多糖乙?；揎椀淖钚卵芯窟M(jìn)展

房芳，柳春燕，陳靠山，2，王浩

（1.皖南醫(yī)學(xué)院，蕪湖 241000；2.山東大學(xué)）

多糖乙酰化修飾的最新研究進(jìn)展

房芳1，柳春燕1，陳靠山1，2，王浩1

（1.皖南醫(yī)學(xué)院，蕪湖 241000；2.山東大學(xué)）

多糖是存在于動(dòng)植物及微生物體內(nèi)的一類重要的生物活性大分子物質(zhì)，在抗腫瘤、抗氧化、抗病毒、抗凝血及免疫調(diào)節(jié)等多方面發(fā)揮生物活性作用，是醫(yī)藥領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。多糖結(jié)構(gòu)與其活性密切相關(guān)，通過(guò)對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾，可影響多糖的理化性質(zhì)及其生物活性，研究發(fā)現(xiàn)，乙?；揎椇蟮亩嗵撬苄栽黾?，生物活性明顯增強(qiáng)。借此將對(duì)多糖結(jié)構(gòu)的化學(xué)修飾方法進(jìn)行簡(jiǎn)要概述，并對(duì)多糖的乙酰化修飾方法、結(jié)構(gòu)分析方法及乙?；揎棇?duì)多糖的生物活性影響進(jìn)行綜述，為今后多糖的乙?；揎椦芯考捌溟_(kāi)發(fā)應(yīng)用提供思路。

多糖；乙?；唤Y(jié)構(gòu)修飾；生物活性；研究進(jìn)展

多糖是構(gòu)成生命的四大基本物質(zhì)之一，廣泛存在于動(dòng)植物及微生物體內(nèi)或其分泌物中，是由10個(gè)以上的單糖分子以糖苷鍵線性或分支連接而成的含醛基或酮基的天然高分子聚合物[1]，其通式為[C6（H2O）5]n，分子量常高達(dá)數(shù)萬(wàn)至百萬(wàn)。研究發(fā)現(xiàn)，多糖作為生命體的重要組成部分，不僅可為機(jī)體提供能量、結(jié)構(gòu)支持及防御保護(hù)，還具有多種生物活性：如抗腫瘤、抗氧化、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)、降血糖、降血脂等[2-8]。深入研究表明，多糖的多種生物活性均與其結(jié)構(gòu)密切相關(guān)，分子量、聚合度、分支度、單糖組成、糖苷鍵類型、空間構(gòu)象等[9-11]均影響其生理功能，且通過(guò)應(yīng)用物理、化學(xué)及生物方法對(duì)多糖分子結(jié)構(gòu)進(jìn)行適當(dāng)修飾，可優(yōu)化多糖的理化性質(zhì)及其生物活性，關(guān)鍵在于使修飾后多糖的活性中心的立體構(gòu)象處于最佳狀態(tài)[12-13]。乙酰化修飾是一種常用的化學(xué)修飾方法，可增大多糖的水溶性、提高多糖的生物活性并降低其毒副作用，是目前研究的熱點(diǎn)之一。

將簡(jiǎn)要概述現(xiàn)今常用的多糖結(jié)構(gòu)化學(xué)修飾方法，并通過(guò)對(duì)多糖的乙?；揎椃椒ā⒔Y(jié)構(gòu)分析方法及乙?；揎棇?duì)多糖的生物活性影響進(jìn)行綜述，為今后多糖的乙?；揎椉捌錁?gòu)效關(guān)系的深入研究提供思路。

1 多糖結(jié)構(gòu)的化學(xué)修飾方法

天然多糖以其來(lái)源廣、活性強(qiáng)、毒性低等[14]特點(diǎn)而備受關(guān)注，然而，許多天然多糖初始生物活性弱，甚至無(wú)生物活性，或因其理化性質(zhì)、空間結(jié)構(gòu)等因素限制其藥理活性，需進(jìn)一步修飾才能發(fā)揮作用。通過(guò)修飾可改變多糖的分子量、取代基種類、數(shù)目、位置及空間結(jié)構(gòu)，從而影響其理化性質(zhì)及生物活性[15]。多糖結(jié)構(gòu)的修飾方法主要有化學(xué)修飾法、物理修飾法及生物修飾法，其中又以化學(xué)修飾法最為常用[16]?；瘜W(xué)修飾法可向多糖分子中引入其它元素或基團(tuán)，并將這些元素基團(tuán)連接到糖殘基上的羥基、羧基、氨基等位置，從而改變多糖結(jié)構(gòu)及性質(zhì)，影響其活性。

