杠板歸藥材的化學(xué)成分、質(zhì)量控制及藥理作用研究進(jìn)展

孫欣，陳華國(guó)，周欣

(貴州師范大學(xué)，貴州省山地環(huán)境信息系統(tǒng)與生態(tài)環(huán)境保護(hù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，貴陽(yáng)550001)

杠板歸藥材的化學(xué)成分、質(zhì)量控制及藥理作用研究進(jìn)展

孫欣，陳華國(guó)，周欣

(貴州師范大學(xué)，貴州省山地環(huán)境信息系統(tǒng)與生態(tài)環(huán)境保護(hù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，貴陽(yáng)550001)

杠板歸為常用中藥，也是貴州少數(shù)民族地區(qū)特色苗藥材。目前從杠板歸中分離鑒定出的化學(xué)成分約130余種，黃酮類物質(zhì)是杠板歸藥材中主要化學(xué)成分，此外還有醌類、苯丙素類、萜類、生物堿類、揮發(fā)性成分等。近年來(lái)對(duì)杠板歸藥材的質(zhì)量控制研究較多，包括定性及定量檢測(cè)、指紋圖譜和譜效關(guān)系分析、有害物質(zhì)分析等。研究表明，杠板歸藥材具有抗炎、抗病毒、止咳祛痰、保肝、抗腫瘤、抗氧化和抑制α-葡萄糖苷酶活性、抑制乙酰膽堿酯酶活性等藥理作用。

杠板歸；黃酮類化合物；高效液相色譜法；抗炎作用；抗病毒作用；抗腫瘤作用

杠板歸藥材為多年生蔓生草本蓼科植物杠板歸的干燥地上部分，具有清熱解毒、利水消腫、止咳等功效[1]。杠板歸具有悠久的臨床應(yīng)用歷史，明代龔?fù)①t所著《萬(wàn)病回春》最早記載杠板歸用于治療蛇咬傷?！侗静菥V目拾遺》、《植物名實(shí)圖考》、《生草藥性備要》、《采藥志》等清代醫(yī)學(xué)著作也記載了杠板歸的多種功效。杠板歸在貴州苗族地區(qū)習(xí)稱“加歐萬(wàn)囊”，用于治療感冒發(fā)熱、瀉痢、疔瘡癰腫、跌仆腫痛、蛇蟲(chóng)咬傷等。在現(xiàn)代，以杠板歸為主藥的復(fù)方及其制劑已經(jīng)廣泛應(yīng)用于治療內(nèi)科、外科、婦科等各科疾病，療效顯著。目前市場(chǎng)上以杠板歸為主藥的中成藥制劑也比較多，如抗婦炎膠囊、姜黃消痤搽劑、復(fù)方巖連片等。近年來(lái)，對(duì)杠板歸藥材的研究越來(lái)越多，科技工作者們從化學(xué)成分、質(zhì)量控制及藥理活性等角度開(kāi)展了大量的研究工作，取得了較多成果。本文現(xiàn)就杠板歸藥材的化學(xué)成分、質(zhì)量控制及藥理作用研究進(jìn)展綜述如下。

1 杠板歸藥材的化學(xué)成分

目前從杠板歸中分離鑒定出的化學(xué)成分約130余種，從這些化學(xué)成分的屬性來(lái)看，黃酮類物質(zhì)是杠板歸藥材中主要化學(xué)成分，此外還有醌類、苯丙素類、萜類及其衍生物等化學(xué)組分[2～10]。

1.1 黃酮類 黃酮類物質(zhì)是杠板歸藥材中的主要成分，分離鑒定出的單體化合物有：黃酮醇類，如槲皮素、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸正丁酯、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸、槲皮素-4′-O-β-D-葡萄糖醛酸、槲皮苷、異鼠李素、山柰酚、山柰酚-3-O-蕓香糖苷、蘆丁、蓄苷、viviparum A、金絲桃苷；二氫黃酮醇類，如二氫槲皮素、二氫槲皮素-3-O-β-D-木吡喃糖苷；黃酮類，如3′,5-二羥基-3、4′,5′,7 -四甲氧基黃酮、5,7-二羥基-4′-甲氧基異黃酮、5-羥基-7、8-二甲氧基黃酮、2，2′-二甲氧基-6、7-亞甲二氧基黃酮、perfoliatumin A 、perfoliatumin B；二氫黃酮類生松素；黃烷醇類兒茶素；異黃酮類，如3′，7-二羥基-2′，4′-二甲氧基異黃酮。

1.2 醌類 分離出的醌類化合物包括苯醌類α-托可醌、蒽醌類大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素。

