免疫組化檢查在病理診斷中的應(yīng)用及其意義

熱米拉·阿不都克力木，葛春鳴

（新疆伊犁州新華醫(yī)院病理科，新疆 伊犁 835000）

免疫組化檢查在病理診斷中的應(yīng)用及其意義

熱米拉·阿不都克力木，葛春鳴

（新疆伊犁州新華醫(yī)院病理科，新疆 伊犁 835000）

目的 探討免疫組化檢查在病理診斷中的應(yīng)用及其臨床意義。方法 選取2015年7月～2016年9月間我院門診收入的59例淋巴腫瘤患者的病例檔案，患者均采用免疫組化技術(shù)進(jìn)行病理檢測。結(jié)果 59例患者經(jīng)免疫組化檢查確診結(jié)果顯示出有57例患者檢測成功，成功率為96.61%（57/59），其中淋巴腫瘤轉(zhuǎn)移者45例，原發(fā)性淋巴腫瘤者12例；其余2例為檢測失敗，需進(jìn)一步進(jìn)行全面診斷。結(jié)論 本研究探討了免疫組化在病理診斷中的應(yīng)用情況，該技術(shù)可有效提升轉(zhuǎn)移性腫瘤檢測率及腫瘤確診情況，為臨床的治療惡性腫瘤提供了可靠的病理學(xué)理論參考，具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。

免疫組化檢查；病理診斷；應(yīng)用

免疫組化是應(yīng)用免疫基本原理[1]，通過化學(xué)反應(yīng)促使熒光素、酶、金屬離子或同位素等顯色劑將標(biāo)記抗體顯色而確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原，進(jìn)而對組織來源進(jìn)行定位、定性和定量等精確分析[2]。現(xiàn)本文報(bào)告如下：

1 資料及方法

1.1 臨床資料

選取2015年7月～2016年9月間我院門診收入的59例淋巴腫瘤患者的病例檔案，其中男性34例，女性25例；年齡36-69歲，年齡均值（42.34±3.21）歲。59例患者均因頸部淋巴結(jié)腫大且無痛性、食欲減退、發(fā)熱、盜汗及易疲勞等癥狀到院進(jìn)行診治。

1.2 方法

本組59例患者均采用免疫組化技術(shù)進(jìn)行病理檢測。結(jié)合其具體病癥表現(xiàn)及各種體征決定對其實(shí)施免疫組化技術(shù)，以進(jìn)行病理檢測。免疫組化技術(shù)的具體部操作為：石蠟切片常規(guī)脫蠟至水；給予緩沖液洗3 min*2次；為降低因內(nèi)源性過氧化物酶而造成非特異性的背景染色，應(yīng)將切片放3%H2O2室溫中進(jìn)行5～15 min的孵育；給予緩沖液洗5 min*2次；滴入U(xiǎn)ltra V Block后[3]，于室溫下行5 min的孵育，目的是封閉非特異性背景染色（注：孵育時(shí)間應(yīng)小于10 min，以免降低特異性染色效果）滴入增強(qiáng)子，給予20 min室溫下孵育；給予緩沖液洗5 min*2次；滴入酶標(biāo)二抗，行30 min的室溫孵育（其對光較敏感，盡量避免使其受到不必要的光暴露，應(yīng)儲存于不透明瓶內(nèi)）；給予緩沖液洗5 min*2次；應(yīng)用顯色劑進(jìn)行顯色，了先向1 ml AEC Plus Substrate中滴1～2滴的AEC Plus Chromogen，待混勻后再滴到切片上，孵育3～15 min（具體時(shí)間可由染色的深淺程度決定）；用自來水進(jìn)行充分沖洗切片，再復(fù)染-脫水-透明-封片。

1.3 特點(diǎn)及應(yīng)用

1.3.1 特點(diǎn)

1）特異性強(qiáng)

免疫學(xué)基本原理決定了抗原和抗體間結(jié)合會具有高度的特異性，因此，免疫組化是特定顯示出組織細(xì)胞中的抗原。當(dāng)組織細(xì)胞中存有交叉抗原，會出現(xiàn)特定的交叉反應(yīng)。

