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    重組埃博拉疫苗No.1

    2017-04-17 02:41:49
    生物技術(shù)通訊 2017年1期
    關(guān)鍵詞:糖蛋白表位博拉

    重組埃博拉疫苗No.1

    埃博拉病毒包膜糖蛋白小鼠CTL表位的預(yù)測及鑒定

    背景:埃博拉病毒(EBOVs)能夠引發(fā)嚴(yán)重的出血熱,具有極高的致死率。目前世界上尚無批準(zhǔn)上市的疫苗以及對(duì)該病毒感染的有效治療手段。有研究表明,體液免疫和細(xì)胞免疫反應(yīng)是控制埃博拉病毒感染的關(guān)鍵,而且CD8+T細(xì)胞在介導(dǎo)疫苗引發(fā)的免疫保護(hù)方面發(fā)揮著重要作用。本研究旨在對(duì)埃博拉病毒包膜糖蛋白(GP)H-2d單元型的T細(xì)胞表位進(jìn)行鑒定。

    結(jié)果:利用計(jì)算機(jī)輔助算法對(duì)埃博拉病毒兩種亞型(蘇丹型和扎伊爾型)包膜糖蛋白H-2d單元型的T細(xì)胞表位進(jìn)行預(yù)測。對(duì)預(yù)測的肽進(jìn)行合成,在免疫了表達(dá)埃博拉GP復(fù)制缺陷型腺病毒的BALB/c小鼠上進(jìn)行鑒定。酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)和細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子染色結(jié)果表明肽RPHTPQFLF(蘇丹型埃博拉病毒),GPCAGDFAF和YDRLASTV(扎伊爾型埃博拉病毒)能夠刺激免疫后小鼠的脾細(xì)胞產(chǎn)生大量的IFN-γ。

    結(jié)論:經(jīng)鑒定,對(duì)于2種亞型埃博拉病毒的包膜糖蛋白共有3條肽被確定為T細(xì)胞表位。這些表位的確定將有助于以埃博拉病毒包膜糖蛋白為有效成分的疫苗在BALB/c小鼠模型上的評(píng)價(jià)。

    2012年6月13日,軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院陳薇團(tuán)隊(duì)中的5名成員以吳詩坡博士為第一作者,在美國《Virology Journal》雜志上在線發(fā)表了一篇短論文。吳詩坡當(dāng)時(shí)并不一定想到,在4年后,表達(dá)2014扎伊爾型埃博拉病毒包膜糖蛋白的基于Ad5載體的重組埃博拉病毒疫苗成為了現(xiàn)實(shí)。作為陳薇團(tuán)隊(duì)一員,這些年他一直參與埃博拉疫苗及強(qiáng)致病性病原的各項(xiàng)研究工作,他如此評(píng)價(jià)該工作的意義:

    研究表明,體液免疫和細(xì)胞免疫反應(yīng)是控制埃博拉病毒感染的關(guān)鍵。在體外對(duì)淋巴細(xì)胞使用重疊肽庫刺激是細(xì)胞免疫反應(yīng)檢測中刺激細(xì)胞的通用方法。然而,重疊肽庫的合成成本很高。因此,找到相應(yīng)的CTL表位,將極大的方便相關(guān)疫苗細(xì)胞免疫反應(yīng)的評(píng)價(jià)。利用計(jì)算機(jī)輔助算法對(duì)糖蛋白的CTL表位進(jìn)行預(yù)測,選擇最可能的表位進(jìn)行合成,經(jīng)驗(yàn)證,我們最終找到了蘇丹型和扎伊爾型埃博拉病毒包膜糖蛋白在BALB/c小鼠上的CTL表位。這些表位的發(fā)現(xiàn)將有助于分析不同埃博拉疫苗在小鼠模型上的細(xì)胞免疫反應(yīng)。而我們的研究也揭示了計(jì)算機(jī)預(yù)測-免疫學(xué)驗(yàn)證的方法是CTL表位鑒定的一種簡單、經(jīng)濟(jì)而有效的方法。

    相比整個(gè)埃博拉疫苗的研究,埃博拉病毒包膜糖蛋白CTL表位的發(fā)現(xiàn)僅僅是很小的一部分工作。系統(tǒng)而嚴(yán)謹(jǐn)?shù)难芯渴刮覀冇辛诉@一個(gè)小發(fā)現(xiàn),雖然是很小的一步,卻也為之后炭疽桿菌PA、馬爾堡病毒GP、寨卡病毒E蛋白等CTL表位的成功鑒定打下了基礎(chǔ)。我們自始至終保持著扎實(shí)而深入的科研精神,貫串埃博拉疫苗的整個(gè)研究過程。

    左上,吳詩坡在進(jìn)行細(xì)胞免疫檢測流式細(xì)胞術(shù)上樣;右上,他在重組埃博拉疫苗Ⅰ期臨床試驗(yàn)樣本檢測現(xiàn)場;左下,他在塞拉利昂進(jìn)行Ⅱ期臨床試驗(yàn)樣本ELISA檢測;右下,一張難得的正面照,在塞拉利昂Ⅱ期臨床試驗(yàn)現(xiàn)場

    [1]Wu S,Yu T,Song X,et al.Prediction and identifi?cation of mouse cytotoxic T lymphocyte epitopes in Ebola virus glycoproteins[J].Virol J,2012,9:111.

    10.3969/j.issn.1009-0002.2017.01.011

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