牛結(jié)核病流行病學(xué)與診斷技術(shù)研究之我見

王善泉

（江蘇東臺(tái)市梁垛鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，江蘇東臺(tái) 224225）

牛結(jié)核病流行病學(xué)與診斷技術(shù)研究之我見

王善泉

（江蘇東臺(tái)市梁垛鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，江蘇東臺(tái) 224225）

牛結(jié)核病是一種人畜共患的慢性消耗性傳染病，其傳播流行影響畜牧業(yè)的持續(xù)發(fā)展和人類的健康。闡述了牛結(jié)核病流行病學(xué)和診斷技術(shù)方面的研究進(jìn)展，以期為該病的診治與防控提供依據(jù)。

牛結(jié)核?。涣餍胁W(xué)；診斷技術(shù)；研究進(jìn)展

1 牛結(jié)核病流行病學(xué)研究進(jìn)展

20世紀(jì)80年代中期以來，在許多發(fā)達(dá)國(guó)家結(jié)核病不僅沒有下降，反而逐漸增加，而在一些貧困國(guó)家結(jié)核病已失去控制，特別是中非、南亞，因此1993年世界衛(wèi)生組織（WHO）宣布結(jié)核病處于全球緊急狀態(tài)。對(duì)檢出的陽性牛只不能及時(shí)處理，檢測(cè)手段的有限導(dǎo)致某些染疫牛無法流通限制，未能從根本上消滅傳染源，是造成牛結(jié)核病不斷發(fā)生和流行的主要原因。

現(xiàn)在，多數(shù)國(guó)家都不提倡使用疫苗的手段來控制牛結(jié)核病，而采用定期PPD皮試法檢測(cè)并屠宰PPD皮試診斷陽性牛的防控策略，許多發(fā)達(dá)國(guó)家就是利用該策略有效地控制了牛結(jié)核病。美國(guó)是第1個(gè)實(shí)行根除牛結(jié)核病的國(guó)家，自1971年實(shí)施消滅牛結(jié)核病的計(jì)劃以來，已經(jīng)使牛結(jié)核病發(fā)病率降至0.5%，以后一直呈零星散發(fā)。美國(guó)于1998年實(shí)現(xiàn)了無結(jié)核病目標(biāo)。但由于野生動(dòng)物以及人類結(jié)核病的發(fā)生和流行，后來在密歇根州又有疫情發(fā)生。因此，美國(guó)的牛群處在不斷的檢疫和高度警惕之中。歐盟國(guó)家于20世紀(jì)50年代簽署了控制牛結(jié)核病的協(xié)定，北歐的丹麥、比利時(shí)、挪威、德國(guó)和荷蘭等國(guó)已基本消滅了牛結(jié)核病，英國(guó)和法國(guó)處在控制狀態(tài)。大洋洲的澳大利亞、新西蘭等國(guó)家也已經(jīng)消滅了牛結(jié)核病，但近年來由于野生動(dòng)物獾和狐貍等動(dòng)物結(jié)核病病例的出現(xiàn)，致使牛又感染了結(jié)核病。

亞洲和非洲是牛結(jié)核病和人類結(jié)核病的高發(fā)區(qū)，其中印度發(fā)病最為嚴(yán)重。在所有的非洲國(guó)家中，只有7個(gè)國(guó)家考慮到牛結(jié)核病是必須申報(bào)的疫病而采取檢疫和部分撲殺政策，只有15%的結(jié)核病牛群采取檢疫和撲殺政策，其余48個(gè)國(guó)家采取的控制措施不當(dāng)或根本沒有采取任何控制措施。

2 牛結(jié)核病診斷技術(shù)研究進(jìn)展

結(jié)核病是一古老而又復(fù)雜的人畜共患病，因?yàn)橹委熾y度大，因此早期可靠診斷是防控本病的重要措施。同時(shí)，結(jié)核桿菌極難培養(yǎng)，對(duì)病原菌的體外培養(yǎng)和鑒定難于有效實(shí)施，因此結(jié)核病的診斷技術(shù)定位于免疫學(xué)或血清學(xué)檢測(cè)，目前世界上用于牛結(jié)核病的成熟可靠的診斷或檢測(cè)技術(shù)僅有提純結(jié)核菌素皮膚接種試驗(yàn)（包括頸部PPD皮試和尾根皺褶部PPD皮試）和γ干擾素ELISA試驗(yàn)。 轉(zhuǎn)貼于 233網(wǎng)校論文中

