血培養(yǎng)病原菌分布及耐藥性分析

張靜會(huì)

(天津市寶坻區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，天津?qū)氎?01800)

血培養(yǎng)病原菌分布及耐藥性分析

張靜會(huì)

(天津市寶坻區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，天津?qū)氎?01800)

目的分析我院2014年1月-2015年12月血培養(yǎng)病原菌分布及耐藥情況，為臨床合理用藥提供依據(jù)。方法4064份住院患者血培養(yǎng)標(biāo)本經(jīng)BacT/ALERT 3D自動(dòng)化血培養(yǎng)儀及配套血培養(yǎng)瓶培養(yǎng)，VITEK-2 Compact全自動(dòng)微生物鑒定藥敏系統(tǒng)及真菌ATB FUNGUS 3進(jìn)行菌株鑒定和耐藥性檢測(cè)。結(jié)果血培養(yǎng)標(biāo)本分離出病原菌共517株，檢出率為12. 72%，其中革蘭陰性桿菌286株(55.32%)，革蘭陽(yáng)性球菌214株(41.39%)，真菌11株(2.13%)，革蘭陽(yáng)性桿菌6株（1.16%）。檢出率位于前9位的分離菌依次為大腸埃希菌、凝固酶陰性葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、金黃色葡萄球菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、肺炎鏈球菌、糞腸球菌、屎腸球菌、銅綠假單胞菌。藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示：金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌對(duì)萬(wàn)古霉素、利奈唑胺耐藥率均為0%；大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)頭孢哌酮/舒巴坦、亞胺培南的耐藥率均為0%；銅綠假單胞菌和鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥率較高。結(jié)論血培養(yǎng)病原菌種類(lèi)較多，以革蘭陰性桿菌為主，耐藥性差異較大，應(yīng)及時(shí)監(jiān)測(cè)血培養(yǎng)病原菌菌種及耐藥性的變化，防止抗菌藥物濫用，減少不合理的經(jīng)驗(yàn)性治療。

血培養(yǎng)；病原菌；耐藥性

血流感染(BSI)是一種嚴(yán)重的全身感染性疾病，病情復(fù)雜、進(jìn)展迅速。血培養(yǎng)是診斷血流感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”[1]。近年來(lái)，隨著器官移植、腫瘤化療患者的增加，各種介入性檢查治療和導(dǎo)管置留的普遍應(yīng)用，人口老齡化、免疫缺陷人群的出現(xiàn)以及廣譜抗菌藥物、免疫抑制劑的廣泛應(yīng)用，臨床發(fā)生血流感染的患者逐年增加，因此掌握血培養(yǎng)病原菌的分布和病原菌的耐藥性對(duì)血流感染的診斷和治療具有重要的意義，早期恰當(dāng)?shù)某跏伎咕委煂?duì)降低發(fā)病率和病死率至關(guān)重要。本文選擇天津市寶坻區(qū)人民醫(yī)院2014年1月-2015年12月年共4064份住院患者血培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行分析總結(jié)，為臨床提供用藥依據(jù)并進(jìn)行耐藥現(xiàn)狀分析。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源2014年1月-2015年12月我院各科4064例住院患者送檢血培養(yǎng)標(biāo)本，分離病原菌517株（剔除同一患者2次分離出同一菌株者不重復(fù)記入，只統(tǒng)計(jì)初次分離菌株）。

1.2 儀器與試劑BacT/ALERT 3D自動(dòng)化血培養(yǎng)儀及配套血培養(yǎng)瓶、VITEK-2 Compact全自動(dòng)微生物鑒定藥敏系統(tǒng)及ATB FUNGUS 3真菌藥敏板條等為生物梅里埃公司產(chǎn)品。藥敏試驗(yàn)紙片為北京天壇藥物生物技術(shù)開(kāi)發(fā)公司生產(chǎn)，培養(yǎng)基為天津金章科技發(fā)展有限公司生產(chǎn)。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)本的采集及培養(yǎng)參照《血培養(yǎng)檢測(cè)規(guī)范化操作》[2]進(jìn)行標(biāo)本的正確采集，采集量一般為成人8～10ml注入需氧和厭氧瓶各1份，兒童1～3ml注入兒童需氧瓶，在患者發(fā)熱初期或有感染癥狀時(shí)抽取立刻送微生物室。置BacT/ALERT 3D自動(dòng)化血培養(yǎng)儀中培養(yǎng)，儀器報(bào)警提示陽(yáng)性時(shí)立即轉(zhuǎn)種相應(yīng)培養(yǎng)基，同時(shí)進(jìn)行革蘭染色并電話報(bào)告臨床[3]，分離培養(yǎng)18～24h后進(jìn)行細(xì)菌鑒定和藥敏[4]。補(bǔ)充藥敏采用CLSI推薦的紙片擴(kuò)散法（K-B法）進(jìn)行，判定標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)CLSI2014年標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判讀。

1.3.2 鑒定和藥敏試驗(yàn)使用VITEK-2 Compact全自動(dòng)微生物鑒定藥敏系統(tǒng)及真菌ATB FUNGUS 3藥敏板條對(duì)分離出的細(xì)菌和真菌進(jìn)行鑒定和藥敏試驗(yàn)。

1.3.3 質(zhì)控菌株金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、肺炎克雷伯菌ATCC700603、克柔念珠菌ATCC6258，由天津市臨床檢驗(yàn)中心提供。

