牛病毒性腹瀉病的研究概況

孟小林+劉建華+劉曉娜

摘要：介紹了牛病毒性腹瀉病的病原、臨床癥狀、診斷方法及預(yù)防措施，以期為養(yǎng)殖戶提供參考。

關(guān)鍵詞：牛病毒性腹瀉；持續(xù)性感染；研究進(jìn)展

中圖分類號(hào)：S823 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：1007-273X（2016）11-0010-02

牛病毒性腹瀉（Bovine viral diarrhea，BVD）是由牛病毒性腹瀉病毒（Bovine viral diarrhea virus，BVDV）引起的一種持續(xù)性接觸動(dòng)物傳染病。該病主要危害牛、綿羊、山羊、豬、鹿、駱駝等動(dòng)物的胃腸黏膜組織，因此又被稱為牛病毒性腹瀉、黏膜病。到目前為止，牛病毒性腹瀉廣泛爆發(fā)于土耳其、英國(guó)、韓國(guó)等全球多個(gè)國(guó)家和地區(qū)，并且，已給當(dāng)?shù)氐男竽翗I(yè)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失，因此，該病已經(jīng)成為全球養(yǎng)牛業(yè)最為重視的一種牛病毒性傳染病，國(guó)際獸醫(yī)局也將其定為B類傳染病[1]。

1 BVDV的介紹

牛病毒性腹瀉病毒是黃病毒科瘟病毒屬成員，與同屬的豬瘟病毒、羊邊界病病毒在抗原性和基因序列方面極其相似。在電鏡下，BVDV粒子呈球形或橢球形，直徑大小約在40～80 nm，表面有囊膜。BVDV對(duì)胰酶和氯仿等化學(xué)試劑敏感，難以適應(yīng)酸性環(huán)境，但是對(duì)于堿性環(huán)境耐受能力較強(qiáng)，56 ℃條件下病毒會(huì)完全失活[2]。根據(jù)BVDV 5′-UTR基因序列的高度保守性特點(diǎn)的不同，可將BVDV分為BVDV-1和BVDV-2兩種基因型。

BVDV可以在牛腎細(xì)胞和牛睪丸細(xì)胞等多種牛組織細(xì)胞中存活。根據(jù)感染BVDV后對(duì)細(xì)胞造成的不同影響，可將BVDV分為非致細(xì)胞病變型（Non-cytopathogenic，NCP）BVDV和致細(xì)胞病變型（Cytopathogenic，CP）BVDV兩種生物型，CP型感染細(xì)胞后會(huì)誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡現(xiàn)象[3]。

2 BVD的臨床癥狀

BVD的臨床癥狀主要表現(xiàn)為病畜出現(xiàn)發(fā)熱、腹瀉、流產(chǎn)、持續(xù)性感染（Persistently infected，PI）和免疫抑制等現(xiàn)象。BVDV會(huì)嚴(yán)重影響動(dòng)物的生育能力，降低動(dòng)物的懷孕率，增加受孕母牛出現(xiàn)流產(chǎn)、畸形胎、死胎和木乃伊胎的幾率。持續(xù)性感染牛是傳播BVDV的主要傳染源。妊娠母牛在懷孕的前三個(gè)月感染BVDV后就會(huì)生產(chǎn)出BVDV持續(xù)性感染牛犢。持續(xù)性感染犢牛每天都會(huì)向外界釋放約1千萬(wàn)個(gè)BVDV病毒顆粒，從而傳染給其他動(dòng)物，造成患病動(dòng)物出現(xiàn)免疫抑制，降低機(jī)體抵抗力，引起二次疾病的發(fā)生。攜帶BVDV的犢牛因?yàn)槠淇共∧芰Σ疃鴺O易感染黏膜病，并且在2歲之內(nèi)死亡，僅僅只有少部分犢?？梢源婊?年的時(shí)間，而幸存下來(lái)的犢牛會(huì)對(duì)BVDV產(chǎn)生“免疫耐受”，繼而轉(zhuǎn)化為持續(xù)性感染牛。因此，持續(xù)性感染牛不但不會(huì)為牛場(chǎng)主帶來(lái)任何的經(jīng)濟(jì)效益，而且還會(huì)終生向外界環(huán)境散毒，造成新的感染，這會(huì)給牛場(chǎng)帶來(lái)更大的安全隱患。

