• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    赤霉素(GA3)對(duì)菠菜性別分化的影響及分子機(jī)制

    2017-04-15 11:01:26秦瑞云王少凈劉新鑫杜亞茹王冰肖
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2017年5期
    關(guān)鍵詞:赤霉素菠菜

    秦瑞云+王少凈+劉新鑫+杜亞茹+王冰肖+李忠徽+閆寧寧+李書粉+高武軍+鄧傳良

    摘要:以日本大葉菠菜為供試材料,采用溫室內(nèi)盆栽種植的方式,利用赤霉素(GA3)進(jìn)行處理,探討其對(duì)雌雄異株植物菠菜性別分化的影響。結(jié)果表明,試驗(yàn)組在第1次處理后植株就有明顯的生長(zhǎng),表現(xiàn)為植株莖稈變長(zhǎng)、較對(duì)照組粗壯、開花期提前。與對(duì)照組相比,試驗(yàn)組雌雄比例(1.33)明顯大于對(duì)照組(0.96)。此外,發(fā)生性反轉(zhuǎn)植株中,雌株轉(zhuǎn)變?yōu)樾壑昱c雄株轉(zhuǎn)變?yōu)榇浦甑谋壤秊?.14。利用Y染色體緊密連鎖的雄性特異T11A分子標(biāo)記對(duì)性反轉(zhuǎn)植株進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果表明,雌株轉(zhuǎn)變?yōu)樾壑?,雄性特異條帶出現(xiàn);雄株轉(zhuǎn)變?yōu)榇浦?,雄性特異條帶消失。本研究結(jié)果為進(jìn)一步研究激素對(duì)菠菜性別分化影響的分子機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。

    關(guān)鍵詞:菠菜;赤霉素(GA3);T11A分子標(biāo)記;性反轉(zhuǎn);性別分化

    中圖分類號(hào): S636.101文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A

    文章編號(hào):1002-1302(2017)05-0133-02

    菠菜(Spinacia oleracea L.)為藜科菠菜屬一年生或二年生草本植物,染色體組成為(2n=2x=12),具有生長(zhǎng)周期短、表型豐富、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高等特點(diǎn),是一種大面積種植的蔬菜作物。菠菜系雌雄異株植物,其性別分化不但受到性別決定基因控制,還受到激素的影響[1]。在早期研究中,Chailakhyan等認(rèn)為在長(zhǎng)日照類型的菠菜中,赤霉素對(duì)性別表現(xiàn)的影響為促進(jìn)雄性化[2];El-Gizawy等的研究也表明赤霉素處理菠菜具有促雄作用[3-4];而曹宗巽等則報(bào)道赤霉素在菠菜中有促雌作用[1]。由此可見,不同研究學(xué)者利用赤霉素處理菠菜,其誘導(dǎo)結(jié)果是有差異的。赤霉素對(duì)其他植物性別分化的影響也不盡相同,赤霉素可以促使某些植物雄性化,但是也可以導(dǎo)致某些植物雌性化,赤霉素對(duì)黃瓜雌性系性別分化的影響表現(xiàn)為能促進(jìn)雄花分化,阻礙雌花分化[5]。在赤霉素對(duì)小桐子處理的試驗(yàn)中,結(jié)果表明外施赤霉素誘導(dǎo)小桐子雌花中原來停止發(fā)育的雄蕊重新正常發(fā)育,進(jìn)而將其變成兩性花[6]。在玉米不同的發(fā)育階段,對(duì)葉面噴施赤霉素,能夠使玉米雄花穗變成雌性、雄性不育或保持雄性可育[7]。赤霉素還可以誘導(dǎo)寬葉慈菇雄株及三性花同株向雌株性別的轉(zhuǎn)換[8]。

    盡管前期有不少學(xué)者研究了赤霉素對(duì)菠菜性別分化的影響,并得出了不同的結(jié)論,但是其研究結(jié)果只關(guān)注于赤霉素對(duì)菠菜外觀形態(tài)特征的影響,至于赤霉素為什么會(huì)導(dǎo)致菠菜的性別轉(zhuǎn)化缺乏深入的研究。本研究以日本大葉菠菜為供試材料,采用外源赤霉素處理受試菠菜植株,觀察處理前后菠菜性別變化的情況,并利用菠菜Y染色體緊密連鎖雄性特異標(biāo)記T11A對(duì)性反轉(zhuǎn)植株進(jìn)行基因組檢測(cè),從分子水平探討其對(duì)雌雄異株植物菠菜性別分化的影響,本研究結(jié)果為進(jìn)一步揭示赤霉素對(duì)菠菜性別分化影響的分子機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。