2 結(jié)果

2.1 血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本菌株的分布及構(gòu)成血培養(yǎng)分離病原菌分布情況：4064例患者的血培養(yǎng)中分離出病原菌517株，陽(yáng)性檢出率為12.72%（剔除同一患者2次分離出同一菌株者不重復(fù)記入，只統(tǒng)計(jì)初次分離菌株）。其中革蘭陰性桿菌286株(55.32%)，革蘭陽(yáng)性球菌214株(41.39%)，真菌11株(2.13%)，革蘭陽(yáng)性桿菌6株（1.16%）。見(jiàn)表1。

表1 2014年1月-2015年12月血培養(yǎng)病原菌分布

2.2 革蘭陰性桿菌耐藥率大腸埃希菌共檢出166株，其中ESBLs大腸埃希菌為60株（36.14%）。肺炎克雷伯菌共檢出57株，其中產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌9株（15.79%）。具體耐藥率詳見(jiàn)表2。

表2 革蘭陰性桿菌耐藥率（%）

2.3 革蘭陽(yáng)性球菌耐藥率見(jiàn)表3。

3 討論

近年來(lái)，由于各種抗生素、免疫抑制劑、外科手術(shù)等侵襲性操作和介入治療手段的應(yīng)用，致使血流感染的發(fā)生率呈明顯上升趨勢(shì)[5]。血培養(yǎng)是血流感染診斷、治療和病情監(jiān)測(cè)的關(guān)鍵，對(duì)臨床醫(yī)生合理使用抗菌藥物，控制血流感染具有十分重要的臨床意義[6]。我院2014年1月-2015年12月，共分離出517株病原菌，血培養(yǎng)的陽(yáng)性率為12.72%。本文血培養(yǎng)檢測(cè)結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道的血培養(yǎng)凝固酶陰性葡萄球菌檢出率高于大腸埃希菌的結(jié)果不盡相同[7-9]。

分離的革蘭陽(yáng)性菌主要為葡萄球菌屬，其中凝固酶陰性葡萄球菌(CNS)占大多數(shù)。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)血培養(yǎng)中CNS有27%引起B(yǎng)SI，37%可能引起感染，36%為污染菌。應(yīng)綜合報(bào)警時(shí)間、多套血培養(yǎng)結(jié)果和患者對(duì)治療的反應(yīng)來(lái)對(duì)致病CNS和污染CNS作進(jìn)一步的判斷，同時(shí)也要規(guī)范血培養(yǎng)標(biāo)本的采集，嚴(yán)格無(wú)菌操作降低污染率，減少污染對(duì)CNS抗菌藥物的使用。

根據(jù)藥敏結(jié)果顯示，葡萄球菌屬對(duì)青霉素的耐藥率普遍在80%以上，呈高耐藥性，金黃色葡萄球菌中MRSA的檢出率也比較高，主要原因在于青霉素類(lèi)藥物的廣泛應(yīng)用，使葡萄球菌產(chǎn)生β－內(nèi)酰胺酶和PBPs性質(zhì)的改變，從而大大降低了其與青霉素的親和力，表現(xiàn)出耐藥性，這種耐藥機(jī)制一但產(chǎn)生，葡萄球菌對(duì)幾乎所有的β－內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素(如青霉素類(lèi)、頭孢菌素類(lèi)、氨曲南、碳青霉烯類(lèi)等)耐藥。未發(fā)現(xiàn)耐萬(wàn)古霉素的葡萄球菌，因此對(duì)葡萄球菌引起的感染可選用糖肽類(lèi)抗生素。但國(guó)外已有對(duì)萬(wàn)古霉素耐藥的報(bào)道[10]。肺炎鏈球菌對(duì)左氧氟沙星及頭孢噻肟耐藥率較低，對(duì)青霉素及萬(wàn)古霉素耐藥率為0%。糞腸球菌對(duì)利奈唑胺和萬(wàn)古霉素耐藥率為0%，對(duì)呋喃妥因、氨芐西林、青霉素、左氧氟沙星和莫西沙星耐藥率較低。

本文腸桿菌科細(xì)菌中以大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌屬細(xì)菌最為常見(jiàn)，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌屬細(xì)菌常由于產(chǎn)ESBLs而對(duì)第一、二、三代頭孢菌素、氨曲南及β－內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素耐藥。血培養(yǎng)中銅綠假單胞菌在ICU患者中更為常見(jiàn)，常發(fā)生在有嚴(yán)重原發(fā)病或免疫缺陷患者中，繼發(fā)于醫(yī)院獲得性肺炎，尤其是呼吸機(jī)相關(guān)肺炎者多見(jiàn)，其病勢(shì)兇險(xiǎn)，病死率高。鮑曼不動(dòng)桿菌近些年耐藥率呈現(xiàn)明顯上升趨勢(shì)，對(duì)大部分抗生素的耐藥率均在50%以上，主要分離于ICU患者，大部分為醫(yī)院獲得性感染，醫(yī)護(hù)人員加強(qiáng)院感意識(shí)，認(rèn)真執(zhí)行手衛(wèi)生，可有效控制院感的發(fā)生。

總之，臨床大量使用各類(lèi)抗菌藥物，導(dǎo)致細(xì)菌的耐藥率不斷上升，應(yīng)引起高度的重視。因此，了解血流感染病原菌的耐藥性對(duì)指導(dǎo)臨床用藥有重要的意義[11]。

表3 革蘭陽(yáng)性球菌耐藥率（%）

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R446.5，Q939.92

A

1674-1129(2017)02-0257-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2017.02.040

2016-10-12；

2016-11-14)