廣西中北部地區(qū)不規(guī)則抗體篩選分析

唐玉杰 施 麗 唐生明

廣西中北部地區(qū)不規(guī)則抗體篩選分析

唐玉杰 施 麗 唐生明

目的 通過本院輸血患者不規(guī)則抗體篩選的分析，探討其對(duì)安全輸血的臨床指導(dǎo)價(jià)值。 方法 選擇2012年2月～2016年2月在本院輸血的患者38 722例，根據(jù)患者不規(guī)則抗體篩選的分析，篩選出陽性患者并做特異性分析，交叉配血使其能夠安全有效的輸血。結(jié)果 ①38 722例患者作不規(guī)則抗體篩選，陽性患者278例，占0.717%。其中男性患者陽性率為0.214%，低于女性患者（0.503%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。②無輸血史及無妊娠史的不規(guī)則抗體患者陽性率為0.114%，低于有輸血史或有妊娠史的不規(guī)則抗體陽性率（1.587%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。③278例不規(guī)則抗體患者中，特異性抗體患者128例（46%），其中RH患者98例（35.3%），MNS患者20例（7.2%）及其他特異性抗體患者10例（3.6%）；非特異性抗體患者150例（54%，150/278），其中冷自身抗體患者68例（24.5%），其他非特異性抗體患者82例（29.5%）。結(jié)論 ①廣西中北部地區(qū)不規(guī)則抗體篩選結(jié)果分析與全國其他各地相差不大，屬于正常情況。②通過輸血前不規(guī)則篩選指導(dǎo)患者輸血配血，對(duì)陽性患者進(jìn)行特異性分析和交叉配血，在安全輸血上具有重要的臨床指導(dǎo)意義。

不規(guī)則抗體 臨床輸血 篩選

在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中，很少如輸血前檢驗(yàn)一樣，臨床醫(yī)生基本上依賴輸血前檢驗(yàn)結(jié)果的正確性[1]。輸血前檢驗(yàn)的每一個(gè)環(huán)節(jié)均有可能發(fā)生差錯(cuò)，給患者輸入不相容的血液成分會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重不良后果，如急性溶血反應(yīng)（多由ABO血型不相容輸血引起）與遲發(fā)性溶血反應(yīng)（多由ABO以外血型不相容輸血所致）。由此可見，安全輸血在臨床輸血上具有重要的意義。而安全輸血主要從三方面著手：首先必須血型鑒定；其次是抗體篩選，檢測(cè)出不規(guī)則抗體患者并做特異性分析；然后是針對(duì)不規(guī)則抗體作交叉配血，使患者可以實(shí)施安全輸血。三者相輔相成，缺一不可。當(dāng)前技術(shù)下的輸血檢查，除人為錯(cuò)誤，基本上血型鑒定已不是妨礙安全輸血的主要因素，所以急性溶血反應(yīng)已經(jīng)不是主要的輸血安全問題。有研究表明，不規(guī)則抗體才是臨床輸血產(chǎn)生溶血反應(yīng)的主要原因，且比重越來越大[2，3]。本文將對(duì)來本院就醫(yī)輸血的患者進(jìn)行不規(guī)則抗體篩選，分析結(jié)果并探討其在安全輸血中的意義。

不規(guī)則抗體主要是指抗-A、抗-B、抗-AB之外的紅細(xì)胞血型抗體，如抗-D、抗-N、抗-M、抗-jk，是目前臨床上引起溶血反應(yīng)的主要因素，尤其是多次輸血、大量輸血或妊娠患者中常見[4]。目前不規(guī)則抗體篩選已被廣泛應(yīng)用于臨床輸血，以保證安全輸血，減少溶血反應(yīng)?，F(xiàn)將本院近年來38 722例輸血患者經(jīng)微柱凝膠技術(shù)進(jìn)行不規(guī)則抗體篩選的結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，建立稀有血型數(shù)據(jù)庫，為后期安全輸血提供依據(jù)。

