武夷巖茶復(fù)方顆粒劑對(duì)糖尿病大鼠的降血糖作用

安品弟，蔣慧穎，馬玉仙，曾文治，褚克丹，楊江帆

武夷巖茶復(fù)方顆粒劑對(duì)糖尿病大鼠的降血糖作用

安品弟1，蔣慧穎1，馬玉仙1，曾文治1，褚克丹2，楊江帆1

目的 研究武夷巖茶復(fù)方顆粒劑對(duì)STZ糖尿病大鼠的影響。方法 通過(guò)對(duì)Wistar大鼠進(jìn)行腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)來(lái)建立糖尿病大鼠模型，對(duì)高血糖造模大鼠灌胃武夷巖茶或不同劑量的武夷巖茶復(fù)方顆粒劑，于給藥30 d測(cè)量各組大鼠的空腹血糖值與糖耐量。結(jié)果 武夷巖茶與武夷巖茶復(fù)方顆粒劑都能夠控制STZ糖尿病大鼠血糖的提升以及改善大鼠糖耐量，其中，武夷巖茶復(fù)方顆粒劑的降血糖效果更好。結(jié)論 本方法所制的武夷巖茶復(fù)方顆粒劑對(duì)糖尿病大鼠具有降血糖功效。

糖尿病大鼠；鏈脲佐菌素(STZ)；武夷巖茶；武夷巖茶復(fù)方顆粒劑

糖尿病是一種比較常見(jiàn)而又很難根治的慢性病，其患病率有逐年上升的趨勢(shì)[1]。在西歐發(fā)達(dá)國(guó)家，糖尿病被列為血管病、腫瘤之后的第三大疾病，嚴(yán)重威脅著人類(lèi)的健康[2]。目前醫(yī)學(xué)界一般使用磺脲類(lèi)藥物和雙胍類(lèi)降糖藥等口服的西藥治療糖尿病，但是這些藥物副作用比較大，所以急需一些無(wú)毒副作用的保健產(chǎn)品來(lái)輔助治療糖尿病。

研究發(fā)現(xiàn)[3-5]，茶葉與不同的中藥相互作用，有助于降低血糖、修復(fù)胰島β細(xì)胞，且無(wú)毒副作用。本文選擇武夷巖茶(黃片)與黃精、鐵皮石斛等中藥復(fù)合研制的武夷巖茶復(fù)方顆粒劑對(duì)其降糖功效進(jìn)行探討，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料 體質(zhì)量(200±20) g的Wistar雄性大鼠(福建中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心)，武夷巖茶(黃片，武夷山購(gòu)買(mǎi))，武夷巖茶復(fù)方顆粒劑(實(shí)驗(yàn)室自制)；鏈脲佐菌(STZ)(福州邁新生物技術(shù)有限公司)，檸檬酸、檸檬酸鈉等(上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司)，AR5120 Sartorius電子分析天平(瑞士賽多利斯)，血糖儀(sigma公司)等。

1.2 烏龍茶水提物的制備 將武夷巖茶黃片粉碎過(guò)篩(20目)，按中試水提取工藝進(jìn)行提取，即料液比1∶35，提取2次，提取溫度80 ℃，提取時(shí)間 30 min。將2次提取液合并，過(guò)濾后減壓濃縮干燥得武夷巖茶水提取物[6]。

1.3 實(shí)驗(yàn)分組及劑量選擇 將動(dòng)物適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后將實(shí)驗(yàn)鼠分為6組，分別是：正常對(duì)照組，模型對(duì)照組，高、中、低武夷巖茶復(fù)方劑量組，武夷巖茶組。將武夷巖茶復(fù)方顆粒劑按照成人每日每公斤體質(zhì)量推薦攝入量的10、20、30倍劑量配制成溶液按老鼠體質(zhì)量灌胃，其中正常對(duì)照組和模型對(duì)照組給予灌胃同體積的0.9%生理鹽水，武夷巖茶劑量組給予灌胃相同體積的茶葉水提物。