1.3 苯丙素類 包括香豆素類，如3，4-二氫-4-(4′-羥基苯基)-5，7-二羥基香豆素，3，4-二氫-5-羥基-7-甲氧基-4-(4′-甲氧基苯基)香豆素，3，4-二氫-5-羥基 -4-(4′-羥基苯基) -7-甲氧基香豆素，3，4-二氫-5，7-二羥基-4-(4′-羥基苯基)香豆素，香豆素-7-O-β-D-葡萄糖苷，七葉內(nèi)酯；苯丙酸類化合物，如咖啡酸、咖啡酸甲酯、咖啡酸乙酯、原兒茶酸、阿魏酸，3，3′，4，4′-四甲基鞣花酸、3，3′-二甲基鞣花酸、鞣花酸、3，3′-二甲氧基鞣花酸、6′-乙酰基-3，6-二阿魏酰蔗糖，2′，4′，6′-三乙?；?3，6-二阿魏酰蔗糖，1′，2′，4′，6′-四乙?；?3，6-二阿魏酰蔗糖，1′，4′，6′-三乙酰基-3，6-二阿魏酰蔗糖，2′，6′-二乙?；?3，6-二阿魏酰蔗糖，helonioside B；苯丙素類似物，如Vanicosides B，Vanicosides C，Vanicosides F，氫胡椒脂；木脂素類化合物7′-二羥基羅漢松脂素，8-氧-松脂醇。

1.4 萜類 萜類化合物，包括二萜類貫葉蓼素Ⅰ、貫葉蓼素Ⅱ、3α-羥基-13β-呋喃-11-酮-阿派-8-二烯-(20，6)-內(nèi)酯；四環(huán)三萜類，如β-谷甾醇、豆甾-4-烯-3-酮、胡蘿卜苷、(24S)-24-乙基膽甾-3β、5α，6α-三醇、植物甾醇-β-D-葡萄糖苷、葫蘆素Ⅱa，葫蘆素U；五環(huán)三萜類，如軟木三萜酮、白樺脂醇、白樺脂酸、熊果酸、asteryunnaoside、柴胡皂苷M。

1.5 生物堿類 主要為酰胺類化合物，如iotroridoside A、pokeweedcerebroside、bonaroside。

1.6 其他 包括沒(méi)食子酸，如1-O-沒(méi)食子?；?β-D-葡萄糖、2-O-沒(méi)食子酰基-黏酸二甲酯、黏酸二甲酯；原兒茶醛；對(duì)香豆酸甲酯；丁香酸；小分子糖類；直鏈烷類化合物。

1.7 揮發(fā)性成分 共37個(gè)成分，主要為2-己醛(22.99%)、2-十一烷酮(15.10%)、3-甲基-環(huán)戊烯(11.78%)、苯甲醛(7.98%)、n-十六酸(6.90%)、n-癸酸(4.01%)。

2 杠板歸藥材的質(zhì)量控制

現(xiàn)行版《中國(guó)藥典》(2015年版)采用薄層色譜法進(jìn)行定性鑒別咖啡酸、高效液相色譜法測(cè)定槲皮素含量，用于控制杠板歸藥材的質(zhì)量。由于咖啡酸和槲皮素廣泛存在于植物中，專屬性不強(qiáng)，因此，近年來(lái)對(duì)杠板歸藥材的質(zhì)量控制研究也比較多，出現(xiàn)了大量的先進(jìn)技術(shù)和分析方法。

2.1 定性鑒定 定性鑒定仍以薄層色譜法為主，主要定性指標(biāo)涉及槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸、槲皮素、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸正丁酯等[11]。

2.2 含量測(cè)定 目前，杠板歸藥材中指標(biāo)性成分的測(cè)定多采用高效液相色譜法(HPLC)，并且不再限于單一成分測(cè)定，多成分同時(shí)測(cè)定逐漸成為熱點(diǎn)。陳建等[12]采用HPLC法同時(shí)測(cè)定了杠板歸藥材中的槲皮素和山柰素；鄒盛勤等[13]采用HPLC法同時(shí)測(cè)定了齊墩果酸和熊果酸；黃家宇等[14]采用HPLC法同時(shí)測(cè)定了阿魏酸和香草酸；范東生等[15]采用HPLC法同時(shí)測(cè)定了槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸和槲皮素。Fan等[16]建立了同時(shí)測(cè)定杠板歸中七葉內(nèi)酯、槲皮素、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸和槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯的HPLC法。除了HPLC外，掃集-膠束電泳(sweeping-MEKC)、電泳-電化學(xué)(CE-ED)等檢測(cè)技術(shù)也被應(yīng)用于杠板歸中指標(biāo)性成分含量測(cè)定。李利軍等[17]采用sweeping-MEKC法分離測(cè)定了杠板歸藥材中的阿魏酸、咖啡酸和原兒茶酸。Jin等[18]采用CE-ED法同時(shí)測(cè)定了杠板歸中的槲皮素、香草酸、阿魏酸、咖啡酸和原兒茶酸。

