血管內(nèi)皮生長因子治療下肢缺血性疾病的研究進(jìn)展

劉永東

廣西柳州市柳鐵中心醫(yī)院血管外科，廣西柳州 545007

血管內(nèi)皮生長因子治療下肢缺血性疾病的研究進(jìn)展

劉永東

廣西柳州市柳鐵中心醫(yī)院血管外科，廣西柳州 545007

臨床上采用血管內(nèi)皮生長因子方法治療下肢動脈硬化、血栓閉塞性脈管炎、糖尿病足等下肢缺血性疾病已經(jīng)出現(xiàn)了大量的研究報道，但均未取得十分滿意的治療效果。隨著在這一方面的研究工作的不斷深入，現(xiàn)已證實血管內(nèi)皮前體細(xì)胞能夠定向分化血管當(dāng)中的內(nèi)皮細(xì)胞，并可同時生成新生血管，其中血管內(nèi)皮生長因子發(fā)揮了至關(guān)重要的作用價值。對此，該文將對目前臨床上關(guān)于血管內(nèi)皮生長因子治療下肢缺血性疾病的研究進(jìn)展綜述如下。

血管內(nèi)皮生長因子；動脈硬化；血栓閉塞性脈管炎；糖尿病足；下肢

下肢缺血性疾病患者將會隨著病情的逐步加重而無法采用血管成形與重建等常規(guī)治療措施，此時患者經(jīng)常不得不進(jìn)行截肢治療。而近些年來隨著血管內(nèi)皮生長因子治療方法在臨床上的研究日漸深入，為下肢缺血性疾病患者提供了新的治療方法。作為一種特異性血管生長因子，其在血管新生的治療過程中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用價值。

1 血管新生

血管新生即為針對人體的現(xiàn)存血管采取一定的技術(shù)手段來使之能夠進(jìn)行延伸、拓展，并由此構(gòu)建起接近于健康血管網(wǎng)絡(luò)的組織架構(gòu)。血管新生的主要內(nèi)容就含括了血管基底膜、細(xì)胞外基質(zhì)降解；血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移；新生血管組織建立；血管外壁細(xì)胞積聚；血管附近產(chǎn)生基質(zhì)租??；血管網(wǎng)絡(luò)的調(diào)整與重建。治療性血管新生即為把血管新生誘導(dǎo)因子轉(zhuǎn)入進(jìn)組織當(dāng)中并促進(jìn)缺血部位側(cè)支血管能夠得以實現(xiàn)重生[1]。血管內(nèi)皮生長因子是目前在臨床醫(yī)學(xué)上應(yīng)用效果最好的一種促進(jìn)血管生長的因子，其最為突出的優(yōu)勢特性即體現(xiàn)在以下兩個方面之中：①間質(zhì)細(xì)胞源性因子、腫瘤壞死因子、促血管生長因子等通過對血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)的增強來發(fā)揮效用；②血管內(nèi)皮生長因子的作用影響將始終存在于血管的整個重生階段。

2 蛋白治療

考慮到血管內(nèi)皮生長因子在人體當(dāng)中的半衰期相對較短，采用血管內(nèi)皮生長因子蛋白治療方式治療下肢缺血性疾病通常要重復(fù)多次給藥，不但成本高昂且極為不便[2]。隨著當(dāng)前載體控釋技術(shù)研究愈發(fā)趨向于成熟化以及相關(guān)工藝技術(shù)的快速發(fā)展，目前在臨床上越來越多的開始采用載體緩釋血管內(nèi)皮生長因子的方式來加快促使血管能夠得以新生。當(dāng)前在臨床上所較常采用的控釋載體主要就包括了水凝膠、肝素、膠原基質(zhì)、藻酸鹽等。有研究人員就通過把血管內(nèi)皮生長因子包裹于藻酸鈣微球當(dāng)中，經(jīng)臨床觀察表明含量在6 ng·mL/（L·d）的血管內(nèi)皮生長因子其有效釋放時間可達(dá)到10～14 d，并分別在向磷酸鹽緩沖液以及血清當(dāng)中同時進(jìn)行釋放其結(jié)果表明，在血清當(dāng)中的釋放速率明顯更快，分析其原因很有可能是由于在血清當(dāng)中藻酸鹽和血管內(nèi)皮生長因子所發(fā)生的靜電效應(yīng)有所下降所導(dǎo)致的。有研究人員就通過利用氣體發(fā)泡技術(shù)以及微粒濾過手段賴在血管內(nèi)皮生長因子165內(nèi)新增加聚丙交酯以及聚乙交酯，其血管內(nèi)皮生長因子釋放速率明顯降低，治療結(jié)果表明采取血管內(nèi)皮生長因子緩釋治療方式在血管新生方面達(dá)到了更加優(yōu)異的效果。

