生產(chǎn)上多采用扦插繁殖，但長期的無性繁殖導(dǎo)致茉莉種性退化、抗逆性下降、花朵產(chǎn)量逐年降低[6]。因此，應(yīng)盡快應(yīng)用組培快繁技術(shù)進(jìn)行茉莉良種的商品化繁育，通過母樹外植體的復(fù)壯和篩選再作離體培養(yǎng)，可進(jìn)一步提高種苗質(zhì)量；此外，也可以通過芽變篩選獲得新品系。組培所需外植體材料很少，且增殖系數(shù)高，而扦插則需要大量枝條。因此，良種的繁育應(yīng)以組培途徑為主，應(yīng)加大茉莉組培良種繁育的研究及推廣力度[7]。目前，大部分有關(guān)茉莉組織培養(yǎng)的研究主要集中在雙瓣茉莉上，而有關(guān)單瓣茉莉組織培養(yǎng)的研究很少[3，8-10]。本試驗以單瓣茉莉組培苗為試驗材料，進(jìn)一步優(yōu)化繼代生根培養(yǎng)基，篩選適宜的移栽基質(zhì)，完善單瓣茉莉的組培再生體系，旨在為單瓣茉莉種苗大規(guī)模商業(yè)化生產(chǎn)提供理論指導(dǎo)。

1材料與方法

茉莉組培苗為廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院花卉研究所組培室繼代繁殖的單瓣茉莉組培苗。

1.1茉莉繼代培養(yǎng)基的優(yōu)化試驗

供試材料為5 cm左右、生長正常、葉片張開、葉色濃綠的茉莉無菌組培幼苗，在超凈臺上將其取出后，切去葉片，切成帶1個腋芽的莖段，選取中部的莖段分別接種到繼代培養(yǎng)基中，每瓶接種20個莖段。繼代培養(yǎng)基設(shè)12個處理（表1），每個處理培養(yǎng)基中均加入蔗糖30 g/L，瓊脂4 g/L，pH值調(diào)至6.0±0.2，于123 ℃高溫滅菌20 min，每個處理培養(yǎng)基接種5瓶。接種后置于溫度（25±2） ℃、光照度1 500～2 000 lx、光照培養(yǎng)時間 12 h/d 條件下培養(yǎng)。培養(yǎng)30 d后統(tǒng)計腋芽萌發(fā)率、株高、節(jié)間數(shù)，分析不同培養(yǎng)基對茉莉組培苗腋芽萌發(fā)情況的影響。

1.2茉莉生根培養(yǎng)基的優(yōu)化試驗

供試材料為5 cm左右、生長正常、葉片張開、葉色濃綠的茉莉無菌組培幼苗，在超凈臺上將其取出后，切取帶頂芽的 3 cm 左右的幼苗分別接種到生根培養(yǎng)基中，每瓶接種10株。生根培養(yǎng)基設(shè)6個處理，每個處理培養(yǎng)基中均加入蔗糖 30 g/L、瓊脂4 g/L，pH值調(diào)至6.0±0.2，于123 ℃高溫滅菌20 min，每個處理培養(yǎng)基均接種5瓶。接種后置于（25±2） ℃、1 500～2 000 lx、光照培養(yǎng)時間12 h/d條件下。培養(yǎng) 30 d 后統(tǒng)計生根率、株高、主根數(shù)、主根長，分析不同培養(yǎng)基對茉莉組培苗生根情況的影響。

1.3茉莉組培苗移栽基質(zhì)的篩選試驗

13.1煉苗及預(yù)處理

選擇在生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)時間為 40 d、高約7 cm、葉片7～9張、長勢一致的已生根茉莉組培苗。在移栽環(huán)境強光下，不開瓶蓋煉苗10～15 d，然后打開瓶蓋再煉苗3～4 d。移栽時選取生長狀況良好、株高3～5 cm、根長2～3 cm、每株具4～5條根系的組培苗作為移栽材料，用鑷子將小苗輕輕取出后用自來水沖洗干凈。