    1材料和方法

    1.1試驗(yàn)材料

    供試材料為日本大葉菠菜。2013—2014年連續(xù)在河南師范大學(xué)植物組織培養(yǎng)室種植菠菜。種植前先將種子進(jìn)行人工春化(4 ℃,7 d左右),然后播種于含有培養(yǎng)土和蛭石(培養(yǎng)土、蛭石體積比為1 ∶[KG-*3]1.5)的土壤中(混合后放入植物組織培養(yǎng)室常用的小型花盆中),并給予充足的水分。培養(yǎng)條件為光照14~16 h、黑暗8~10 h的長(zhǎng)日照,均采用日光燈管照明,經(jīng)照度計(jì)檢測(cè)光照度為3 000 lx,培養(yǎng)溫度(20±2)℃,直至全部正常開花。

    1.2試驗(yàn)方法

    1.2.1赤霉素處理

    將種植的菠菜隨機(jī)分為2組,試驗(yàn)組和對(duì)照組,每組均為100株。對(duì)試驗(yàn)組進(jìn)行處理,根據(jù)前期學(xué)者研究結(jié)果[1],將赤霉素處理濃度定為50 mg/L,對(duì)每株菠菜植株均勻噴灑赤霉素,對(duì)照組則噴水。每隔3 d用同一濃度赤霉素處理1次,處理后觀察植株的變化,隨后均正常澆水。試驗(yàn)組由于每棵植株開花時(shí)間略有差異,因此每隔2 d統(tǒng)計(jì)1次,統(tǒng)計(jì)時(shí)嚴(yán)格按照菠菜雌雄植株開花特點(diǎn),準(zhǔn)確區(qū)分絕對(duì)雌株、絕對(duì)雄株及兩性株,直至試驗(yàn)組和對(duì)照組菠菜植株均全部正常開花。

    1.2.2性反轉(zhuǎn)植株的分子檢測(cè)

    為了檢測(cè)性反轉(zhuǎn)產(chǎn)生的分子機(jī)制,進(jìn)行如下處理:在赤霉素處理之前,剪取培養(yǎng)約2周的菠菜葉片,用改良的2×CTAB法提取每株菠菜的DNA[9-10],用菠菜Y染色體緊密連鎖的雄性特異標(biāo)記T11A分子標(biāo)記[11]鑒定菠菜的原始性別,引物序列為T11A-F,5′-CCCTAATTAACTCCTCTTTACCCAA-3′;T11A-R,5′-TACAAGCCCCATTATCATAACAGTC-3′。T11A反應(yīng)體系(20 μL)為0.5 μL上游引物,0.5 μL下游引物,14.4 μL H2O,2 μL buffer,1.5 μL dNTP,0.1 μL Taq DNA聚合酶;其擴(kuò)增程序?yàn)?4 ℃ 2 min,94 ℃ 15 s,56 ℃ 30 s,72 ℃ 1 min,72 ℃ 10 min,4 ℃恒溫;另外,對(duì)赤霉素處理后的菠菜植株的開花情況進(jìn)行性別統(tǒng)計(jì),將統(tǒng)計(jì)結(jié)果與處理前鑒定的菠菜原始性別進(jìn)行比較,找出發(fā)生性別反轉(zhuǎn)的植株,保存葉片,提取DNA,并再次利用T11A對(duì)性反轉(zhuǎn)植株進(jìn)行鑒定,并借助瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)處理前后條帶變化情況。

    2結(jié)果與分析

    [HTK]2.1赤霉素處理對(duì)菠菜性別分化的影響[HT]

    赤霉素處理后菠菜形態(tài)特征產(chǎn)生一些變化,與對(duì)照組相比,試驗(yàn)組在第1次處理后植株有了明顯的生長(zhǎng),表現(xiàn)為植株莖稈變長(zhǎng)、明顯粗壯、開花期提前。

