油茶果殼化學成分研究

陳仕平，黃燕，吳磊，吳靜

（1.江西省科學院，江西南昌 330029；2.江西新世紀民星動物保健品有限公司，江西南昌 330096）

油茶果殼化學成分研究

陳仕平1，黃燕1，吳磊1，吳靜2

（1.江西省科學院，江西南昌 330029；2.江西新世紀民星動物保健品有限公司，江西南昌 330096）

目的：研究油茶果殼的化學成分。方法：采用硅膠柱、半制備柱、Sephadex LH-20以及重結(jié)晶等方法從油茶果殼中分離化合物，通過理化性質(zhì)和波譜學分析其化學結(jié)構(gòu)。結(jié)果：分離出5種化學物質(zhì)，分別鑒定為齊墩果酸（1）、皂皮酸（2）、齊墩果酸-3-O-β-D-葡萄糖苷（3）、大黃素（4）和柚皮苷（5）。結(jié)論：化合物2、3和5為首次從該植物中分離得到。

油茶果殼；化學成分；柱色譜

油茶（Camellia oleifera Abel）屬于山茶科植物，是一種經(jīng)濟價值很高的樹種，同時也是四大油料樹種之一，主要分布于廣西、湖南、江西等華南地區(qū)[1]。生物活性研究表明，油茶具有顯著的神經(jīng)保護作用、抗炎、抗菌、抗氧化以及抑制腫瘤等生物活性[2-5]。早期的研究主要集中在其根和種子，從中分離得到的化合物以三萜及三萜皂苷、黃酮和黃酮苷為主[6-7]。但對于油茶果殼的次級代謝產(chǎn)物研究只有極少報道[8]。在取出茶籽后，油茶果殼始終作為一種農(nóng)業(yè)廢棄物被丟棄而沒有得到充分的利用。

本研究以油茶果殼為研究對象，采用各種柱色譜技術(shù)，分離得到了5個化合物，分別鑒定為齊墩果酸（1）、皂皮酸（2）、齊墩果酸-3-O-β-D-葡萄糖苷（3）、大黃素（4）和柚皮苷（5），其中化合物2、3、5為首次從該植物中分離得到。

1 儀器與材料

BS224 S電子分析天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）；KQ-500B超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；Vacucella 22L真空干燥箱（德國MMM公司）；Direct-Q3CHAO超純水系統(tǒng)（美國密理博公司）；ALPHA 1-2LDPLUS冷凍干燥機（德國ALPHA公司）；Thermo LCQ Advanctage液相色譜儀-質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國Thermo Electron公司）；Bruker Avance 400 NMR核磁共振儀[美國布魯克（Bruker）公司]；CBIO21多功能暗箱式紫外分析儀（北京賽百奧科技有限公司）；Agilent 1260高效液相色譜儀（四元泵，柱溫箱，UV檢測器美國安捷倫公司)。

硅膠（100～200目，200～300目），均為青島海洋化工廠生產(chǎn)；葡聚糖凝膠Sephadex LH-20，GE Pharmacia公司生產(chǎn)；硅膠板，青島海洋生化工廠分廠生產(chǎn)(50mm×100mm，厚0.2～0.25mm)；反相分析色譜柱：ZORBAX ODS（5μm，150mm×4.6mm）安捷倫，美國；反相半制備色譜柱：ZORBAX ODS C18（5μm,250mm×9.4mm）安捷倫，美國；色譜溶劑系統(tǒng)：CHCl2/MeOH，PE/EtOAc（不同比例）；MeOH/H2O（不同比例）；TLC顯色劑；紫外燈，254～365nm；10%H2SO4乙醇溶液；所有化學試劑均為分析純。