1.3.2移栽基質(zhì)的消毒及配制

選用珍珠巖、河沙、黃泥土、泥炭這4種純基質(zhì)，以及黃泥、泥炭按體積比1 ∶[KG-*3]1混合配制，共5種移栽基質(zhì)處理，每種基質(zhì)裝2個育苗框。

1.3.3組培苗的移栽

將預(yù)處理的組培苗移栽到5種不同的試驗基質(zhì)中，每個育苗框移栽30株組培苗，每個處理60株，隨機移苗。本試驗采用南京農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)系王紹華設(shè)計的方差分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析和差異顯著性檢驗。

2結(jié)果與分析

2.1不同繼代培養(yǎng)基對茉莉組培苗增殖的影響

在同樣的基本培養(yǎng)基中，當(dāng)NAA的濃度一致時，隨著 6-BA濃度的升高，萌發(fā)率、株高、節(jié)數(shù)都逐漸提高，均以 5 mg/L 最適宜；當(dāng)6-BA濃度一致時，NAA以低濃度水平的處理較好，即0.01 mg/L；對比基本培養(yǎng)基，WPM處理的苗偏高，但萌發(fā)率不及MS處理，且MS處理的生長較穩(wěn)定，植株長勢比WPM處理的好，腋芽葉色較深、健壯（表1、圖1）。因此，選用MS+5 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA作為茉莉的繼代增殖培養(yǎng)基比較適宜。

2.2不同生根培養(yǎng)基對茉莉組培苗生根的影響

在6個處理中，NAA處理的生根率明顯低于IBA處理，且NAA處理的根過于肥大，容易從基部碰斷，屬畸形根，雖然株高、主根數(shù)、主根平均長度都高于IBA處理，但生根率以及根的質(zhì)量仍為生根培養(yǎng)基考慮的最重要因素，因此，茉莉生根培養(yǎng)基中，IBA處理優(yōu)于NAA處理。在IBA處理中，隨著IBA濃度的提高，生根率、株高都先上升后下降，當(dāng)IBA濃度為0.8 mg/L時，生根率達(dá)到94.0%，平均株高達(dá)8.11 cm，且與其他處理差異明顯，根系發(fā)達(dá)、植株健壯（圖2、表2）。綜合考慮，選用1/2 MS+0.8 mg/L IBA培養(yǎng)基最適宜茉莉的生根培養(yǎng)。

2.3不同基質(zhì)對茉莉組培苗移栽的影響

基質(zhì)類型對組培苗移栽有明顯影響，其中在泥炭基質(zhì)中茉莉組培苗移栽成活率達(dá)100.0%，且長勢旺盛，根系發(fā)達(dá)、粗壯；珍珠巖、河沙這2種基質(zhì)由于養(yǎng)分較少，植株生長差，不長新葉；黃泥土黏性太高，組培苗生長慢，根系細(xì)弱，不利于組培苗的生長；黃泥與泥炭組合雖然在一定程度上緩解黃泥土黏性太高的缺點，但長勢仍不及純泥炭的處理（表3、圖3）。因此，為保證成活率、提高組培苗移栽質(zhì)量，選用純泥炭作為移栽基質(zhì)最適宜。

2.4移栽管理

剛出瓶的組培苗對水分最敏感，對基質(zhì)水分的管理原則是“寧少勿多”。移栽后將組培苗置于自動噴淋系統(tǒng)下栽培，通過噴霧保持葉面濕潤狀態(tài)，08：00—18：00期間每隔1 h噴水1次，每次噴淋30～60 s，根據(jù)不同季節(jié)進(jìn)行調(diào)整，夏季噴淋時間長而冬季短。2周后，植株開始發(fā)新根，空氣濕度可保持在70%～80%，可適當(dāng)澆水。移栽期間的施肥以葉面肥為主，移栽后20 d后，每周施1次肥料，可以選擇硝酸鉀、磷酸二氫鉀、腐殖酸類等，以及復(fù)合肥和稀釋的MS培養(yǎng)基等。3個月后，即可移栽至大田種植（圖4）。

