過敏性哮喘患兒呼出氣一氧化氮變化及與血清過敏原特異性IgE的相關(guān)性

李穎

(首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京朝陽醫(yī)院，北京100000)

過敏性哮喘患兒呼出氣一氧化氮變化及與血清過敏原特異性IgE的相關(guān)性

李穎

(首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京朝陽醫(yī)院，北京100000)

目的觀察過敏性哮喘患兒呼出氣一氧化氮(FeNO)變化，并探討其與患兒血清過敏原特異性免疫球蛋白E(sIgE)的相關(guān)性。方法選擇2014年1月～016年1月收治的急性發(fā)作期過敏性哮喘患兒56例為觀察組，非過敏性哮喘患兒56例為對照組。采用FeNO分析儀檢測兩組患兒FeNO。采用免疫印跡法檢測兩組患兒血清sIgE，檢測范圍包含粉粉塵螨、戶塵螨、牛奶、雞蛋蛋白等共計(jì)20種過敏原。分析觀察組FeNO與血清sIgE表達(dá)的相關(guān)性。結(jié)果觀察組、對照組患兒FeNO分別為(23.18±3.82)、(5.85±1.19)ppb,兩組相比P<0.05。觀察組總sIgE陽性38例(67.85%)，對照組總sIgE陽性5例(8.93%)，兩組相比P<0.05。觀察組、對照組患兒血清總sIgE水平分別為(106.51±8.26)、(16.24±2.31)IU/mL，兩組相比P<0.05。Spearman直線相關(guān)分析結(jié)果顯示觀察組患兒FeNO與血清總sIgE呈正相關(guān)(r=0.742，P<0.05)。結(jié)論過敏性哮喘患兒FeNO高于非過敏性哮喘患兒。過敏性哮喘患兒FeNO與血清sIgE表達(dá)呈正相關(guān)。

呼出氣一氧化氮；過敏原；免疫球蛋白E;過敏性哮喘

兒童過敏性哮喘和非過敏性哮喘的發(fā)病原因、治療方式有明顯差異，但癥狀類似，過敏原實(shí)驗(yàn)是鑒別兒童過敏性哮喘和非過敏性哮喘、確定過敏性哮喘患兒過敏原的重要方法，但是兒童多不配合，臨床上需要尋找一種簡便易行的鑒別過敏性哮喘和非過敏性哮喘的方法[1～4]。呼出氣一氧化氮(FeNO)是一種氣道炎性標(biāo)志物[5]。免疫球蛋白E(IgE)是過敏原進(jìn)入機(jī)體刺激B淋巴細(xì)胞釋放的一種免疫球蛋白[6]，是診斷過敏性哮喘的重要指標(biāo)，不同的過敏原會(huì)產(chǎn)生不同的過敏原特異性IgE(sIgE)。本研究比較了過敏性哮喘和非過敏性哮喘患兒FeNO水平，并分析過敏性哮喘患兒FeNO水平和血清sIgE表達(dá)的相關(guān)性，旨在探討FeNO在過敏性、非過敏性哮喘鑒別診斷中的應(yīng)用價(jià)值?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2014年1月～2016年1月我院兒科收治的急性發(fā)作期過敏性患兒56例為觀察組，其中男36例，女20例，年齡1.5～5(3.18±0.92)歲。同期收治的56例非過敏性哮喘患兒為對照組。其中男31例、女25例，年齡1.2～5(2.98±0.87)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡1～5歲，能夠配合相應(yīng)檢查。②有喘息、氣促、呼氣相延長等臨床表現(xiàn)，肺部聽診有明顯哮鳴音、喘鳴音。③依據(jù)諸福棠《實(shí)用兒科學(xué)》(第7版)[5]診斷標(biāo)準(zhǔn)分別確診為過敏性哮喘、非過敏性哮喘(咳嗽變應(yīng)性哮喘)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①支氣管異物、先天性喉喘鳴、心源性哮喘等疾病；②近期服用激素或免疫抑制劑類藥物。本研究已經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理審查委員會(huì)批準(zhǔn)，所有患兒監(jiān)護(hù)人均簽署知情同意書。

