有機(jī)磷農(nóng)藥殘留在果蔬中的快速檢測(cè)技術(shù)研究

趙媛

農(nóng)藥在果蔬種植發(fā)揮著重要的作用，促進(jìn)農(nóng)業(yè)種植行業(yè)發(fā)展，使果蔬免受病蟲危害。有機(jī)磷農(nóng)藥是近年來(lái)運(yùn)用最為廣泛的農(nóng)藥，果農(nóng)們通過(guò)噴灑農(nóng)藥，果蔬種植受到全方位的農(nóng)藥保護(hù)，雖然杜絕了蟲害，但廣覆蓋式地農(nóng)藥噴灑在一定程度帶來(lái)了消極影響。近年來(lái)，有機(jī)磷農(nóng)藥的含量超標(biāo)，導(dǎo)致超標(biāo)農(nóng)藥流入市場(chǎng)，威脅著人民的生活健康，同時(shí)殘留農(nóng)藥流入土壤，破壞可耕層的土壤結(jié)構(gòu)，對(duì)水文特征的穩(wěn)定性也有不同程度的影響?；谟袡C(jī)磷農(nóng)藥的隱性的消極影響，對(duì)果蔬殘留的有機(jī)磷農(nóng)藥進(jìn)行快速檢測(cè)是現(xiàn)代農(nóng)業(yè)的必經(jīng)趨勢(shì)，對(duì)果蔬市場(chǎng)的維護(hù)和百姓的生命安全有著積極的現(xiàn)實(shí)意義。

有機(jī)磷農(nóng)藥的概述

果蔬種植過(guò)程易受到蟲害，同時(shí)雜草的影響導(dǎo)致果蔬生長(zhǎng)，因此使用農(nóng)藥抑制蟲害和雜草的生長(zhǎng)。農(nóng)藥的正確使用能夠提高果蔬種植的產(chǎn)量，對(duì)我國(guó)的農(nóng)業(yè)發(fā)展有促進(jìn)作用。傳統(tǒng)的農(nóng)藥采用的是有機(jī)氯農(nóng)藥，有機(jī)氯殺蟲劑對(duì)果蔬的蟲害抑制效果不明顯，活性較低，因此有機(jī)磷殺蟲劑應(yīng)運(yùn)而生，配合使用的有機(jī)磷農(nóng)藥成為了果蔬種植中使用最多的農(nóng)藥。該種農(nóng)藥對(duì)果蔬蟲害的防治效果顯著，并且果蔬的害蟲成活性較低，但有機(jī)磷農(nóng)藥的劇性和毒性非常嚴(yán)重，有些濃度較高的殺蟲劑已經(jīng)在市場(chǎng)禁止投入了，同時(shí)濃度高的有機(jī)磷農(nóng)藥也被限制在農(nóng)用了。

有機(jī)磷農(nóng)藥快速檢測(cè)技術(shù)的重要性

有機(jī)磷農(nóng)藥使用不規(guī)范或者使用量超標(biāo)，對(duì)果蔬種植生長(zhǎng)有嚴(yán)重影響，若有機(jī)磷農(nóng)藥超標(biāo)的果蔬流入市場(chǎng)，人體攝入了有機(jī)磷農(nóng)藥物質(zhì)將給人們的生命安全造成威脅。對(duì)大氣環(huán)境也有嚴(yán)重的污染，由于現(xiàn)代的農(nóng)藥使用技術(shù)多是噴灑方式，并且多是采用多使用直升機(jī)噴灑，空氣中農(nóng)藥運(yùn)動(dòng)分子飄散到空中污染大氣。農(nóng)藥間接進(jìn)入土壤，對(duì)土壤的可耕層造成了土壤性能破壞，且土壤的微生物對(duì)農(nóng)藥的分解周期長(zhǎng)，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，降低了土壤的再循環(huán)利用率。農(nóng)藥流入河流，對(duì)地下河的水體造成污染，由于農(nóng)藥具有高度的溶解性和揮發(fā)性，有機(jī)磷農(nóng)藥融入水體，而水是生命之源，受到有機(jī)磷污染的水體流入生產(chǎn)生活領(lǐng)域，將帶來(lái)化學(xué)性的生命安全威脅。因此，對(duì)果蔬種植使用的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留進(jìn)行快速檢測(cè)，有利于對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥殘留做出正確的防范措施，避免有機(jī)磷對(duì)生產(chǎn)生活帶來(lái)消極影響。