    赤霉素處理對(duì)菠菜性別分化的影響也非常明顯,如表1所示,與對(duì)照組相比,試驗(yàn)組雌雄比例(1.33)明顯大于對(duì)照組(0.96)。另外,在發(fā)生性反轉(zhuǎn)植株中,雌株轉(zhuǎn)變?yōu)樾壑昱c雄株轉(zhuǎn)變?yōu)榇浦甑谋壤秊?.14,結(jié)果表明50 mg/L赤霉素對(duì)雌雄異株菠菜的性別分化有明顯的影響,既有利于雌株的分化又有利于雄株的分化。

    3討論

    關(guān)于植物的性別分化,分子水平上的研究結(jié)果表明,植物的性別分化就是性別決定基因在誘導(dǎo)信號(hào)等作用下,發(fā)生去阻遏作用,使特異基因選擇性地表達(dá),從而實(shí)現(xiàn)性別分化程序表達(dá)的過程[2]。赤霉素作為一種誘導(dǎo)信號(hào),在高等植物的各個(gè)生長(zhǎng)發(fā)育階段都具有重要的調(diào)控作用[3]。外源赤霉素常常用作調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)和性別分化。赤霉素經(jīng)常被認(rèn)為是男性荷爾蒙,赤霉素處理可以誘導(dǎo)黃瓜和菠菜的雌株雄性化[12]。在番木瓜上噴施赤霉素抑制劑,可以誘導(dǎo)雄株上出現(xiàn)心皮發(fā)育,說明了赤霉素在保持番木瓜雄性特征中的作用[13]。

    性反轉(zhuǎn)是指生物個(gè)體從一種性別特征轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪环N相反的性別特征的性別轉(zhuǎn)變現(xiàn)象。這一現(xiàn)象在動(dòng)物中比較常見,也研究的比較透徹。李尚偉等利用抑制性差減雜交技術(shù)(SSH),結(jié)合SMART cDNA合成和RACE-PCR方法,從性反轉(zhuǎn)雄魚性腺中克隆到鈣調(diào)蛋白基因(ECaM),進(jìn)一步分析表明ECaM基因可能是促使石斑魚由雌向雄轉(zhuǎn)變的重要功能基因之一[14]。劉曉翌等探討了人類性反轉(zhuǎn)綜合征發(fā)生與性別分化相關(guān)基因[WTBX][STBX]SRY、SOX9[WTBZ][STBZ]之間的關(guān)系,研究結(jié)果表明SRY易位是導(dǎo)致性反轉(zhuǎn)發(fā)生的重要原因之一,某些性反轉(zhuǎn)的發(fā)生可能與[WTBX][STBX]SOX9[WTBZ][STBZ]基因異常有關(guān)[15]。性反轉(zhuǎn)現(xiàn)象在植物中也時(shí)有發(fā)生,但是對(duì)其分子機(jī)理研究未見相關(guān)報(bào)道。本研究利用菠菜Y染色體緊密連鎖雄性特異的T11A分子標(biāo)記對(duì)菠菜性反轉(zhuǎn)植株進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果表明,赤霉素處理菠菜可以導(dǎo)致雌株轉(zhuǎn)變?yōu)樾壑?,也可以?dǎo)致雄株轉(zhuǎn)變?yōu)榇浦?;雌株轉(zhuǎn)變雄株,雄性特異條帶出現(xiàn);雄株轉(zhuǎn)變?yōu)榇浦辏坌蕴禺悧l帶消失。目前,未有決定菠菜性別基因克隆的報(bào)道,如果利用抑制性差減雜交技術(shù)篩選到菠菜性反轉(zhuǎn)前后的差異表達(dá)基因,將可能會(huì)為揭示菠菜發(fā)生性反轉(zhuǎn)的分子機(jī)制提供線索。此外,在菠菜性反轉(zhuǎn)過程中,Y染色體緊密連鎖雄性特異的T11A分子標(biāo)記為什么會(huì)出現(xiàn)或者消失,以及其與性別決定基因的關(guān)系還需要進(jìn)一步進(jìn)行深入研究。

    參考文獻(xiàn):

    [1]曹宗巽,梅慧生,楊中漢,等. 赤霉素和乙烯利對(duì)菠菜性別表現(xiàn)的控制及其與同工酶的關(guān)系[J]. 植物生理學(xué)報(bào),1980,6(2):150-156.

    [2]Chailakhyan M K,Khryanin V N. The role of leaves in sex expression in hemp and spinach[J]. Planta,1979,144(2):205-207.