1.2 FeNO檢測方法 檢測在肺功能室內(nèi)進(jìn)行，囑患兒檢測前1 d內(nèi)禁食含亞硝酸鹽豐富的食物(如榨菜、火腿腸、腌制品、碳酸飲料等)，檢測前2 h禁止飲食和劇烈活動(dòng)。采用Aerocrine AB公司產(chǎn)的FeNO分析儀，室內(nèi)溫度控制為20 ℃～28 ℃，濕度為20%～60%，操作方法依據(jù)美國胸科協(xié)會(huì)/歐洲呼吸病學(xué)會(huì)(ATS/ERS)推薦的操作標(biāo)準(zhǔn)[7]進(jìn)行，檢測結(jié)果以ppb(1ppb=1×10-9mmol/L)表示。檢測時(shí)患兒坐位，頭保持自然水平，患兒先進(jìn)性一次呼氣，最大限度排空肺內(nèi)空氣，然后含緊濾嘴做一次吸氣，并以50 mL/s的速度平穩(wěn)呼氣，維持4 s后，儀器自動(dòng)顯示結(jié)果。檢測重復(fù)3次，每次間隔1 min以上，結(jié)果平均變異率小于10%為正常，取平均值。

1.3 血清sIgE檢測方法 采用促凝管采集兩組患兒靜脈血2 mL，室溫靜置30 min，3 000 r/min離心10 min，收集血清，保存至-80 ℃冰箱中，待所有患兒血清樣本采集齊全后統(tǒng)一檢測。血清sIgE檢測方法采用免疫印跡法，使用Mediwiss公司的Allergy Sreen系統(tǒng)及配套試劑盒進(jìn)行檢測，操作方法嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。檢測的過敏原包括粉塵螨、戶塵螨、柳樹、貓狗毛皮屑、蟑螂、牛奶、雞蛋蛋白、牛肉、貝、蟹、芒果、腰果、菠蘿、霉菌、艾蒿等共計(jì)20種。某一種過敏原sIgE≥0.35 IU/mL定義為sIgE陽性，總sIgE≥100 IU/mL定義為總IgE陽性。

2 結(jié)果

2.1 兩組患兒FeNO比較 觀察組、對照組患兒FeNO水平分別為(23.18±3.82)、(5.85±1.19)ppb，兩組相比P<0.05。

2.2 兩組患兒血清sIgE表達(dá)情況比較 觀察組總sIgE陽性38例(67.85%)，對照組總sIgE陽性5例(8.93%)，兩組相比P<0.05。觀察組、對照組患兒血清總sIgE水平分別為(106.51±8.26)、(16.24±2.31)IU/mL，兩組相比P<0.05。觀察組患兒共檢出陽性過敏原牛奶(23例)、雞蛋(18例)、戶塵螨(13例)、粉塵螨(11例)、蟹(5例)、牛肉(4例)。

2.3 觀察組患兒FeNO與血清總sIgE的相關(guān)性 Spearman直線相關(guān)分析結(jié)果顯示觀察組患兒FeNO與血清總sIgE呈正相關(guān)(r=0.742，P<0.05)。

3 討論

非過敏性哮喘主要是感染引起的氣道炎癥所致，其中以咳嗽變應(yīng)性哮喘最為常見。過敏性喘息是接觸各種過敏原導(dǎo)致的的氣道慢性過敏性炎癥。過敏性哮喘的整體發(fā)病機(jī)制尚不明確，近年來在研究毛細(xì)支氣管炎的機(jī)制時(shí)發(fā)現(xiàn)，輔助性T細(xì)胞Th1/Th2細(xì)胞免疫失衡，導(dǎo)致干擾素γ、白細(xì)胞介素4(IL-4)、IgE的分泌失調(diào)[9]，可能是其發(fā)病機(jī)制，組胺、白三烯、花生四烯酸等具有支氣管收縮作用的炎性因子也顯著增多，刺激氣管黏膜增生，誘導(dǎo)哮喘發(fā)作。

