蜂蜜中農(nóng)藥殘留研究進展

郭衛(wèi)蕓，李光輝，楊旗，王永輝，高雪麗，*，王輝

（1.許昌學院食品與生物工程學院河南省食品安全生物標識快檢技術重點實驗室，河南許昌461000；2.河南省長葛市頤恒健蜂業(yè)有限公司，河南長葛461500）

蜂蜜中農(nóng)藥殘留研究進展

郭衛(wèi)蕓1，李光輝1，楊旗2，王永輝1，高雪麗1，*，王輝2

（1.許昌學院食品與生物工程學院河南省食品安全生物標識快檢技術重點實驗室，河南許昌461000；2.河南省長葛市頤恒健蜂業(yè)有限公司，河南長葛461500）

農(nóng)藥殘留是蜂蜜及相應產(chǎn)品面臨的一項重要的安全問題。針對國內(nèi)外蜂蜜中農(nóng)藥殘留的現(xiàn)狀、蜂蜜中農(nóng)藥殘留的分析方法發(fā)展歷程、農(nóng)藥殘留的降解方法進行綜述，并從政策支持、分析方法的發(fā)展趨勢以及農(nóng)殘脫除、降解等應急手段等方面對確保蜂蜜食用品質(zhì)的發(fā)展前景進行展望。

蜂蜜；農(nóng)藥殘留；分析方法；降解；研究進展

蜂蜜是由蜜蜂采集植物花蜜或昆蟲分泌物，與其自身分泌物結(jié)合經(jīng)釀造、存放、脫水，存儲于巢脾中的天然甜性物質(zhì)。我國是養(yǎng)蜂大國，蜂蜜年產(chǎn)量已超過50萬噸，占世界蜂蜜總產(chǎn)量的1/4以上[1]。隨著蜂蜜的保健作用被越來越多的消費者認識與接受，我國人均蜂蜜消費量已達250 g，基本接近日本的水平[2]。蜂產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留發(fā)生的原因主要是蜜蜂在外出采蜜時，花蜜來源的農(nóng)作物噴灑了農(nóng)藥，蜜蜂將其攜帶回蜂箱。蜂蜜中的農(nóng)藥殘留主要涉及除蟲劑、除草劑和殺菌劑等[3]。各國對蜂蜜中有害物質(zhì)殘留的監(jiān)控日趨嚴格，其中農(nóng)藥殘留水平是重要的指標。歐盟、美國及日本等國家和地區(qū)均制定了蜂蜜農(nóng)殘最大殘留限量（MRL），且不斷對蜂蜜農(nóng)藥殘留標準、規(guī)則進行調(diào)整，使得我國蜂蜜產(chǎn)品出口難度加大。

1 蜂蜜中農(nóng)藥殘留現(xiàn)狀

1.1 國外蜂蜜農(nóng)藥殘留情況

目前，許多國家或地區(qū)所產(chǎn)蜂產(chǎn)品中均有不同程度的農(nóng)藥殘留問題。J.Irungu等在位于肯尼亞的昆蟲生理生態(tài)國際研究中心的非洲蜜蜂健康參考實驗室，通過收集來源于埃塞俄比亞和肯尼亞兩國市場及農(nóng)場中的28種蜂蜜樣品，發(fā)現(xiàn)其中馬拉硫磷的殘留量高出歐盟最大殘留限量2倍，盡管該農(nóng)藥較易分解，但長期接觸依然會對人體以及蜜蜂的健康帶來不利影響[4]。H.Yavuz等收集來自肯尼亞和土耳其的106個蜂蜜樣品，通過對其中的有機氯農(nóng)藥殘留進行分析統(tǒng)計，幾乎在所有蜂蜜樣品中均發(fā)現(xiàn)了艾氏劑、順式氯丹、反式氯丹、氧化態(tài)氯丹、2，4-滴滴伊以及 4，4-滴滴伊，其中氧化態(tài)氯丹平均含量達到了54.0 μg/kg，并且有55個樣品中氧化態(tài)氯丹的平均含量超過了土耳其的最大允許限量[5]。這項研究反映了被調(diào)察地區(qū)蜂蜜農(nóng)殘超標現(xiàn)象的嚴重性。

一項針對產(chǎn)自意大利72個蜂蜜樣品中28種農(nóng)藥的殘留調(diào)查發(fā)現(xiàn)，94%的蜂蜜樣品中含有至少一種農(nóng)藥殘留，滴滴涕,滴滴滴以及滴滴伊在該地區(qū)并不高發(fā)，但是采自蘋果園中的蜂蜜樣品中毒死蜱和喹氧靈是非常高發(fā)的農(nóng)殘種類[6]。W.Maciej等收集了來自波蘭的19個蜂蜜樣品，通過對其中的有機氯農(nóng)藥殘留進行分析發(fā)現(xiàn)，有15個樣品中發(fā)現(xiàn)了4，4-滴滴伊，有個別樣品中也發(fā)現(xiàn)了林丹、異狄氏劑以及艾氏劑的少量殘留，殘留水平均在標準限量以內(nèi)[7]。

