貴州產(chǎn)亞貢葉中揮發(fā)性成分氣相質(zhì)譜分析

陳曉蘭，廖 羽，吳倩男，袁曉艷，余 蘭

(遵義醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院，貴州 遵義 563003)

貴州產(chǎn)亞貢葉中揮發(fā)性成分氣相質(zhì)譜分析

陳曉蘭，廖 羽，吳倩男，袁曉艷*，余 蘭*

(遵義醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院，貴州 遵義 563003)

采用水蒸氣蒸餾法提取亞貢葉的揮發(fā)性成分，用氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)聯(lián)用技術(shù)，研究了貴州產(chǎn)亞貢葉的揮發(fā)性成分及其相對(duì)含量，定性分析及相對(duì)定量分析結(jié)果表明：亞貢葉的揮發(fā)性成分共檢出68種化學(xué)成分，可大致歸為9類，其中烯類(25種)的數(shù)量最多，相對(duì)含量大于1%的物質(zhì)有14種，包括α-萜品烯(28.82%)、3-甲基戊醛(11.6%)、(1R)-4-甲基-1-(1-甲基乙基)-3-環(huán)己烯-1-醇(9.61%)、右旋大根香葉烯(8.23%)等。由此可知，貴州產(chǎn)亞貢葉中含有多種抗氧化、抗菌、驅(qū)蟲作用等生物活性成分，具有繼續(xù)深入研究的意義。

亞貢；揮發(fā)性成分；定量分析；氣相色譜-質(zhì)譜

亞貢(Smallanthussonchifolius)又稱雪蓮果，菊科向日葵屬雙子葉草本植物，原產(chǎn)于南美洲，是傳統(tǒng)根莖食品。亞貢引入我國(guó)后，得到廣泛的關(guān)注，在我國(guó)臺(tái)灣、海南、福建、云南、遼寧、貴州等地種植或有大規(guī)模生產(chǎn)基地。亞貢塊莖含有豐富的水分與果寡糖，可當(dāng)作水果食用或制成干片，花、葉可作為茶葉。亞貢葉子中含有蛋白質(zhì)、糖類、酚酸、類黃酮、萜類、揮發(fā)油、氨基酸、礦物質(zhì)等成分[1]，研究表明：亞貢有抗糖尿病[2]、抗菌[3]、抗氧化[4]、抗炎[5]等藥理作用，具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。但亞貢葉除了少量作為茶、飼料外，大部分是農(nóng)業(yè)廢棄物。

亞貢葉揮發(fā)油中含有多種化學(xué)成分，至今鮮有研究報(bào)道。研究其化學(xué)成分可為亞貢的開發(fā)利用提供支持，最大限度地發(fā)揮它的經(jīng)濟(jì)社會(huì)利用價(jià)值。本文采用GC-MS聯(lián)用技術(shù)對(duì)貴州產(chǎn)亞貢葉的揮發(fā)性成分進(jìn)行定性定量分析，為進(jìn)一步研究開發(fā)提供資料。

1 儀器與材料

6890-5973N型氣相質(zhì)譜聯(lián)用儀(Agilent(美國(guó))公司)。干燥的亞貢葉于2016年9月采摘于貴州省遵義市正安縣，由遵義醫(yī)學(xué)院張玉金博士鑒定。正己烷為分析純，水為純化水。

2 試驗(yàn)方法

2.1 揮發(fā)油的提取

取干燥的亞貢葉，在中藥粉碎機(jī)中粉碎，過60目篩。采用水蒸氣蒸餾法[6]對(duì)亞貢葉揮發(fā)油進(jìn)行提取，準(zhǔn)確稱取160 g亞貢葉置于揮發(fā)油提取器的圓底燒瓶中，按照1∶10的料液比加入1600 mL純化水，浸泡1 h，用電熱套緩慢加熱至沸騰，保持微沸6 h，用適量正己烷洗脫揮發(fā)油，充分搖勻靜置后，取油層，并加入5 g無硫酸鈉脫水，最終定容至4 mL，過微孔濾膜后，得供試品。