    [3]El-Gizawy A M,El-Oksh I,Sharaf A,et al. Effect of gibberellic acid and alar on flowering and seed yield of spinach[J]. Egytian Journal of Horticulture,1992,19(2):191-200.

    [4]Sherry R A,Eckard K J,Lord E M. Flower development in dioecious Spinacia oleracea(Chenopodiaceae)[J]. American Journal of Botany,1993,80(3):283-291.

    [5]Pike L M,Peterson C E. Gibberellin A4/A7,for induction of staminate flowers on the gynoecious cucumber(Cucumis sativus L.)[J]. Euphytica,1969,18(1):106-109.

    [6]皮雪靜,潘幫珍,徐增富. 赤霉素誘導(dǎo)小桐子產(chǎn)生兩性花[J]. 植物分類與資源學(xué)報(bào),2013,35(1):26-32.

    [7][JP2]Hansen D J,Bellman S K,Sacher R M. Gibberellic acid-controlled [JP3]sex expression of corn tassels[J]. Crop Science,1976,16(3):371-374.[JP][ZK)][HT][HJ][HT][FL)][LM]

    [HT8.]

    [8]Tanimoto T. Modification of sex expression in Sagittaria latifolia by the application of gibberellic acid and paclobutrazol[J].Journal of the Japanese Society for Horticultural Science,2007,76(1):47-53.

    [9]宋國(guó)立,崔榮霞,王坤波,等. 改良CTAB法快速提取棉花DNA[J]. 棉花學(xué)報(bào),1998,10(5):273-275.[ZK)]

    [10][JP2]Olexová L,Lubomira D,Kuchta T. Comparison of three types of methods for the isolation of DNA from flours,biscuits and instant paps[J]. European Food Research and Technology,2004,218(4):390-393.[JP]

    [11]Onodera Y,Yonaha I,Niikura S,et al. Monoecy and gynomonoecy in Spinacia oleracea L.:morphological and genetic analyses[J]. Scientia Horticulturae,2008,118(3):266-269.

    [12]Chailakhyan M K. Genetic and hormonal regulation of growth,flowering,and sex expression in plants[J]. American Journal of Botany,1979,66(6):717-736.

    [13]Kumar A,Jaiswal V S. Sex reversal and fruit formation on male plants of Carica papaya L by ethrel and chlorflurenol[J]. Proceedings:Plant Sciences,1984,93(6):635-641.

    [14]李尚偉,文建軍,劉世貴,等. 石斑魚性反轉(zhuǎn)相關(guān)基因ECaM的克隆及表達(dá)特征分析[J]. 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展,2005,32(2):147-153.

    [15]劉曉翌,付姣,肖曉素,等. 性反轉(zhuǎn)綜合征患者[WTBX][STBX]SRY、SOX9[WTBZ][STBZ]基因檢測(cè)[J]. 中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志,2008(9):30-31.

