十六烷基三甲基溴化銨和乳清蛋白結(jié)合的研究

劉 偉，李興民*，鄭海濤，劉 毅

(中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與營(yíng)養(yǎng)工程學(xué)院，教育部-北京市共建功能乳品重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100083)

十六烷基三甲基溴化銨和乳清蛋白結(jié)合的研究

劉 偉，李興民*，鄭海濤，劉 毅

(中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與營(yíng)養(yǎng)工程學(xué)院，教育部-北京市共建功能乳品重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100083)

尋找新型絮凝劑，研究其與蛋白粒子結(jié)合的物化因素，實(shí)現(xiàn)蛋白分離及對(duì)乳清的合理利用。研究不同因素如十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)濃度、pH值、溫度、蛋白質(zhì)量濃度、離子強(qiáng)度對(duì)蛋白-CTAB復(fù)合物形成的影響，獲得乳清蛋白與CTAB結(jié)合的最佳物化條件。結(jié)果表明：CTAB添加量是影響蛋白-CTAB結(jié)合的最大因素；不同pH值對(duì)CTAB-蛋白的影響差異不顯著；不同pH值條件下，溫度對(duì)CTAB-蛋白結(jié)合影響顯著；在0～200mmol/L范圍內(nèi)，離子強(qiáng)度越高，結(jié)合的絡(luò)合物越少。蛋白質(zhì)量濃度越大，結(jié)合的絡(luò)合物越多，蛋白回收率越大。

乳清蛋白；十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)；靜電結(jié)合；物化因素

Abstract：Today, understanding physico-chemical factors affecting the complexation between coagulant and protein granules for protein separation is of great interest to the finding of novel coagulants and the reasonable utilization of whey protein. The effects of different factors such as final cetyltrimethyl ammol/lonium bromide (CTAB) concentration, pH, temperature, whey protein concentration and ionic intensity on the complexation between CTAB and whey protein were dealt with for finding the best complexation conditions. Final CTAB concentration was found to be the most important factor. pH had no significant effect on CTAB/whey protein complexation. At different pH values, the complexation was significantly affected by temperature. In a range of 0 to 200 mmol/L, higher ionic intensity resulted in a decrease of CTAB/whey protein complexation. However,increasing whey protein concentration affected the complexation in a positive way, resulting in an increase of protein recovery.

Key words：whey protein；CTAB；electrostatic interaction；physico-chemical factors

美國(guó)乳品局預(yù)測(cè)，到2015年全球干酪產(chǎn)量將達(dá)到2100萬(wàn)t，未來(lái)增長(zhǎng)量主要來(lái)自中國(guó)、印度等亞洲新興國(guó)家[1]。乳清廢液中含占全奶蛋白20%的乳清蛋白、99%以上的乳糖以及多種水溶性維生素和部分脂肪。乳清蛋白具有許多重要功能特性和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值[2-4]，主要單體成分有β-乳球蛋白(1.3g/L)、α-乳白蛋白(0.7g/L)、牛血清蛋白(0.3g/L)、免疫球蛋白(0.7g/L)、乳鐵蛋白(0.1g/L)、乳過(guò)氧化物酶(0.03g/L)以及微量的溶菌酶[5]。不同分子結(jié)構(gòu)的單體蛋白在溶液體系中表現(xiàn)出的不同物化特性是實(shí)現(xiàn)乳清蛋白聚集分離的分子基礎(chǔ)[6]。

乳清蛋白分離和純化一般有色譜層析、電滲析、膜過(guò)濾、以及酸度和溫度調(diào)節(jié)[7]。以上方法在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)可以實(shí)現(xiàn)較好的蛋白分離，但低產(chǎn)率、低純度和高成本的缺點(diǎn)限制了實(shí)際應(yīng)用。因此尋找新型絮凝劑，探索其與蛋白粒子結(jié)合的研究對(duì)于乳清的合理利用有重要意義。