結(jié)核菌素提純蛋白衍生物（PPD）試驗(yàn)一直應(yīng)用于動(dòng)物和人結(jié)核病的免疫診斷法，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）和我國(guó)農(nóng)業(yè)部均將此方法列為牛結(jié)核病檢疫的標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)，此法至今仍是國(guó)內(nèi)外實(shí)際檢疫中最為實(shí)用的診斷方法。而其他檢測(cè)牛血清抗體的ELISA方法或免疫金標(biāo)方法，因?yàn)榻Y(jié)核病引發(fā)的體液免疫的滯后性，無法用于獸醫(yī)臨床試驗(yàn)。PCR試驗(yàn)已用于許多動(dòng)物疫病的快速檢測(cè)，但因分枝桿菌間的相互交叉干擾，或者待檢樣品中細(xì)菌過低過雜，易于造成假陽性和假陰性，因而檢測(cè)結(jié)核病的PCR診斷試驗(yàn)大都停留在實(shí)驗(yàn)室制備和應(yīng)用階段，在牛結(jié)核病的實(shí)際診斷中少有報(bào)道。澳大利亞已研制出牛結(jié)核病的γ干擾素ELISA試驗(yàn)，應(yīng)用結(jié)果表明，本方法比傳統(tǒng)的結(jié)核菌素法診斷牛結(jié)核病更敏感，并可有效解決假陽性的問題，γ干擾素ELISA試驗(yàn)將是牛結(jié)核病診斷的一個(gè)主要發(fā)展趨勢(shì)。

牛γ干擾素測(cè)定法的廣泛性田間試驗(yàn)已在世界上許多國(guó)家（包括澳大利亞、愛爾蘭、新西蘭、阿根廷、西班牙、意大利和美國(guó)）完成，并在澳大利亞和新西蘭被認(rèn)可為正式試驗(yàn)，美國(guó)和其他歐美國(guó)家也正在進(jìn)行本方法的區(qū)域試驗(yàn)和驗(yàn)證，以探討徹底替代PPD皮試法的可能性。目前已有20多萬頭經(jīng)過測(cè)試，本法敏感性為77.0%～93.6%，而相比較的結(jié)核菌素試驗(yàn)敏感性為65.6%～84.4%。西班牙學(xué)者選擇了85個(gè)牛群1 136頭牛進(jìn)行了牛頸部PPD比較皮試（SICCT）和γ干擾素ELISA試驗(yàn)比對(duì)，并且用細(xì)菌培養(yǎng)和PCR予以確認(rèn)，結(jié)果γ干擾素ELISA檢測(cè)法的敏感性為84.9%，SICCT的敏感性為80.2%，將2種方法結(jié)合起來的敏感性為92.9%。中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心也開展了頸部PPD皮試和γ干擾素ELISA比較，證實(shí)二者間陽性符合率較高，達(dá)90.6%。

牛頸部PPD比較皮試（SICCT）操作要點(diǎn)：一是部位。牛頸部同一側(cè)，中上部1/3處區(qū)域。二是注射器。針尖不能太寬太長(zhǎng)，直徑0.45 mm、長(zhǎng)度3～4 mm為宜。三是劑量。牛和禽PPD劑量不低于2 000 IU/0.1 ml，一般為2 000～3 250 IU，如采取TB根除計(jì)劃則提高為5 000 IU，接種量基本為0.1 ml，不高于0.2 ml。四是間隔距離。牛和禽PPD注射部位間距15～20 cm。五是結(jié)果判定。72 h后判定，如皮厚差4 mm以上，有紅腫熱痛等炎性反應(yīng)則判定為陽性；2.1～3.9mm的判為可疑；2 mm以下的為陰性。凡判定為疑似反應(yīng)的牛只，于第1次檢疫60 d后進(jìn)行復(fù)檢，其結(jié)果仍為疑似反應(yīng)時(shí)，經(jīng)60 d再?gòu)?fù)檢，如仍為疑似反應(yīng)，應(yīng)判為陽性。牛尾根皺褶部PPD皮試（CFT）操作要點(diǎn)：一是部位。牛尾根皺褶部。二是劑量。因敏感性低于頸部皮試，因此接種劑量應(yīng)適當(dāng)提高，可以提高至頸部皮試量的1倍左右。三是結(jié)果判定。72 h后判定，如皮厚差4 mm以上，出現(xiàn)可摸到或可見的腫塊時(shí)則判定為陽性。如呈現(xiàn)陽性則10 d后以頸部PPD皮試進(jìn)行確認(rèn)。

[1] 胡來根.牛結(jié)核病的診斷與防制[J].畜牧與飼料科學(xué)，2012，（4）：110-111.

[2] 賈伍有.奶牛結(jié)核病及其防治[J].畜牧與飼料科學(xué)，2013，30（1）：161-162.

王善泉（1962—），男，江蘇東臺(tái)人，主要從事畜牧生產(chǎn)與疫病防治技術(shù)推廣研究工作。