1.4 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)項(xiàng)目及方法

1.4.1 高血糖大鼠造模 取正常大鼠50只，隨機(jī)分為5組，每組10只，將大鼠禁食3～5 h，用血糖儀檢測(cè)大鼠尾靜脈血糖，作為該批次動(dòng)物基礎(chǔ)血糖值。隨后禁食24 h(自由飲水)，按劑量30 mg·kg-1腹腔注射STZ溶液(用前新鮮配制，臨用前溶解在pH=4.5的0.1 mmol·L-1檸檬酸緩沖液內(nèi)，1次· d-1，連續(xù)2 d)，正常對(duì)照組注射等量檸檬酸緩沖液，1次· d-1，連續(xù)2 d[6]。3 d后動(dòng)物禁食3～5 h，測(cè)尾靜脈血糖，血糖值≥16.7 mmol·L-1并且有多飲多食多尿等癥狀即認(rèn)定為高血糖模型成功動(dòng)物。

1.4.2 正常大鼠血糖實(shí)驗(yàn) 把50只體質(zhì)量為(200±20) g的正常Wistar大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)5 d，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、武夷巖茶組和3個(gè)武夷巖茶復(fù)方劑量組，分組完成后，每天上午8點(diǎn)給藥，高、中、低三劑量組分別給予灌胃劑量為3.3、6.7、10.0 g·kg-1的武夷巖茶復(fù)方顆粒劑，正常組對(duì)照組和模型對(duì)照組給予灌胃同體積的0.9%生理鹽水，連續(xù)30 d，測(cè)定空腹血糖。

1.4.3 正常大鼠糖耐量實(shí)驗(yàn) 把50只體質(zhì)量為(200±20) g的正常Wistar大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)5 d，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、武夷巖茶組和3個(gè)武夷巖茶復(fù)方劑量組，分組完成后，每天上午8點(diǎn)給藥，高、中、低三劑量組分別給予灌胃劑量為3.3、6.7、10.0 g·kg-1的武夷巖茶復(fù)方顆粒劑，5組大鼠連續(xù)給藥7 d后，第8天禁食5 h，自由飲水，測(cè)定血糖值，給予灌胃25%葡萄糖溶液(2.0 g·kg-1)，分別于給予葡萄糖后0、30、60、120 min再次取血測(cè)定血糖值并計(jì)算血糖曲線(xiàn)下面積。血糖曲線(xiàn)下面積S(mmol/L)=(a+2b+3c+2d)/4 ，其中a、b、c、d分別為灌胃葡萄糖溶液0、30、60、120 min后的血糖值[7]。

1.4.4 高血糖大鼠血糖實(shí)驗(yàn) 將高血糖模型大鼠隨機(jī)分為模型對(duì)照組、武夷巖茶組和3個(gè)武夷巖茶復(fù)方劑量組。分組完成后，每天上午8點(diǎn)給藥，高、中、低三劑量組分別給予灌胃劑量為3.3、6.7、10.0 g·kg-1的武夷巖茶復(fù)方顆粒劑，正常對(duì)照組和模型對(duì)照組給予灌胃同體積的0.9%生理鹽水，連續(xù)30 d，測(cè)定空腹血糖。

1.4.5 高血糖Wistar大鼠糖耐量實(shí)驗(yàn) 將高血糖模型大鼠隨機(jī)分為模型對(duì)照組、武夷巖茶組和3個(gè)武夷巖茶復(fù)方劑量組。分組完成后，每天上午8點(diǎn)給藥，高、中、低三劑量組分別給予灌胃劑量為3.3、6.7、10.0 g·kg-1的武夷巖茶復(fù)方顆粒劑，正常對(duì)照組和模型對(duì)照組給予灌胃同體積的0.9%生理鹽水，糖尿病大鼠連續(xù)給藥7 d后，第8天禁食5 h，自由飲水，測(cè)定血糖值，給予灌胃25%葡萄糖溶液(2.0 g·kg-1)，分別于給予葡萄糖后0、30、60、120 min再次取血測(cè)定血糖值并計(jì)算血糖曲線(xiàn)下面積。

1.5 數(shù)據(jù)處理 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用DPS軟件對(duì)各組采用重復(fù)測(cè)量方差分析，不同字母表示同一行數(shù)據(jù)組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2 結(jié)果與分析

2.1 武夷巖茶復(fù)方顆粒劑對(duì)正常大鼠血糖的影響武夷巖茶復(fù)方顆粒劑高、中、低劑量組與武夷巖茶組大鼠在連續(xù)給藥30 d后，血糖值基本無(wú)變化，與對(duì)照組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。表明長(zhǎng)期灌胃武夷巖茶復(fù)方顆粒劑與武夷巖茶對(duì)正常血糖值無(wú)影響，見(jiàn)表1。