常用的多糖化學(xué)修飾法有硫酸化修飾、磷酸化修飾、乙酰化修飾、羧甲基化修飾等[16-17]（見(jiàn)表1）。

表1 常用多糖化學(xué)修飾法比較Table1 Comparison of common chemical modification methods of polysaccharide

2 多糖的乙?；揎椃椒?/h2>

乙?；揎検亲畛Ｓ玫幕瘜W(xué)修飾法之一，主要對(duì)多糖支鏈結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾。天然多糖為多羥基化合物，在適當(dāng)條件下，活性羥基基團(tuán)上可發(fā)生親核取代反應(yīng)，并生成相應(yīng)的多糖酯，其反應(yīng)機(jī)理如圖1所示。

圖1 多糖乙酰化反應(yīng)機(jī)理Fig.1 The acetylation reaction mechanism of polysaccharide

經(jīng)典多糖乙?；揎椃橐宜狒?吡啶法。乙?；^(guò)程中，需將多糖溶解于一定的有機(jī)溶劑中（甲酰胺、甲醇、DMAc/LiCl、DMSO等），并通過(guò)加入乙?；噭ㄒ宜岷鸵宜狒﹣?lái)完成酰化反應(yīng)，催化劑（如N－溴代琥珀酰亞胺NBS、DMAP、吡啶等）的加入可使反應(yīng)加速，并提高乙酰化反應(yīng)取代度，通常乙酰取代多發(fā)生在羥基氧及氨基氮上[18]。時(shí)春娟等[19]首次以水為溶劑、乙酸乙烯酯為?；噭?，加以磷酸鈉催化，對(duì)單糖進(jìn)行全乙酰化反應(yīng)。此反應(yīng)在溫和條件下進(jìn)行，無(wú)需隔絕水氧，故而操作簡(jiǎn)便，且其反應(yīng)迅速、經(jīng)濟(jì)環(huán)保，不失為一種高效便捷的乙?；椒ā５擉w系目前暫適用于單糖的全乙?；?，對(duì)多糖的全乙酰化產(chǎn)物獲得還需根據(jù)多糖的不同性質(zhì)及實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，?jǐn)慎選取合適的乙酰化反應(yīng)體系。

唐鳳翔等[20]在研究中還發(fā)現(xiàn)，使用相轉(zhuǎn)移催化?；半x子交換酰化法均可使κ-卡拉膠的乙?；雀哂谝话沲；āＴ谙噢D(zhuǎn)移催化?；ㄖ型ㄟ^(guò)使用18-冠醚-6作為催化劑，可用于制備低分子量及低乙?；鹊摩?卡拉膠；而離子交換-?；▌t更適合較大分子量κ-卡拉膠的乙酰化。通過(guò)對(duì)常規(guī)乙?；椒ㄟM(jìn)行改進(jìn)，選擇合適的溶劑及催化劑等可提高不同性質(zhì)多糖的乙?；〈?，為其進(jìn)一步活性研究奠定基礎(chǔ)。

3 乙?；嗵堑睦砘再|(zhì)及結(jié)構(gòu)解析

3.1 乙酰取代度

乙?；揎椷^(guò)程中，糖分子上的活性基團(tuán)被乙?；娲?，修飾程度的不同將直接影響多糖的理化性質(zhì)及生物活性，故而選取乙酰取代度作為反應(yīng)乙?；嗵墙Y(jié)構(gòu)和功能表征的重要參數(shù)。常用的多糖乙酰取代度測(cè)定方法有皂化法和羥胺比色法[21]，此外還有高氯酸比色法[22]等等。經(jīng)典皂化法利用酯水解原理，將樣品中的乙酸酯完全水解，并以標(biāo)準(zhǔn)酸滴定，從而計(jì)算出乙?；〈?。該法通俗易懂、操作簡(jiǎn)便，但耗樣大且時(shí)程長(zhǎng)，對(duì)低取代多糖測(cè)定誤差較大，故實(shí)際操作中多選用羥胺比色法。羥胺比色法在強(qiáng)堿條件下進(jìn)行，游離的乙?；c羥胺反應(yīng)生成乙酰羥肟酸，遇Fe3+生成可溶性紅色絡(luò)合物-羥肟酸鐵，利用紫外分光光度計(jì)可直接測(cè)定并計(jì)算得到乙酰取代度?，F(xiàn)今改良的羥胺比色法多選用安全易得的三氯化鐵為顯色劑，不僅操作簡(jiǎn)便、反應(yīng)迅速，且靈敏度較高、適用范圍廣，是最常用的乙酰取代度測(cè)定法。乙酰取代度（DS）的計(jì)算公式如下：