3 基因治療

研究人員將編碼后的血管內(nèi)皮生長因子基因裸露質(zhì)粒DNA輸注進(jìn)試驗小鼠的缺血性后肢肌肉中，經(jīng)治療1個月后通過造影結(jié)果表明缺血肢體側(cè)支循環(huán)顯著加強，內(nèi)收肌與腓腸肌當(dāng)中的內(nèi)毛細(xì)血管密度顯著升高，同時經(jīng)由組織學(xué)檢驗出了標(biāo)記有血管內(nèi)皮生長因子的蛋白。血管內(nèi)皮生長因子基因治療當(dāng)前在臨床上的載體主要就包括了脂質(zhì)體DNA、裸露質(zhì)地DNA以及病毒載體DNA三種。其中前兩種轉(zhuǎn)染操作相對較為簡單，而最后一種只能夠?qū)崿F(xiàn)轉(zhuǎn)染分裂細(xì)胞。有可能導(dǎo)致的免疫反應(yīng)與毒副作用為其主要切入點，基因輸入主要有肌肉輸注和導(dǎo)管腔內(nèi)輸注兩種[3]。病毒載體主要就包括了腺病毒與逆轉(zhuǎn)錄病毒兩種，其中后一種病毒的轉(zhuǎn)染效率相對偏低，并且也僅僅能夠?qū)Ψ至鸭?xì)胞實現(xiàn)轉(zhuǎn)染；而腺病毒其在發(fā)生轉(zhuǎn)染現(xiàn)象之后血管內(nèi)皮生長因子將不會被整合到宿主基因組當(dāng)中，仍然能夠保持長達(dá)足月以上。然而有可能會發(fā)生的免疫反應(yīng)和毒副效應(yīng)則是其主要的切入點。基因輸注形式主要是通過肌肉輸注以及通過導(dǎo)管腔內(nèi)室進(jìn)行輸注。近些年來有研究人員就采用物理技術(shù)來加強血管內(nèi)皮生長因子基因?qū)Υ龠M(jìn)血管新生起到了較為滿意的臨床療效，其中主要就包括以下幾種技術(shù)：①離子照射療法：有研究人員就采用低劑量的的離子來對缺血性小鼠的下肢進(jìn)行照射，通過刺激作用來促使其肥大細(xì)胞能夠逐步轉(zhuǎn)移至缺血區(qū)域，同時利用肥大細(xì)胞來產(chǎn)生出血管內(nèi)皮生長因子，以促使試驗小鼠缺血部位的血管能夠得以重新生成。②超聲波輔助療法：有研究人員就通過采用低強度超聲波來對缺血性實驗小鼠的下肢進(jìn)行照射治療，在持續(xù)照射3周以后缺血程度為中等的小鼠其缺血部位組織血液流動情況取得了明顯恢復(fù)。③磁場效用療法：有研究人員就采用包含了血管內(nèi)皮生長因子的DNA裸質(zhì)粒磁性納米微粒子經(jīng)由動脈輸注入實驗小鼠體內(nèi)，經(jīng)由外部磁場以促使微粒子能夠集中于其缺血性部位，進(jìn)而促使血管得以重新生成。