2.3 指紋圖譜和譜效關(guān)系相關(guān)研究 Tian等[19]建立了杠板歸藥材的HPLC指紋圖譜測(cè)定方法，對(duì)不同產(chǎn)地藥材進(jìn)行指紋圖譜測(cè)試，并采用中藥指紋圖譜分析軟件、聚類分析和主成分分析等方法對(duì)獲得的杠板歸指紋圖譜進(jìn)行分析，獲得了其特征圖譜。在上述基礎(chǔ)上，對(duì)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的不同批次杠板歸藥材進(jìn)行了抗炎、鎮(zhèn)痛方面的藥效研究，分析了其藥效學(xué)共性和差異性。最后，研究者采用灰色關(guān)聯(lián)度法等數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法，對(duì)不同批次杠板歸藥材的化學(xué)指紋圖譜色譜峰所表征的化學(xué)信息與藥效學(xué)結(jié)果所表征的生物學(xué)信息進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，尋找與藥效關(guān)聯(lián)度大的化學(xué)物質(zhì)。這些研究工作為杠板歸藥材的藥效成分識(shí)別及基于藥效物質(zhì)的質(zhì)量控制研究奠定了良好基礎(chǔ)。

2.4 有害物質(zhì)分析 龍尚祥等[20]應(yīng)用AES/ABS法測(cè)定不同產(chǎn)地杠板歸藥材的鉛、鎘、汞、砷、銅等重金屬元素，采用聚類分析、主成分分析等數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法對(duì)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行分析處理，發(fā)現(xiàn)不同產(chǎn)地的杠板歸藥材中鉛、砷、銅含量符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，而有些產(chǎn)地藥材中鎘和汞的含量超標(biāo)。范東生等[21,22]采用GC(ECD)法對(duì)15批不同產(chǎn)地杠板歸藥材中的α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC、PP′-DDT、OP′-DDT、PP′-DDD、PP′-DDE、PCNB進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)9種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量均未超標(biāo)。上述研究成果為杠板歸藥材的規(guī)范化種植、選址等提供了科技支撐。

3 杠板歸藥材的藥理作用

3.1 抗炎作用 有學(xué)者[23，24]用二甲苯致炎模型和醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性試驗(yàn)觀察了杠板歸的抗炎活性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸及其甲酯均顯示出良好的抗炎作用，并且槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯的抗炎作用具有劑量相關(guān)性。有學(xué)者[24]通過(guò)藥物干預(yù)角大鼠叉菜膠所致足腫脹模型，發(fā)現(xiàn)杠板歸乙醇提取物能顯著降低血清及炎癥反應(yīng)的組織中PGE2、MDA的水平，提示杠板歸的抗炎機(jī)制可能與降低PGE2表達(dá)、抑制脂質(zhì)過(guò)氧化有關(guān)。

3.2 抗病毒作用 張長(zhǎng)城等[25]采用MTT法檢測(cè)杠板歸各提取物的抗病毒效果，以病毒抑制率和治療指數(shù)為評(píng)價(jià)指標(biāo)，結(jié)果顯示杠板歸醇提部位和大孔樹(shù)脂醇洗脫部位作用最強(qiáng)，藥物濃度在8 μg/mL以上時(shí)，杠板歸醇提取物對(duì)HSV的抑制率在50%以上。體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，杠板歸總黃酮在感染前無(wú)抑制HSV-1病毒作用，但對(duì)病毒復(fù)制及細(xì)胞間傳播有強(qiáng)烈的抑制作用；體內(nèi)實(shí)驗(yàn)顯示，杠板歸中的槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸具有抗H1N1病毒作用[23]。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)杠板歸總黃酮能提高HSV-1病毒感染性腦炎小鼠的生存率并延長(zhǎng)生存時(shí)間[26,27]。

3.3 止咳祛痰 隆萬(wàn)玉等[24]采用SO2致咳，觀察杠板歸灌服7 d后的小鼠的咳嗽潛伏期和3 min內(nèi)咳嗽次數(shù)，結(jié)果顯示杠板歸干預(yù)能減少咳嗽次數(shù)、延長(zhǎng)咳嗽潛伏期；采用毛細(xì)管排痰法測(cè)定杠板歸給藥7 d后大鼠60 min排痰量，發(fā)現(xiàn)杠板歸干預(yù)能促進(jìn)大鼠排痰。上述研究結(jié)果提示杠板歸具有顯著的鎮(zhèn)咳作用和較好的祛痰作用，但是其機(jī)制尚有待研究。

