楊媚杰,朱敏
(懷化市公安局刑事科學技術(shù)研究所,湖南懷化 418000)
火燒后炭化尸體個體識別1例
楊媚杰,朱敏
(懷化市公安局刑事科學技術(shù)研究所,湖南懷化 418000)
法醫(yī)遺傳學;燒傷;尸體;縱火行為
1.1 簡要案情
某日20時許,某村村民吳某因與村民李某發(fā)生感情糾紛,激動之余吳某用菜刀將李某砍傷。在村民將李某送往醫(yī)院搶救過程中,有人發(fā)現(xiàn)李某家起火。次日早晨,村民在李某家殘礫中發(fā)現(xiàn)一具大部被燒成骨灰的殘骸。技術(shù)員僅能從其骨骼外形上辨識為人體骨骼,現(xiàn)場提取嚴重炭化的48cm×35cm的右側(cè)髖關(guān)節(jié),該股骨兩端均已燒壞。為確定死者身份,委托本中心對炭化尸塊進行個體識別鑒定。
1.2 檢驗過程
將現(xiàn)場提取到的炭化尸塊上炭化面嚴重的物質(zhì)進行切除。在這一過程中發(fā)現(xiàn),近骨頭面的組織也呈現(xiàn)出較嚴重的炭化,進一步增加了DNA提取難度。最終選取靠近骨關(guān)節(jié)面的組織少許,將其剪碎放入0.5mL的Eppendorf離心管中,加入120mL Chelex-100及10μL PK進行消化。原則上消化在56℃下進行,消化時間需5h以上。在本次提取中,每隔半小時觀察消化情況(可根據(jù)消化情況補加PK),56℃孵育直至檢材完全消化。將消化液在98℃煮沸8min,收集提取液用于后續(xù)PCR復合擴增及檢測。提取液可在4℃下保存1周。
采用AmpF?STR?Identifiler?Plus試劑盒(美國Thermo Fisher Scientific公司)對15個常見STR基因座進行擴增,采用標準反應體系25 μL,具體按照試劑盒說明書操作。擴增反應在GeneAmp?PCR系統(tǒng)9700(美國Thermo Fisher Scientific公司)上進行,擴增產(chǎn)物經(jīng)3130xl基因分析儀(美國Thermo Fisher Scientific公司)完成電泳電測,檢測數(shù)據(jù)由GeneMapper?ID v3.3軟件完成分型。
1.3 檢驗結(jié)果
炭化尸塊的DNA分型圖譜見圖1。單峰峰值均在200RFU以上,雜合子表現(xiàn)均衡,分型結(jié)果可靠。吳某的血液DNA分型圖譜見圖2。
圖1 炭化尸塊的DNA分型圖譜
圖2 吳某血液的DNA分型圖譜
1.4 鑒定意見
炭化尸塊的基因型與吳某的基因型符合單親遺傳關(guān)系。
近年來殺人焚尸案件及火災事件有所增加,這類案件中常涉及被焚燒的尸體。其中發(fā)生嚴重炭化尸體的DNA檢驗常常會遇到困難,對受害人或者犯罪嫌疑人的身份無法確認,將直接影響案件偵破,不利于社會穩(wěn)定。
針對火宅現(xiàn)場生物學檢材的低分型成功率及本案分型成功的經(jīng)驗,擬探討該類檢材的提取技巧。火宅事件中涉及的DNA常常由于這一特殊環(huán)境(如高溫、火燒等)會發(fā)生嚴重降解,導致DNA提取困難,或者所提取DNA僅僅為降解片段。另外,對于被火燒發(fā)生嚴重炭化的尸體,DNA由于遭到高溫破壞所以含量少、雜質(zhì)多。采用現(xiàn)有的商業(yè)化常染色體試劑盒對這一類型樣本進行DNA分型檢測時,或出現(xiàn)陰性結(jié)果,或無法獲取完整的分型圖譜(大片段完全丟失),或出現(xiàn)混合物分型結(jié)果。針對這一情況,檢材的選取便顯得尤為關(guān)鍵,應根據(jù)案情情況及各個檢材的實際情況選取最有可能提取到有效DNA的部位。本案檢驗人員選取炭化面深處接近骨關(guān)節(jié)面的部位,該部位受環(huán)境因素的影響最小,可最大程度地獲取有效DNA。圖1表明,本次選取的檢材DNA未發(fā)生降解及污染,除與檢材的及時提取有關(guān)外,檢材選取部位及檢材處理是關(guān)鍵因素。在DNA提取過程中實時觀察消化情況,對消化過程及提取步驟進行優(yōu)化,對抽提DNA的質(zhì)和量都會產(chǎn)生重要影響,從而影響最終的分型結(jié)果。另外,當DNA采用Chelex法無法提取到有效DNA時,可嘗試采用商業(yè)化DNA提取試劑盒,并對提取的DNA進行純化處理。由于本次檢測中,采用Chelex法便獲取了有效分型,故沒有對兩種不同方法進行橫向比較。
DF795.2
B
10.3969/j.issn.1004-5619.2017.01.031
1004-5619(2017)01-0103-02
2016-09-30)
(本文編輯:張素華)
楊媚杰(1984—),女,主要從事法醫(yī)物證學鑒定;E-mail:yang29247@sina.com