NO是一種具有生物活性的小分子，在體內(nèi)有L-精氨酸和氧分子通過一氧化氮合成酶(NOS)合成，NOS是該合成反應(yīng)的關(guān)鍵酶[11]，在體內(nèi)主要有誘導(dǎo)性NOS(iNOS)和原生型NOS(cNOS)，均廣泛存在于肺組織中，iNOS表達(dá)于巨噬細(xì)胞、肥大細(xì)胞、中性粒細(xì)胞上皮細(xì)胞等，肺或支氣管組織發(fā)生炎性時(shí)這些細(xì)胞iNOS表達(dá)上調(diào)，合成NO增多，導(dǎo)致FeNO水平升高[12]。本研究結(jié)果顯示過敏性哮喘患兒FeNO水平顯著高于非過敏性哮喘患兒，提示過敏性哮喘患兒氣道炎癥反應(yīng)水平較高。進(jìn)行一步研究顯示，過敏性哮喘患兒FeNO水平與血清總sIgE呈正相關(guān)，這與國外學(xué)者Choi等[15]的研究結(jié)果一致。血清總sIgE與過敏性疾病密切相關(guān)，過敏原通過抗原提呈細(xì)胞激活輔助性T細(xì)胞，產(chǎn)生IL-4、IL-5、IL-10等一系列炎癥因子，并進(jìn)一步激活B淋巴細(xì)胞合成IgE結(jié)合于肥大細(xì)胞表面。當(dāng)過敏原在此進(jìn)入體內(nèi)時(shí)，與IgE結(jié)合并迅速釋放大量炎性因子，介導(dǎo)平滑肌收縮、黏液分泌增加，提高血管通透性，誘導(dǎo)炎癥細(xì)胞浸潤[16]，這是過敏性哮喘發(fā)生的主要機(jī)制。本研究結(jié)果也提示我們，可以將FeNO作為鑒別診斷過敏性哮喘和非過敏性哮喘的輔助指標(biāo)。

由于疾病異質(zhì)性的存在，哮喘診斷的確立應(yīng)綜合考慮多方面的因素，僅通過一個(gè)哮喘診斷試驗(yàn)很難對哮喘進(jìn)行明確診斷。最新的美國胸科協(xié)會(huì)(ATS)指南強(qiáng)調(diào)了 FeNO 在嗜酸性粒細(xì)胞哮喘診斷中的價(jià)值。ATS 指南建議使用 FeNO 的臨界值，而不是預(yù)測性公式來進(jìn)行鑒別診斷。 FeNO 能有效對哮喘進(jìn)行鑒別診斷。對于病因不明的慢性呼吸系統(tǒng)疾病，相比肺功能，F(xiàn)eNO 能更準(zhǔn)確的診斷哮喘。FeNO 聯(lián)合肺功能和支氣管高反應(yīng)來診斷哮喘，其特異性和準(zhǔn)確性可分別達(dá)到 94% 和 93%。FeNO(臨界值 > 25 ppb)能有效診斷嗜酸性粒細(xì)胞哮喘。 對于哮喘樣癥狀患者，F(xiàn)eNO 水平的升高往往提示哮喘的存在。但是，使用 FeNO 進(jìn)行哮喘診斷也存在不少問題，這主要是由于部分表型哮喘存在氣道炎癥異質(zhì)性，且這種異質(zhì)性和 FeNO 水平的升高無明顯關(guān)聯(lián)(如中性粒細(xì)胞氣道炎癥)。 對于已使用吸入或口服激素治療的患者，F(xiàn)eNO 可能會(huì)出現(xiàn)假陰性結(jié)果。但是這也說明 FeNO 能有效反映哮喘患者激素治療的療效。 無哮喘但 FeNO > 50 ppb 的成人患者(兒童 > 35 ppb)，往往提示存在明顯的嗜酸性粒細(xì)胞氣道炎癥，吸入性糖皮質(zhì)激素治療療效好。無哮喘但 FeNO < 25ppb 的成人患者(兒童 < 20 ppb)，往往提示不存在嗜酸性粒細(xì)胞氣道炎癥，對吸入性糖皮質(zhì)激素治療效果差，也可能存在其他診斷。

明確診斷的無癥狀哮喘患者，F(xiàn)eNO > 50 ppb(兒童 > 35 ppb)提示吸入性糖皮質(zhì)激素減量會(huì)導(dǎo)致哮喘復(fù)發(fā)。明確診斷的無癥狀哮喘患者，若FeNO < 25 ppb(兒童<20 ppb)，提示可給予 吸入性糖皮質(zhì)激素減量甚至停藥。 有臨床研究針對下氣道不適主訴患者評估了FeNO診斷哮喘的準(zhǔn)確性。研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng) FeNO 臨界值為 46 ppb 時(shí)，診斷敏感性為 32%，特異性為 93%，陽性預(yù)測值為 80%。研究發(fā)現(xiàn)，如果 FeNO≤12 ppb，基本不考慮哮喘；如果 FeNO>46 ppb，可以診斷為哮喘。 另一個(gè)研究也發(fā)現(xiàn)，當(dāng) FeNO>31 ppb 時(shí)，可以診斷為哮喘(陽性預(yù)測值82%)；如果FeNO<12 ppb則不考慮哮喘(陰性預(yù)測值 81%)。當(dāng)患者存在中性粒細(xì)胞炎癥時(shí)，F(xiàn)eNO診斷的精確性會(huì)進(jìn)一步提高。 此外，若患者有呼吸困難、咳嗽伴或不伴喘息，此時(shí) FeNO 水平的升高往往提示可能存在哮喘。總之，F(xiàn)eNO本身具有良好的特異性，但在哮喘診斷上靈敏度相對較低，這限制了FeNO作為一項(xiàng)哮喘診斷性檢查的應(yīng)用。