資料與方法

1 一般資料 本院為三甲醫(yī)院。38 722例輸血患者中，桂林市級(jí)（包含直轄縣）23 660例，周邊市級(jí)15 062例，其中賀州市7 506例，柳州市3 028例，其他地區(qū)4 528例，基本上可反映廣西中北部地區(qū)。其中男性20 135例（52%），年齡8～70歲，平均年齡（35.0±2.3）歲，女性18 587例，年齡10～73歲，平均年齡（32.0±1.7）歲。無輸血史、無妊娠史患者22 846例（59%），有輸血史或妊娠史的15 876例（41%）?；颊吣挲g對(duì)比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，無輸血史無妊娠史與有輸血史或妊娠史對(duì)比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 儀器與試劑 抗體篩選紅細(xì)胞及抗體鑒定譜細(xì)胞均由上海血液生物醫(yī)藥有限公司提供，微柱凝膠檢測(cè)卡及儀器均由強(qiáng)生（中國）醫(yī)療器材有限公司提供。

3 不規(guī)則抗體篩選方法 采用微柱凝膠技術(shù)進(jìn)行不規(guī)則抗體篩選。首先按照Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ對(duì)微柱凝膠進(jìn)行標(biāo)記，然后在凝膠孔中加入患者50μl血漿與等量的抗體篩選細(xì)胞與自身細(xì)胞，保持37℃孵育15 min。孵育結(jié)束后離心10 min，分析結(jié)果。若為陽性，則用抗體鑒定譜細(xì)胞進(jìn)行特異性分析。

4 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 若離心結(jié)束后，紅細(xì)胞發(fā)生凝聚且在凝柱的中上層，說明結(jié)果為陽性；反之，若凝聚在凝柱底層，說明結(jié)果為陰性。對(duì)陽性患者用抗體鑒定譜細(xì)胞進(jìn)一步做特異性分析，方法同上，需把Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ標(biāo)記改為1～10號(hào)標(biāo)記法。若患者血漿與自身細(xì)胞、抗體鑒定譜細(xì)胞均發(fā)生凝聚，為非特異性抗體；若患者血漿僅與部分抗體鑒定譜細(xì)胞凝聚，與其他抗體鑒定譜細(xì)胞、自身細(xì)胞不發(fā)生凝聚，則為特異性抗體[5]。具體定性以反應(yīng)格局與相應(yīng)抗原反應(yīng)的陰陽性來判定。

5 對(duì)陽性患者采取嚴(yán)格交叉配血方法 采用微柱凝膠方法進(jìn)行交叉配血。

6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS18.0軟件，計(jì)數(shù)資料采用χ?檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 進(jìn)行不規(guī)則抗體篩選的38 722例中，檢出陽性患者278例（0.717%）。其中男性83例，陽性率0.214%，女性陽性率（0.503%）明顯高于男性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。無輸血史及無妊娠史的不規(guī)則抗體患者26例，陽性率0.114%;有輸血史或有妊娠史的不規(guī)則抗體患者陽性率（1.587%）明顯高于無輸血史無妊娠史患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

2 278例陽性患者中，有特異性抗體患者128例（46%），其中RH患者98例（35.3%）、MNS患者20例（7.2%）、其他特異性抗體患者10例（3.6%）；非特異性抗體患者150例（54%），其中冷自身抗體68例（24.5%）、其他非特異性抗體82例（29.5%）。見表2。

表1 38 722例患者不規(guī)則抗體篩選陽性率

討 論

抗體篩選試驗(yàn)的方法很多，國外以間接抗球蛋白法為金標(biāo)準(zhǔn)，是靈敏且有效的檢測(cè)抗體方法，同時(shí)此法可有效避免無臨床意義抗體的干擾。但是耗時(shí)長(zhǎng)、步驟多。國內(nèi)有的醫(yī)院還采取普通的鹽水法進(jìn)行篩選。此法可用于檢測(cè)干擾ABO定型的鹽水反應(yīng)活性抗體，如MN、P血型抗體；但也會(huì)檢查出無臨床意義的抗體，如冷凝集素抗–I及抗-IH等，而且會(huì)漏檢IgG性質(zhì)的抗體[6]。多數(shù)國內(nèi)中小醫(yī)院采取凝聚胺法，凝聚胺對(duì)Kell系統(tǒng)不敏感，對(duì)RH系統(tǒng)特別敏感，而我國最常見的是由RH系統(tǒng)引起的遲發(fā)性溶血反應(yīng)，且漢族人中幾乎均為K抗原陰性，所以通常不考慮抗-K。廣西是全國少數(shù)民族最多的地區(qū)，廣西中北部地區(qū)包含眾多除漢族外的壯族、瑤族、苗族、侗族及其他少數(shù)民族群體。所以我院采用微柱凝膠技術(shù)，是一種簡(jiǎn)單、有效檢測(cè)不規(guī)則抗體的方法，不過無法排除無臨床意義抗體的干擾。