Kaewkannetra等[8]研究應(yīng)用不同濃度硫酸鋁對(duì)乳清中蛋白粒子大小的影響，發(fā)現(xiàn)硫酸鋁在5mg/L時(shí)粒子粒徑最大，蛋白分離效果最好。有機(jī)絮凝劑領(lǐng)域，Savant等[9]研究了殼聚糖基的多種絮凝劑的絮凝效果，結(jié)果顯示殼聚糖和其他多糖的絡(luò)合物可以實(shí)現(xiàn)70%的固體物質(zhì)的分離；Fuda等[10]利用十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)攪打產(chǎn)生的泡沫分離乳清蛋白，可以獲得80%以上的單體蛋白的分離，攪打泡沫分離和直接加入CTAB的分離效果之間沒(méi)有顯著差異。

CTAB屬于季銨鹽型陽(yáng)離子表面活性劑。具有水溶性好，耐酸、耐堿和抗菌功效的特點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于食品、化妝品、個(gè)人護(hù)理用品、消毒劑等方面[11]。CTAB的化學(xué)結(jié)構(gòu)如圖1所示，非極性區(qū)域含有正電荷，乳清中大部分乳清蛋白的等電點(diǎn)在pH5.5以下。正常的乳清液(pH 6.3)中蛋白表面帶負(fù)電荷，蛋白粒子和CTAB結(jié)合發(fā)生靜電結(jié)合，形成乳清蛋白-CTAB絡(luò)合物。

圖1 十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)的化學(xué)結(jié)構(gòu)Fig.1 Chemical structure of CTAB

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)直接加入CTAB，改變體系中的物化條件，研究CTAB濃度、pH值、溫度、離子強(qiáng)度對(duì)蛋白-CTAB絡(luò)合物形成的影響，得到乳清蛋白與CTAB結(jié)合的最佳物化條件。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

新鮮切達(dá)干酪乳清 北京三元乳品廠。

0.1 mol/L CTAB標(biāo)準(zhǔn)溶液、考馬斯亮藍(lán)G250、磷酸緩沖液、BSA標(biāo)準(zhǔn)液(5mg/mL)、硫酸(1.825g/mL)、異戊醇(0.811g/mL)。

1.2 儀器與設(shè)備

UC-2102C型紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)；LS230貝克曼庫(kù)爾特粒徑分析儀(0.02～2000μm)；Anke GL-20G-Ⅱ型冷凍離心機(jī)；半自動(dòng)凱氏定氮儀；Millipore超濾膜(截留10kD)；Micon8050超濾杯；乳脂離心機(jī)；蓋勃乳脂計(jì)；恒溫水浴鍋；電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱；Safe溫控箱(4℃)；HANNA PH211-C型pH酸度計(jì)。

1.3 方法

實(shí)驗(yàn)采用離心后測(cè)定上清液中蛋白的方法即蛋白回收率間接反映蛋白與CTAB結(jié)合的情況。蛋白回收率越高，說(shuō)明蛋白-CTAB絡(luò)合物形成的越多，或者絡(luò)合物粒子越大；因脂肪是影響乳清液濁度的重要因素，測(cè)定上清液中濁度方法直接反映乳清液中脂肪變化情況。

分別采用GB/T 5009.5—1985《食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定方法》凱氏定氮法測(cè)定蛋白含量；GB/T 5009.6—2003《食品中脂肪的測(cè)定》蓋勃法測(cè)乳脂肪含量；參考黃偉坤等[12]方法測(cè)定乳糖含量；參照GB/T 14769—1993 《食品中水分的測(cè)定方法》恒溫干燥法測(cè)定水分含量。

1.3.1 pH值對(duì)CTAB與乳清蛋白結(jié)合的影響

蛋白質(zhì)量濃度為0.61g/100mL調(diào)節(jié)pH值為4.5、5.5、6.5、7.0、8.0、9.0的乳清樣液，分別在各組樣液中加入CTAB標(biāo)準(zhǔn)液(0.1mol/L)，得CTAB濃度為0、1、2、3、4、5mmol/L的混合溶液。搖勻攪拌10min，4℃條件下3000r/min離心15min。移取上清液5mL，測(cè)上清液濁度、總蛋白含量。

1.3.2 離子強(qiáng)度對(duì)CTAB與乳清蛋白結(jié)合的影響

保持蛋白質(zhì)量濃度0.61g/100mL，pH8.0不變，常溫下(20℃)將乳清液分成4組，用2mol/L的標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液配制離子強(qiáng)度分別為0、50、100、200mmol/L的乳清樣液，用0.1mol/L CTAB標(biāo)準(zhǔn)溶液在上述4組樣液中配制CTAB濃度分別為0、1、2、3、4、5mmol/L的混合溶液，常溫下攪拌1min放置20min，4℃低溫3000r/min離心15min。取出上清液，測(cè)定上清液中蛋白含量、濁度。

