屠呦呦：鑄就青蒿素抗瘧傳奇

◎ 本刊記者 馮翔慧

屠呦呦：鑄就青蒿素抗瘧傳奇

◎ 本刊記者 馮翔慧

“呦呦鹿鳴，食野之蒿?！?86歲的屠呦呦因創(chuàng)造性地發(fā)現(xiàn)、提取了抗瘧藥物青蒿素，問鼎2016年度國家科學(xué)技術(shù)獎(jiǎng)最高榮譽(yù)，成為有史以來獲此殊榮的第一位女性科學(xué)家。這是她繼2011年榮獲拉斯克獎(jiǎng)臨床醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)，2015年榮獲諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)之后，獲得的又一項(xiàng)“重量級(jí)”大獎(jiǎng)。

問世40年來，青蒿素已經(jīng)挽救了數(shù)百萬人的生命。

臨危受命

將抗瘧藥研發(fā)的重任委以屠呦呦，在于她扎實(shí)的中西醫(yī)知識(shí)和被同事公認(rèn)的科研能力。1969年年初，剛過38歲的屠呦呦已經(jīng)在衛(wèi)生部中醫(yī)研究院（現(xiàn)中國中醫(yī)科學(xué)院）中藥研究所工作了快14年。她是新中國培養(yǎng)的第一代大學(xué)生，1955年畢業(yè)于北京大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系。

那年1月21日，屠呦呦了解到一個(gè)全國性大協(xié)作項(xiàng)目——“523”任務(wù)，她的科研人生就此迎來轉(zhuǎn)折?！?23”任務(wù)，是一項(xiàng)援外戰(zhàn)備緊急軍工項(xiàng)目，也是一項(xiàng)巨大的秘密科研工程，涵蓋了瘧疾防控的所有領(lǐng)域。在20世紀(jì)60年代的東南亞戰(zhàn)場上，瘧原蟲已經(jīng)對奎寧類藥物產(chǎn)生了抗性。能否抵抗瘧疾，甚至成了越南戰(zhàn)場上美越雙方的“勝負(fù)手”。在中國，20世紀(jì)60年代初和70年代初，也曾大范圍暴發(fā)瘧疾，全國發(fā)病人數(shù)多達(dá)1000萬到2000萬。

抗瘧藥的研發(fā)，是在和瘧原蟲奪命的速度賽跑。

在當(dāng)時(shí)的歷史背景下，支撐屠呦呦堅(jiān)持下來的是“責(zé)任”和“擔(dān)當(dāng)”。屠呦呦常說的就是：國家培養(yǎng)了我，我也得為國家做些事情。

191次實(shí)驗(yàn)

“我們把青蒿買來先泡，然后把葉子包起來用乙醚泡，直到第191次實(shí)驗(yàn)，才真正發(fā)現(xiàn)了有效成分?！睆?969年接到代號(hào)為“523”的國家任務(wù)至今，已近半個(gè)世紀(jì)。年近九旬的老人，說起往昔，輕描淡寫。

接手任務(wù)后，屠呦呦翻閱古籍，尋找方藥，拜訪老中醫(yī)，對能獲得的中藥信息，逐字逐句地抄錄。在匯集了包括植物、動(dòng)物、礦物等2000余內(nèi)服、外用方藥的基礎(chǔ)上，課題組編寫了以640種中藥為主的《瘧疾單驗(yàn)方集》。屠呦呦說：“正是這些信息的收集和解析鑄就了青蒿素發(fā)現(xiàn)的基礎(chǔ)，這也是中藥新藥研究有別于一般植物藥研發(fā)的地方。”

到1971年9月初，課題組篩選了100余種中藥的水提物和醇提物樣品200余個(gè)，但結(jié)果令人失望。重新埋下頭去，看醫(yī)書！從《神農(nóng)本草經(jīng)》到《圣濟(jì)總錄》再到《溫病條辨》……終于，葛洪的《肘后備急方》中關(guān)于青蒿抗瘧的記載跳了出來，給黑暗中摸索的課題組一抹亮光——“青蒿一握，以水二升漬，絞取汁，盡服之?！?/p>

為什么古人用“絞汁”？是不是加熱破壞了青蒿里的有效成分？屠呦呦決定用沸點(diǎn)只有34.6℃的乙醚來提取青蒿?！澳菚r(shí)藥廠都停工，只能用土辦法。我們把青蒿買來先泡，然后把葉子包起來用乙醚泡，直到第191次實(shí)驗(yàn)，才真正發(fā)現(xiàn)了有效成分?！蓖肋线险f。

實(shí)驗(yàn)過程繁復(fù)而冗長。1971年10月4日，191號(hào)青蒿乙醚中性提取物樣品抗瘧實(shí)驗(yàn)的最后結(jié)果出爐——對瘧原蟲的抑制率達(dá)到了100%。1972年3月8日，屠呦呦作為代表在全國“523”辦公室主持的南京中醫(yī)中藥專業(yè)組會(huì)議上報(bào)告了青蒿乙醚中性粗提物的鼠瘧、猴瘧抑制率達(dá)100%的結(jié)果。呦呦等人去往海南昌江地區(qū)進(jìn)行臨床驗(yàn)證。結(jié)果顯示，該藥品對當(dāng)?shù)亍⒌童憛^(qū)、外來人口的間日瘧和惡性瘧均有一定的效果，尤其是對11例間日瘧患者，有效率達(dá)100%。

土法上馬

當(dāng)時(shí)所有的工作都停了，藥廠也都停了，根本沒有誰能配合屠呦呦等人的工作，所以只能“土法上馬”：用7個(gè)大水缸取代實(shí)驗(yàn)室常規(guī)提取容器。中藥所又增派人員，開始大量提取青蒿乙醚提取物，以進(jìn)行臨床前的毒性試驗(yàn)和制備臨床觀察用藥。

