三亞某醫(yī)院血流感染病原菌分布及耐藥性

李志霞，王玉豐，許 麗，趙 梅, 邢曉為

(1 海南省第三人民醫(yī)院，海南 三亞 572000； 2 海南醫(yī)學院，海南 ?？?571012； 3 中南大學湘雅三醫(yī)院醫(yī)學實驗中心，湖南 長沙 410013)

·論著·

三亞某醫(yī)院血流感染病原菌分布及耐藥性

李志霞1，王玉豐1，許 麗2，趙 梅1, 邢曉為3

(1 海南省第三人民醫(yī)院，海南 三亞 572000； 2 海南醫(yī)學院，海南 ?？?571012； 3 中南大學湘雅三醫(yī)院醫(yī)學實驗中心，湖南 長沙 410013)

目的 了解三亞地區(qū)某醫(yī)院血流感染病原菌分布及其耐藥情況。方法 回顧性分析該院2013年1月—2015年12月臨床送檢血培養(yǎng)標本及藥敏試驗結果。結果 3 195份血培養(yǎng)標本共檢出陽性病原菌356株，陽性率為11.14%，其中革蘭陰性菌215株(占60.39%)，革蘭陽性菌122株(占34.27%)，真菌19株(占5.34%)。革蘭陰性菌分離菌株數(shù)較多的是大腸埃希菌(90株，25.28%)、肺炎克雷伯菌(60株，16.85%)及假鼻疽伯克霍爾德菌(24株，6.74%)；革蘭陽性菌則以金黃色葡萄球菌(42株，11.80%)、凝固酶陰性葡萄球菌(38株，10.67%)及鏈球菌屬細菌(33株，9.27%)居多。大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌對頭孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星及碳青霉烯類耐藥率低于10.00% 。假鼻疽伯克霍爾德菌對多數(shù)抗菌藥物的耐藥率低于10.00%。主要革蘭陽性菌未檢測出耐利奈唑胺及萬古霉素的菌株。結論 近期該院血流感染病原菌以革蘭陰性菌為主，尤其假鼻疽伯克霍爾德菌的分離率較其他地區(qū)高，應引起臨床重視。

血流感染; 血培養(yǎng); 病原菌; 耐藥性； 抗藥性，微生物

[Chin J Infect Control，2017，16(3)：221-224]

近年來，由于濫用抗菌藥物、免疫抑制劑使用及外科手術劇增等原因，血流感染的病原菌譜及耐藥性較前均發(fā)生了較大變化[1]。血培養(yǎng)作為醫(yī)學檢驗一項常規(guī)檢查，至今仍是臨床診斷血流感染的“金標準”[2]。通過血培養(yǎng)不僅能明確病原菌，還能提供針對病原菌的藥敏結果，為臨床選擇合適抗菌藥物提供依據(jù)。本研究對海南省第三人民醫(yī)院2013—2015年血培養(yǎng)病原菌譜及耐藥性進行分析，以期為臨床抗感染治療提供幫助。

1 資料與方法

1.1 菌株來源 來自于2013年1月—2015年12月海南省第三人民醫(yī)院各科室送檢的3 195份血標本，剔除同一患者檢出的重復菌株。

1.2 標本采集及培養(yǎng) 無菌采集疑似血流感染患者的靜脈血5～10 mL至BACT/ALERT專用需氧、厭氧培養(yǎng)瓶，立即送檢。所有患者均要求雙側雙瓶送檢(兩個不同部位，各送檢一套需氧及厭氧培養(yǎng)瓶)。培養(yǎng)瓶置于BACT/ALERT3D自動化血培養(yǎng)儀(梅里埃公司產品)中培養(yǎng)。培養(yǎng)儀報警顯示陽性后，取出涂片、革蘭染色，同時轉種血平板、巧克力培養(yǎng)基、沙保羅培養(yǎng)基等，35℃孵育18～24 h。若培養(yǎng)瓶5 d未見報警，轉種無細菌生長，則判斷為培養(yǎng)陰性。

1.3 菌株鑒定及藥敏試驗 取轉種血平板上可疑菌落做涂片、革蘭染色、鏡檢，革蘭陽性菌做觸酶試驗，革蘭陰性菌做氧化酶試驗。根據(jù)菌落及菌株特征，選擇接種VITEK 2 Compact配套試劑卡進行菌株鑒定；分離細菌菌株采用K-B法進行藥敏試驗。質控菌株為大腸埃希菌ATCC 25922、銅綠假單胞菌ATCC 27853、金黃色葡萄球菌ATCC 25913。