表1 武夷巖茶復(fù)方顆粒劑對(duì)正常大鼠大鼠血糖的影響(±s)

2.2 武夷巖茶復(fù)方顆粒劑對(duì)正常大鼠糖耐量的影響 正常大鼠在給予灌胃25%葡萄糖溶液后，血糖值在0～30 min時(shí)間段內(nèi)迅速升高并達(dá)到頂峰值，之后血糖逐漸降低。120 min時(shí)血糖降低到正常水平，并且各給藥組血糖與正常組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，各給藥組的曲線(xiàn)下面積與正常組相比也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，表明武夷巖茶復(fù)方顆粒劑與武夷巖茶有改善正常大鼠糖耐量的作用，見(jiàn)表2。

表2 武夷巖茶復(fù)方顆粒劑對(duì)正常大鼠糖耐量的影響(±s)

注：①與正常對(duì)照組比較，P<0.05；②與武夷巖茶組比較P<0.05；

2.3 武夷巖茶復(fù)方顆粒劑對(duì)STZ高血糖大鼠空腹血糖的影響 大鼠注射STZ后，血糖顯著升高，在給藥后10、20、30 d模型組大鼠與正常組大鼠相比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，說(shuō)明STZ大鼠造模成功，并在試驗(yàn)期間一直保持高血糖狀態(tài)。灌胃10 d后，給藥組大鼠血糖開(kāi)始下降，灌胃20 d后，武夷巖茶復(fù)方顆粒劑高、中、低劑量組與武夷巖茶組大鼠血糖下降顯著，與模型組相比較，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，并且武夷巖茶復(fù)方顆粒劑高、中、低劑量組大鼠血糖的降低值大于武夷巖茶組，證明武夷巖茶復(fù)方顆粒劑與武夷巖茶都具有很好的降血糖作用，并且武夷巖茶復(fù)方顆粒劑的各組分之間具有協(xié)同作用，見(jiàn)表3。

表3 武夷巖茶復(fù)方顆粒劑對(duì)STZ高血糖大鼠空腹血糖的影響(±s)

注：①與正常對(duì)照組比較P<0.05；②與武夷巖茶組比較P<0.05。

2.4 武夷巖茶復(fù)方顆粒劑對(duì)高血糖大鼠糖耐量的影響 高血糖大鼠在給予灌胃25%葡萄糖溶液后，血糖值在0～30 min時(shí)間段內(nèi)迅速升高并達(dá)到頂峰值，之后血糖逐漸降低，模型對(duì)照組大鼠血糖于糖負(fù)荷后逐漸升高，與糖負(fù)荷前血糖濃度無(wú)差別。武夷巖茶復(fù)方顆粒劑高、中、低劑量組與武夷巖茶組在糖負(fù)荷后0～30 min時(shí)間段內(nèi)迅速升高并達(dá)到頂峰值，120 min后血糖值在糖負(fù)荷前血糖值附近，并且與模型組血糖比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。各給藥組的曲線(xiàn)下面積與模型組相比都具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，表明武夷巖茶復(fù)方顆粒劑與武夷巖茶有改善糖尿病大鼠糖耐量的作用，見(jiàn)表4。

表4 武夷巖茶復(fù)方顆粒劑對(duì)STZ高血糖大鼠糖耐量的影響(±s)

注：①與正常對(duì)照組比較P<0.05；②與武夷巖茶組比較P<0.05。

3 討論

鏈脲佐菌素(STZ)是從鏈霉菌中提取出來(lái)的一種抗生素，由葡萄糖分子和甲基化氮源部分組成，是誘導(dǎo)糖尿病動(dòng)物模型的常用藥物之一[8]。STZ誘導(dǎo)模型通過(guò)STZ對(duì)胰島的選擇性毒性作用，直接損傷β細(xì)胞，造成胰島素分泌不足，從而引起血糖上升，但是對(duì)其他臟器的損害很輕。故而STZ誘導(dǎo)的Wistar大鼠病情穩(wěn)定，存活時(shí)間相對(duì)比較長(zhǎng)[9]。本實(shí)驗(yàn)主要內(nèi)容是研究武夷巖茶復(fù)方顆粒劑對(duì)由損傷β細(xì)胞所引起的糖尿病大鼠血糖的影響。因此，本實(shí)驗(yàn)利用鏈脲佐菌素(STZ)制造高血糖大鼠模型。