1.3.3 溫度處理對(duì)CTAB與乳清蛋白結(jié)合的影響

兩組乳清液分別調(diào)節(jié)pH值至6.5和8.0，按0～5mmol/L濃度加入CTAB，每組溶液體系分成4個(gè)梯度，水浴加熱到50、60、70、80℃，加熱時(shí)間10min。取樣品4℃條件下3000r/min離心15min。移取上清液5mL，測(cè)定上清液中蛋白含量、濁度。

1.3.4 總蛋白質(zhì)量濃度對(duì)CTAB與蛋白結(jié)合和沉淀的影響

常溫(20℃)、pH8.0條件下，利用低溫冷凍濃縮與超濾法得到總蛋白質(zhì)量濃度分別為0.6、1.2、1.8、2.4g/100mL的4組乳清液。用CTAB標(biāo)準(zhǔn)溶液在上述4組樣液中調(diào)節(jié)其濃度分別為0～5mmol/L的混合液，攪拌1min后放置20min，4℃低溫冷凍，3000r/min離心15min。移取上清液5mL，測(cè)定總蛋白質(zhì)量濃度、濁度。

1.3.5 乳清液中CTAB和蛋白結(jié)合的粒度分析

pH8.0時(shí)，選擇不同溫度，用CTAB標(biāo)準(zhǔn)液配制0～5mmol/L樣液。將不同濃度梯度的樣液分成兩組，取10mL常溫(20℃)放置10min，10mL水浴加熱(80℃)10min。分別搖勻攪拌1min，取5mL樣液于試管中，利用粒度分析儀測(cè)定蛋白-CTAB絡(luò)合物的粒子大小分布。

2 結(jié)果與分析

2.1 乳清中主要營(yíng)養(yǎng)成分含量

測(cè)得乳清中主要營(yíng)養(yǎng)成分含量(3次重復(fù))為：總蛋白(0.81±0.14)g/100mL、乳脂肪(0.58±0.04)g/100mL、乳糖(4.9±0.17)g/100mL、水分(92.31±0.26)g/100mL。

2.2 物化因素對(duì)CTAB與乳清蛋白結(jié)合的影響

2.2.1 pH值對(duì)CTAB與乳清蛋白結(jié)合的影響

從圖2可以看出，不同濃度的CTAB結(jié)合乳清蛋白的沉降效果不顯著，蛋白回收率呈下降趨勢(shì)，產(chǎn)生類(lèi)似于鹽溶的現(xiàn)象。反映此條件下，CTAB帶負(fù)電荷的非極性部分和蛋白表面的疏水性區(qū)域產(chǎn)生疏水性結(jié)合，增加了蛋白表面的電荷量，增強(qiáng)了蛋白與水分子之間的作用，蛋白-CTAB絡(luò)合物溶解度增大。但在pH8.0時(shí)，隨著CTAB濃度增加，蛋白回收率呈現(xiàn)先下降后增加的趨勢(shì)。在CTAB濃度為5mmol/L時(shí)，回收率最高，此結(jié)果和Fuda等[10]關(guān)于選擇性沉降β-乳球蛋白的實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。產(chǎn)生此結(jié)果的原因是占乳清蛋白50%以上的β-乳球蛋白在水溶液中充分解離，表面負(fù)電荷豐富，可以和CTAB的非極性正電荷基團(tuán)發(fā)生靜電作用，當(dāng)CTAB濃度升高到一定值后，蛋白質(zhì)表面電荷被充分中和，非極性區(qū)域的疏水作用開(kāi)始顯現(xiàn)，導(dǎo)致蛋白-CTAB絡(luò)合物的聚集[13]。隨著pH值進(jìn)一步升高，蛋白質(zhì)表面電荷逐漸增加，外周水極化層增厚，疏水作用力減弱，阻礙了蛋白-CTAB之間的結(jié)合[14]。

