腦卒中患者血清可溶性CD14、同型半胱氨酸和7項(xiàng)血脂結(jié)果分析

張韶斌 陳斯亮 羅莞超 韋慶文 羅丹

腦卒中患者血清可溶性CD14、同型半胱氨酸和7項(xiàng)血脂結(jié)果分析

張韶斌★陳斯亮 羅莞超 韋慶文 羅丹

目的探討血清中可溶性CD14（sCD14）、同型半胱氨酸（HCY）和7項(xiàng)血脂指標(biāo)與腦卒中的相關(guān)性。方法采用ELISA法檢測(cè)195例腦卒中患者及120例健康對(duì)照組血清sCD14；使用羅氏C7O2全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)195例腦卒中患者及120例健康對(duì)照組血清HCY和7項(xiàng)血脂，并對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果腦卒中患者中sCD14、HCY、TG、CHOL、HDL、LDL?C、Apo A、Apo B、LP（a）含量分別為（79.98±36.67）μg/mL、（20.78±17.98）μmol/L、（1.48±0.78）mmol/L、（5.19±0.93）mmol/L、（1.15±0.31）mmol/L、（2.62±0.83）mmol/L、（1.34±0.26）g/L、（0.97±0.76）g/L、（188.07±167.68）mg/L；腦卒中患者血清sCD14、HCY、TG、CHOL、LDL?C含量明顯升高，與健康對(duì)照組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而腦卒中患者HDL、Apo A、Apo B、LP（a）含量與健康對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論腦卒中患者血清sCD14、HCY和TG、CHOL、LDL?C明顯相關(guān)，對(duì)了解患者的發(fā)病和輔助診斷具有重要的臨床意義。

可溶性CD14；同型半胱氨酸；腦卒中

腦卒中是一種由腦部血液循環(huán)障礙而引起的疾病，是由各種誘因引發(fā)腦內(nèi)血管狹窄、堵塞或者破裂導(dǎo)致的［1］。近年來(lái)腦卒中的發(fā)病率呈增加趨勢(shì)，其較高的致殘率給社會(huì)和家庭造成了巨大負(fù)擔(dān)［2］。CD14是位于單核?巨噬細(xì)胞表面的一種白細(xì)胞分化抗原，是細(xì)菌脂多糖（lipo?polysaccharides，LPS）的重要受體，有兩種存在形式：一種是位于細(xì)胞膜上的膜結(jié)合型CD14（mCD14）；另一種是游離于血清和尿液中的可溶性的 CD14（sCD14）［3?4］。在正常情況下，mCD14主要分布在單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和樹(shù)突細(xì)胞的細(xì)胞膜上，sCD14則主要存在于血清中。近年來(lái)的研究表明，sCD14與一些疾病有較高的相關(guān)性，如敗血癥、白血病、冠心病等［5?7］，但有關(guān)sCD14與腦卒中的相關(guān)性研究較少。血液同型半胱氨酸（homocysteine，HCY）水平升高是缺血性腦血管病的一個(gè)重要的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，且血液HCY濃度與發(fā)生腦梗死的危險(xiǎn)度呈量效關(guān)系，血漿HCY水平輕度增高即可致腦梗發(fā)病危險(xiǎn)性增加 2倍［8?9］。本文通過(guò)對(duì)血清可溶性CD14（sCD14）、HCY及7項(xiàng)血脂指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，探討血清sCD14、HCY和7項(xiàng)血脂指標(biāo)與腦卒中的相關(guān)性。