《Food Control》在2014年報道了針對哥倫比亞4個地區(qū)所生產(chǎn)蜂蜜中的農(nóng)藥殘留的評估情況，發(fā)現(xiàn)所抽檢的61個蜂蜜樣品中有32個樣品中含有殺蟲劑、殺菌劑和殺螨劑，占總樣品數(shù)的52.4%，農(nóng)殘種類主要以有機氯和有機磷農(nóng)藥為主。其中，4.9%的樣品中農(nóng)藥殘留水平超過了歐盟的最高殘留限量標準[8]。D.Orso等分析了巴西南里奧格蘭德州的43個蜂蜜樣品，發(fā)現(xiàn)44%的樣品中含有1種或1種以上的農(nóng)藥殘留，殘留水平在 0.22 μg/kg～10 μg/kg。較多檢測到的農(nóng)藥種類包括殺蟲劑、殺螨劑、抗菌劑、滅菌劑以及除草劑等[9]。

1.2 我國蜂蜜農(nóng)藥殘留現(xiàn)狀

我國市場上的蜂蜜也存在一定的農(nóng)藥殘留風險。柳菡等對市售的50批蜂蜜樣品進行多菌靈、甲基托布津和乙基托布津檢測，在17批蜂蜜中檢出多菌靈，殘留水平為范圍 10.0 μg/kg～120.0 μg/kg[10]。李菊穎等對湖南省5個蜂場20個養(yǎng)蜂場的26批蜂蜜樣品進行殺蟲劑殘留分析，僅在一批雜花蜜樣品中檢出啶蟲脒陽性樣品，含量測定值為6.024 μg/kg[11]。王東等對我國市場購買的10種蜂蜜產(chǎn)品進行分析，發(fā)現(xiàn)有3種蜂蜜樣品中檢出了六六六或滴滴涕，殘留量在20.4 μg/kg～219.1 μg/kg水平[12]。藺永剛對產(chǎn)自于新疆伊犁地區(qū)尼勒克縣的3種黑蜂蜂蜜中蠅毒磷、敵百蟲、毒死蜱、皮蠅磷和馬拉硫磷等殘留情況進行了分析，發(fā)現(xiàn)這些農(nóng)藥在這3個樣品中均有少量殘留，最小殘留水平分別為 13.0、10.0、16.0 μg/kg[13]。林國斌等檢測了我國各地63份蜂蜜樣品中10種擬除蟲菊酯進行分析，發(fā)現(xiàn)20個樣品中溴螨酯的殘留水平在 1.1 μg/kg～4.8 μg/kg，10個樣品中含有氟胺氰菊酯，殘留水平在1.0 μg/kg～5.2 μg/kg，還有少量樣品中含有氯氟氰菊酯、氟氯氰菊酯以及氰戊菊酯[14]。曾銀歡分析了100個蜂蜜樣品中10種殺螨劑殘留情況，發(fā)現(xiàn)目標物質(zhì)檢出率高低順序為：吡螨胺、噻螨酮、蠅毒磷、四螨嗪、螺螨酯、喹螨醚、克螨特、噠螨靈、乙螨唑和唑螨酯，其中吡螨胺檢出率達到了16%[15]。盡管從分析數(shù)據(jù)上來看，我國蜂蜜中農(nóng)藥殘留水平整體低于國外，但依然一定程度影響我國蜂產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。

2 蜂蜜中農(nóng)藥殘留的分析方法

2.1 氣相色譜法

氣相色譜法（Gas chromatography，GC）最早是由英國人Martin和Synge在1941年發(fā)現(xiàn)，半個世紀以來，氣相色譜法得到了很大程度的發(fā)展。我國氣相色譜儀的生產(chǎn)及應用從上世紀70年代左右開始，目前在生物醫(yī)藥[16]、食品[17-18]、中藥[19]等各大領域均有應用。中國農(nóng)科院植保所姚建仁等早在1985年就報道了采用氣相色譜法分析蜂蜜中有機氯農(nóng)藥殘留的方法[20]。由于氣相色譜法具有操作簡單、靈敏、重現(xiàn)性好等優(yōu)點，被逐漸擴大在蜂蜜中有機氯[21-23]、有機磷[24-26]、擬除蟲菊酯[14，27]以及多類型復合農(nóng)藥殘留[17，28-29]分析領域中的應用。根據(jù)目標物質(zhì)的不同溶解極性，分析前處理使用的提取溶劑包括乙酸乙酯[25-26，29]、二氯甲烷[12，27]以及各種有機溶劑按不同比例所配置的混合試劑[28，30]。凈化方法包括固相萃取法[21，28]、分散固相萃取法[31-32]等，所使用的凈化材料包括HLB（二乙烯苯和N-乙烯基吡咯烷酮復合物）[33]、Folrisil（弗羅里硅土）[14]等，也有采用磁性納米材料[34]的研究報道。