[FK（W9][TPHCY4.tif][FK）]

3討論

[JP2]近年來，國內(nèi)外學(xué)者對茉莉花的化學(xué)成分、藥理作用、常規(guī)栽培、病蟲害防治等方面進(jìn)行了廣泛的研究，但針對木犀科茉莉?qū)俚能岳蚱贩N進(jìn)行組培研究的相關(guān)報道較少，而以單瓣茉莉品種進(jìn)行組培研究更未見公開報道。本試驗研究單瓣茉莉組培技術(shù)，旨在建立一套完整的茉莉花離體培養(yǎng)體系，為單瓣茉莉種苗大規(guī)模商業(yè)化生產(chǎn)提供理論指導(dǎo)，促進(jìn)茉莉產(chǎn)業(yè)發(fā)展。[JP]

本試驗以MS、WPM為基本培養(yǎng)基，比較了不同6-BA和NAA配比對茉莉增殖的影響，篩選出適宜茉莉繼代增殖的培養(yǎng)基為MS+5.0 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA，其腋芽葉色濃綠、健壯，對增殖效果最好。適宜茉莉生根的培養(yǎng)基為1/2 MS+0.8 mg/L IBA，生根培養(yǎng)基不適宜添加NAA，這與前人的研究結(jié)果均不一樣[6，8，10]，可能由于他們研究的是雙瓣茉莉，本試驗的對象是單瓣茉莉，因此在生根培養(yǎng)基的激素使用上存在差異。栽培基質(zhì)是作物生長的介質(zhì)，它直接影響作物生長發(fā)育，本研究發(fā)現(xiàn)移栽基質(zhì)以純泥炭較佳，移栽成活率可達(dá)100.0%，且生長狀況最佳。泥炭土含有大量的有機質(zhì)，并且疏松，透氣透水性能好，保水保肥能力強，質(zhì)地輕，無病害孢子和蟲卵，適合作為茉莉組培苗移栽基質(zhì)。

[HS2*3]參考文獻(xiàn)：

[1]董利娟，張曙光. 茉莉花的生產(chǎn)現(xiàn)狀與科研方向[J]. 茶葉通訊，2001（2）：11-13.

[2]李春牛，李俊玲，嚴(yán)華兵，等. 茉莉種質(zhì)資源收集評價與繁育技術(shù)[J]. 熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，33（2）：27-29，48.

[3]朱春林. 單瓣茉莉帶葉嫩枝扦插簡易育苗法[J]. 林業(yè)實用技術(shù)，2012（10）：50-51.

[4]郭素枝，張明輝，邱棟梁，等. 3個茉莉品種花蕾香精油化學(xué)成分的GC-MS分析[J]. 西北植物學(xué)報，2011，31（8）：1695-1699.

[5]賴明志. 臺灣種茉莉的種性與繁殖特性[J]. 福建農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，1995，24（3）：291-294.

[6]蔡漢，陳曉強，熊作明，等. 茉莉離體微繁及無糖生根技術(shù)[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報，2007，23（5）：464-468.

[7]卜朝陽，周錦業(yè)，黃昌艷，等. 我國茉莉研究現(xiàn)狀及問題分析[J]. 北方園藝，2014（19）：199-203.

[8]李聰聰，陸長梅，佘建明，等. 雙瓣茉莉離體微繁技術(shù)[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，40（4）：65-68.

[9]孫艷妮，湯訪評，房偉民，等. 茉莉離體快繁體系的建立[J]. 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報，2009，21（4）：390-394.

[10]孫艷妮，李俊香，房偉民，等. 茉莉試管苗生根誘導(dǎo)主要影響因子的比較研究[J]. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報，2009，21（11）：42-45.