1 材料與方法

1.1 一般資料

病例選取自深圳市龍崗中心醫(yī)院2014年11月至2016年10月之間，采取隨機(jī)卡片的方法，從符合1995年第4屆全國(guó)腦血管病學(xué)術(shù)會(huì)議制定的腦卒中診斷標(biāo)準(zhǔn)［10］的腦卒中患者病例中隨機(jī)選取195例，設(shè)為實(shí)驗(yàn)組。所有患者均在發(fā)病后24 h內(nèi)入院，并經(jīng)CT、MRI等影像學(xué)診斷確診。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并心肌梗死、心房顫動(dòng)或冠心病者；有嚴(yán)重的肝、腎衰竭者；有嚴(yán)重創(chuàng)傷或在入院前3個(gè)月內(nèi)有重大手術(shù)史患者；惡性腫瘤患者；血小板計(jì)數(shù)＜100×109/L或＞400×109/L。其中男性100例，女性95例，年齡41～80歲，平均年齡（56.3± 5.6）歲；健康對(duì)照組選取自2015年5月至2016年10月之間來(lái)我院進(jìn)行健康體檢的健康體檢者120例，其中男性70例，女性50例，年齡30至60歲之間，平均年齡（54.3±4.6）歲。實(shí)驗(yàn)組和健康對(duì)照組在性別、年齡等方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

1.2 檢測(cè)方法

所有受檢者在空腹12 h的情況下于清晨7點(diǎn)采集靜脈血 3 mL。采用ELISA法測(cè)定血清sCD14，sCD14試劑盒批號(hào)為MEXN?H0032，由美國(guó)ADL公司提供，主要儀器為安途生物PHOMO型酶標(biāo)儀，操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。同時(shí)采用羅氏C7O2全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)TG、CHOL、HDL、LDL?C、Apo A、Apo B和HCY水平，其中TG、CHOL、HDL、LDL?C、Apo A、Apo B、LP（a）檢測(cè)的試劑、質(zhì)控和定標(biāo)物由德國(guó)羅氏公司提供；HCY檢測(cè)的試劑、質(zhì)控和定標(biāo)物由廣州科方生物技術(shù)有限公司提供，試劑批號(hào)：150901，嚴(yán)格按照儀器操作和試劑使用說(shuō)明進(jìn)行檢測(cè)，確保結(jié)果的準(zhǔn)確性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 腦卒中患者與健康對(duì)照組血清sCD14、HCY和7項(xiàng)血脂指標(biāo)比較

腦卒中患者血清sCD14、HCY、TG、CHOL、LDL?C含量明顯升高，與健康對(duì)照組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而腦卒中患者HDL、Apo A、Apo B、LP（a）含量與和健康對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表1。

2.2 腦卒中患者與健康對(duì)照組不同性別間血清sCD14、HCY水平比較

腦卒中實(shí)驗(yàn)組和健康對(duì)照組不同性別間血清sCD14、HCY水平進(jìn)行比較。腦卒中男性sCD14水平和HCY水平與健康對(duì)照組男性相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；腦卒中女性sCD14水平與對(duì)照組女性sCD14相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表2。實(shí)驗(yàn)組和健康對(duì)照組兩組的男性血清HCY與女性的相比，差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。實(shí)驗(yàn)組的男性血清的sCD14與女性的相比，差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表3。

表1 腦卒中患者與健康對(duì)照組血清sCD14、HCY和7項(xiàng)血脂水平比較（±s）Table 1 Comparison of serum levels of sCD14，HCY and serum seven blood lipid indexes with stroke and healthy controls（±s）

表1 腦卒中患者與健康對(duì)照組血清sCD14、HCY和7項(xiàng)血脂水平比較（±s）Table 1 Comparison of serum levels of sCD14，HCY and serum seven blood lipid indexes with stroke and healthy controls（±s）

項(xiàng)目sCD14（μg/mL）HCY（μmol/L）TG（mmol/L）CHOL（mmol/L）LDL?C（mmol/L）Apo A（g/L）HDL（mmol/L）Apo B（g/L）LP（a）（mg/L）實(shí)驗(yàn)組（n=195）72.98±36.67 20.78±17.98 1.48±0.78 5.19±0.93 2.62±0.83 1.34±0.26 1.15±0.31 0.97±0.76 188.07±167.68對(duì)照組（n=120）57.13±21.67 14.45±7.28 0.88±0.75 4.39±1.21 2.26±0.43 1.36±0.29 1.29±0.22 0.85±0.57 151.43±177.45 t 4.29 3.67 6.72 6.60 4.40 0.63 4.32 1.49 1.84 P值0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.53 0.06 0.14 0.07