油茶果殼由江西省恩泉油脂有限公司提供，經(jīng)江西省科學院天然產(chǎn)物研究室鑒定為油茶的干燥果殼。

2 提取與分離

油茶果殼干燥樣品4 523.23g經(jīng)粉碎后，采用80%乙醇為溶劑，室溫浸泡提取3次，每次3天。提取液合并、過濾、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)和冷凍干燥得粗提物342.56g，粗提物用適量的水超聲輔助打散，分別用正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇萃取。經(jīng)冷凍干燥分別得正己烷萃取相21.35g、二氯甲烷萃取相28.56g、乙酸乙酯萃取相50.56g、正丁醇萃取相70.25g和水相156.38g。取45g乙酸乙酯萃取相進行硅膠柱色譜分離，硅膠采用100～200目，流動相采用二氯甲烷-甲醇（99∶1→49∶1→19∶1→9∶1→4∶1→1∶1，v/v）→甲醇梯度洗脫，薄層色譜跟蹤，合并相同部分，得到10部分（COE-1→COE-10）；其中COE-2繼續(xù)使用硅膠（200～300目）進行柱色譜分離，流動相采用二氯甲烷-甲醇（50∶1→19∶1，v/v）部分進行洗脫，氮吹儀吹干，甲醇結(jié)晶得到化合物1（32.0mg）；COE-3、COE-5采用與COE-2相同的方法得到化合物2（15.0mg）和化合物3（24.0mg）；COE-7經(jīng)過Sephadex LH-20柱色譜，用甲醇-水（4∶1→1∶1，v/v）梯度洗脫得到5部分(COE-7-1→COE-7-5)，COE-7-3繼續(xù)采用Sephadex LH-20柱色譜分離，得到化合物4（18.0mg）；COE-8經(jīng)過半制備液相色譜分離，得到化合物5（35.0mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物 1：白色粉末；C30H48O3；ESI-MS(m/z)：455[M-H]-；1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：5.28(1H,s,H-12),3.22(1H,d,J=7.1Hz,H-3),2.82(1H,d,J=11.1Hz,H-12)，0.90(3H,s,H-23),0.73(3H,s,CH3-24),0.75(3H,s,CH3-25),0.89(3H,s,CH3-26),1.15(3H,s,CH3-27),0.91(3H,s,CH3-29),0.97(3H,s,CH3-30)；13C-NMR(100MHz,CDCl3)δ：183.24(C-28),143.61(C-13),122.64(C-12),79.05(C-3),55.3(C-5),47.65(C-9),46.53(C-17),45.9(C-19),41.61(C-14),40.99(C-18),39.02(C-8),38.5(C-1),37.10(-C-10),33.81(C-21),33.01(C-29),32.51(C-22),32.54(C-7),30.67(C-20),28.71(C-23),27.7(C-15),27.3(C-2),25.40(C-27),23.81(C-30),23.40(C-16),22.93(C-11),18.30(C-6),17.30(C-26),15.50(C-25),15.30(C-24)。以上數(shù)據(jù)與文獻[9]報道對照基本一致，故鑒定該化合物齊墩果酸。

化合物 2：白色粉末；C30H46O5；ESI-MS(m/z)：487[M+H]+；1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：9.43(1H,s,H-23),5.45(1H,t,J=3.4Hz,H-12),4.46(1H,t,J=4.4,2.9Hz,H-16),3.80(1H,dd,J=5.4,9.5Hz,H-3),3.00(1H,dd,J=4.1,14.2Hz,H-18),2.24(1H,t,J=14.2Hz,H-19)，1.38(3H,s,CH3-27),1.08(3H,s,CH3-24),1.02(3H,s,CH3-25),0.93(3H,s,CH3-30),0.86(3H,s,CH3-29),0.82(3H,s,CH3-26)；13C-NMR(100MHz,CDCl3)δ：209.23(C-23),180.24(C-28),145.61(C-13),123.14(C-12),74.05(C-16),71.05(C-3),58.32(C-4),47.65(C-10),47.02(C-8),46.53(C-17),45.9(C-19),41.61(C-14),40.99(C-18),40.54(C-7),38.5(C-1),37.10(C-9),36.41(C-15),34.81(C-21),32.82(C-6),31.51(C-22),30.67(C-20),27.31(C-2),26.96(C-30),26.96(C-29),26.40(C-27),22.93(C-11),21.30(C-5),17.30(C-26),15.50(C-25),10.30(C-24)。以上數(shù)據(jù)與文獻[10]報道的皂皮酸數(shù)據(jù)相一致，故鑒定化合物2為皂皮酸。