4 細(xì)胞治療

當(dāng)前現(xiàn)已表明血管內(nèi)皮前體細(xì)胞能夠?qū)崿F(xiàn)對血管內(nèi)皮細(xì)胞的定向分化效果，同時還可產(chǎn)生出新生血管，特別是血管內(nèi)皮生長因子在血管內(nèi)皮前體細(xì)胞定向分化、體內(nèi)擴展增大以及轉(zhuǎn)染之后定向移植治療周圍缺血性疾病臨床效果顯著[4]。有研究人員就采用免疫磁珠方式來由人體骨髓內(nèi)分離出CD34+細(xì)胞，并將之放置在涂抹了纖連蛋白的塑料板上，在對其培養(yǎng)24 h之后，將貼壁細(xì)胞取出，搜集懸浮細(xì)胞，將其中所包含的成熟內(nèi)皮細(xì)胞徹底清除。把懸浮細(xì)胞采用含括有血管內(nèi)皮生長因子的培養(yǎng)基質(zhì)進(jìn)行2～3周的培養(yǎng)后，產(chǎn)生出快速擴張增大的貼壁細(xì)胞集落。此類細(xì)胞具備有內(nèi)皮細(xì)胞的典型性特征，把擴展增多以后的血管內(nèi)皮細(xì)胞的定向分化移植到無胸腺試驗小鼠缺血性后肢上，可促使其卻血量與微血管密度明顯增大。

促使骨髓內(nèi)的EPC盡量存在于外周血內(nèi)，這一階段便是EPC的動員過程。血管內(nèi)皮生長因子是EPC實現(xiàn)外部高效化動員的主要因子。有研究人員就通過對試驗小鼠腹腔內(nèi)進(jìn)行可溶性血管內(nèi)皮生長因子的注射，1次/d，持續(xù)注射7 d。在實施血管內(nèi)皮生長因子處理的第1天，試驗小鼠的外周血EPC未處理細(xì)胞數(shù)占總體細(xì)胞數(shù)的25%左右，在處理到第4天后其數(shù)值達(dá)到峰值，即37%。而后，研究人員損傷實驗鼠角膜，結(jié)果表明EPC一同參與到了對損傷角膜新血管的構(gòu)建過程之中。和對照試驗組的情況相比較，血管內(nèi)皮生長因子動員之后將會有為數(shù)更多的EPC一同參與進(jìn)血管的新生構(gòu)成之中。

5 結(jié)束語

在該次研究中，主要就血管內(nèi)皮生長因子治療下肢缺血性疾病的研究進(jìn)展展開了具體分析，其中就對這一治療方法的主要原理“血管新生”予以了具體闡述，而后就血管內(nèi)皮生長因子的蛋白治療方法、基因治療方法、細(xì)胞治療方法的研究進(jìn)展展開了具體探究，最終希望通過該文的研究能夠為相關(guān)的研究人員提供一些有價值的參考。

[1]丁云,高淵,杜繼聰,等.下肢缺血性疾病干細(xì)胞治療相關(guān)的股內(nèi)側(cè)肌動脈應(yīng)用解剖學(xué)[J].解剖學(xué)雜志,2014,37(4)：514-516.

[2]黃智,周石,宋杰,等.不同介入方法治療老年下肢缺血性疾病的近期療效[J].中國老年學(xué)雜志,2014,34(2).

[3]王芳,何雪梅,姚佐懿,等.miR-221-3p在下肢缺血性疾病中的表達(dá)變化[J].中國動脈硬化雜志,2017,25(2).

[4]張滕,周為民.治療性血管新生在下肢缺血性疾病中的研究進(jìn)展[J].國際外科學(xué)雜志,2016,43(12)：856-860.

R6

A

1004-6569（2017）07（a）-0082-02

劉永東（1974-），男，湖南祁東人，碩士，副主任醫(yī)師，研究方向：主動瘤診治及膝下動脈閉塞介入治療。

2017-04-03）