2）敏感性高

由于ABC法、SP三步法的創(chuàng)新出現(xiàn)，抗體可稀釋至千倍甚至億倍，且仍可與抗原結(jié)合反應(yīng)，愈加方便應(yīng)用于常規(guī)病理診斷。

1.3.2 應(yīng)用范圍

目前，免疫組織檢查可應(yīng)用于惡性腫瘤診斷及鑒別診斷；定位轉(zhuǎn)移性惡性腫瘤；進(jìn)一步對腫瘤病理分型；多種標(biāo)志物鑒別診斷軟組織腫瘤；及時(shí)檢測出微小轉(zhuǎn)移灶，指導(dǎo)確定治療方案及包括手術(shù)范圍。

1.4 陽性判定標(biāo)準(zhǔn)

陽性免疫特征：弱（+）、中（++）、強(qiáng)（+++）三級。免疫熒光法則出現(xiàn)淺綠色、顯綠色和耀眼亮綠色的熒光；而免疫酶標(biāo)記則為淡黃色細(xì)顆粒、棕黃色顆粒和褐黃色粗顆粒，后者耀眼易見。

陽性細(xì)胞學(xué)特征：胞膜型、胞核型、胞質(zhì)型、微絨毛型、復(fù)合型五種。

陽性組織學(xué)特征：局灶型、彌漫型、片塊型、網(wǎng)狀型、腺管型、腔緣型、菊團(tuán)型等。

陽性強(qiáng)度特征：依照抗原含量分為1分弱陽性（+）、2分中等陽性（++）；3分強(qiáng)陽性（+++）；依照陽性細(xì)胞數(shù)量分為弱陽性（+，總數(shù)≤25%）；中等陽性（++，總數(shù)25%-49%）；強(qiáng)陽性（+++，總數(shù)≥50%）。

2 結(jié) 果

依據(jù)上述判定標(biāo)準(zhǔn)，本組59例疑似為患淋巴腫瘤患者均給予免疫組化檢查的結(jié)果如表1所示。

表1 免疫組化檢查結(jié)果情況（n，%）

57例患者檢測成功：其中淋巴腫瘤轉(zhuǎn)移者45例（其中21例中等陽性（++）、微絨毛型、片塊型；24例強(qiáng)陽性（+++）、復(fù)合型、彌漫型及網(wǎng)狀型），原發(fā)性淋巴腫瘤者12例（均為弱（+）、局灶型、局灶型）；其余2例為檢測失敗，需進(jìn)一步進(jìn)行全面診斷。

3 討 論

由于淋巴瘤最難進(jìn)行病理診斷及明確分型，所以在應(yīng)用免疫組化方案進(jìn)行病理診斷淋巴瘤時(shí)，必須用2種及以上的標(biāo)記物抗體，才能精確反應(yīng)出患者體內(nèi)淋巴瘤的各種亞型信息。此技術(shù)在生物學(xué)領(lǐng)域，尤其在醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)和臨床研究上可發(fā)揮重要的影響作用。免疫組化技術(shù)最大優(yōu)勢是定位及定性分析，其可通過抗原抗體結(jié)合反應(yīng)和呈色反應(yīng)，可被熒光素精準(zhǔn)定位，進(jìn)而可定性觀察其形態(tài)與功能，以對病理學(xué)檢查行定量分析。因此，免疫組織化檢查可對惡性腫瘤疾病做到早發(fā)現(xiàn)、早確診及早鑒別，通過確定轉(zhuǎn)移性惡性腫瘤的原發(fā)位，以進(jìn)一步對病理進(jìn)行分型；還可及時(shí)發(fā)現(xiàn)微小型轉(zhuǎn)移灶，是爭取最佳治療時(shí)間及提高療效的關(guān)鍵，因此，對其診斷價(jià)值至關(guān)重要。

[1] 楊 勇.免疫組化技術(shù)在病理診斷中的應(yīng)用[J].《心血管病防治知識》,2016(7):5-7.

[2] 李春飛.淺談免疫組化技術(shù)在病理診斷中的應(yīng)用價(jià)值[J].《醫(yī)學(xué)信息》,2014(39):514-514.

本文編輯：吳 衛(wèi)

R730.4

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ISSN.2095-8242.2017.05.909.02