    猜你喜歡
    赤霉素菠菜
    不同濃度赤霉素處理對(duì)分蘗洋蔥實(shí)生苗生長(zhǎng)發(fā)育的影響
    吉林蔬菜(2022年4期)2022-11-04 07:22:20
    菠菜用肥料要謹(jǐn)慎
    冬鮮菠菜
    買菠菜
    麻油拌菠菜治療便秘
    低溫及赤霉素處理對(duì)絲綿木種子萌發(fā)的影響
    菠菜花生米
    菠菜含鐵
    小麥dms突變體株高與赤霉素代謝的關(guān)系
    赤霉素對(duì)亞高溫脅迫下番茄花柱外露及相關(guān)基因表達(dá)的影響
    国产亚洲精品一区二区www | 女性被躁到高潮视频| 国产免费现黄频在线看| 大型黄色视频在线免费观看| 亚洲欧美一区二区三区久久| 操美女的视频在线观看| 亚洲一码二码三码区别大吗| 久热这里只有精品99| 国产亚洲av高清不卡| 最近最新中文字幕大全电影3 | 人妻一区二区av| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 国产成+人综合+亚洲专区| 夫妻午夜视频| 男人操女人黄网站| 丝袜美腿诱惑在线| 午夜福利乱码中文字幕| 一边摸一边做爽爽视频免费| 激情在线观看视频在线高清 | 国产精品亚洲一级av第二区| 一级毛片女人18水好多| 日本vs欧美在线观看视频| x7x7x7水蜜桃| 国产av又大| 国产黄色免费在线视频| 亚洲九九香蕉| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 亚洲成人免费电影在线观看| 国产亚洲av高清不卡| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 国产单亲对白刺激| 高清黄色对白视频在线免费看| 高清视频免费观看一区二区| 黄色女人牲交| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 九色亚洲精品在线播放| 色播在线永久视频| 在线播放国产精品三级| e午夜精品久久久久久久| 老鸭窝网址在线观看| 久久久久久久久久久久大奶| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 国产真人三级小视频在线观看| 新久久久久国产一级毛片| 一本大道久久a久久精品| 最近最新中文字幕大全电影3 | 99热只有精品国产| 国产精品乱码一区二三区的特点 | av中文乱码字幕在线| 久久人妻av系列| 99热国产这里只有精品6| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 在线永久观看黄色视频| 久久国产乱子伦精品免费另类| 亚洲精品中文字幕在线视频| 欧美日韩av久久| 一级黄色大片毛片| 精品少妇久久久久久888优播| 午夜成年电影在线免费观看| 91av网站免费观看| 宅男免费午夜| 午夜影院日韩av| 丰满饥渴人妻一区二区三| netflix在线观看网站| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 国产成人精品无人区| 99精品欧美一区二区三区四区| 国产深夜福利视频在线观看| 久久草成人影院| 大香蕉久久成人网| 成年人黄色毛片网站| 十八禁人妻一区二区| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 乱人伦中国视频| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 在线观看免费高清a一片| 国产男女内射视频| 大码成人一级视频| 婷婷丁香在线五月| 少妇的丰满在线观看| 在线观看午夜福利视频| 日本精品一区二区三区蜜桃| 国产不卡一卡二| 亚洲精品在线观看二区| 男女午夜视频在线观看| 一区福利在线观看| 国产高清视频在线播放一区| 色婷婷久久久亚洲欧美| 韩国av一区二区三区四区| 大片电影免费在线观看免费| 精品午夜福利视频在线观看一区| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 国产在线精品亚洲第一网站| xxx96com| 两个人看的免费小视频| 精品国内亚洲2022精品成人 | 夜夜躁狠狠躁天天躁| 国产成人av教育| 夜夜夜夜夜久久久久| √禁漫天堂资源中文www| 人妻久久中文字幕网| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 亚洲av第一区精品v没综合| 欧美激情极品国产一区二区三区| 亚洲精品粉嫩美女一区| 无遮挡黄片免费观看| 99国产极品粉嫩在线观看| 午夜91福利影院| 精品久久久久久久久久免费视频 | 午夜福利在线免费观看网站| 久久久久久久午夜电影 | 两个人免费观看高清视频| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 亚洲片人在线观看| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 涩涩av久久男人的天堂| ponron亚洲| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 老司机深夜福利视频在线观看| 国产成人精品久久二区二区免费| 黑人欧美特级aaaaaa片| 高清在线国产一区| 成熟少妇高潮喷水视频| 老司机午夜十八禁免费视频| 99香蕉大伊视频| 国产精品偷伦视频观看了| 久久久久久久精品吃奶| 久久中文字幕一级| 成人亚洲精品一区在线观看| 成年人免费黄色播放视频| 日本精品一区二区三区蜜桃| 一区福利在线观看| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 