相同濃度CTAB、不同pH值情況下，各組蛋白回收率沒(méi)有顯著差異。說(shuō)明雖然pH值不同，蛋白表面電荷發(fā)生改變，但由于CTAB分子本身表面電荷量有限，促進(jìn)蛋白大分子之間相互結(jié)合的作用有限。由以上分析得出，除pH8.0外，常溫下不同pH值之間蛋白-CTAB絡(luò)合物的形成和聚集沒(méi)有顯著差異，單純依靠調(diào)節(jié)pH值達(dá)不到良好的蛋白和CTAB結(jié)合的效果。

圖2 不同pH值對(duì)蛋白回收率的影響(20℃)Fig.2 Effect of pH on protein recovery (ambient temperature)

2.2.2 離子強(qiáng)度對(duì)CTAB與乳清蛋白結(jié)合的影響

圖3 不同離子強(qiáng)度對(duì)蛋白回收率的影響Fig.3 Effect of ionic intensity on protein recovery

在相同NaCl濃度下，蛋白質(zhì)回收率隨著CTAB濃度的增加而呈先下降后增大的趨勢(shì)。從圖3可以看出，在不同的離子強(qiáng)度下，CTAB的類(lèi)鹽溶/鹽析作用不同。氯化鈉濃度越高，CTAB促進(jìn)蛋白-CTAB結(jié)合的能力越小，即在高離子強(qiáng)度下，CTAB的類(lèi)鹽溶/鹽析作用受到抑制。當(dāng)NaCl濃度為50mmol/L時(shí)，蛋白沉降與空白組保持一致，而當(dāng)離子強(qiáng)度大于等于100mmol/L時(shí)，蛋白-CTAB結(jié)合明顯受到抑制。這是因?yàn)椋cH+比較，Na+在水環(huán)境中能優(yōu)先和蛋白表面負(fù)電荷區(qū)域結(jié)合，對(duì)蛋白分子起到屏蔽作用，導(dǎo)致CTAB的疏水性正電荷無(wú)法與蛋白負(fù)電荷區(qū)域結(jié)合，蛋白表面電荷被中和，本身結(jié)構(gòu)發(fā)生較小改變，整體疏水性沒(méi)有改變，故不會(huì)產(chǎn)生聚集[14]。一定范圍內(nèi)Na+濃度越高，疏水作用越弱，蛋白分子相對(duì)越穩(wěn)定。

2.2.3 溫度對(duì)CTAB與乳清蛋白結(jié)合的影響

圖4 不同溫度處理對(duì)蛋白回收率的影響Fig.4 Effect of temperature on protein recovery

保持蛋白濃度以及其他條件不變，研究不同溫度及兩種pH值對(duì)乳清液體系中蛋白沉降的影響。結(jié)果如圖4所示。在pH8.0，0～2mmol/L CTAB濃度時(shí)，不同溫度處理的效果不明顯。2～5mmol/L CTAB濃度時(shí)，溫度處理效果逐漸顯現(xiàn)，其中在CTAB濃度為3mmol/L時(shí)，蛋白回收率的最高值與最低值之差最大；但是在5mmol/L時(shí)，不同溫度處理組之間蛋白的沉降又趨于平緩。溫度破壞水環(huán)境中原來(lái)的氫鍵結(jié)構(gòu)以及蛋白原始結(jié)構(gòu)，蛋白內(nèi)部的疏水區(qū)域充分暴露，蛋白粒子之間發(fā)生聚集。在不含CTAB， pH8.0的乳清液中，不同溫度對(duì)蛋白-CTAB絡(luò)合物的形成沒(méi)有顯著差異，而當(dāng)CTAB濃度逐漸增大時(shí)，溫度的作用顯現(xiàn)出來(lái)。說(shuō)明在堿性環(huán)境中，CTAB中和了蛋白表面的負(fù)電荷，各粒子之間的靜電排斥作用消失；當(dāng)CTAB濃度進(jìn)一步增大，更多的CTAB結(jié)合在了蛋白分子表面，蛋白-CTAB復(fù)合體表面因凈正電荷而產(chǎn)生微弱的靜電排斥，CTAB濃度越大，排斥作用越明顯。由以上結(jié)果得出，pH8.0，CTAB濃度為3mmol/L時(shí)，溫度的作用最顯著，此時(shí)CTAB可以和蛋白表面電荷充分結(jié)合而不產(chǎn)生凈電荷。