1.4 統(tǒng)計分析 應用SPSS 17.0軟件進行統(tǒng)計學處理，計數(shù)資料以構成比表示，各年份陽性率的比較采用趨勢χ2檢驗，P≤0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 血培養(yǎng)陽性情況 3 195份血標本中，共分離出356株病原菌(每份陽性標本均僅分離出1種病原菌)，標本的陽性率為11.14%，其中2013、2014、2015年的陽性率依次為 9.09%、10.66%、12.23%，三年來檢出率呈升高趨勢(χ2=4.711，P=0.03)。見表1。

表1 2013—2015年某院血標本培養(yǎng)陽性情況

Table 1 Positive results of blood culture in a hospital in 2013-2015

年份標本數(shù)陽性標本數(shù)陽性率(%)2013605559．092014100410710．662015158619412．23合計319535611．14

2.2 病原菌分布 所分離出的356株病原菌中，菌株數(shù)位于前5位的細菌依次為大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌(CNS)及鏈球菌屬。其中革蘭陰性菌215株，占60.39%；革蘭陽性菌122株，占34.27%；真菌19株，占5.34%。在革蘭陰性菌中，排列前3位的依次為大腸埃希菌(41.86%)、肺炎克雷伯菌(27.91%)、假鼻疽伯克霍爾德菌(11.16%)；革蘭陽性菌則以金黃色葡萄球菌(34.43%)、CNS(31.15%)及鏈球菌屬(27.05%)為主。各病原菌分布情況見表2。

表2 2013—2015年某院血培養(yǎng)病原菌分布

Table 2 Distribution of pathogens from blood culture in a hospital in 2013-2015

病原菌株數(shù)構成比(%)革蘭陰性菌21560．39 大腸埃希菌9025．28 肺炎克雷伯菌6016．85 假鼻疽伯克霍爾德菌246．74 陰溝腸桿菌82．25 銅綠假單胞菌82．25 鮑曼不動桿菌61．68 其他革蘭陰性菌195．34革蘭陽性菌12234．27 金黃色葡萄球菌4211．80 CNS3810．67 鏈球菌屬339．27 腸球菌屬71．97 其他革蘭陽性菌20．56真菌195．34合計356100．00

2.3 主要革蘭陰性菌對常用抗菌藥物的耐藥情況 大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌為腸桿菌科分離數(shù)最多的兩種細菌，產超廣譜β-內酰胺酶(ESBLs)菌株前者檢出37株(41.11%)，后者檢出12株(20.00%)。檢出亞胺培南耐藥大腸埃希菌3株(3.33%)，檢出耐亞胺培南、美羅培南的肺炎克雷伯菌各1株(1.67%)。非發(fā)酵菌分離最多的是假鼻疽伯克霍爾德菌(24株)，對檢測的多數(shù)抗菌藥物耐藥率<10.00%。見表3。

表3 主要革蘭陰性菌對常用抗菌藥物的耐藥情況

Table 3 Antimicrobial resistance of main gram-negative bacterial strains

抗菌藥物大腸埃希菌(n=90)耐藥株數(shù)耐藥率(%)肺炎克雷伯菌(n=60)耐藥株數(shù)耐藥率(%)假鼻疽伯克霍爾德菌(n=24)耐藥株數(shù)耐藥率(%)氨芐西林6370．00??--哌拉西林6066．672440．0028．33阿莫西林/克拉維酸4448．891728．33--氨芐西林/舒巴坦3538．891525．00416．67哌拉西林/他唑巴坦1112．221118．3328．33頭孢唑林5662．221626．67--頭孢呋辛4347．781016．67--頭孢他啶4145．561423．3328．33頭孢曲松4651．111220．0028．33頭孢噻肟4550．001220．0028．33頭孢吡肟3640．00813．331562．50頭孢哌酮/舒巴坦33．3358．3314．17氨曲南3842．221626．67520．83亞胺培南33．3311．6714．17美羅培南00．0011．6700．00阿米卡星44．4446．671770．83慶大霉素2831．11915．0024100．00妥布霉素2123．3358．332395．83米諾環(huán)素1213．331016．6728．33環(huán)丙沙星4246．67915．0028．33左氧氟沙星4347．78610．00312．50復方磺胺甲口惡唑5358．891220．0014．17