国产成人系列免费观看| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 999精品在线视频| 免费日韩欧美在线观看| 国产精品99久久99久久久不卡| 亚洲一区中文字幕在线| 精品国产亚洲在线| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 又黄又爽又免费观看的视频| 亚洲中文字幕日韩| 精品国产亚洲在线| 国产一区二区三区视频了| 一本综合久久免费| 一区二区三区国产精品乱码| 国产成人免费无遮挡视频| 国产免费男女视频| 动漫黄色视频在线观看| 日韩中文字幕欧美一区二区| 亚洲一区中文字幕在线| 水蜜桃什么品种好| 美女国产高潮福利片在线看| 热re99久久国产66热| 国产精品1区2区在线观看. | 精品人妻1区二区| 女人久久www免费人成看片| 99在线人妻在线中文字幕 | 成人三级做爰电影| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 中文字幕av电影在线播放| 无限看片的www在线观看| 一本综合久久免费| 看黄色毛片网站| av电影中文网址| netflix在线观看网站| 精品国产亚洲在线| 啦啦啦免费观看视频1| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 久久久久久人人人人人| av线在线观看网站| 一级a爱片免费观看的视频| 精品一品国产午夜福利视频| 黄色女人牲交| 天堂√8在线中文| av有码第一页| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 老鸭窝网址在线观看| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 精品电影一区二区在线| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 嫩草影视91久久| av中文乱码字幕在线| 一级a爱片免费观看的视频| 精品一品国产午夜福利视频| 欧美午夜高清在线| 十八禁网站免费在线| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 国产免费现黄频在线看| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 香蕉丝袜av| 久久久久久久久久久久大奶| 在线观看免费日韩欧美大片| cao死你这个sao货| 欧美成狂野欧美在线观看| 精品无人区乱码1区二区| 黑人猛操日本美女一级片| 高潮久久久久久久久久久不卡| 老司机深夜福利视频在线观看| 日本黄色视频三级网站网址 | 欧美黄色片欧美黄色片| 午夜福利,免费看| 啦啦啦 在线观看视频| 久久性视频一级片| 国产精品永久免费网站| 亚洲一区二区三区不卡视频| 老司机亚洲免费影院| 日韩中文字幕欧美一区二区| 波多野结衣av一区二区av| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 久久久久久久久久久久大奶| 一级作爱视频免费观看| aaaaa片日本免费| 亚洲成a人片在线一区二区| 精品久久蜜臀av无| 99国产精品99久久久久| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 亚洲国产精品sss在线观看 | 午夜免费鲁丝| 午夜日韩欧美国产| 欧美日韩精品网址| 国产日韩欧美亚洲二区| 另类亚洲欧美激情| 久久中文字幕一级| 69精品国产乱码久久久| 91大片在线观看| 欧美性长视频在线观看| 国产99白浆流出| 精品一区二区三卡| 俄罗斯特黄特色一大片| 免费看十八禁软件| bbb黄色大片| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 国产精品99久久99久久久不卡| 国产一区有黄有色的免费视频| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 国产成人精品在线电影| 日本a在线网址| 91国产中文字幕| 国产精品免费大片| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产精品免费视频内射| 三上悠亚av全集在线观看| 国产不卡一卡二| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 国产精品久久视频播放| 精品国产一区二区久久| 国产精品欧美亚洲77777| 9191精品国产免费久久| 一区二区三区激情视频| 日韩成人在线观看一区二区三区| 精品久久久久久,| 女人久久www免费人成看片| cao死你这个sao货| 制服诱惑二区| 精品午夜福利视频在线观看一区| 国产人伦9x9x在线观看| 99久久99久久久精品蜜桃| 一区二区三区精品91| 在线观看日韩欧美| 大片电影免费在线观看免费| 国产精品电影一区二区三区 | 宅男免费午夜| 精品国产乱码久久久久久男人| 亚洲五月婷婷丁香| 首页视频小说图片口味搜索| 欧美久久黑人一区二区| 一本大道久久a久久精品| 国产99白浆流出| 日本欧美视频一区| 99在线人妻在线中文字幕 | 欧美乱码精品一区二区三区| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 深夜精品福利| 色精品久久人妻99蜜桃| 久久久久视频综合| 超碰成人久久| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 一二三四社区在线视频社区8| 欧美成狂野欧美在线观看| 校园春色视频在线观看| 国产精品电影一区二区三区 | 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 