DS=（1.62C）/（43-0.42C）

式中：C為乙?；?%。

研究發(fā)現(xiàn)，溶劑體系、反應(yīng)時(shí)間、溫度、體系pH值、?；噭┯昧亢痛呋瘎ㄈ鏝BS）添加量[20，23]等均可影響乙?；磻?yīng)取代度，其中?；噭┯昧亢痛呋瘎┨砑恿繉?duì)多糖乙?；磻?yīng)有顯著影響[23]，研究表明，一定范圍內(nèi)隨乙酸酐用量增加，乙?；〈仍黾樱S著用量進(jìn)一步增大，取代度會(huì)出現(xiàn)明顯下降，或由于乙酸酐水解副反應(yīng)加大，使反應(yīng)體系pH值迅速降低所致。體系pH值對(duì)乙?；磻?yīng)影響較大：pH過(guò)低，反應(yīng)動(dòng)力不足，底物反應(yīng)不完全；而pH過(guò)高，則酰化產(chǎn)物易分解，故反應(yīng)過(guò)程需調(diào)控反應(yīng)體系pH值，從而保證反應(yīng)更快更好進(jìn)行。

3.2 單糖組成和分子量

乙酰化多糖的分子量可采用高效液相色譜法（HPLC）或高效凝膠滲透色譜法（HPGPC）進(jìn)行測(cè)定。周林[24]等人就利用凝膠滲透色譜（GPC）對(duì)改性前后裂褶多糖的重均相對(duì)分子質(zhì)量（Mw）和數(shù)均相對(duì)分子質(zhì)量（Mn）進(jìn)行了測(cè)定。乙酰化多糖的單糖組成測(cè)定方法同天然多糖一樣，可采用氣相色譜（GC）或氣相色譜-質(zhì)譜[25]進(jìn)行測(cè)定。而核磁共振光譜（NMR）法，不僅能確定糖結(jié)構(gòu)中糖苷鍵構(gòu)型，還可測(cè)定多糖重復(fù)結(jié)構(gòu)中單糖的數(shù)目，且為了能進(jìn)一步確定乙?；胛恢?，可使用13C-NMR進(jìn)行進(jìn)一步分析測(cè)定[17]。

3.3 結(jié)構(gòu)解析

乙?；嗵强刹捎米贤夤庾V、紅外光譜（IR）、核磁共振（1HNMR、13CNMR、2D NMR）對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析。紫外-可見(jiàn)光譜法常用于多糖結(jié)構(gòu)分析，通過(guò)對(duì)190～400 nm范圍進(jìn)行掃描，判斷在260～280 nm范圍內(nèi)有無(wú)蛋白質(zhì)、核酸的特征吸收峰[26]。