正常人中不規(guī)則抗體陽性率較低，但有報(bào)道大量輸血患者的陽性率在15%～20%[7]。本文篩選的38 722例患者中，278例陽性（陽性率0.717%），與王謙[8]等報(bào)道的陽性率0.68%差異不大。在特異性抗體陽性患者中，RH系統(tǒng)最多，其中以抗-E陽性最多（59例，21.22%），與張艷[9]等報(bào)道的襄陽地區(qū)抗-E陽性患者中最多相似，但其報(bào)告中比例達(dá)62.86%。由此可見，臨床上行E抗原相容性輸血是否具有重要價(jià)值值得探討。另外,結(jié)果顯示女性患者陽性率明顯大于男性，與陳倩[10]等報(bào)道的海南地區(qū)不規(guī)則抗體篩選結(jié)果一致。有輸血史或妊娠史的患者陽性率明顯大于無輸血史、無妊娠史的患者陽性率，與國內(nèi)諸多報(bào)道相符，如閆有敏[11]等報(bào)告陽性患者中88.89%為有輸血史或妊娠史，11.11%為無輸血史、妊娠史的，說明輸血及或妊娠可能是引起不規(guī)則抗體陽性的主要因素。所以在臨床輸血上尤其應(yīng)關(guān)注女性及有輸血史或妊娠史患者的不規(guī)則抗體篩選。

根據(jù)報(bào)道，目前已知紅細(xì)胞有多達(dá)29個(gè)抗原系統(tǒng)（如ABO、RH、MN、LW、MNS、JK等）、500多種抗原（確認(rèn)200多種）。紅細(xì)胞抗原的多樣性決定了抗體的多樣性，檢測(cè)抗-A、抗-B、抗-D（ABO血型、RH血型）可確保絕大多數(shù)患者的輸血安全，但仍不能避免因血型不合（ABO、RH血型以外）而引發(fā)的溶血。若未對(duì)患者進(jìn)行不規(guī)則抗體篩選而進(jìn)行輸血，導(dǎo)致患者出現(xiàn)遲發(fā)性溶血反應(yīng)，易被忽視或不能引起臨床醫(yī)師的注意，進(jìn)而造成不可估量的后果?！杜R床輸血技術(shù)規(guī)范》第四章第17條提到：“凡遇以下情況必須按《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》有關(guān)規(guī)定做抗體篩選試驗(yàn)：①交叉配血不合的；②對(duì)有輸血史、妊娠史或短期內(nèi)需接受多次輸血者[12]。所以在輸血前尤其是針對(duì)以上患者，應(yīng)嚴(yán)格進(jìn)行不規(guī)則抗體篩選。且為了將溶血反應(yīng)降至最低，應(yīng)對(duì)所有輸血患者在輸血前根據(jù)具體情況選擇檢測(cè)方法進(jìn)行不規(guī)則抗體篩選。

臨床上抗體篩選并非能檢出所有有臨床意義的抗體，主要是因?yàn)榈皖l抗原的抗體可能被忽略及以往所產(chǎn)生的抗體已降至難以檢出的水平[13]，所以患者以往的抗體鑒定記錄有重要參考價(jià)值。本次不規(guī)則抗體篩選的分析結(jié)果在該院已記錄，并建立了相應(yīng)的數(shù)據(jù)庫。本次分析主要得益于采用微柱凝膠技術(shù)，使得少數(shù)民族多的廣西中北部地區(qū)的篩選結(jié)果穩(wěn)定、準(zhǔn)確，具有一定的地區(qū)代表性。對(duì)未來廣西中北部地區(qū)的不規(guī)則抗體篩選及安全輸血具有重要的指導(dǎo)意義。

1 李紅梅，王遠(yuǎn)杰，馮寧，等.臨床血液標(biāo)本采集錯(cuò)誤原因分析[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2015，21（27）：13-14.

2 Kang MG，Lin YA，Lee KM.A hemolytic transfusion reaction due to anti Ku antibody in a patient with knull phenotype the first case in Korea[J].J Lab Med，2009，29（3）：238-242.

