雞組織滴蟲病的病理學(xué)診斷

彭欠欠，蘇佳文，崔子鶴，石火英

（揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院，揚(yáng)州 225009）

·研究論文·

雞組織滴蟲病的病理學(xué)診斷

彭欠欠，蘇佳文，崔子鶴，石火英

（揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院，揚(yáng)州 225009）

本研究通過疾病的調(diào)查、肉眼病變和組織病理學(xué)觀察的方法，對(duì)揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物醫(yī)院收集送檢病雞進(jìn)行了病理學(xué)診斷。病雞臨床癥狀表現(xiàn)為精神萎靡，雞冠發(fā)紫，排出淡綠色稀糞；剖檢病雞可觀察到肝臟腫大，表明有大小不等的黃褐色壞死灶，盲腸腫大，內(nèi)有黃色干酪樣栓子；顯微鏡下肝臟和盲腸中有嗜伊紅的組織滴蟲蟲體，并有大量嗜酸性粒細(xì)胞存在。經(jīng)臨床癥狀觀察、病理剖檢以及病理組織學(xué)診斷，確診為雞組織滴蟲病。

組織滴蟲；病理學(xué)；診斷；雞

組織滴蟲病是由火雞組織滴蟲（Histomonas meleagridis）引起禽類肝臟和盲腸寄生性機(jī)能紊亂的一種急性原蟲病，多發(fā)于雞、火雞、鵪鶉及其他雞形目的禽類[1,2]，主要以肝臟壞死和盲腸潰瘍?yōu)樘卣?，故又稱為盲腸肝炎[3]。組織滴蟲病發(fā)展后期經(jīng)常出現(xiàn)血液循環(huán)障礙，導(dǎo)致病雞頭部呈現(xiàn)黑紫色，所以又有“黑頭病”之稱[1]。組織滴蟲最早于1895年在火雞體內(nèi)發(fā)現(xiàn)，稱之為火雞阿米巴原蟲（Amoeba meleagridis），之后發(fā)現(xiàn)此寄生蟲有鞭毛和偽足，與溫氏組織滴蟲（Histomonas wenrich）、火雞六鞭毛蟲（Hexamita meleagridis）等獨(dú)立原蟲不同，命名為火雞組織滴蟲。組織滴蟲病的發(fā)生沒有明顯的季節(jié)性，但多發(fā)于溫暖、潮濕的夏秋季節(jié)，發(fā)病年齡多在2周齡到10周齡之間。組織滴蟲病在世界范圍內(nèi)分布廣泛，給養(yǎng)禽業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失，因此對(duì)其進(jìn)行診斷和防治顯得至關(guān)重要。

2016年4月，揚(yáng)州市高郵某雞場(chǎng)送病雞到揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物醫(yī)院就診。該畜主共飼養(yǎng)1800只雞，已死亡20多只，送檢病雞25日齡，近幾天陸續(xù)發(fā)生死亡。應(yīng)用疾病調(diào)查、病理剖檢、肉眼病變觀察對(duì)送檢病雞進(jìn)行了臨床診斷，并通過組織病理學(xué)切片的制作對(duì)組織器官進(jìn)行了病理學(xué)分析，結(jié)果診斷為雞組織滴蟲病。

1 材料與方法

1.1 病料來源 2016年4月，揚(yáng)州市某雞場(chǎng)將病雞送至揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物醫(yī)院就診，將送檢的5只病雞全部剖檢，采集肝臟和盲腸組織備用。

1.2 主要儀器與試劑 手動(dòng)輪轉(zhuǎn)切片機(jī)（型號(hào)為RM2235）購(gòu)自德國(guó)Leica Microystems Nussloch GmbH；電熱恒溫水浴鍋（型號(hào)為HH.S21-4）購(gòu)自上海博訊有限公司；顯微鏡購(gòu)自德國(guó)ZEISS公司；醫(yī)用冷凍箱購(gòu)自SANYO公司；所用試劑與切片制作儀器均為揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院病理實(shí)驗(yàn)室提供。