乙醚等有機(jī)溶媒對身體有害，當(dāng)時(shí)設(shè)備簡陋，沒有通風(fēng)系統(tǒng)，也沒有實(shí)驗(yàn)防護(hù)?？蒲腥藛T除了頭暈眼脹，還出現(xiàn)鼻子出血、皮膚過敏等癥狀，屠呦呦也得上了中毒性肝炎。

困難依然有。在個(gè)別動(dòng)物的病理切片中，研究人員發(fā)現(xiàn)了藥物的疑似毒副作用。藥理人員堅(jiān)持，藥物的毒理、毒性情況還未完全明確，上臨床還不夠條件。

“我當(dāng)時(shí)心里很著急，因?yàn)榀懠策@種傳染病有季節(jié)性，實(shí)在不想錯(cuò)過當(dāng)年的臨床觀察季節(jié)，否則就要再等一年?！?972年7月，屠呦呦等3名科研人員住進(jìn)了北京東直門醫(yī)院，當(dāng)起了人體試毒的首批“小白鼠”。之后，科研團(tuán)隊(duì)又在中藥所內(nèi)補(bǔ)充5例增大劑量的人體試服，受試者情況良好，未出現(xiàn)明顯毒副作用。

帶著青蒿的乙醚中性提取物，屠

良藥誕生

在青蒿素問世和推廣以前，全世界每年約有4億人次感染瘧疾，至少有100萬人死于此病。青蒿素類抗瘧藥，成為瘧疾肆虐地區(qū)的救命藥。

臨床驗(yàn)證結(jié)果良好。下一步，就是盡快找到這青蒿乙醚中性提取物的有效成分，弄清楚這到底是什么化合物。

據(jù)中藥所有關(guān)研究人員回憶，由于當(dāng)時(shí)對青蒿的了解不太多，不論對有效成分的部位還是提取工作都處于摸索階段，研究人員各自對提取工作都提出了相應(yīng)的意見。屠呦呦課題組的倪慕云設(shè)計(jì)了有效提取物色譜柱分離的前處理，但未能分離到單體。組員鐘裕蓉在倪慕云的色譜柱前處理基礎(chǔ)上，于1972年11月8日，改用硅膠柱分離，用石油醚和乙酸乙酯—石油醚洗脫，最先得到含量大的方形結(jié)晶，編號(hào)為“結(jié)晶Ⅰ”；隨后洗脫出來的是針形結(jié)晶，編號(hào)為“結(jié)晶Ⅱ”，這種結(jié)晶含量很少；再后來得到的另一種針形結(jié)晶，編號(hào)為“結(jié)晶Ⅲ”。12月初經(jīng)鼠瘧試驗(yàn)證明，“結(jié)晶Ⅱ”是唯一有抗瘧作用的有效單體。11月8日，也成為課題組認(rèn)定的青蒿素誕生之日。

1986年，青蒿素類抗瘧藥獲得衛(wèi)生部實(shí)施新藥審批辦法以來的第一個(gè)新藥證書。

屠呦呦的工作，并沒有止步于發(fā)現(xiàn)青蒿素。1973年，她工作的重點(diǎn)就轉(zhuǎn)向了青蒿素的化學(xué)研究。經(jīng)構(gòu)效關(guān)系研究，明確青蒿素結(jié)構(gòu)中的過氧基團(tuán)是抗瘧活性基團(tuán)，部分雙氫青蒿素羥基衍生物的鼠瘧效價(jià)也有所提高。雙氫青蒿素及其片劑的開發(fā)研究工作，是屠呦呦及其課題組對中國乃至世界作出的又一重要貢獻(xiàn)。

如今，以青蒿素類藥物為主的聯(lián)合療法，已是世界衛(wèi)生組織推薦的抗瘧疾標(biāo)準(zhǔn)療法。

拋掉光環(huán)

繼獲得2011年拉斯克獎(jiǎng)、2015年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)之后，此次屠呦呦又獲得國家最高科學(xué)技術(shù)獎(jiǎng)。對此，屠呦呦平淡地說：“拋掉獎(jiǎng)項(xiàng)的光環(huán)，回歸本真?？蒲械哪康?，就是解決問題。醫(yī)學(xué)科研的目的，就是緩解人們的病痛。當(dāng)年的研究，不是為了得獎(jiǎng)，也不會(huì)有人想到得獎(jiǎng)。”她說，更應(yīng)考慮的，是如何把尊重原創(chuàng)和發(fā)揮團(tuán)隊(duì)精神有機(jī)結(jié)合。

屠呦呦不會(huì)說“場面話”，她就是直來直去。每次開會(huì)，屠呦呦從不說什么“這好”“那好”，而是一針見血指出問題。

屠呦呦思慮著青蒿素的未來。她嚴(yán)肅地指出，這些年來，沒有很好地組織進(jìn)一步研究，一直到現(xiàn)在，青蒿素的抗瘧機(jī)理也沒有弄清楚?！耙粋€(gè)新藥只有把機(jī)理搞清楚了，才能充分發(fā)揮它的作用。”

中國中醫(yī)科學(xué)院院長張伯禮總結(jié)出了青蒿素精神的內(nèi)核：醫(yī)學(xué)研究應(yīng)該圍繞臨床的重大需求；在方法上應(yīng)該把傳統(tǒng)中醫(yī)的經(jīng)驗(yàn)智慧和現(xiàn)代科技相結(jié)合；個(gè)人發(fā)明和團(tuán)隊(duì)精神、舉國體制相結(jié)合；科研人員要淡泊名利，靜下心來。