對(duì)乙?；嗵沁M(jìn)行紅外光譜分析，常用KBr壓片法，利用傅立葉變換紅外光譜儀對(duì)4 000～400 cm-1范圍進(jìn)行掃描，觀察其吸收峰[20]。3 400 cm-1波段附近的寬吸收峰是O—H的伸縮振動(dòng)；3 000～2 800 cm-1波段處的吸收峰是糖類C—H的伸縮振動(dòng)，此為糖類的特征吸收峰；在1 650 cm-1有吸收，為C=O非對(duì)稱伸縮振動(dòng)峰；1 735～1 729 cm-1波段處出現(xiàn)酯基的C= O伸縮振動(dòng)吸收峰且1 251 cm-1處有較弱的酯基的C—O伸縮振動(dòng)；在1 000～700 cm-1的吸收峰是α-和β-吡喃單糖形成的特征峰（890 cm-1波段附近的吸收峰是吡喃糖β型C—H彎曲振動(dòng)的特征吸收峰）。1 735～1 729 cm-1波段處的吸收峰隨著乙?；〈鹊脑黾佣鰪?qiáng)，這說(shuō)明乙酰化修飾的成功。此外，若O—H伸縮振動(dòng)強(qiáng)度遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于C=O伸縮振動(dòng)，則說(shuō)明乙?；娜〈缺容^低。通過(guò)使用13C-NMR可進(jìn)一步確定乙酰基引入位置[20]，如κ-卡拉膠的乙酰化：當(dāng)取代度較低時(shí)，乙?；鶊F(tuán)首先進(jìn)入C6位，隨乙?；潭仍龈?，乙?；鶊F(tuán)將繼續(xù)向C2進(jìn)攻。

乙?；嗵堑?H核磁共振（1HNMR）譜顯示，大多數(shù)糖質(zhì)子的響應(yīng)信號(hào)峰集中在δ4.0～5.5 ppm范圍內(nèi)。在100 MHz核磁共振儀上C2→C6上質(zhì)子信號(hào)多堆集于δ4.0～4.8 ppm范圍內(nèi)，且溶劑峰干擾強(qiáng)，難以解析。δ4.8～5.5 ppm的C1質(zhì)子信號(hào)顯示，α型吡喃糖的C1質(zhì)子信號(hào)多超過(guò)5.0 ppm，β型則小于5.0 ppm，借此可將兩類加以區(qū)分[27]。此外，2.0 ppm高場(chǎng)處出現(xiàn)的乙?；谆|(zhì)子峰也可用于判定乙酰化改性的成功[28]。13CNMR的化學(xué)位移范圍較寬，異頭碳的共振信號(hào)多出現(xiàn)在δ90～110，而δ170～176范圍內(nèi)的低場(chǎng)信號(hào)則可表明己糖醛酸的羧基或乙酰氨基的存在[29]。近年來(lái)，隨著NMR技術(shù)的發(fā)展，尤其是二維核磁共振（2D NMR）的出現(xiàn)和發(fā)展，使多糖結(jié)構(gòu)研究得到進(jìn)一步發(fā)展[29]，常用的2D NMR譜有同核位移相關(guān)譜、碳?xì)湎嚓P(guān)譜等。2D NMR的發(fā)展很好的解決了糖殘基連接序列的問(wèn)題，這是糖結(jié)構(gòu)核磁共振分析上的一個(gè)突破。

此外，通過(guò)對(duì)多糖樣品進(jìn)行全甲基化保護(hù)后水解再還原、再乙酰化，可得到部分甲基化的鏈狀多羥基醇的乙酰衍生物，應(yīng)用GC-MS測(cè)定，能夠?qū)翁堑慕M成及大致分枝情況進(jìn)行了解[30]。原子力顯微鏡的應(yīng)用發(fā)展，也使得人們可以進(jìn)一步研究多糖的高級(jí)構(gòu)象：南征[31]等人在研究中發(fā)現(xiàn)乙?；揎椇笮吁U菇多糖的一級(jí)結(jié)構(gòu)及高級(jí)構(gòu)象均有改變。

3.4 乙酰取代度對(duì)多糖理化性質(zhì)影響

乙酰取代度的大小將影響多糖的理化性質(zhì)，乙?；蟮亩嗵撬苄悦黠@增加，且隨取代度增加越易溶解。有研究表明，低取代的乙酰化綠豆淀粉水溶液的透明度增加，溶解度及膨潤(rùn)力均增大，且隨著乙?；吭黾樱阴；矸鄣目鼓列栽鰪?qiáng)，同時(shí)具有較好的凝膠特性[32]。易斌[33]、張磊[34]等人也發(fā)現(xiàn)乙?；t薯淀粉的乙酰化度越高，其凝膠特性越好。