[1] 徐艷娜,顧劍華,李永蓮,等.反復(fù)喘息嬰幼兒維生素D3水平及與Th1/Th2細(xì)胞平衡變化的相關(guān)性研究[J].中華實(shí)用兒科臨床雜志,2015,30(4):264-266.

[2] 單文婕,盧燕鳴,李亞琴,等.嬰幼兒反復(fù)喘息危險(xiǎn)因素Meta分析[J].中華實(shí)用兒科臨床雜志,2015,30(10):761-764.

[3] 朱亞菊,林芊,華麗,等.布地奈德混懸液聯(lián)合妥洛特羅貼劑治療嬰幼兒反復(fù)喘息的療效及安全性研究[J].上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2011,31(12):1729-1732.

[4] 張景麗,吳會(huì)芳,趙倩,等.嬰幼兒反復(fù)喘息的危險(xiǎn)因素研究[J].中國全科醫(yī)學(xué),2017,20(1):76-79.

[5] 陳芳,鄧力.呼出氣一氧化氮在嬰幼兒喘息中的研究進(jìn)展[J].中華實(shí)用兒科臨床雜志,2015,30(22):1751-1753.

[6] 徐艷娜,顧劍華,金曉群,等.血清25-羥維生素D3及總免疫球蛋白E水平與嬰幼兒反復(fù)喘息的相關(guān)性研究[J].中國醫(yī)藥,2014,9(11):1582-1584.

[7] 龔穎,葉伶,安霞,等.評估呼出氣一氧化氮(FeNO)在支氣管哮喘管理中的作用[J].復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2013,40(3):349-353.

[8] 張玉娥,單蓓蘭,虞炯,等.上海市普陀區(qū)兒童喘息及哮喘流行病學(xué)調(diào)查[J].臨床兒科雜志,2012,30(4):339-341.

[9] 王建榮,張?jiān)隼?烏魯木齊地區(qū)喘息患兒發(fā)生支氣管哮喘的危險(xiǎn)因素[J].實(shí)用兒科臨床雜志,2012,27(4):255-256

[10] Papadopoulos NG, Arakawa H, Carlsen KH等.兒童哮喘國際共識[J].中華實(shí)用兒科臨床雜志,2014,29(1):67-76.

[11] 張永明,林江濤,蘇楠,等.呼出氣一氧化氮檢測在慢性咳嗽病因診斷中的價(jià)值[J].中華醫(yī)學(xué)雜志,2011,91(18):1254-1258.

[12] 劉潔露,于化鵬,譚曉媚,等.支氣管激發(fā)試驗(yàn)與舒張?jiān)囼?yàn)對支氣管哮喘患者呼出氣一氧化氮測定值的影響和意義[J].中華結(jié)核和呼吸雜志,2016,39(3):189-192.

[13] 任旭斌,劉春濤,黃玉芳,等.呼出氣一氧化氮檢測對支氣管哮喘的診斷價(jià)值[J].中國呼吸與危重監(jiān)護(hù)雜志,2009,8(4):322-326.

[14] 霍龍,范曉云,陸兆雙,等.哮喘急性發(fā)作FeNO與外周血嗜酸粒細(xì)胞及肺功能的相關(guān)性研究[J].臨床肺科雜志,2014,19(4):583-585,589.

[15] Choi BS, Kim KW, Lee YJ, et al. Exhaled nitric oxide is associated with allergic inflammation in children[J]. J Korean Med Sci, 2011,26(10):1265-1269.

[16] 王修海,趙煒,劉世國,等.白細(xì)胞介素4和13基因多態(tài)性對支氣管哮喘患者易感性及血清總IgE水平的影響[J].中華結(jié)核和呼吸雜志,2009,32(3):161-164.

10.3969/j.issn.1002-266X.2017.35.022

R725.6

B

1002-266X(2017)35-0066-03

2017-06-20)