蔬菜中百菌清等有機(jī)氯及擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法優(yōu)化

紀(jì)翠娟

（河北省任丘市農(nóng)業(yè)局 河北 任丘 062550）

蔬菜中百菌清等有機(jī)氯及擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法優(yōu)化

紀(jì)翠娟

（河北省任丘市農(nóng)業(yè)局 河北 任丘 062550）

根據(jù)NY/T761-2008蔬菜中有機(jī)氯農(nóng)藥檢測(cè)方法，優(yōu)化色譜條件，結(jié)果表明，加標(biāo)回收率在86.5%～110.3%，RSD在3.12%～9.27%。此分析方法重現(xiàn)性好，簡(jiǎn)單準(zhǔn)確，為蔬菜中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留檢測(cè)定量分析提供參考方案和依據(jù)。

蔬菜；有機(jī)氯及擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)；農(nóng)藥殘留

我國(guó)是以農(nóng)為本的大國(guó)，農(nóng)藥殘留問(wèn)題近年因安全問(wèn)題和出口貿(mào)易，越來(lái)越受到人民和各級(jí)政府的重視。至今在世界各國(guó)統(tǒng)計(jì)的農(nóng)藥逾1 500種，主要用于防治昆蟲(chóng)及有毒有害病菌。有機(jī)氯及擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥因其生物毒性強(qiáng)、高殘留且具有富集性、難以降解等特殊特性，已經(jīng)成為一種嚴(yán)重的環(huán)境污染問(wèn)題。

常規(guī)的蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)，因技術(shù)簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)便易上手、省錢(qián)省力等優(yōu)勢(shì)被廣泛使用，但快速檢測(cè)一般受限于有機(jī)磷及氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥的范疇，且靈敏度低，準(zhǔn)確性差，假陽(yáng)性且不能提供法律依據(jù)等問(wèn)題，已經(jīng)越來(lái)越不能適應(yīng)當(dāng)前的農(nóng)產(chǎn)品安全問(wèn)題的需要。

本優(yōu)化方法用乙腈作為萃取溶劑，經(jīng)SPE柱凈化，濃縮，氣相色譜儀電子捕獲檢測(cè)器檢測(cè)，外標(biāo)法定性定量，方法簡(jiǎn)單、靈敏度高。

1 材料與方法

1.1 樣品材料的采集。取認(rèn)定產(chǎn)地內(nèi)蔬菜種植園區(qū)即將上市的樣品，隨機(jī)取樣。單個(gè)樣品3 kg，簽抽樣單，送回實(shí)驗(yàn)室，用組織搗碎機(jī)切碎，用于檢測(cè)，300 g以上留樣。

1.2 儀器與試劑。島津GC2010plus，ECD檢測(cè)器，配自動(dòng)進(jìn)樣器，電子分析天平；丙酮、乙腈、正己烷，氯化鈉(140℃烘4 h，至于干燥器內(nèi)備用)；百菌清、腐霉利、三唑酮、五氯硝基苯、氯氟氰菊酯、氯氰菊酯、莠去津，標(biāo)準(zhǔn)品均由農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所提供。

1.3 色譜分析條件。色譜柱：Rtx-CLpesticides(30 m ×0.32 mm×0.5 μm)。固相萃取柱：弗羅里矽柱，容積6 ml，填充物1 000 mg。進(jìn)樣量：1.0 μl。溫度：進(jìn)樣口220℃；檢測(cè)器300℃。載氣：氮?dú)狻Ａ魉伲?.38 ml/min，尾吹氣流速30 ml/min。進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣。升溫梯度：150℃(保持2 min)，6℃/min升溫到270℃(保持8 min)。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 標(biāo)準(zhǔn)工作液制備。分別取各儲(chǔ)備液(10 μg/ml) 0.1 ml于10 ml容量瓶中，用正己烷稀釋溶解定容至刻度，各標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)濃度均為0.1 μg/ml。