我國(guó)的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)現(xiàn)狀

我國(guó)傳統(tǒng)的殘留有機(jī)磷農(nóng)藥成本較低，但是效率不高，對(duì)大部分的殘留農(nóng)藥是能檢測(cè)的，但檢測(cè)效果不佳。主要方法是：乙腈提取果蔬殘留農(nóng)藥樣品，通常使用劑量是五十毫升，如果樣品中存在水分可以采用無(wú)水氯化鈉吸干，吸干后靜止樣品，并保持確勻混狀態(tài)， 樣品隨著時(shí)間出現(xiàn)分層現(xiàn)象后，提取最上層的乙腈相，并在接近八十度的水浴，用氮?dú)鈱?duì)分層樣品進(jìn)行晾干，最后加上丙酮進(jìn)行容量固定，得出的數(shù)據(jù)使用氣相色譜進(jìn)行測(cè)定。傳統(tǒng)的此種方法對(duì)乙腈的使用加大了化學(xué)品劇毒性對(duì)人體的危害，檢測(cè)操作復(fù)雜，回收率低。隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和現(xiàn)代化學(xué)的應(yīng)用，對(duì)果蔬的農(nóng)藥殘留有了新的檢測(cè)技術(shù)，檢測(cè)效果更好，且檢測(cè)率達(dá)到百分之八十以上。常見(jiàn)新型的殘留物快速檢測(cè)兩種方法為酶劑分析法和免疫分析法。

酶是一種催化性很強(qiáng)的物質(zhì)，且專一度很高，對(duì)生化檢測(cè)的作用明顯，是快速檢驗(yàn)殘留有機(jī)磷農(nóng)藥的一種方法。常用的酶劑為膽堿酯酶和植物酶。膽堿酯酶受到有機(jī)磷農(nóng)藥的抑制會(huì)出現(xiàn)正常功能失效，活性存活率低，并且有機(jī)磷農(nóng)藥的濃度與抑制率呈現(xiàn)正比的關(guān)系，有機(jī)磷濃度越高，抑制率就越高，存活性就越差。一般來(lái)說(shuō)，酶劑對(duì)神經(jīng)中樞的傳導(dǎo)的代謝產(chǎn)物是乙酰膽堿，在乙酰膽堿加入顯色劑使其發(fā)生反應(yīng)，反應(yīng)物為黃色的物質(zhì)，用分光光度計(jì)測(cè)試抑制率從而判斷有機(jī)磷農(nóng)藥的殘留率。

免疫分析法主要是利用抗體來(lái)檢測(cè)殘留農(nóng)藥，抗體對(duì)酶等化合物進(jìn)行檢測(cè)，采用的是抗原抗異性識(shí)別，酶標(biāo)記的的抗體保存期限越長(zhǎng)，敏感度越高，并采用光譜分析對(duì)顯示結(jié)果進(jìn)行測(cè)驗(yàn)，對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥的定性定量檢測(cè)有積極的作用。

酶劑方法和免疫法都是應(yīng)用最為廣泛的兩種方法，酶劑方法操作簡(jiǎn)便更易應(yīng)用，因此下面對(duì)酶式劑法的某個(gè)例子的具體應(yīng)用進(jìn)行論述。

酶劑方法的配制

運(yùn)用此種方法注意三個(gè)方面的配制。第一，緩沖溶液的配制。緩沖溶液配制達(dá)到的ph值是到8。如果選擇1000毫升的蒸餾水就需要11.9克的無(wú)水磷氫二納和3，2克的磷酸二氫鈉配制。第二，顯色劑的配制。顯色劑成分是二硫代二硝基本基苯甲酸和碳酸氫鈉配制，需要取20毫升的緩沖液且在4度的溫度下作為溶解。二硫代二硝基本基苯甲酸和碳酸氫鈉配制克數(shù)分別為160毫克和15.6毫克。第三，底物的配制。底物配制需要硫代乙酰膽堿和蒸餾水混合，分別是25毫克和35毫升，溫度條件要求4度。第四，乙酰膽堿的配制。吸光度的變化值在合理范圍內(nèi)，通常3分鐘的變化值不低于0.3。