在pH6.5環(huán)境下，蛋白回收的變化趨勢(shì)不如在pH8.0時(shí)顯著。此條件下，蛋白表面帶有的電荷量不如pH8.0多，導(dǎo)致蛋白-CTAB復(fù)合體的數(shù)量較少，蛋白回收率低于pH8.0時(shí)的回收率。50℃條件下，大部分蛋白沒(méi)有發(fā)生變性，隨著CTAB濃度增大，蛋白沉降效率下降，發(fā)生類(lèi)鹽溶現(xiàn)象。80℃條件下整體的蛋白回收率最高，維持在50%左右，原因是此溫度條件下大部分蛋白發(fā)生變性，結(jié)構(gòu)遭到破壞，疏水基團(tuán)和區(qū)域暴露導(dǎo)致蛋白和蛋白之間，蛋白和CTAB復(fù)合體發(fā)生聚集。與pH8.0條件下比較，CTAB的添加對(duì)蛋白-CTAB絡(luò)合物的形成沒(méi)有顯著影響，雖然大部分乳清蛋白的等電點(diǎn)在此pH值，但由于差值不大，蛋白表面電荷量不足，導(dǎo)致CTAB和蛋白的結(jié)合受限，溶液中過(guò)多的CTAB圍繞在蛋白分子外周，產(chǎn)生的靜電排斥阻礙了蛋白粒子之間的聚集。

由于乳清蛋白具有較高的水溶性，脂肪含量是影響濁度的一個(gè)重要因素。乳清中脂肪一般以脂肪球形式存在，兩個(gè)因素影響脂肪的結(jié)合沉淀。第一，脂肪球外周包裹著一層蛋白——乳脂肪球膜蛋白(MFGMP)，不同的工藝處理會(huì)使脂肪球表面的蛋白組成發(fā)生變化[15]，MFGMP同樣會(huì)與CTAB靜電結(jié)合，同時(shí)與脂肪結(jié)合；第二，乳脂肪包括中性脂肪和磷脂，磷脂分子中含有磷酸基團(tuán)和CTAB的正電荷區(qū)域結(jié)合[16]?？紤]到乳脂肪是阻塞膜孔、降低超濾效率的最大因素[17]，通過(guò)加入適當(dāng)濃度的CTAB分離乳脂肪，可以提高現(xiàn)有膜過(guò)濾的效率。

圖5 不同溫度處理對(duì)乳清上清液濁度的影響(pH8.0)Fig.5 Effect of temperature on turbidity of whey supernatant left after protein coagulation

由圖5可見(jiàn)，在CTAB濃度為3mmol/L，pH8的堿性乳清液中，乳脂肪實(shí)現(xiàn)迅速分離而不受溫度影響。

2.2.4 乳清蛋白質(zhì)量濃度對(duì)CTAB與乳清蛋白結(jié)合的影響

圖6 不同乳清蛋白質(zhì)量濃度對(duì)蛋白回收率的影響Fig.6 Effect of whey protein concentration on protein recovery

利用低溫冷凍和超濾濃縮，得到不同蛋白質(zhì)量濃度的樣液。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖6所示。40℃恒溫水浴加熱20min，在蛋白質(zhì)量濃度為0.6g/100mL的乳清液體系中，隨著CTAB濃度增加，蛋白回收率整體呈現(xiàn)先下降后上升的趨勢(shì)，這和2.1.3節(jié)中50℃處理結(jié)果相符。分析原因，在pH8.0環(huán)境中，蛋白表面帶有充分的負(fù)電荷，體系穩(wěn)定。當(dāng)加入一定量的表面活性劑后，蛋白表面的疏水區(qū)域和活性劑結(jié)合，表面電荷量增加，和周?chē)肿映浞纸Y(jié)合，實(shí)現(xiàn)更穩(wěn)定的混合體系；隨著CTAB濃度逐漸增大，充足的CTAB分子和蛋白質(zhì)結(jié)合，中和表面電荷，疏水作用力增強(qiáng)，導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性沉降。但蛋白質(zhì)量濃度達(dá)到1.2g/100mL 及以上時(shí)，蛋白沉降效率隨著CTAB濃度的增大沒(méi)有明顯變化。造成此現(xiàn)象的可能原因是蛋白質(zhì)量濃度過(guò)高，而加入的CTAB量少，不足以和蛋白質(zhì)分子完全結(jié)合中和表面靜電。相同的CTAB濃度下，蛋白質(zhì)量濃度越高，沉降效率越大。這是由于在乳清液體系中，蛋白質(zhì)量濃度越高，蛋白分子間發(fā)生碰撞結(jié)合的概率越大。乳糖具有穩(wěn)定乳清中蛋白質(zhì)的作用[13,18]，濃縮乳清液的過(guò)程中減少了單位體積內(nèi)的乳糖含量，促進(jìn)了蛋白的聚集。另外CTAB在水溶液中起著“橋連”作用，促進(jìn)蛋白分子間的結(jié)合[19]。