午夜精品在线福利| 亚洲情色 制服丝袜| 亚洲三区欧美一区| 久久狼人影院| 欧美日韩乱码在线| 国产97色在线日韩免费| 亚洲av片天天在线观看| 午夜精品国产一区二区电影| 国产一区二区激情短视频| 大香蕉久久成人网| 两人在一起打扑克的视频| 午夜免费鲁丝| 久热爱精品视频在线9| 黄色女人牲交| 国产精品久久视频播放| 高清在线国产一区| 亚洲三区欧美一区| 亚洲熟妇熟女久久| 超色免费av| 成年女人毛片免费观看观看9 | 国产精品99久久99久久久不卡| 精品亚洲成国产av| 大陆偷拍与自拍| 亚洲综合色网址| 亚洲成人手机| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 亚洲中文av在线| bbb黄色大片| 欧美乱码精品一区二区三区| 日韩成人在线观看一区二区三区| 久久中文字幕一级| 国产亚洲欧美98| 午夜91福利影院| 在线观看一区二区三区激情| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 亚洲人成伊人成综合网2020| xxxhd国产人妻xxx| 午夜精品国产一区二区电影| 大香蕉久久网| 极品人妻少妇av视频| 窝窝影院91人妻| 三上悠亚av全集在线观看| 国产欧美日韩精品亚洲av| 日韩人妻精品一区2区三区| 久久久久视频综合| 欧美日韩av久久| 精品国产美女av久久久久小说| 大香蕉久久成人网| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 免费看a级黄色片| 国产成人精品在线电影| 国产成人av教育| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 12—13女人毛片做爰片一| 亚洲男人天堂网一区| 人成视频在线观看免费观看| 国产精华一区二区三区| 国产在线精品亚洲第一网站| 超碰97精品在线观看| 免费少妇av软件| 大陆偷拍与自拍| x7x7x7水蜜桃| 亚洲中文日韩欧美视频| 午夜精品国产一区二区电影| 男女床上黄色一级片免费看| 国产成人影院久久av| 久久久久精品国产欧美久久久| 午夜激情av网站| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 欧美黄色淫秽网站| 午夜91福利影院| 99国产极品粉嫩在线观看| 久久久国产精品麻豆| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 亚洲精品av麻豆狂野| 欧美日韩亚洲高清精品| 日本黄色日本黄色录像| 久9热在线精品视频| 久久青草综合色| 久久婷婷成人综合色麻豆| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 免费观看a级毛片全部| 91在线观看av| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 成年人黄色毛片网站| 久久青草综合色| 亚洲全国av大片| 色94色欧美一区二区| 免费观看a级毛片全部| 国产成人av激情在线播放| 精品人妻1区二区| 亚洲五月天丁香| 窝窝影院91人妻| 久久国产乱子伦精品免费另类| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 国产单亲对白刺激| 国产精品久久久av美女十八| 老鸭窝网址在线观看| 免费在线观看日本一区| 久久久国产欧美日韩av| 一级,二级,三级黄色视频| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 亚洲伊人色综图| 大型av网站在线播放| 国产成人啪精品午夜网站| 国产精品99久久99久久久不卡| 在线免费观看的www视频| 两人在一起打扑克的视频| 成年版毛片免费区| 在线天堂中文资源库| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 精品福利观看| 久久中文看片网| 免费观看a级毛片全部| 在线观看舔阴道视频| 精品国产一区二区三区四区第35| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 美女福利国产在线| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 国产色视频综合| 欧美乱色亚洲激情| 亚洲熟妇中文字幕五十中出 | 电影成人av| av天堂久久9| 热re99久久精品国产66热6| 99精国产麻豆久久婷婷| 成年女人毛片免费观看观看9 | 成人国产一区最新在线观看| 满18在线观看网站| 丰满迷人的少妇在线观看| videos熟女内射| 亚洲av日韩在线播放| av天堂久久9| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 正在播放国产对白刺激| av天堂在线播放| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 一区二区三区国产精品乱码| 国产在线观看jvid| 麻豆av在线久日| 精品久久久久久久久久免费视频 | 91老司机精品| 午夜影院日韩av| 18在线观看网站| 午夜日韩欧美国产| 在线观看免费视频网站a站| 成年人黄色毛片网站| netflix在线观看网站| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 欧美日韩视频精品一区| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 亚洲熟妇中文字幕五十中出 | 美女 人体艺术 gogo| 麻豆乱淫一区二区| 国产av精品麻豆| 91麻豆av在线| 