-：表示未檢測；*：表示天然耐藥

2.4 主要革蘭陽性菌對常用抗菌藥物的耐藥情況 耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)及耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)檢出率分別為9.52%、26.32%。金黃色葡萄球菌和CNS對米諾環(huán)素、利奈唑胺、替考拉寧及萬古霉素敏感率均達100.00%；鏈球菌屬細菌對利奈唑胺及萬古霉素的敏感率也達100.00%。見表4。

3 討論

血培養(yǎng)作為血流感染最重要的診斷依據(jù)，越來越受到臨床重視。近年來，該院血培養(yǎng)送檢量成急劇上升趨勢，從2013年的605份上升至2015年的1 586份，增長了1.62倍。3年共送檢3 195份，標本陽性率為11.14%，高于本地區(qū)另一家醫(yī)院報道的8.68%(2011—2013年)[3]，與同期國內張保榮等[4]報道的11.9%(南京)及邵衛(wèi)勇等[5]報道的10.6%(浙江)相近。血流感染優(yōu)勢菌種分布情況在不同時期及不同地域之間存在一定差異。本次調查顯示，該院血流感染以革蘭陰性菌為主，占60.39%；其次為革蘭陽性菌，占34.27%；真菌占5.34%，與同期諸多文獻[3-6]報道情況相似，表明革蘭陰性菌是近期國內血流感染的優(yōu)勢菌種。與多地報道情況無異，腸桿菌科中的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌是該院分離排名前兩位的革蘭陰性菌，不同的是非發(fā)酵菌中的假鼻疽伯克霍爾德菌在該院分離率較高(占6.74%)，位居革蘭陰性菌第3位，與本地區(qū)麥珍等[3]報道相似(位居革蘭陰性菌第3位，占5.6%)。而在我國內陸地區(qū)，假鼻疽伯克霍爾德菌較為罕見，在國內諸多調查中均未分離出該細菌[4-6]。該菌作為人獸共患自然疫源性疾病—類鼻疽的病原菌，主要分布在熱帶地區(qū)，三亞地區(qū)屬類鼻疽的重災區(qū)[7]。類鼻疽臨床表現(xiàn)多樣，極易誤診，致死率高[8]，已引起當?shù)匦l(wèi)生防疫部門高度重視。

表4 主要革蘭陽性菌對常用抗菌藥物的耐藥情況

Table 4 Antimicrobial resistance of main gram-positive bacterial strains

抗菌藥物金黃色葡萄球菌(n=42)耐藥株數(shù)耐藥率(%)CNS(n=38)耐藥株數(shù)耐藥率(%)鏈球菌屬(n=33)耐藥株數(shù)耐藥率(%)青霉素G3788．101539．4726．06苯唑西林49．521026．32--頭孢唑林511．901026．32--頭孢西丁511．9012．63--阿米卡星49．52615．79--慶大霉素37．14513．16--萬古霉素00．0000．0000．00替考拉寧00．0000．00--利奈唑胺00．0000．0000．00四環(huán)素1330．95410．531648．48米諾環(huán)素00．0000．00--紅霉素1330．951642．11824．24克林霉素819．05513．161133．33環(huán)丙沙星37．14615．79--左氧氟沙星49．52718．4213．03復方磺胺甲口惡唑2764．291128．9513．03利福平614．29410．5313．03

-：表示未檢測

大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌除臨床分離率高外，其產生ESBLs比例持續(xù)升高也備受臨床關注。本次調查中，兩者ESBLs檢出率分別為41.11%和20.00%，均較文獻[3-4]報道低。哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、妥布霉素及米諾環(huán)素均對大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌保持較高的抗菌活性，可供臨床選用。另外，本次調查中共發(fā)現(xiàn)3株碳青霉烯類耐藥大腸埃希菌(均對亞胺培南耐藥)及2株碳青霉烯類耐藥肺炎克雷伯菌(分別對亞胺培南和美羅培南耐藥)，應引起臨床重視。假鼻疽伯克霍爾德菌是熱帶地區(qū)血流感染常見病原菌，該細菌除對慶大霉素、阿米卡星及妥布霉素等氨基糖苷類及頭孢吡肟高度耐藥外，對其他種類抗菌藥物仍保持較高抗菌活性。對該細菌感染的治療關鍵在于早診斷，早治療及足療程。