4 乙?；揎棇?duì)多糖活性的影響

乙?；揎椏上蚨嗵欠肿又胁迦胍阴；鶊F(tuán)，改變其定向性和橫向次序，使多糖鏈的空間構(gòu)象發(fā)生改變，更多的極性基團(tuán)暴露，從而使多糖水溶性增大[35]、生物活性及生物利用度隨之發(fā)生變化。研究發(fā)現(xiàn)，乙?；嗵侵幸阴；〈燃叭〈恢脤?duì)多糖活性影響顯著。就數(shù)量而言，美國(guó)學(xué)者M(jìn)cA-nalley曾在研究中指出多糖的活性隨乙?；吭龃蠖鰪?qiáng)。但隨著研究深入，學(xué)者們發(fā)現(xiàn)低取代的乙?；嗵且簿哂休^好的抗腫瘤活性，且其取代位置密切相關(guān)：O-3位取代，多糖抗腫瘤活性明顯增強(qiáng)；O-5位取代，活性減弱；O位全部取代時(shí)，則活性消失[11]。乙酰基取代度及取代位置對(duì)多糖生物活性的影響彼此相互作用，其作用規(guī)律仍需進(jìn)一步研究。因此，采取適當(dāng)方法在特定位置引入乙?；?，從而發(fā)揮所需功效是以后需要深入研究的方向之一。

4.1 抗氧化

活性氧（如OH-羥自由基和O2－超氧陰離子等）在生物體的代謝過(guò)程中不斷產(chǎn)生，并參與多種生化過(guò)程，如：信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、基因的表達(dá)與調(diào)控、受體的激活等，并在吞噬方面發(fā)揮至關(guān)重要的作用。然而活性氧的大量積累也導(dǎo)致氧化應(yīng)激反應(yīng)，促使核酸鏈斷裂、不飽和脂肪酸過(guò)氧化，造成膜損傷、線粒體氧化磷酸化作用的改變等，嚴(yán)重?cái)_亂機(jī)體平衡，與炎癥、衰老、腫瘤等多種疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，因此，生物體內(nèi)自由基的生成與清除平衡具有重要意義。目前，多糖體外抗氧化活性的研究?jī)?nèi)容主要包括三個(gè)方面：自由基的清除、抗脂質(zhì)過(guò)氧化及還原能力[36]。大量研究表明，許多多糖本身具有一定的體外抗氧化活性，經(jīng)乙?；揎椄男院笃淝宄齇H-羥自由基、O2－超氧陰離子自由基及DPPH·有機(jī)自由基的能力均有所增加，且還原能力也要比原多糖有所提高[37-38]。然而，研究也發(fā)現(xiàn)某些乙?；嗵潜忍烊欢嗵堑目寡趸芰τ胁煌潭鹊南陆礫22，39]，這可能與反應(yīng)后多糖分子量大小、取代基的位置及取代度的多少有關(guān)。一些研究表明低取代乙?；嗵荄PPH·自由基清除能力比天然多糖略有降低，但隨著取代度增大其還原能力大大提高[40]，對(duì)于高取代度乙?；嗵?，乙?；囊胛恢脤?duì)其氧化活性影響較大。在動(dòng)物體內(nèi)的抗氧化實(shí)驗(yàn)研究中還發(fā)現(xiàn)，乙?；坭蕉嗵腔钚詢?yōu)于天然多糖，且呈劑量依賴性，并通過(guò)調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)發(fā)揮抗腫瘤作用[41]。

4.2 抗病毒

乙?；揎椬鳛橐环N常用的多糖化學(xué)修飾方法，已成功運(yùn)用于纖維素的修飾。纖維素的水溶性較差，難以對(duì)其分子進(jìn)行直接修飾，然而在均相體系中通過(guò)對(duì)纖維素進(jìn)行乙酰化修飾，可顯著增大其溶解性，增加其活性。在研究過(guò)程中，Samaranayake等[42]報(bào)道了一種新的纖維素乙酰化方法，該法可用于制備低取代乙酰纖維素，后續(xù)學(xué)者并以這種低取代衍生物為原料進(jìn)行硫酸化修飾，可以通過(guò)再脫乙?；?，得到高取代且分布均勻的硫酸化纖維素，也可直接制備得到乙酰硫酸酯化纖維素[43]，修飾后的纖維素水溶性明顯增大，抗HIV活性顯著增強(qiáng)。