九色亚洲精品在线播放| 精品人妻熟女毛片av久久网站| av片东京热男人的天堂| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 天堂√8在线中文| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 在线观看66精品国产| 亚洲精品美女久久av网站| 亚洲一区高清亚洲精品| 女同久久另类99精品国产91| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 老司机午夜福利在线观看视频| 久久国产精品影院| av有码第一页| av网站在线播放免费| 婷婷成人精品国产| 日韩欧美免费精品| 久久影院123| 精品国产一区二区三区四区第35| 在线观看日韩欧美| 757午夜福利合集在线观看| 99国产精品免费福利视频| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 乱人伦中国视频| 中文欧美无线码| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 免费高清在线观看日韩| 制服人妻中文乱码| 日韩欧美国产一区二区入口| av超薄肉色丝袜交足视频| 热re99久久国产66热| 久久中文看片网| 久久久久国产一级毛片高清牌| 少妇粗大呻吟视频| 又大又爽又粗| 下体分泌物呈黄色| 久久中文字幕一级| 脱女人内裤的视频| 在线观看免费视频网站a站| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 国产精品亚洲一级av第二区| 精品免费久久久久久久清纯 | 亚洲国产精品sss在线观看 | 亚洲久久久国产精品| 中文字幕色久视频| 激情视频va一区二区三区| 黄频高清免费视频| 亚洲精品av麻豆狂野| 国产蜜桃级精品一区二区三区 | 久久久久久久国产电影| 在线观看免费日韩欧美大片| 曰老女人黄片| 国产av精品麻豆| 免费观看精品视频网站| 国产一区在线观看成人免费| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 中文亚洲av片在线观看爽 | 亚洲色图综合在线观看| 欧美黑人欧美精品刺激| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 99国产极品粉嫩在线观看| 久9热在线精品视频| 日韩中文字幕欧美一区二区| 一级,二级,三级黄色视频| 岛国在线观看网站| 久久中文字幕人妻熟女| xxxhd国产人妻xxx| 国产欧美日韩一区二区三| 成人三级做爰电影| 亚洲美女黄片视频| 欧美日韩福利视频一区二区| 又紧又爽又黄一区二区| 午夜亚洲福利在线播放| 欧美乱妇无乱码| 国产精品国产高清国产av | 啦啦啦在线免费观看视频4| 国产精品免费一区二区三区在线 | 亚洲专区字幕在线| 久久精品人人爽人人爽视色| 9色porny在线观看| 亚洲片人在线观看| 欧美成人免费av一区二区三区 | 国产亚洲欧美在线一区二区| 久久热在线av| 亚洲成人国产一区在线观看| www.精华液| 午夜福利视频在线观看免费| 99精品久久久久人妻精品| 国产亚洲精品久久久久久毛片 | 亚洲欧美一区二区三区久久| 啦啦啦 在线观看视频| 欧美久久黑人一区二区| 黄色女人牲交| 大片电影免费在线观看免费| 精品亚洲成国产av| 国产国语露脸激情在线看| 亚洲精品中文字幕在线视频| 高清毛片免费观看视频网站 | 午夜成年电影在线免费观看| 日韩成人在线观看一区二区三区| 国产极品粉嫩免费观看在线| 久久香蕉精品热| 母亲3免费完整高清在线观看| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 久久精品人人爽人人爽视色| 高潮久久久久久久久久久不卡| 久久精品国产清高在天天线| 国产激情久久老熟女| tube8黄色片| 极品人妻少妇av视频| 精品电影一区二区在线| 午夜精品在线福利| 一区二区三区激情视频| 1024视频免费在线观看| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 男女之事视频高清在线观看| 久久精品国产综合久久久| 国产亚洲欧美在线一区二区| 午夜免费鲁丝| 天堂动漫精品| 欧美精品av麻豆av| 午夜福利一区二区在线看| 高清av免费在线| 国产xxxxx性猛交| 久久草成人影院| 久久国产乱子伦精品免费另类| 亚洲欧美激情综合另类| 成人国产一区最新在线观看| 亚洲人成电影免费在线| 少妇粗大呻吟视频| 波多野结衣一区麻豆| 欧美日韩黄片免| 香蕉国产在线看| 不卡一级毛片| 波多野结衣一区麻豆| 不卡一级毛片| 亚洲熟女精品中文字幕| 亚洲精品国产区一区二| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 亚洲欧美激情在线| a在线观看视频网站| 国产视频一区二区在线看| 亚洲一区二区三区欧美精品| 久热爱精品视频在线9| 亚洲五月天丁香| 久久久久久免费高清国产稀缺| 国产极品粉嫩免费观看在线| 十八禁高潮呻吟视频| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 亚洲精品在线美女| 亚洲人成电影观看| 亚洲成人免费电影在线观看| 两性夫妻黄色片| 18禁观看日本| 很黄的视频免费| 精品久久久久久,| av网站在线播放免费| 国产蜜桃级精品一区二区三区 | 国产成人系列免费观看| 亚洲精品乱久久久久久| 天天影视国产精品| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 久久久精品免费免费高清| 欧美国产精品一级二级三级| 18禁国产床啪视频网站| 我的亚洲天堂| 色94色欧美一区二区|