表2 不同性別中腦卒中實(shí)驗(yàn)組與健康對(duì)照組血清sCD14、HCY水平比較（±s）Table 2 Comparison of serum levels of sCD14 and HCY in stroke group and healthy control group with different gender（±s）

表2 不同性別中腦卒中實(shí)驗(yàn)組與健康對(duì)照組血清sCD14、HCY水平比較（±s）Table 2 Comparison of serum levels of sCD14 and HCY in stroke group and healthy control group with different gender（±s）

性別n男100 70女組別實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組t P值實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組t P值95 50 sCD14（μg/mL）81.35±12.23 59.62±20.48 8.64＜0.01 60.21±9.53 53.33±23.53 2.49 0.014 HCY（μmol/L）22.3±8.62 15.3±7.69 5.44＜0.01 18.49±6.67 11.65±2.31 7.02＜0.01

表3 腦卒中實(shí)驗(yàn)組與健康對(duì)照組不同性別間血清sCD14、HCY水平比較（±s）Table 3 Comparison of serum sCD14 and HCY levels between different genders of stroke patients and healthy controls（±s）

表3 腦卒中實(shí)驗(yàn)組與健康對(duì)照組不同性別間血清sCD14、HCY水平比較（±s）Table 3 Comparison of serum sCD14 and HCY levels between different genders of stroke patients and healthy controls（±s）

指標(biāo)sCD14（μg/mL）HCY（μmol/L）實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組男（n=100）81.35±12.23 22.3±8.62女（n=95）60.21±9.53 18.49±6.67 t t 13.42 3.44 P值0.00 0.00男（n=70）59.62±20.48 15.3±7.69女（n=50）53.33±23.53 11.65±2.31 1.56 3.25 P值0.12 0.00

3 討論

CD14是LPS受體復(fù)合物的主要成分，主要由單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，具有膜結(jié)合性（mCD14）和可溶性（sCD14）兩種形式［11］。大量研究發(fā)現(xiàn)sCD14在人類多種疾病發(fā)生發(fā)展過(guò)程中都具有重要的病理生理意義，sCD14是一種糖蛋白，其蛋白質(zhì)多肽鏈結(jié)構(gòu)較mCD14少8個(gè)氨基酸，同時(shí)不含磷酸酰肌醇，分子量為48 KDa，較mCD14小。sCD14存在于人和動(dòng)物的血液與尿液中，約占機(jī)體全部CD14含量的99%左右，其正常血清中的濃度為2～6 μg/mL［12］。

目前研究發(fā)現(xiàn)，sCD14在動(dòng)脈粥樣硬化形成過(guò)程中起重要作用，在其病理生理變化中，sCD14促使內(nèi)皮細(xì)胞活化，加速動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成［13］。Griga T等［14］研究發(fā)現(xiàn)CD14基因的多態(tài)性可以影響單核細(xì)胞表面以及分泌入血CD14的密度，且其與心肌梗死的發(fā)生具有一定的相關(guān)性。血管壁病變、血液和血液成份的流體動(dòng)力學(xué)變化等是腦梗死的主要病因，有研究表明，產(chǎn)生動(dòng)脈易損斑塊，隨后發(fā)生破裂和形成的血栓，這些是腦梗死發(fā)生的病理基礎(chǔ)，斑塊局部炎癥和免疫反應(yīng)是易損斑塊形成的關(guān)鍵因素，CD14對(duì)于單核?巨噬細(xì)胞系統(tǒng)和動(dòng)脈易損斑塊的發(fā)生發(fā)展至關(guān)重要［15］。本研究發(fā)現(xiàn)腦卒中患者血清sCD14水平明顯高于對(duì)照組，提示sCD14的水平與腦卒中的發(fā)生密切相關(guān)，有必要開(kāi)展大樣本的臨床研究來(lái)進(jìn)一步確認(rèn)腦梗死患者sCD14與患者發(fā)病和進(jìn)展的關(guān)系，而對(duì)于腦梗死后患者復(fù)發(fā)情況也可能與CD14單核細(xì)胞亞型相關(guān)，建立腦梗死患者和健康受試者的隊(duì)列研究意義重大，以探討CD14和其它單核細(xì)胞亞型在腦梗死患者和健康人群中的差異，通過(guò)這一途徑，可以為腦梗死患者提供一種新的治療策略。