武夷巖茶，所采的鮮葉是連梗帶葉的成熟鮮葉(即三葉半開(kāi)面)，經(jīng)過(guò)獨(dú)特的做青工藝制作，搖青與涼青交替進(jìn)行，動(dòng)靜結(jié)合，通過(guò)“走水”，這些成分從梗脈向葉面分布，使葉面的兒茶素、氨基酸等成分更加豐富[10]。其降血糖效果明顯優(yōu)于白茶、綠茶和紅茶，這表明武夷巖茶中存在其他高效的降血糖成分。因此，將武夷巖茶用于防治糖尿病擁有其他茶類(lèi)所無(wú)法比擬的優(yōu)勢(shì)。黃精和鐵皮石斛因多糖等成分含量高而具有顯著的降血糖功效[11-12]，其主要作用路徑是通過(guò)降低胰島素抵抗或增加胰島素分泌來(lái)調(diào)節(jié)糖代謝。如果在武夷巖茶中添加降糖效果好的茶多糖，同時(shí)外源添加多糖含量高的鐵皮石斛和黃精等中藥必將有助于武夷巖茶(黃片)降血糖功效的提升。

本研究通過(guò)對(duì)正常對(duì)照組大鼠以及STZ造模高血糖大鼠灌胃、測(cè)定實(shí)驗(yàn)前后血糖值，并結(jié)合糖耐量試驗(yàn)進(jìn)行全方位研究武夷巖茶復(fù)方顆粒劑對(duì)血糖的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明武夷巖茶與武夷巖茶復(fù)方顆粒劑都能夠控制糖尿病大鼠血糖的提升以及改善糖尿病大鼠的糖耐量，武夷巖茶復(fù)方顆粒劑降血糖功效明顯優(yōu)于單獨(dú)武夷巖茶，驗(yàn)證了茶葉與中藥的復(fù)合具有協(xié)同作用，為烏龍茶與中藥復(fù)合應(yīng)用于治療糖尿病提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。茶葉與口服降糖藥物不同，茶葉是天然產(chǎn)物，副作用小，因此茶葉與中藥的復(fù)合具有開(kāi)發(fā)新降血糖藥物的前景。

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Experimental Study on Hypoglycemic Effect of

Wuyi Compound Granule on Diabetic Rats AN Pin-di1, JIANG Hui-ying1, MA Yu-xian1, ZENG Wen-zhi1, CHU Ke-dan2, YANG Jiang-fan1

(1.Fujian Agriculture and Forestry University,Collaborative Innovation Center of Chinese Oolong Tea Industry,Fuzhou 350002,China;2.College of Pharmacy,Fujian University of Traditional Chinese Medicine,Fuzhou 350002,China)

ObjectiveTo study the effect of Wuyi compound granules on streptozotocin (STZ) rats.MethodsThe diabetic rat model was established by intraperitoneal injection of STZ to Wistar. The hyperglycemic rats was intragastrical administration of Wuyi rock tea and Wuyi compound granules with different doses, and the blood glucose and glucose tolerance in rats were measured after 30 d.ResultsThe results show that both the Wuyi rock tea or Wuyi compound granules can control the increase of STZ diabetic rats blood glucose and improve the glucose tolerance in rats, and the hypoglycemic effect of compound granule of Wuyi rock tea was better.ConclusionWuyi compound granules made by the method have a hypoglycemic effect on diabetic rat.

diabetic rats；streptozotocin；Wuyi rock tea；Wuyi compound granules

1672-688X(2017)01-0014-004

10.15926/j.cnki.issn1672-688x.2017.01.005

福建省“2011協(xié)同創(chuàng)新中心”中國(guó)烏龍茶產(chǎn)業(yè)協(xié)同創(chuàng)新中心專(zhuān)項(xiàng)(閩教科〔2015〕75號(hào))

2017-01-12

1.福建農(nóng)林大學(xué)園藝學(xué)院/中國(guó)烏龍茶協(xié)同創(chuàng)新中心，福建福州 350002 2.福建中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，福建福州 350002

安品弟(1991—)，女，河南禹州人，從事茶葉經(jīng)濟(jì)與資源利用研究。

楊江帆，男，教授，E-mail：yjf3001@163.com

R587.1

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