1.3 方法 剖檢病雞，取新鮮的肝臟和盲腸組織，立即放入15%的福爾馬林溶液中進(jìn)行固定；將已固定的臟器修成大小適宜、切面完整的組織。組織經(jīng)過固定和沖洗后在梯度乙醇溶液中進(jìn)行脫水，在70%、80%、90%的乙醇溶液中分別脫水4 h，在100%Ⅰ、100%Ⅱ的乙醇中分別脫水2 h；隨后用二甲苯透明，二甲苯Ⅰ中2 min，二甲苯Ⅱ中7 min，具體操作時(shí)間視組織透明情況而定；在60℃溫箱內(nèi)將透明的組織塊放入加熱熔解的石蠟中，讓石蠟浸透組織，2.5 h后進(jìn)行包埋；將包埋好的組織進(jìn)行修樣及標(biāo)記，-20℃過夜，然后對(duì)其進(jìn)行切片；將切片置入50℃烘箱內(nèi)烤片24 h，然后通過二甲苯Ⅰ和二甲苯Ⅱ進(jìn)行脫蠟，分別10 min；接著放入95%、85%、75%乙醇溶液中各2 min，水洗；蘇木素染色15 min，水洗，放入鹽酸-乙醇內(nèi)2 s，水洗之后伊紅染色15 s，洗凈之后用中性樹脂封片，觀察病變，拍照。

2 結(jié)果

2.1 詢問病史 該養(yǎng)殖場(chǎng)共飼養(yǎng)1800只雞，近幾天陸續(xù)發(fā)生死亡，已經(jīng)死亡20余只飼養(yǎng)方式全部采用籠養(yǎng)。發(fā)病雞集中于20～50日齡。

2.2 臨床癥狀 病雞精神沉郁，食欲不振，行動(dòng)呆滯，翅下垂，羽毛松亂無光澤；排淡綠色稀糞，少數(shù)糞便帶血絲；雞冠發(fā)紫，呈暗黑色，可視黏膜蒼白。

2.3 大體病理變化 剖解病雞發(fā)現(xiàn)其肝臟腫大，呈深紫褐色，表面散在大小不一的黃褐色壞死灶，壞死灶中央稍有下陷，有的壞死灶周圍有出血帶（圖1）；盲腸外觀明顯腫大，觸之堅(jiān)硬，呈香腸狀，粗細(xì)不均，腸腔內(nèi)有干酪樣物充塞（圖 2）。

圖1 病雞肝臟的剖檢病變Fig.1 Anatomopathological change in liver of chicken

圖2 病雞盲腸的剖檢病變Fig.2 Anatomopathological change in caecum of chicken

2.4 顯微病理學(xué)觀察 對(duì)病雞的肝臟和盲腸組織切片進(jìn)行觀察，肝臟組織壞死灶中心部位的肝細(xì)胞發(fā)生壞死和崩解，形成均質(zhì)團(tuán)塊；周圍的肝細(xì)胞索排列紊亂，肝細(xì)胞變性、壞死，其間有大量蟲體分布和嗜酸性淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)（圖3）。盲腸黏膜充血，上皮細(xì)胞變性、壞死、脫落，固有層嚴(yán)重受損，有嗜伊紅的圓形或橢圓形蟲體存在，并有嗜酸性淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)（圖4）。

圖3 肝臟組織中的組織滴蟲（黑箭頭所示，HE，×400）Fig.3 Detection of Histomonas meleagridis in liver by histopathological method ( indicated by black arrow, HE, ×400 )

圖4 盲腸組織中的組織滴蟲（黑箭頭所示，HE，×400）Fig.4 Detection of Histomonas meleagridis in caecum by histopathological method ( indicated by black arrow, HE, ×400 )

3 討論

3.1 組織滴蟲病和球蟲病的鑒別診斷 組織滴蟲病的主要臨床癥狀為精神萎靡不振，羽毛松亂無光澤，下痢，與球蟲病的臨床癥狀極為相似，但可以通過剖檢病變將二者進(jìn)行區(qū)分。患球蟲病的病雞兩側(cè)盲腸腫大，外觀呈灰紅色，內(nèi)有凝固的血液和組織碎片，腸壁漿膜層帶有白色圓形斑點(diǎn)或出血點(diǎn)；患組織滴蟲病的病雞一側(cè)或兩側(cè)盲腸腫大，外觀呈灰白色，內(nèi)有干酪樣滲出物或壞死物形成凝固栓子堵塞腸腔，栓塞的橫切面呈同心層狀，中心是黑紅色的凝固血塊，外圍包裹著淡黃色的滲出物或壞死物；肝臟腫大，表面有黃色不規(guī)則的特征性潰瘍病灶。本病例中發(fā)病雞雞冠發(fā)紫，呈暗黑色；肝臟腫大，表面有許多黃褐色壞死灶；盲腸腫大，腸腔內(nèi)充滿干酪樣物質(zhì)；顯微鏡下發(fā)現(xiàn)肝臟和盲腸組織中有大量嗜伊紅的蟲體存在。根據(jù)臨床癥狀、病理剖檢變化和顯微鏡下病理變化，鑒定該病為雞組織滴蟲病。