1.4.2 樣品提取。稱(chēng)取25.0 g試料于燒杯中，加乙腈50.0 ml，在勻漿機(jī)中高速勻漿2 min，用濾紙過(guò)濾，濾液收集到裝有6 g氯化鈉的100 ml具塞量筒中，收集濾液40～50 ml，蓋上蓋子，劇烈震蕩1 min，在室溫下靜置30 min，使乙腈和水相充分分層，分層界限清楚。注意事項(xiàng)：①若發(fā)生乳化現(xiàn)象，應(yīng)加少量水后靜置。②一般要求振搖之后，具塞量筒下層需有少量氯化鈉固體剩余。③室溫靜置時(shí)間在30 min左右，過(guò)短過(guò)長(zhǎng)均對(duì)回收率有影響。

1.4.3 凈化。從具塞量筒中吸取10.00 ml乙腈溶液放入150 ml燒杯中，將燒杯放在80℃水浴鍋上加熱，杯內(nèi)緩緩?fù)ㄈ肟諝饬?，蒸發(fā)近干，加入2.0 ml正己烷，蓋上鋁箔，備用。將弗羅里矽柱依次用5.0 ml正己烷預(yù)淋洗，條件化，當(dāng)溶劑液面到達(dá)柱吸附層表面時(shí)，立即倒入待凈化溶液，用15 ml刻度離心管接收洗脫液，用5 ml丙酮+正己烷(10+90)沖洗燒杯后淋洗弗羅里矽柱，并重復(fù)1次。將盛有淋洗液的離心管50℃氮吹蒸發(fā)至小于5 ml，用正己烷定容至5.0 ml，渦旋混勻，移入樣品瓶中，供色譜測(cè)定。注意事項(xiàng)：①條件化SPE小柱溶劑液面到達(dá)柱吸附層表面時(shí)，需馬上倒入凈化液，不能放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。②提取液在80℃水浴鍋上加熱蒸發(fā)，不可完全蒸發(fā)干，應(yīng)蒸發(fā)至近干，以免影響標(biāo)準(zhǔn)品回收率。③淋洗弗羅里矽柱最后，應(yīng)用吸耳球?qū)⑿≈鶅?nèi)殘留液體吹入刻度離心管內(nèi)。

2 結(jié)果與討論

2.1 重復(fù)性、穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

2.1.1 將0.1 μg/ml標(biāo)準(zhǔn)工作液，在既定的色譜條件下，同一樣品進(jìn)樣6針，計(jì)算8種有機(jī)氯及擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥殘留量，結(jié)果表明，8種農(nóng)藥殘留峰面積RSD(%)均小于5.0%，表明該方法重復(fù)性符合要求。混標(biāo)圖譜見(jiàn)下圖。

2.1.2 將0.1 μg/ml標(biāo)準(zhǔn)工作液，分別在進(jìn)樣后0 h、

6 h、12 h、18 h進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算RSD(%)均小于10.0%，表明該混標(biāo)工作液試液在18 h之內(nèi)穩(wěn)定。

2.2 精密度與加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)。稱(chēng)取蔬菜樣品7份，每份25.0 g，按照1.4實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行處理，經(jīng)色譜檢測(cè)，計(jì)算含量及回收率，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3 小結(jié)

本試驗(yàn)依據(jù)NY/T761-2008檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，在實(shí)驗(yàn)步驟和儀器分析等方面進(jìn)行了優(yōu)化，考慮了線速度、進(jìn)樣口溫度、柱溫、檢測(cè)器溫度、載氣等對(duì)分析結(jié)果的影響，在保證峰形良好、分離度良好的前提下，縮短時(shí)間。從圖譜和加標(biāo)回收率的結(jié)果來(lái)看，幾種農(nóng)藥得到了較好的回收率，取得良好的分離效果，方法靈敏度高，重復(fù)性穩(wěn)定性好，可推廣用于蔬菜有機(jī)氯及擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥殘留的檢測(cè)。

[1]NY/T761-2008，蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲(chóng)菊酯和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥多殘留的測(cè)定 [S].北京：農(nóng)業(yè)出版社，2008.

[2]GB2763-2014，食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量 [S].北京：中國(guó)質(zhì)檢出版社，2014.

[3]GB/T5009.199-2003，蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留量快速檢測(cè) [S].北京：中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)，2003.

[4]GB/T8855-2008，新鮮水果和蔬菜的取樣方法[S].北京：中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局，2008.