3 BVD的流行病學(xué)

BVDV可以通過(guò)直接或者間接的方式水平和垂直傳播病毒。本病的主要傳染源是BVDV患畜和BVDV攜帶動(dòng)物。感染BVDV的妊娠母畜產(chǎn)下胎兒則成為持續(xù)性感染動(dòng)物（PI），其可終生排毒。同時(shí)，一些BVDV污染的商用生物制劑如血清、精液等也可造成BVDV的傳播。

BVDV已經(jīng)在世界范圍內(nèi)成為畜牧業(yè)的一個(gè)危害性極大的病毒性病原體。自1946年首次發(fā)現(xiàn)該病毒以來(lái)，BVD已經(jīng)在全球多個(gè)國(guó)家均有報(bào)道。據(jù)部分國(guó)家地區(qū)統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明，美國(guó)BVDV血清陽(yáng)性率為50%，法國(guó)為76%，英國(guó)為54%～74%，瑞士為78%～80%，加拿大部分地區(qū)為82%～84%，澳大利亞為89%，印度為17.31%，南美六國(guó)（智利、巴西、烏拉圭、阿根廷、秘魯及哥倫比亞）血清平均陽(yáng)性率高達(dá)84.9%。在中國(guó)，1980年首次報(bào)道了BVDV疫情。近30年間，該病已在中國(guó)新疆、四川、黑龍江、重慶等20多個(gè)省市呈現(xiàn)大規(guī)模暴發(fā)態(tài)勢(shì)[4]。

4 BVDV的診斷方法

4.1 BVDV的分離與鑒定

本方法采取發(fā)病動(dòng)物的全血、腎臟、脾臟、口鼻分泌物以及淋巴結(jié)，經(jīng)過(guò)研磨除菌處理后接種于牛腎細(xì)胞或者牛睪丸細(xì)胞進(jìn)行病毒的分離與鑒定。研究人員從BVDV陽(yáng)性仔豬病料中成功分離出一株豬源BVDV，但是，該方法存在一定的局限性，它不僅不能檢測(cè)出NCP型BVDV，并且也不能區(qū)分短暫性感染和持續(xù)性感染的牛， 除非3周后對(duì)陽(yáng)性牛進(jìn)行再次檢測(cè)確診，因此，該方法不能廣泛地應(yīng)用于對(duì)BVDV的診斷[5]。

4.2 血清學(xué)診斷

血清中和試驗(yàn)是開展BVD流行病學(xué)調(diào)查的常用方法。該方法通過(guò)檢測(cè)每個(gè)月前后采集血樣的抗體滴度來(lái)判斷樣品的患病情況。但是，此方法耗時(shí)長(zhǎng)，并且不能篩選出免疫耐受牛的感染情況，因此，并不能準(zhǔn)確的判斷BVD的疫情。

瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)是目前基層獸醫(yī)站常用的BVD檢測(cè)方法。選取可疑動(dòng)物發(fā)炎或糜爛的組織，不經(jīng)過(guò)任何處理，直接與標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清反應(yīng)，檢測(cè)病料中是否存在BVDV抗原。瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)雖然省時(shí)、省力、操作簡(jiǎn)便，但是準(zhǔn)確性較差，敏感性也不如血清中和試驗(yàn)，因此，不能作為BVDV精確診斷的依據(jù)。

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)是比較常規(guī)的檢測(cè)BVDV抗體水平的技術(shù)。雖然，ELISA能較為準(zhǔn)確地檢測(cè)出待檢動(dòng)物BVDV的抗體水平，但它仍有局限性，一方面難以在病畜早期做出診斷，另一方面由于BVD存在于許多免疫耐受的動(dòng)物體內(nèi)，因此，ELISA無(wú)法查出所有的患病動(dòng)物。目前，國(guó)內(nèi)還沒(méi)有根據(jù)純化的病毒抗原而建立的ELISA方法，因此，該方法檢測(cè)得到的陽(yáng)性結(jié)果也值得懷疑[6]。