4.3 抗腫瘤

多糖抗腫瘤是目前研究的熱點(diǎn)，大量研究發(fā)現(xiàn)許多天然多糖具有抗腫瘤活性并可通過(guò)多種途徑發(fā)揮抗腫瘤作用，主要包括對(duì)腫瘤細(xì)胞的直接抑制作用以及通過(guò)增強(qiáng)機(jī)體免疫功能發(fā)揮間接抗腫瘤作用。對(duì)枸杞多糖的研究發(fā)現(xiàn)，天然的枸杞多糖可提高機(jī)體抗氧化能力并通過(guò)提升免疫器官作用而發(fā)揮間接抗腫瘤作用，通過(guò)對(duì)其進(jìn)行乙?；揎?，能夠進(jìn)一步加強(qiáng)其作用[41]。乙?；蟮亩嗵蔷哂锌鼓[瘤活性或活性增加主要與乙?；囊敫淖兞硕嗵堑乃苄圆⑹蛊浠钚圆课槐┞队嘘P(guān)，如地衣類多糖石臍素是β-（1-6）-葡聚糖，部分乙?；笏苄栽黾樱憩F(xiàn)出抗腫瘤活性，脫乙?；蛉阴；髣t失去抗腫瘤活性[44]。MTT比色法研究結(jié)果也表明，乙酰化杏鮑菇多糖對(duì)K562細(xì)胞的體外增殖抑制作用高于天然多糖[31]，說(shuō)明乙酰化修飾能使杏鮑菇多糖的抗腫瘤活性增加。

4.4 免疫調(diào)節(jié)

機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)功能，對(duì)維持自身生理動(dòng)態(tài)平衡與相對(duì)穩(wěn)定起著關(guān)鍵作用。其中由T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫發(fā)揮重要作用，配合著巨噬細(xì)胞強(qiáng)大的吞噬能力，對(duì)維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定至關(guān)重要，因此研究中也常以淋巴細(xì)胞的增殖作用及巨噬細(xì)胞的吞噬功能來(lái)評(píng)價(jià)藥物對(duì)細(xì)胞免疫功能的影響。體外細(xì)胞免疫活性研究表明乙?；揎椇蟮摩?卡拉膠對(duì)淋巴細(xì)胞及巨噬細(xì)胞的免疫活性增強(qiáng)作用較天然多糖有顯著的提高[45]，不僅促進(jìn)脾淋巴細(xì)胞增殖，對(duì)巨噬細(xì)胞的吞噬功能也有促進(jìn)作用。乙?；揎椇蟮摩?卡拉膠，其空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，活性基團(tuán)的暴露及水溶性的增加，使其生物活性增強(qiáng)。樹(shù)突狀細(xì)胞（dendritic cells，DCs）是體內(nèi)功能最強(qiáng)的抗原提呈細(xì)胞，成熟的DCs細(xì)胞可分泌大量的IL-1β、IL-6、TNF-α等促炎癥細(xì)胞因子及MIP-1α、MIP-1β、RANTES等趨化因子，在免疫調(diào)節(jié)過(guò)程中發(fā)揮重要作用。研究發(fā)現(xiàn)，大粒車前子多糖經(jīng)乙?；揎椇蟠龠M(jìn)樹(shù)突狀細(xì)胞分泌細(xì)胞因子IL-12p70的能力增強(qiáng)，在DS為0.06～0.1范圍內(nèi)，其促進(jìn)DCs分泌IL-12p70能力均增強(qiáng)，且在DS為0.08左右時(shí)達(dá)到最大[46]。

4.5 抗凝血

人體內(nèi)的凝血及抗凝血系統(tǒng)在正常生理?xiàng)l件下處于一種動(dòng)態(tài)平衡的狀態(tài)，正常的凝血系統(tǒng)能夠維持血流的穩(wěn)定，防止血液流失，而抗凝系統(tǒng)能夠保持血流的通暢，若抗凝系統(tǒng)出現(xiàn)問(wèn)題，則易導(dǎo)致血栓性疾病，嚴(yán)重危害心腦血管健康。活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）、凝血酶原時(shí)間（PT）、凝血酶時(shí)間（TT）是醫(yī)學(xué)上常用來(lái)確定凝血途徑的三項(xiàng)指標(biāo)。APTT反映內(nèi)源性凝血系統(tǒng)各凝血成分總的凝血狀況，PT反映外源性凝血系統(tǒng)的凝血狀況，TT反映血漿纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白的凝血狀況。研究發(fā)現(xiàn)，許多天然多糖具有良好的抗凝血作用，如茶多糖、桑葉多糖、海藻多糖等。研究還發(fā)現(xiàn)，經(jīng)乙?；揎椇蟮亩嗵瞧淇鼓饔蔑@著增強(qiáng)，且與其取代度密切相關(guān)，如通過(guò)向茶多糖中引入乙?；?，可使多糖支鏈羥基暴露，多糖的水溶性增加，從而使茶多糖的抗凝血活性增強(qiáng)[47]，且隨著取代度增大，活性進(jìn)一步增強(qiáng)。