2.2 色譜條件

GC條件：Agilent HP-5MS 5% Phenyl Methyl Siloxane色譜柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)，載氣為高純He，流速1 mL/min，不分流，進(jìn)樣口溫度250 ℃，程序升溫：初始溫度35 ℃，保留5 min，以1.5 ℃/min升至80 ℃，保留5 min，接著以0.5 ℃/min升至100 ℃，保留1 min，再以0.25 ℃/min升至120 ℃，保留1 min，最后以10 ℃/min升至200 ℃，保留5 min。進(jìn)樣口溫度250 ℃，柱流量1.0 mL/min。

MS條件：溶劑延遲4.0 min，電離方式電子轟擊源(Electron Impact,EI)，EM電壓(Electron Multiplier Volts,EM電壓)70 eV，四級(jí)桿溫度150 ℃，離子源溫度230 ℃，質(zhì)量掃描范圍m/z 30～500原子質(zhì)量單位(amu，atomic mass uni)。采用Wiley、Nist05、NIST08和NIST08S譜庫(kù)檢索鑒定化合物結(jié)構(gòu)，用峰面積歸一化法計(jì)算各組分的相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)。

3 結(jié)果與分析

水蒸氣蒸餾法提取的亞貢葉揮發(fā)油GC-MS分析總離子流圖見圖1，應(yīng)用計(jì)算機(jī)聯(lián)機(jī)信息檢索,共鑒別出68種揮發(fā)性化學(xué)物質(zhì)，采用峰面積歸一化法測(cè)定了各化學(xué)成分的相對(duì)百分含量，結(jié)果見表1。

化學(xué)成分類型序號(hào)保留時(shí)間/min化合物名稱分子式分子量峰面積相對(duì)含量/%烯醇類110.591葉醇C6H12O100330737740.27230.665(Z)-β-松油醇C10H18O154544012470.44331.199芳樟醇C10H18O154247627140.20432.788(E)-1-甲基-4-(1-異丙基)-2-環(huán)己烯-1-醇C10H18O154866635870.71534.586(Z)-1-甲基-4-(1-異丙基)-2-環(huán)己烯-1-醇C10H18O154547016280.45638.697(1R)-4-甲基-1-(1-甲基乙基)-3-環(huán)己烯-1-醇C10H18O15411744623119.61739.945α-松油醇C10H18O154700047740.57840.404(E)-3-甲基-6-(1-異丙基)-2-環(huán)己烯-1-醇C10H18O154200136010.16940.583桃金娘烯醇C10H16O152154087050.131042.117(Z)-3-甲基-6-(1-異丙基)-2-環(huán)己烯-1-醇C10H18O154420337330.341160.683γ-萜品烯-7-醇C10H16O152172506980.1412170.667葉綠醇C20H40O296218541780.18烯類139.4405-(1,1-二甲基)-1,3-環(huán)戊二烯C9H1412252351580.041415.744(1R)-α-蒎烯C10H161363825417013.131516.722莰烯C10H161361137113640.931619.645α-萜品烯C10H16136352300503228.821721.130β-月桂烯C10H161361852377931.521821.800α-水芹烯C10H16136315414300.261923.0752-蒈烯C10H1613619940840.022023.971β-側(cè)柏烯C10H161361036816890.852125.376(E)-羅勒烯C10H16136419672020.342227.132γ-萜品烯C10H161367322647075.99

續(xù)表1:

化學(xué)成分類型序號(hào)保留時(shí)間/min化合物名稱分子式分子量峰面積相對(duì)含量/%2329.644異松油烯C10H161361934440221.582433.738(2-甲基丙烯基)-1,5-環(huán)己二烯C10H1413488658920.072561.2344-甲基-1-異丙基-4-乙烯基-3-(1-甲基乙烯基)環(huán)己烯C15H24204514871520.422667.398α-蓽澄匣油烯C15H24204509701900.422768.862β-波旁烯C15H242041866595431.532869.353蒜頭素C15H24204160346430.132970.418β-蓽澄匣油烯C15H24204604496460.493070.952β-欖香烯C15H24204230319700.193175.198石竹烯C14H221905162941254.223276.976(+)-表-二環(huán)倍半水芹烯C15H24204568163370.463381.330Z,Z,Z-1,5,9,9-四甲基-1,4,7-環(huán)十一碳三烯C15H24204752143390.623488.142右旋大根香葉烯C15H2420410067424938.233592.884α-衣蘭油烯C15H24204428303350.353695.332(-)-g-蓽澄匣烯C15H24204167690760.1437111.478(-)-β-丁香烯環(huán)氧化物C15H24O220920886990.75烯醛類3810.2292-己烯醛C6H10O98625549930.513940.766藏花醛C10H14O150138570330.114043.381β-環(huán)檸檬醛C10H16O152178949100.154152.278桃金娘烯醛C10H14O15091418810.07醛類425.9943-甲基戊醛C6H12O100141866106211.6437.225己醛C6H12O100278868380.234411.9524-甲基己醛C7H14O1143838824433.144518.035苯甲醛C7H6O106102127960.084625.543苯乙醛C8H8O120309697540.254745.8982-甲基-3-苯基丙醛C10H12O148108823520.09烯酮類4890.724β-紫羅蘭酮C13H20O1921066864660.8749114.600鼠尾草-4(14)-烯-1-酮C15H24O220120339100.1050169.285法尼基丙酮C18H30O26258752020.05酮類514.876甲基異丁基酮C6H12O100378208150.31525.3133-甲基-2-戊酮C6H12O1001418639621.16539.9164-甲基-2-己酮C7H14O114273790160.225424.6252,2,6-三甲基環(huán)己酮C9H16O14038967640.0355169.436六氫金合歡基內(nèi)酮C18H36O268373109330.31氧雜環(huán)化合物5621.946(E)-2-(2-戊烯基)呋喃C9H12O136101588040.085761.796(E,E)-1,3,3-三甲基-2-(2-亞丁烯基)-7-雜氧二環(huán)[2.2.1]庚烷C10H20O192276728190.2358172.996邁諾氧化物C20H34O290107744780.09芳香烴5923.701對(duì)傘花烴C10H14134573723990.476047.2221,2,3,4-四氫-1,1,6-三甲基萘C13H18174103126740.086163.7841,2,3,4-四氫-4-(1-甲基乙烯基)-苯C13H1817481563340.076279.8711,2,3,5,6,7,8,8a-八氫-1-甲基-6-亞甲基-4-(1-甲基乙基)-萘C15H24204236496360.196398.702(1S-cis)-1,2,3,5,6,8a-六氫-4,7-二甲基-1-(1-甲基乙基)-萘C15H242042048605141.68其他類644.794甲酸異戊酯C6H12O211631497060.036515.3014-甲基-1-(1-甲基乙基)-[3.1.0]二環(huán)己烷去氫衍生物C10H161361679388581.376620.806(Z)-2-氨基亞甲基-3,3-二甲基丁腈C7H12N2124197647130.166727.829(1α,2β,5α)-2-甲基-5-(1-甲基乙基)-二環(huán)[3.1.0]-2-己醇C10H18O154731395260.606865.4052-甲氧基-3-烯丙基苯酚C10H12O21641167336120.95

由表1可知，貴州產(chǎn)亞貢葉共檢出68種揮發(fā)性成分，可大致歸為9類。其中烯醇類12種，相對(duì)含量13.20%；烯類25種，相對(duì)含量61.50%；烯醛類4種，相對(duì)含量0.84%；醛類6種，相對(duì)含量15.39%；烯酮類3種，相對(duì)含量1.02%；酮類5種，相對(duì)含量2.03%；氧雜環(huán)化合物3種，相對(duì)含量0.40%；芳香烴5種，相對(duì)含量2.49%；其他類(烷烴類等)5種，相對(duì)含量3.11%。由此可知，烯類(25種)的數(shù)量最多，烯醇類(12種)次之，其他類(烷烴類等)相對(duì)較少。亞貢揮發(fā)油中未檢出醚類、有機(jī)酸類、炔類等成分。