4.3 分子生物學(xué)診斷

隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，核酸擴(kuò)增技術(shù)常用來(lái)在實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)動(dòng)物病毒性傳染病。核酸擴(kuò)增技術(shù)包括實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)、環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)、嵌套式PT-PCR技術(shù)和多聯(lián)PCR技術(shù)等。這些技術(shù)可以利用BVDV特異性引物快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)出樣品中是否含有BVDV抗原，并且可以將同屬的豬瘟病毒和羊邊界病病毒區(qū)分開來(lái)，同時(shí)，這些方法還可以明確樣品中BVDV的生物型，這為BVDV的防控工作提供了技術(shù)支撐。

5 BVDV的預(yù)防及控制

目前，為了防止BVDV在牛群中大規(guī)模傳播，凈化已經(jīng)存在的BVDV疫情，各國(guó)采取的有效措施主要有疫苗的免疫接種、BVDV病原的鑒定、撲殺持續(xù)性感染動(dòng)物和提高日常飼養(yǎng)管理水平等。

5.1 BVDV疫苗的研究進(jìn)展

預(yù)防接種疫苗是防控病毒性傳染病的主要措施。1960年，首次報(bào)道分離出一株致細(xì)胞病變型BVDV毒株，即C24V，該毒株廣泛用于BVDV活疫苗的研制。隨后，有超過(guò)160種的BVDV滅活疫苗和弱毒活疫苗應(yīng)用于BVD的免疫接種工作，并且取得了一定的預(yù)防效果。研究顯示，BVDV疫苗主要通過(guò)以下兩個(gè)方面發(fā)揮其預(yù)防作用。一方面，BVDV疫苗可以控制BVDV在畜群內(nèi)進(jìn)行傳播；另一方面，該疫苗能夠減輕感染動(dòng)物的患病程度。

5.2 “BVDV控制及根除”計(jì)劃

為了加強(qiáng)BVDV的防控工作以及徹底根除BVD，西方各養(yǎng)牛大國(guó)在早年間就建立并實(shí)施了“BVDV防控根除” 計(jì)劃，并且取得了良好的成果。簡(jiǎn)而言之，該計(jì)劃主要包含三個(gè)部分，第一部分是BVDV檢測(cè)階段，即在牧群中篩選出可疑動(dòng)物并進(jìn)行最終的確定；第二部分是清除階段，即將已感染BVDV的動(dòng)物及BVDV持續(xù)性感染動(dòng)物進(jìn)行合理地焚燒及掩埋；第三階段是生物安全監(jiān)控階段，該階段各地會(huì)啟動(dòng)生物安全防治體系，防止BVDV再次感染健康動(dòng)物。瑞士已用該計(jì)劃在兩年內(nèi)將本地BVDV動(dòng)物感染數(shù)從原來(lái)的1.8%降低為0.2%[7]。歐洲西北部成功地實(shí)施了系統(tǒng)性的根除計(jì)劃，因此，大部分地區(qū)被視為沒(méi)有BVD疫情的區(qū)域。

5.3 日常飼養(yǎng)管理

雖然預(yù)防接種疫苗能預(yù)防BVDV的感染，但是作為獨(dú)立的控制措施，免疫接種并不能徹底消除BVDV感染疫情，也不能大幅度地降低BVDV帶來(lái)的經(jīng)濟(jì)損失，原因不在于現(xiàn)有疫苗的缺陷，而在于BVDV野毒株的差異性以及BVDV特有的持續(xù)性感染癥狀。因此，嚴(yán)格的牛場(chǎng)日常管理以及BVDV持續(xù)性感染牛的淘汰對(duì)于BVDV疫情的凈化也至關(guān)重要。

養(yǎng)殖場(chǎng)平時(shí)應(yīng)該加強(qiáng)檢疫，防止引進(jìn)BVDV病牛。BVD尚無(wú)特效治療方法。一旦發(fā)現(xiàn)病牛，立即對(duì)病牛進(jìn)行隔離治療或無(wú)害化處理，防止BVDV的擴(kuò)散或蔓延。因此，養(yǎng)殖場(chǎng)應(yīng)該定期通過(guò)血清學(xué)檢測(cè)方法監(jiān)測(cè)牛群BVDV的感染情況，淘汰持續(xù)感染的牛，逐步凈化牛群。

參考文獻(xiàn)：

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