研究認(rèn)為，高HCY導(dǎo)致腦卒中的可能機(jī)制為促使氧自由基生成，引起血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷和促進(jìn)動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增生，加速低密度脂蛋白氧化，增加泡沫細(xì)胞形成，而后者是粥樣斑塊的主要成分；HCY參與了血管內(nèi)皮毒性作用，使平滑肌細(xì)胞增殖，最終阻塞血流通路；HCY還可改變凝血因子功能，增加血栓的形成傾向，導(dǎo)致凝血機(jī)制的改變，最終誘發(fā)心腦血管疾病，在臨床上其病死率，病殘率均比較高［16］。正常人體每日產(chǎn)生15～20 μmol/L同型半胱氨酸，大部分在細(xì)胞內(nèi)分解代謝，僅有1.5 μmol/L或更少被釋放到血液中。有研究表明，血清HCY濃度每增加5 μmol/L，腦卒中發(fā)生的危險(xiǎn)性則增大了1.65倍；血清HCY濃度每降低3 μmol/L，腦卒中發(fā)生的危險(xiǎn)性則降低15%～30%［16］。補(bǔ)充葉酸降低HCY可以顯著降低腦卒中風(fēng)險(xiǎn)，目前已知降低HCY最安全有效的方法是補(bǔ)充葉酸，可以合并或不合并使用維生素B12或維生素B6。本研究發(fā)現(xiàn)腦卒中患者血清HCY水平明顯高于對(duì)照組，提示HCY的水平與腦卒中的發(fā)生密切相關(guān)。另外高脂血導(dǎo)致脂質(zhì)在血管內(nèi)皮沉積所引起的動(dòng)脈硬化，本研究發(fā)現(xiàn)腦卒中患者血清TG、CHOL、LDL?C含量明顯升高，與健康對(duì)照組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），提示血清TG、CHOL、LDL?C的水平與腦卒中的發(fā)生密切相關(guān)。

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Analysis of serum soluble CD14,homocysteine and 7 blood lipids in patients with stroke

ZHANG Shaobin★,CHEN Siliang,LUO Guanchao,WEI Qingwen,LUO Dan
(Department of Clinical laboratory,Longgang Central HospitalofShenzhen,Shenzhen,Guangdong,China, 518116)

ObjectiveTo investigate the correlation between serum soluble CD14(sCD14), homocysteine(HCY),blood lipids and cerebral stroke.MethodsELISA was used to detect the serum levels of sCD14 in 195 patients with stroke and 120 healthy controls.The Roche C7O2 automatic biochemical analyzer was used to detect the serum levels of HCY and serum lipids in 195 patients with stroke and 120 healthy controls,and the test results were analyzed.ResultsThe expression levels of sCD14,HCY,TG, CHOL,HDL,LDL?C,Apo A,Apo B,and LP(a)in the serum of stroke patients were(79.98±36.67)μg/mL, (20.78±17.98)μmol/L,(1.48±0.78)mmol/L,(5.19±0.93)mmol/L,(1.15±0.31)mmol/L,(2.62±0.83)mmol/L, (1.34±0.26)g/L,(0.97±0.76)g/L,and(188.07±167.68)mg/L,respectively.The expression levels of serum sCD14,HCY,TG,CHOL and LDL?C in the stroke patients were significantly increased compared with the levels in the healthy control group(P＜0.05).There were no significant differences in the levels of HDL,Apo A,Apo B,and LP(a)between the healthy control group and the stroke patients(P＞0.05).ConclusionThe serum levels of sCD14,HCY,TG,CHOL and LDL?C were significantly related to stroke patients,providing important clinical information in understanding the pathogenesis and diagnosis of these patients.

Soluble CD14;Homocysteine;Stroke

深圳市衛(wèi)計(jì)委科研課題（201303209）

深圳市龍崗中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東，深圳518116

★通訊作者：張韶斌，E?mail：13923856280@139.com