3.4 保肝作用 近年來(lái)關(guān)于杠板歸保肝作用的文獻(xiàn)報(bào)道逐漸增多，研究也較為深入。張可鋒等[27,28]以杠板歸提取物干預(yù)DMN誘導(dǎo)的肝纖維化大鼠，結(jié)果顯示大鼠肝組織中HIF-1α、VEGF、TGFβ1表達(dá)降低，認(rèn)為杠板歸具有良好的抗肝纖維化作用；杠板歸提取物能不同程度地下調(diào)CCl4所致肝損傷模型動(dòng)物血清中ALT、AST水平，升高SOD活性，降低MDA含量，并能減輕肝組織變性、壞死程度，有一定的保肝作用，其機(jī)制可能與抗脂質(zhì)過(guò)氧化有關(guān)[29]。

3.5 抗腫瘤 陶鋒等[30]采用MTT法觀察了杠板歸對(duì)多種腫瘤細(xì)胞的增殖抑制作用，結(jié)果顯示杠板歸提取物對(duì)人結(jié)腸腺癌細(xì)胞株Colo320、人前列腺癌細(xì)胞株P(guān)C-3、人白血病細(xì)胞株HL60、人胃腺癌細(xì)胞株SGC-7901和小鼠黑色素瘤細(xì)胞株B-16均有不同程度的增殖抑制作用，其中乙酸乙酯部位抑制作用最強(qiáng)。此外，研究還發(fā)現(xiàn)乙酸乙酯部位對(duì)S-180肉瘤具有較強(qiáng)的體內(nèi)抗腫瘤作用。杠板歸多糖對(duì)人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株A549有顯著的增殖抑制作用，并呈現(xiàn)濃度和時(shí)間依賴性，其機(jī)制可能涉及線粒體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡途徑[31]。

3.6 抗氧化和抑制α-葡萄糖苷酶活性 有學(xué)者[32]發(fā)現(xiàn)杠板歸甲醇提取物具有較好的抗氧化活性；應(yīng)用體外α-葡萄糖苷酶篩選模型對(duì)酶活性抑制力進(jìn)行評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)杠板歸的甲醇提取物具有較好的酶抑制活性。

3.7 抑制乙酰膽堿酯酶活性 殷帥文等[33]采用乙酰膽堿酯酶(AChE)抑制活性模型對(duì)63種植物乙醇提取物不同溶劑萃取物進(jìn)行AchE抑制活性研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)杠板歸的石油醚萃取物在供試質(zhì)量濃度在1 mg/mL時(shí)，對(duì)乙酰膽堿酯酶活性抑制率大于90%，表現(xiàn)出較強(qiáng)的AchE抑制活性。

綜上所述，杠板歸藥材的化學(xué)成分復(fù)雜，有多種藥理活性，特別是在婦科炎癥的防治方面顯示出獨(dú)特療效，值得深入研究。目前，杠板歸藥材的研究仍存在諸多問(wèn)題，主要有以下方面：①有效成分不明確，如抗炎、抗腫瘤、抗病毒等活性成分不清楚，藥理研究仍處于提取物階段。②杠板歸藥材中化學(xué)成分含量低，如何正確、合理地評(píng)價(jià)杠板歸藥材品質(zhì)尚待研究。③雖然目前已有大量科學(xué)研究涉及指標(biāo)性成分測(cè)定、指紋圖譜構(gòu)建等，但把這些研究成果納入杠板歸藥材的法定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)則尚待努力。④杠板歸生長(zhǎng)環(huán)境特殊，極易受到重金屬污染的影響。因此，專家學(xué)者們?nèi)孕鑼?duì)杠板歸藥材的化學(xué)成分和藥理活性進(jìn)行深入研究，進(jìn)一步闡明化學(xué)成分和臨床應(yīng)用的關(guān)系；另外，還要加強(qiáng)杠板歸質(zhì)量控制，有效保護(hù)杠板歸野生資源，減少重金屬污染對(duì)杠板歸品質(zhì)的影響。

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10.3969/j.issn.1002-266X.2017.39.035

R931.71

A

1002-266X(2017)39-0110-04

貴州省重大科技項(xiàng)目(黔科合J重大字2015-2002-3-3)；貴州省高層次創(chuàng)新人才培養(yǎng)項(xiàng)目(黔科合人才2015-4033)。

周欣(E-mail: alice9800@sina.com)

2017-06-01)