化合物 3：白色粉末；C36H58O8；ESI-MS(m/z)：619[M+H]+；1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：5.41(1H,s,H-1'),5.29(1H,s,H-12),0.92(3H,s,H-23),0.74(3H,s,CH3-24),0.76(3H,s,CH3-25),0.90(3H,s,CH3-26),1.16(3H,s,CH3-27),0.92(3H,s,CH3-29),0.98(3H,s,CH3-30)；13C-NMR(100MHz,CDCl3)δ：180.26(C-28),144.10(C-13),123.01(C-12),103.44(C-1'),79.05(C-3),76.99(C-5'),76.47(C-3'),73.68(C-2'),70.46(C-4'),61.18(C-6'),55.30(C-5),47.66(C-9),-46.53(C-17),45.91(C-19),41.61(C-14),40.99(C-18),39.04(C-8),38.52(C-1),37.11(C-10),33.82(C-21),33.03(C-29),32.51(C-22),32.54(C-7),30.67(C-20),28.72(C-23),27.71(C-15),27.32(C-2),25.40(C-27),23.82(C-30),23.41(C-16),22.95(C-11),18.32(C-6),17.34(C-26),15.51(C-25),15.30(C-24)。以上數(shù)據(jù)與文獻[11]報道對照基本一致，故鑒定該化合物為齊墩果酸-3-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物 4：黃色粉末；C15H10O5；ESI-MS(m/z)：269[M–H]–；1H-NMR(400MHz,DMSO)δ：12.01(1H,s,1-OH),11.93(1H,s,3-OH),7.38(1H,s,H-5),7.07(1H,s,H-7),7.03(1H,d,J=2.2Hz,H-4),6.53(1H,d,J=2.2Hz,H-2),2.36(3H,s,CH3)；13C-NMR(100MHz,DMSO)δ：190.07(C-9),181.65(C-10),166.02(C-3),164.90(C-1),161.86(C-8),148.63(C-6),135.46(C-4a),133.17(C-10a),124.50(C-7),120.87(C-5),113.72(C-9a),109.32(C--8a),109.22(C-4),108.34(C-2),21.96(6-CH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻[12]報道對照基本一致，故鑒定該化合物為大黃素。

化合物5：白色固體；C27H31O14；ESI-MS(m/z)：579[M-H]–；1H-NMR(400MHz,DMSO)δ：12.06(1H,s,5-OH),9.62(1H,s,4'-OH),7.33(2H,dd,J=8.5,2.8Hz,H-2',6'),6.80(2H,d,J=8.0Hz,H-3',5'),6.18(2H,m,H-6,8),5.50(1H,td,J=13.6,2.3Hz,H-2),4.71(2H,dd,J=22.9,4.4Hz,H-1''),4.58(1H,d,J=4.4Hz,H-1'''),4.50(d,J=5.7Hz,1H),3.18–3.68(10H,m,H-2''–6'',H-2'''–5'''),3.20(2H,td,J=9.4,4.5Hz,H-3),1.16(3H,d,J=5.9Hz,H-6''')；13C-NMR(100MHz,DMSO)δ：197.70(C-4),165.28(C-7),163.51(C-5),163.2(C-9),158.30(C-4'),129.00(C-1'),128.9(C-2',6'),115.70(C-3',5'),103.80(C-10),100.88(C-1'''),97.87(C-1''),96.76(C-6),95.63(C-8),79.18(C-2),77.61(C-2''),77.33(C-3''),76.65(C-5''),72.32(C-4'''),70.91(C-2''',3'''),70.08(C-4''),68.75(C-5'''),60.94(C-6''),42.4(C-3),18.49(C-6''')。以上數(shù)據(jù)與文獻[13]報道一致，故鑒定化合物5為柚皮苷。

[1]鄔靖宇,曹清明,鐘海雁.油茶葉黃酮類化合物研究進展[J].食品與機械,2014(6):243-246.