對于血流感染中革蘭陽性菌的菌譜分布，CNS在多地報道中均位居首位[9-12]，在我們以往的統(tǒng)計中也是如此。但在本次調查中，金黃色葡萄球菌分離率首次超過CNS，成為最常見的革蘭陽性菌。其原因可能與該院近年來推行雙側雙瓶送檢，部分CNS污染菌被有效剔除有關。調查顯示金黃色葡萄球菌及CNS對米諾環(huán)素、替考拉寧及利奈唑胺均保持100%的抗菌活性，也尚未檢測出耐萬古霉素菌株，提示治療葡萄球菌所致的嚴重感染，以上幾種抗菌藥物均可選用。鏈球菌屬細菌也是革蘭陽性菌中分離率較高的病原菌，該菌屬對青霉素G、左氧氟沙星、利福平及復方磺胺甲口惡唑均高度敏感，也尚未檢測出耐利奈唑胺及萬古霉素的菌株，均可作為臨床用藥。另外，本次調查分離的病原體真菌所占比率高達5.34%。真菌血癥多為繼發(fā)性，主要與臨床濫用廣譜抗菌藥物及免疫抑制劑等相關，病死率高，應引起臨床足夠重視。

該院是海南省南部重癥治療中心，每年收治大量危重癥患者，由于各種侵入性操作較多，極易造成醫(yī)院感染的發(fā)生。動態(tài)監(jiān)測住院患者血培養(yǎng)病原菌譜的分布特點和抗菌藥物的耐藥性，不僅能正確指導臨床合理使用抗菌藥物，還能有效預防多重耐藥菌在醫(yī)院內傳播及流行，保證醫(yī)療安全。

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(本文編輯：周鵬程)

Distribution and antimicrobial resistance of pathogens causing bloodstream infection in a hospital in Sanya city

LIZhi-xia1,WANGYu-feng1,XULi2,ZHAOMei1,XINGXiao-wei3

(1TheThirdPeople’sHospitalofHainanProvince,Sanya572000,China； 2HainanMedicalUniversity,Haikou571012,China； 3CenterforExperimentalMedicalResearch,ThirdXiangyaHospitalofCentralSouthUniversity,Changsha410013,China)

Objective To understand the distribution and antimicrobial resistance of pathogens isolated from blood culture in a hospital in Sanya city.Methods Blood culture specimens and antimicrobial susceptibility testing results in this hospital from January 2013 to December 2015 were analyzed retrospectively.Results A total of 356 isolates of pathogenic bacteria were isolated from 3 195 blood culture specimens, the positive rate was 11.14%，including 215(60.39%)gram-negative bacterial strains, 122(34.27%) gram-positive bacterial strains, and 19(5.34%) fungi strains. The top 3 gram-negative bacteria wereEscherichiacoli(n=90, 25.28%),Klebsiellapneumoniae(n=60, 16.85%), andBurkholderiapseudomallei(n=24, 6.74%); the most common gram-positive bacteria wereStaphylococcusaureus(n=42, 11.80%),coagulase-negativestaphylococcus(n=38, 10.67%), andStreptococcusspp.(n=33, 9.27%). Resistance rates ofEscherichiacoliandKlebsiellapneumoniaeto cefoperazone/sulbactam，amikacin, and carbapenems were all lower than 10.00%； resistance rates ofBurkholderiapseudomalleito most antimicrobial agents were lower than 10.00%. There were no strains of main gram-positive bacteria that were found to be resistant to linezolid and vancomycin.Conclusion Gram-negative bacteria are the main pathogens causing bloodstream infection in this hospital in recent years, especially the isolation rate ofBurkholderiapseudomalleiis higher, which should arouse more attention in clinic.

bloodstream infection; blood culture; pathogen; drug resistance, microbial

2016-05-12

海南省三亞市醫(yī)療衛(wèi)生科技創(chuàng)新基金資助項目(2014YW23)

李志霞(1982-)，女(黎族)，海南省陵水縣人，主管技師，主要從事微生物檢測相關研究。

王玉豐 E-mail:10427436@qq.com

10.3969/j.issn.1671-9638.2017.03.008

R181.3+2 R378

A

1671-9638(2017)03-0221-04