酶劑方法的使用儀器

使用的儀器型號(hào)為PR-203-6T，生產(chǎn)的的廠商為廈門市信儀科技有限公司。該儀器使用前有個(gè)預(yù)熱過(guò)程，并有參數(shù)的設(shè)定過(guò)程，15分鐘的預(yù)熱后，選擇正確的參數(shù)后，在9分鐘以內(nèi)的顯色時(shí)間，能檢測(cè)出儀器6個(gè)通道各自的光能量。在測(cè)試對(duì)照顯色，按下“對(duì)照”按鍵；第1通道區(qū)別其他通道放置的是對(duì)照試樣，其他放置的是樣品試樣，按下“樣品”鍵后，儀器測(cè)試樣品。

殘留農(nóng)藥的測(cè)試

這個(gè)測(cè)試環(huán)節(jié)主要有三個(gè)環(huán)節(jié)：對(duì)照測(cè)試，樣品提取，樣品測(cè)試。首先，果蔬農(nóng)藥的對(duì)照測(cè)試需要酶液和緩沖液進(jìn)行攪混，分別是100微升和2.5毫升，并把混合液放入比色皿中，同時(shí)放入顯色劑和底物混合液，均取100微升。將四種液體充分混合倒入儀器，按下對(duì)照按鍵測(cè)試。參數(shù)設(shè)置透光度為100。接著，進(jìn)行樣本提取，果蔬樣品注意樣本的次生植物對(duì)酶試驗(yàn)的產(chǎn)生假陽(yáng)性的消極影，因此在樣本提取之前，把須根等次生植物剔除，特別是針對(duì)葉綠素含量高的果蔬。2克的果蔬需要吸收10毫升的緩沖液并在2分鐘后過(guò)濾才能成為等待測(cè)試的樣品。過(guò)濾瓶選擇三角瓶，能夠充分震蕩搖勻。特殊的含植物須根的果蔬測(cè)試需要的吸取的緩沖液是是其整體質(zhì)量的5倍。最后，樣品測(cè)試，需要酶液、待測(cè)液、顯色劑、底物這幾樣的材料，分別采用的是100微升、2.5毫升、100微升、100微升。需要的裝置儀器是容積為1厘米的比色皿。充分搖勻并震蕩，10分鐘的靜止時(shí)間后把混合液放入儀器中，按下樣品鍵進(jìn)行測(cè)試。注意的事項(xiàng)：酶反映的速度必須在合適的溫度條件下，通常在37度以上，若低于此度數(shù)，混合液的反映時(shí)間延長(zhǎng)因此放置的時(shí)間需相應(yīng)延長(zhǎng)，在達(dá)到以下的條件才能繼續(xù)測(cè)試樣品：膽堿酯酶的空白對(duì)照時(shí)間3分鐘的吸光變化值不能低于0.3。

結(jié)果的檢測(cè)判斷

樣品測(cè)試沒(méi)有其他因素的影響下，陽(yáng)性結(jié)果表示是富含高度有機(jī)磷農(nóng)藥，通常檢測(cè)出酶的抑制率達(dá)到百分之50以上。顯示陽(yáng)性的測(cè)試結(jié)果的果蔬樣品必須經(jīng)過(guò)重復(fù)測(cè)試，才能得出正確的檢測(cè)判斷，通常重復(fù)測(cè)試的次數(shù)不能低于2次。

酶劑方法的檢測(cè)是目前運(yùn)用最為普遍的快速檢測(cè)果蔬中殘留有機(jī)磷農(nóng)藥的方法，對(duì)影響乙酰膽堿酯酶的活性的因素，如底物的濃度、顯色劑量、緩沖溶液的ph值、溫度條件，實(shí)施合理的控制，確保酶發(fā)生反應(yīng)的在最佳反映條件下。這種檢測(cè)方法靈敏度高，滿足了對(duì)果蔬中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的快速檢測(cè)的要求。