[2]Hu J L,Nie S P,Huang D F,et al.Extraction of saponin from Camellia oleifera cake and evaluation of its antioxidant activity[J].International journal of food science &technology,2012,47(8):1676-1687.

[3]淦永鑒,李旭,楊莉琳,等.油茶籽殼提取物抗氧化及抗癌活性研究[J].食品工業(yè)科技,2015,36(8):171-174.

[4]Cheng Y T,Wu S L,Ho C Y,et al.Beneficial effects of camellia oil(Camellia oleiferaAbel.) on ketoprofen-induced gastrointestinal mucosal damage through upregulation of HO-1 and VEGF[J].Journal of agricultural and food chemistry,2014,62(3):642-650.

[5]李紅冰,陳躍龍,石海峰,等.油茶種子抗腫瘤有效部位群化學成分含量的分析方法[J].時珍國醫(yī)國藥,2008,19(7):1610-1612.

[6]陳躍龍,馮寶民,唐玲,等.油茶葉的化學成分[J].沈陽藥科大學學報,2010,27(4):292-294,324.

[7]鄢慶偉,鐘瑞建,周國平,等.油茶莖化學成分研究[J].中藥材,2015(10):2102-2104.

[8]王玲瓊,徐巧林,董麗梅,等.油茶果殼化學成分研究[J].熱帶亞熱帶植物學報,2017,25(1):81-86.

[9]Yong J,Wu X,Lu C.Chemical constituents isolated from the fruits ofLonicera maackii[J].Chemistry of Natural Compounds,2014,4(50):765-766.

[10]Jia Z,Koike K,Kudo M,et al.Triterpenoid saponins and sapogenins fromVaccaria segetalis[J].Phytochemistry,1998,48(3):529-536.

[11]Umbetova AK,Choudhary MI,Burasheva GS,et al.Biologically active substances fromCamphorosma monspeliacum[J].Chemistry of natural compounds,2005,41(6):726-727.

[12]Yang L,Zeng S,Li Z H,et al.Chemical Components of the Leaves ofSiraitia grosvenorii[J].Chemistry of Natural Compounds,2016,52(5):891-892.

[13]許有瑞,張可鋒,謝親建,等.沙田柚幼果化學成分研究[J].中藥材,2015(9):1879-1881.

Chemical Constituents from Fruit Shells of Camellia oleifera

Chen Shi-ping1,Huang Yan1,Wu lei1,Wu Jing2
(1.Jiangxi Academy of Sciences,Jiangxi Nanchang 330029;2.Jiangxi New Century Animal Health Products Co.,Ltd.,Jiangxi Nanchang 330096)

Objective:To study the chemical constituents of Camellia oleifera Abel.fruit shells.Methods:The compounds were isolated and purified from C.oleifera fruit shells by various column chromatographic techniques.Their chemical structures were elucidated on the basis of spectroscopic data analysis and physicochemical properties.Results:Five compounds were isolated and identified as oleanolic acid (1),quillaic acid (2),oleanolic acid -3-O-β-D-glucopyranoside (3),emodin (4),and naringoside (5).Conclusion:Compounds 2,3,5 were isolated for the first time from C.oleifera.

Camellia oleifera Abel.fruit shells;Chemical constituents;column chromatographic

R284 文獻標志碼：A

2096-0387（2017）06-0021-03

國家自然基金（31260400）。

陳仕平(1977—)，男，江西萬年人，碩士，助理研究員，研究方向：科技管理。