2.2 液相色譜法

對于那些具有強極性、難揮發(fā)、大分子或熱穩(wěn)定性差的被分析物來說，更適合于采用液相色譜法進行分析。該方法具有較高的靈敏度，樣品預處理簡單，分析時間較短，且可以實現(xiàn)多通道檢測，近年來被更多地研究應用于蜂蜜中農(nóng)藥殘留的分析中。王國民較早地應用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析蜂蜜中的敵百蟲、敵敵畏、蠅毒磷等3種有機磷，分析檢測限可以達到0.1 μg/kg，獲得了良好的效果[35]；朱瑩應用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法（HPLC-MS/MS），以多反應監(jiān)測模式（MRM）對蜂蜜中殘留的極性較強的除草劑——殺草強進行分析，方法檢測限為 5 μg/kg～50 μg/kg[36]；陳意光等應用HPLC-MS/MS分析蜂蜜中的氟蟲酰胺、氯蟲酰胺、烯啶蟲胺等6種殺蟲劑，檢測限達到0.01 μg/kg～2 μg/kg[37]；張爍等采用超高效液相色譜串聯(lián)高分辨質(zhì)譜法（UHPLC-HRMS），研究蜂蜜中克百威、3-羥基克百威、溴氰菊酯、氟胺氰菊酯、腈嘧菌酯、嘧菌環(huán)胺等14種具有不同極性的農(nóng)藥殘留，檢測限為0.6 μg/kg～6 μg/kg，進一步擴大了方法的應用范圍[38]。王東等首次嘗試采用HPLC-MS/MS方法分析蜂蜜種殘留的吡蟲啉、噻蟲嗪等6種新煙堿類殺蟲劑，檢測限達到 0.2 μg/kg～0.4 μg/kg，所建立的方法獲得了較好的應用效果[39]。2015年以來，更多的研究聚焦于采用HPLC-MS/MS 法分析蜂蜜中的殺螨劑[15]、三嗪類[32]、煙堿類[11]、三唑類[31]等農(nóng)藥殘留。例如曾銀歡等研究了蜂蜜中10種殺螨劑的檢測方法，采用分散液液微萃取對待測物進行預處理，后經(jīng)HPLC-MS/MS分析測定，檢測限達到 1.5 μg/kg～3.0 μg/kg[15]；何麗君等采用分散固相萃取法對蜂蜜樣品進行處理，UHPLC-MS/MS分析21 種三嗪類殺蟲劑，檢測限為 1 μg/kg～10 μg/kg[32]。也有采用HPLC-MS/MS同時分析蜂蜜中不同種類的農(nóng)藥[10，31]或同時分析蜂蜜中的農(nóng)藥和抗生素[31]的研究報道。

2.3 光譜法

光譜法是一種較為快速、高效分析方法，由于其不需要復雜的前處理工序，因此可以實現(xiàn)現(xiàn)場快速檢測，近幾年也逐漸被嘗試應用于蜂蜜中農(nóng)藥殘留的分析。孫旭光等采用表面增強拉曼光譜分析蜂蜜中的樂果殘留，確定了蜂蜜中樂果農(nóng)藥殘留對應的四個特征拉曼位移峰，并通過建立線性回歸模型，實現(xiàn)了蜂蜜中樂果殘留的檢測，據(jù)報道，此方法的檢測限為2 mg/kg[40]。葛學峰等研究了利用熒光性質(zhì)分析蜂蜜中腐霉利農(nóng)藥殘留的分析方法，通過研究腐霉利-蜂蜜混合體系，確定了適合于在蜂蜜中檢測腐霉利的熒光峰為390 nm，在此條件下進行熒光光譜線性擬合，確定系數(shù)達到0.99，為快速分析蜂蜜中的農(nóng)藥殘留提供了新的思路[41]。