3 洪小珍，許先國，朱發(fā)明，等.血清學(xué)和分子生物學(xué)鑒定Lewi血型抗體引起的輸血反應(yīng)[J].中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志，2008，16（5）：1192-1195.

4 范金波，李海平，劉久波.8967例手術(shù)前備血及受血者不規(guī)則抗體檢測(cè)結(jié)果分析[J].臨床輸血與檢驗(yàn)，2011，13（2）：155-157.

5 曹微微，舒象武，李碧娟，等.55481例住院擬輸血患者紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體分析[J].臨床輸血與檢驗(yàn)，2013，15（3）：238-240.

6 曲曉霞，張爽.輸血前疑難配血的工作體會(huì)與總結(jié)[J].中國社區(qū)醫(yī)師（醫(yī)學(xué)專業(yè)半月刊），2009，11（24）：28-28.

7 劉仁強(qiáng)，何子毅，鄒文濤，等.多次輸血產(chǎn)生不規(guī)則抗體及配血時(shí)間分析[J].廣東醫(yī)學(xué)，2010，31（14）：1789-1790.

8 王謙，燕備戰(zhàn)，于洋.31766名患者紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體分析[J].中國輸血雜志，2011，24（11）：966-968.

9 張艷，水波，侯治兵.襄陽地區(qū)不規(guī)則抗體篩查的統(tǒng)計(jì)分析及臨床意義[J].臨床血液學(xué)雜志，2014（2）：135-136.

10 陳倩，張志亮，唐秋萍.海南地區(qū)無償獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體篩查結(jié)果分析[J].中國輸血雜志，2015，28（4）：416-418.

11 閆有敏，王帥，李德征.住院預(yù)輸血患者不規(guī)則抗體檢出率調(diào)查[J].臨床輸血與檢驗(yàn)，2015，17（2）：175-176.

12 衛(wèi)生部.臨床輸血規(guī)范[J].柳州醫(yī)學(xué)，2012（1）：75-77.

13 葉巧國，張衛(wèi)良，盧德權(quán)，等.微柱凝膠卡式法在臨床輸血中的應(yīng)用價(jià)值分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2014，（1）：54-56.

Analysis of Irregular Antibody Screening of the North Central Area of Guangxi Province

TANG Yu-jie，SHI Li，TANG Sheng-ming.
Blood Transfusion Department of Affiliated Hospital of Guilin Medical College 5410012

Objective By analyzing irregular antibody screening of patients with blood transfusions，we explored its significance in blood transfusion safety and regional clinical guidance. Methods 38 722 patients with blood transfusions were studied from February 2012 to February 2016and among them positive irregular antibodies were screened and specificity was analyzed for safe and effective transfusion. Reasults 278 cases of positive irregular antibodies were found in the patients，which accounted for 0.717% （278/38 722）. Among them 83 males with a positive rate of 0.214% （83/38 722），and 195 females with a positive rate of 0.503% （195/38 722）were observed. Female patients had a significantly high positive rate when compared with male patients（P＜0.05）. The positive incidence of 0.114%（26/22 846）in the patients with history of blood transfusion and pregnancy was lower than that in control （1.587%，252/15 876）（P＜0.05）.. . Among the 278 patients with irregular antibodies，128 （46.0%） patients presented specific antibodies，including 98 cases of RH （35.3%，98/278），20 cases of MNS patients （7.2%，20/278），and 10 cases of others（3.6%，10/278）. 150 （54%，150/278） patients had non-specific antibodies，，68 had cold antibodies（24.5%，68/278），and 82（29.5%，82/278） carried other non-specific antibodies. Conclusion Analysis of the north central area of Guangxi province are similar with the other regions，under the normal conditions. Through the screening before blood transfusion，the patients with positive irregular antibodies should be analyzed for blood cross matchingand transfusion safety.

Irregular antibody Clinical transfusion Screening

R457.1

A

1671-2587（2017）02-0132-04

2016-10-13）

（本文編輯：王敏）

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.01.011

541001 廣西桂林醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院輸血科（唐玉杰，唐生明）；新疆伊犁州友誼醫(yī)院輸血科（施 麗）

唐玉杰（1976–），女，廣西人，主管技師，碩士，主要從事輸血工作，（Tel）18102268689。

唐玉杰，女，主管技師，（E-mail）huangw_ j168@163.com。