4.6 降血糖

糖尿病（Diabetes Mellitus，DM）是一組由遺傳和環(huán)境等多種病因引起以慢性高血糖為特征的代謝性疾病群，是由胰島素分泌相對(duì)或絕對(duì)不足，或胰島素作用缺陷所引起的糖、脂、蛋白質(zhì)、水和電解質(zhì)等一系列代謝紊亂。研究發(fā)現(xiàn)，紅棗多糖經(jīng)乙?；揎椇螅苄栽黾?，且乙?；仍礁咴揭兹芙?，其α-葡萄糖苷酶抑制活性顯著增加，但各乙酰化紅棗多糖的取代度與其對(duì)BSA-Glu體系中非酶糖化反應(yīng)的抑制效果沒(méi)有相關(guān)性[48]。

5 展望

乙?；揎椬鳛槌Ｓ没瘜W(xué)修飾法的一種，可通過(guò)改變多糖結(jié)構(gòu)從而改變其理化性質(zhì)影響其生物活性，水溶性的增加使許多乙?；嗵蔷哂锌寡趸?、抗病毒、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等多種生物活性且優(yōu)于天然多糖?，F(xiàn)有研究發(fā)現(xiàn)乙酰化反應(yīng)體系的改變可影響乙?；嗵堑娜〈燃耙阴；〈恢玫?，如何選擇合適的體系以適應(yīng)不同性質(zhì)多糖的乙?；€需進(jìn)一步探究。雖然目前對(duì)于多糖的結(jié)構(gòu)研究還駐足于一、二級(jí)結(jié)構(gòu)，但隨著核磁共振、原子力顯微鏡等技術(shù)的不斷發(fā)展，多糖結(jié)構(gòu)的研究將會(huì)繼續(xù)深入，通過(guò)進(jìn)一步探討乙?；嗵堑臉?gòu)效關(guān)系，將為未來(lái)特定的引入乙?；鶊F(tuán)、優(yōu)化多糖生物活性奠定基礎(chǔ)。

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Latest Research Progress on Acetylation Modification of Polysaccharide

Fang Fang1，Liu Chunyan1，Chen Kaoshan1，2，Wang Hao1
（1.Wannan Medical College，Wuhu 241000；2.Shandong University）

Polysaccharides was a kind of important bioactive macromolecules which was isolated from plants，animals or microorganism.It drew amounts of attention due to the effects of anti-tumor，anti-oxidation，anti-viral，anti-clotting and immunomodulatory in the biochemical and medical areas.The diverse bioactivities of polysaccharide were closely related to the structure，so the physic-chemical characters or bioactivities of polysaccharides could be changed by modifying its structure.Recent research indicated that compared with the original polysaccharides，the hydro solubility and bioactivities of acetylated polysaccharides had been obviously improved.In this paper，the chemical methods for structural modification of polysaccharides were reviewed，which focused on the studies of acetylation modification and structure-activity relationship of acetylated polysaccharide.

polysaccharide；acetylation；structural modifications；biological activity；research progress

Q539

A

1002-2090（2017）02-0042-06

10.3969/j.issn.1002-2090.2017.02.009

2016-08-05

安徽省自然科學(xué)基金（1408085MH197）；安徽省教育廳重點(diǎn)項(xiàng)目（KJ2015A199）；大學(xué)生科研資助金（WK2015S23）。

房芳（1996-），女，皖南醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)專業(yè)2014級(jí)碩士研究生。

陳靠山，男，教授，博士研究生導(dǎo)師，E-mail：ksc313@126.com。