3 蜂蜜中農(nóng)藥殘留的降解與控制

目前，可借鑒的用于蜂蜜中農(nóng)藥殘留脫除技術包括光降解、微生物分解以及輻照等。首先，通過添加一些外源性的活性物質(zhì)例如稀土、糖鈰配物等對某些種類的農(nóng)藥殘留進行降解處理，所能夠脫除的農(nóng)殘種類包括有機磷類、擬除蟲菊酯類農(nóng)藥等[42-43]。但是由于引入了外源性的物質(zhì)，由此所引起的新的安全性問題也需要被重視。其次，利用微生物進行農(nóng)藥殘留降解也是一項重要的研究內(nèi)容。有研究人員通過分離、純化以及馴化一些農(nóng)殘耐受力較高的微生物菌株，或者通過基因改良的方法獲得了一些具有分解農(nóng)殘作用的專用菌株，再將其用于土壤、植物等目標物中農(nóng)殘的降解當中[44-45]。但是，由于生物方法作用時間長，微生物生長要求的條件苛刻，并且微生物的生長繁殖有可能引發(fā)不良的氣味等問題，在應用中存在問題。第三，近年來，利用輻照進行農(nóng)殘脫除研究也已經(jīng)在該領域?qū)嵤46]。國內(nèi)學者在其它食品研究中發(fā)現(xiàn)一些農(nóng)藥殘留可以通過輻照處理技術進行降解，如：蘋果中的擬除蟲菊酯類和氨基甲酸酯類[47]，茶葉中的聯(lián)苯菊酯類農(nóng)藥殘留也具有良好的輻照降解效果[48]。

對蜂蜜中含有的農(nóng)藥殘留進行應急處理，從而實現(xiàn)蜂蜜中相關農(nóng)殘指標達到標準，對于促進我國蜂產(chǎn)品加工業(yè)的健康發(fā)展非常重要。2009年由河南某公司所開發(fā)的“蜂蜜脫抗工藝”，通過采用升溫、大孔吸附樹脂吸附過濾等物化處理，能夠起到控制蜂蜜中部分農(nóng)殘水平的初步效果。然而，徐瑞晗通過比較大孔吸附樹脂以及陽離子交換樹脂對蜂蜜中甲基對硫磷、對硫磷、磺胺二甲嘧啶和磺胺喹噁啉含量的影響，發(fā)現(xiàn)這兩種樹脂對幾種農(nóng)殘的吸附均屬于理論上的放熱過程，升高溫度會明顯抑制吸附的進行。而較低的溫度下，蜂蜜黏度高，流動性差，說明該技術仍存在效率缺陷[49]。采用紫外線在蜂蜜農(nóng)殘降解方面已有了初步地探索。Marghitas等采用紫外線進行蜂蜜中所含有的有機磷及有機氯類農(nóng)藥進行脫除研究，發(fā)現(xiàn)經(jīng)254 nm紫外線照射以后，44%的殘留農(nóng)藥獲得了令人滿意的降解效果[50]。

4 結(jié)語與展望

我國非常重視蜂產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，2010年12月29日農(nóng)業(yè)部發(fā)布了《全國養(yǎng)蜂業(yè)“十二五”發(fā)展規(guī)劃》，首次對養(yǎng)蜂業(yè)進行了系統(tǒng)地規(guī)劃；2011年12月，農(nóng)業(yè)部以公告形式發(fā)布了《養(yǎng)蜂管理辦法（試行）》，更好地維護了蜂農(nóng)合法權(quán)益，保持了生態(tài)平衡，并對促進蜂業(yè)健康持續(xù)發(fā)展起了很大的推動作用。進一步研究蜂蜜中農(nóng)藥殘留含量的檢測方法，提供更高通量、更快速、環(huán)境友好的分析方法，對于保證有關部門對行業(yè)的有效監(jiān)控意義重大。開發(fā)新的更為高效、簡便的蜂蜜農(nóng)殘脫除或降解應急處理方法，能夠有效確保蜂農(nóng)及相關企業(yè)的效益，同時保證消費者的身體健康。

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Progress in the Pesticides Residue of Honey

GUO Wei-yun1，LI Guang-hui1，YANG Qi2，WANG Yong-hui1，GAO Xue-li1，*，WAN G Hui2
（1.Key Laboratory of Biomarker Based Rapid-detection Technology for Food Safety of Henan Province，F(xiàn)ood and Bioengineering College，Xuchang University，Xuchang 461000，Henan，China；2.Henan Changge Yi Heng Jian Apiculture Co.，Ltd.，Changge 461500，Henan，China）

It was affirmed that pesticides residue was an important risk to the honey and its family.Some aspects such as the present situation，the analytical method and the degradation methods of pesticide residues were summarized in this article.Finally，an outlook of development prospect for policy support，analytical method and degradation method was also discussed.

honey；pesticides residues；analytical method；degradation；progress

10.3969/j.issn.1005-6521.2017.23.039

河南省科技攻關項目（172102310699）；河南省高等學校重點科研項目（17A550006）

郭衛(wèi)蕓（1981—），男（漢），講師，博士，研究方向：食品加工及食品檢測。

*通信作者

2017-08-31