3.2 飼養(yǎng)管理 組織滴蟲病主要通過消化道感染，雞直接吞食排出的蟲體或帶有黑頭組織滴蟲的異刺線蟲卵即可感染?；痣u和棚養(yǎng)雞容易發(fā)生該病，籠養(yǎng)雞感染組織滴蟲機(jī)率較低，但是，如果雞舍飼養(yǎng)管理?xiàng)l件較差，飲水和飼料被組織滴蟲污染，也會(huì)造成組織滴蟲病的發(fā)生，因此加強(qiáng)對(duì)雞群的飼養(yǎng)管理尤為重要。

在平時(shí)的飼養(yǎng)管理中，除了對(duì)危害較大的傳染性疾病做好免疫防控外，更應(yīng)該搞好雞舍的環(huán)境衛(wèi)生并進(jìn)行合理的用藥驅(qū)蟲，避免寄生蟲病造成的經(jīng)濟(jì)損失[4]。經(jīng)常對(duì)雞舍清掃消毒，保持舍內(nèi)干燥，有充足的光照；飼料和水槽每天用0.2%的高錳酸鉀水刷洗；病死雞按規(guī)定進(jìn)行無害化處理，糞便及時(shí)清理并進(jìn)行堆積發(fā)酵[5]。

[1] 顧家英, 郭苗苗, 王小波, 等. 雞盲腸肝炎的病理診斷[J].黑龍江畜牧獸醫(yī), 2016(2)∶ 82-83+215.

[2] 宋合強(qiáng). 一起雞盲腸肝炎病例的診治報(bào)告[J]. 農(nóng)業(yè)開發(fā)與裝備, 2014(7)∶ 140-141.

[3] 王丕民. 一例雞組織滴蟲病的診治[J]. 畜牧獸醫(yī)科技信息, 2016(1)∶109.

[4] 黃艷麗, 王成達(dá), 王芳. 一例雞盲腸肝炎的診療體會(huì)[J].吉林畜牧獸醫(yī), 2015(7)∶ 36.

[5] 何芳, 陳大健. 雞盲腸肝炎病理解剖與防治[J]. 中國(guó)動(dòng)物保健, 2012(11)∶ 92-93.

PATHOLOGICAL DIAGNOSIS OF HISTOMONIASIS IN CHICKEN

PENG Qian-qian, SU Jia-wen, CUI Zi-he, SHI Huo-ying

(College of Veterinary Medicine, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China)

Pathological diagnosis of histomoniasis was performed for sick chickens based on survey, clinical signs and tissue lesions. The sick chickens that were sent to Yangzhou University animal hospital looked weak and had loose stools on bellies. Livers swelled with necrosis in different sizes and ceca also swelled with caseous emboli at necropsy. Under the microscope, a large number of eosinophilic histomonas and eosnophils were observed in livers and ceca. These observations demonstrated that these sick chickens were infected with histomonias meleagridis.

Histomonas meleagridis; pathology; diagnosis; chicken

S855.927.22

A

1674-6422（2017）01-0072-03

2016-06-12

國(guó)家自然科學(xué)基金（31172300）；江蘇省高校自然科學(xué)重大項(xiàng)目（12KJA230002）；高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專項(xiàng)科研基金（博導(dǎo)類）（20133250110002）；江蘇高校優(yōu)勢(shì)學(xué)科建設(shè)工程資助項(xiàng)目（PAPD）；江蘇省動(dòng)物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心

彭欠欠，女，碩士研究生，預(yù)防獸醫(yī)學(xué)專業(yè)

石火英，E-mail:hyshi@yzu.edu.cn