2.3 乳清蛋白和CTAB結(jié)合的粒度分析

乳清液分別在不同溫度條件下處理10min，結(jié)果如圖7所示。在pH8.0條件下，乳清蛋白表面帶有充分的負(fù)電荷，CTAB疏水性正電荷區(qū)域與之結(jié)合。80℃水浴處理，鹽溶作用減弱，疏水性作用增強(qiáng)。蛋白-CTAB絡(luò)合物粒子隨著CTAB濃度增大而增大，更易和水相分離，此結(jié)果與前面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果保持一致。常溫下，蛋白-CTAB絡(luò)合物的粒徑大小有增大趨勢(shì)，CTAB 0～2mmol/L時(shí)粒子粒徑有明顯變化，但隨著CTAB濃度的增大，增加幅度趨于平緩，反映出失去了蛋白本身的疏水作用。單獨(dú)的靜電作用力對(duì)絡(luò)合物粒子的聚集、沉降影響不顯著。

圖7 不同CTAB濃度條件下乳清蛋白-CTAB復(fù)合粒子粒徑分布Fig.7 Granular distribution of CTAB/whey protein complexes formed at different CTAB concentrations

3 結(jié) 論

pH值、離子強(qiáng)度、溫度、蛋白質(zhì)量濃度以及CTAB添加量是影響CTAB與乳清蛋白結(jié)合的幾個(gè)重要因素，不同因素對(duì)蛋白回收率有不同程度的影響。當(dāng)pH8.0、溫度80℃、CTAB 5mmol/L、乳清蛋白質(zhì)量濃度為0.6g/100mL時(shí)，蛋白分離效率可以達(dá)到70%。

除pH8.0外，常溫下不同pH值對(duì)蛋白-CTAB絡(luò)合物的形成和聚集沒(méi)有顯著性影響；pH8.0的乳清液中，不同溫度對(duì)蛋白-CTAB絡(luò)合物形成有顯著性差異；選用NaCl，離子強(qiáng)度達(dá)到200mmol/L時(shí)也沒(méi)有產(chǎn)生鹽析現(xiàn)象；缺少乳清蛋白本身的疏水作用，單獨(dú)的靜電結(jié)合對(duì)絡(luò)合物粒子的聚集沉降影響有限。乳清蛋白質(zhì)量濃度越高，CTAB與乳清蛋白結(jié)合越多。

應(yīng)用CTAB結(jié)合乳清蛋白，可以減少乳清中干物質(zhì)排放，降低乳清的化學(xué)需氧量(COD)值，減少環(huán)境污染。

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Effects of Physico-chemical Factors on Complexation of Cetyltrimethyl Ammol/Lonium Bromide with Whey Protein

LIU Wei，LI Xing-min*，ZHENG Hai-tao，LIU Yi
(Key Laboratory of Functional Dairy, Co-constructed by Ministry of Education and Beijing Government, College of Food Science and Nutritional Engineering, China Agricultural University, Beijing 100083, China)

TS252.9

A

1002-6630(2010)21-0024-05

2010-04-21

“十一五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2006BAD04A06)

劉偉(1984—)，男，碩士研究生，研究方向?yàn)槿槠房茖W(xué)。E-mail：lwsix@126.com

*通信作者：李興民(1964—)，男，副教授，學(xué)士，研究方向?yàn)樾螽a(chǎn)品加工。E-mail：lixingmin@cau.edu.cn