在揮發(fā)性成分中，相對(duì)含量大于1%的物質(zhì)有14種，相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)占總成分的83.58%。包括α-萜品烯(28.82%)、3-甲基戊醛(11.6%)、(1R)-4-甲基-1-(1-甲基乙基)-3-環(huán)己烯-1-醇(9.61%)、右旋大根香葉烯(8.23%)、γ-萜品烯(5.99%)、石竹烯(4.22%)、4-甲基己醛(3.14%)、(1R)-α-蒎烯(3.13%)、(1S-cis)-1,2,3,5,6,8a-六氫-4,7-二甲基-1-(1-甲基乙基)-萘(1.68%)、異松油烯(1.58%)、β-波旁烯(1.53%)、β-月桂烯(1.52%)、4-甲基-1-(1-甲基乙基)-[3.1.0]二環(huán)己烷去氫衍生物(1.37%)、3-甲基-2-戊酮(1.16%)。

4 討論

菊科植物亞貢葉貴州產(chǎn)亞貢葉中含有多種抗氧化、抗菌、驅(qū)蟲作用等生物活性成分，具有繼續(xù)深入研究的意義。其化學(xué)成分的作用主要有以下幾點(diǎn)：(1)抗氧化活性。研究表明，揮發(fā)油中單萜烯類化合物中因含有活潑的亞甲基基團(tuán)而具有抗氧化活性[7]，清除自由基的作用，如α-萜品烯(28.82%)、α-蒎烯(3.13%)、γ-萜品烯(5.99%)等，這些單萜在亞貢葉揮發(fā)油中含量較高。另外，亞貢精油中含有的萜類氧化物，如α-松油醇等組分也可能作為自由基清除劑。(2)抗菌活性：例如α-蒎烯(3.13%)具有強(qiáng)大的抗菌活性，可抑制多種病原菌的生長(zhǎng)、繁殖[8]。α-松油醇(0.57%)對(duì)革蘭陰性菌和革蘭陽性菌均具有較強(qiáng)抗菌活性[9]、石竹烯(4.22%)也具有一定的抗菌作用。(3)驅(qū)蟲作用：α-蒎烯及莰烯(0.93%)等成分是天然的強(qiáng)驅(qū)蟲殺蟲成分。(4)其他作用：亞貢葉中揮發(fā)油成分復(fù)雜，揮發(fā)性成分含量少的成分，也具有一定的生物活性。例如芳樟醇具有抗菌消炎作用、抗細(xì)菌、抗真菌和抗病毒作用[10]等多種生理活性。

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(責(zé)任編輯：曾小軍)

Determination of Volatile Components from Yacon (Smallanthussonchifolius) Leaves in Guizhou by GC-MS

CHEN Xiao-lan, LIAO Yu, WU Qian-nan, YUAN Xiao-yan*, YU Lan*

(School of Pharmacy, Zunyi Medical College, Zunyi 563003, China)

The volatile components were extracted from the leaves of yacon (Smallanthussonchifolius) in Guizhou by using water reflux method, and their relative contents were analyzed by GC-MS. Through qualitative analysis and relative quantitative analysis, a total of 68 kinds of volatile chemical constituents were identified from the leaves of yacon, and they could be classified into 9 types. Among them, the quantity of alkenes was the most (25 kinds). There were 14 kinds of volatile compounds whose relative content was over 1.0%, including α-terpinene (28.82%), 3-methyl-pentanal (11.6%), (1R)-4-methyl-1-(1-methylethyl)-3-cyclohex-1-alcohol (9.61%), dextro-germacrene (8.23%), etc. Therefore, the leaves of yacon in Guizhou contain a variety of bioactive components possessing antioxidant, antibacterial and anthelmintic effects.

Yacon; Volatile components; Quantitative analysis; GC-MS

2016-09-29

遵義醫(yī)學(xué)院博士啟動(dòng)資金資助項(xiàng)目(No:F-635)；貴州省聯(lián)合基金資助項(xiàng)目(No:CK-881)。

陳曉蘭(1991─)，女，碩士研究生，研究方向：藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。*通訊作者：袁曉艷、余蘭。

R284.1

A

1001-8581(2017)03-0099-04