• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    黃皮精油對(duì)蓮霧果實(shí)軟腐病抑制機(jī)理的初探

    2017-03-28 11:30:12張史青鐘曼茜從心黎
    關(guān)鍵詞:蓮霧黃皮軟腐病

    張史青,鐘曼茜,曾 鳳,從心黎

    (海南大學(xué)園藝園林學(xué)院,???570228)

    黃皮精油對(duì)蓮霧果實(shí)軟腐病抑制機(jī)理的初探

    張史青,鐘曼茜,曾 鳳,從心黎

    (海南大學(xué)園藝園林學(xué)院,???570228)

    以‘黑金剛’蓮霧為試驗(yàn)對(duì)象,對(duì)蓮霧果實(shí)采后軟腐病病原菌進(jìn)行了分離純化,通過從黃皮葉子中提取的精油對(duì)軟腐病進(jìn)行抑菌活性測(cè)定,研究黃皮精油對(duì)菌絲體形態(tài)和結(jié)構(gòu)的影響,探討黃皮精油的抑菌機(jī)制。結(jié)果表明:不同濃度的黃皮精油對(duì)供試的蓮霧軟腐病均有抑制作用,其中0.6 μL/mL濃度下的抑菌率達(dá)到60.62%;0.6 μL/mL的黃皮精油處理后的菌絲體生長(zhǎng)稀疏,分支變少;黃皮精油對(duì)病原菌的細(xì)胞膜通透性產(chǎn)生了顯著影響,可溶性蛋白和還原性糖含量減少,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收受阻。綜合來看,初步明確了黃皮精油的抗菌機(jī)制,其中0.6 μL/mL濃度下的抑菌效果最佳。

    蓮霧;軟腐病;黃皮;精油;抑菌效果

    蓮霧是一種熱帶常綠果樹,我國(guó)廣東和海南等地大面積栽培[1]。蓮霧果皮薄,呼吸強(qiáng)度高,極其不耐貯藏且較易發(fā)生病害。引起蓮霧果實(shí)采后腐爛的大多數(shù)為真菌病害,主要有炭疽病、軟腐病等,目前國(guó)內(nèi)對(duì)軟腐病的研究工作僅限于對(duì)其形態(tài)學(xué)和常規(guī)的生理生化的研究,主要采取的防治措施包括培育抗病品種、使用化學(xué)藥劑等[2-3]。隨著生活水平的提高,人們對(duì)食品安全的要求也越來越高,應(yīng)用綠色環(huán)保的生物保鮮劑會(huì)更加有利于鮮果產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。吳新[3-4]研究表明,香芹酚、肉桂醛、紫蘇醛、沉香萜醇和異硫氰酸烯丙酯(AITC)等5種植物精油對(duì)常見的病原真菌、細(xì)菌等都有較為廣泛的抑菌作用。Smith-Palmer發(fā)現(xiàn)不同種植物精油混合使用或單一精油與其他抑菌物質(zhì)混合使用能發(fā)揮更顯著的抑菌效果。黃皮是海南普遍存在的植物材料,而以黃皮葉子提取的植物精油對(duì)蓮霧果實(shí)軟腐病抑制效果的研究未曾見到報(bào)道。因此,本試驗(yàn)對(duì)蓮霧果皮上的軟腐病進(jìn)行分離鑒定,并用黃皮精油對(duì)其病原菌進(jìn)行抑菌測(cè)定,為蓮霧軟腐病的抑菌機(jī)制提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    黃皮葉子,采摘自海南黃皮種植基地,曬干、粉碎;‘黑金剛’品種蓮霧果實(shí),九成熟、有病害、大小均勻,購自市場(chǎng)。

    1.2 試驗(yàn)方法

    1.2.1 精油的提取 采用水蒸氣蒸餾法提取精油:稱取200 g干燥、粉碎的黃皮葉子粉末裝入2 000 mL蒸餾瓶中并加入蒸餾水1 400 mL,在蒸餾裝置中進(jìn)行蒸餾操作,蒸餾時(shí)間為4~6 h,至沒有油狀物滴出時(shí)停止蒸餾,靜置片刻,收集干燥后于4℃冰箱中黑暗條件下密封保存?zhèn)溆肹5]。

    1.2.2 黃皮精油抑菌活性的測(cè)定 以菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定黃皮精油對(duì)蓮霧軟腐病的抑制效果。用高溫滅菌的培養(yǎng)基制成 0.2、0.4、0.6、0.8、1.0μL/mL的帶精油培養(yǎng)基,對(duì)照加無菌水,倒大約 15 mL 帶精油培養(yǎng)基于直徑 90 mm的無菌培養(yǎng)皿內(nèi),每處理重復(fù) 3 皿,冷卻后,接入已分離純化并生長(zhǎng) 3d的蓮霧軟腐病菌落,用直徑為 5 mm 的打孔器沿菌落的邊緣取菌餅接種于含有不同精油濃度梯度的培養(yǎng)皿中,每皿接1個(gè)菌餅,置于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng),于3 d 后用十字交叉法測(cè)量菌落的直徑[4-5],并計(jì)算其平均直徑,按式(1)計(jì)算黃皮精油的抑菌率。

    1.2.3 病原菌致病力測(cè)定 釆用針刺法運(yùn)用柯赫氏法則進(jìn)行致病力測(cè)定。采取無傷與有傷2種接種方式,于每個(gè)蓮霧果實(shí)表面接種菌餅1個(gè),均重復(fù)3次。

    無傷接種:取PDA培養(yǎng)基的邊緣處生長(zhǎng)3d的病原菌,用打孔器打成直徑5 mm的菌餅,移到接種的部位。有傷接種:先用無菌針在同一部位進(jìn)行針刺,共剌5個(gè)小孔,每孔約深0.2 mm。取PDA培養(yǎng)基邊緣處生長(zhǎng)3d的病原菌,用打孔器打成直徑5 mm的菌餅,移到接種的部位。對(duì)照:接種方式同上,接種同樣大小的無菌PDA培養(yǎng)基到接種果實(shí)表皮。接種后于25℃條件培養(yǎng)觀察,每隔1d記錄剌傷接種病斑擴(kuò)展情況。同時(shí),接種蓮霧果實(shí)發(fā)病后,從果實(shí)發(fā)病部位分離純化出病原菌,與最初分離純化且接種發(fā)病的菌株作對(duì)比,確認(rèn)分離物的一致性。

    1.2.4 顯微鏡觀察菌絲的形態(tài)結(jié)構(gòu)變化 取供試軟腐病病原菌在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng),在第3 d菌絲覆蓋整個(gè)平板后,用5 mm打孔器取菌餅5個(gè)接入 100 mL 液體培養(yǎng)基中,設(shè)置處理組和對(duì)照組,處理組加入60 μL最適濃度的黃皮精油,對(duì)照組加入相對(duì)應(yīng)滅菌的蒸餾水,將其置于 25 ℃、140 r/min振蕩箱中培養(yǎng)48 h,用0.2mol/L、pH=6.5的磷酸鹽緩沖液將菌絲充分去除培養(yǎng)基,取微量完整菌絲在顯微鏡下觀察記錄[6]。

    1.2.5 相對(duì)電導(dǎo)率的測(cè)定 取供試軟腐病病原菌在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng),在第3 d菌絲覆蓋整個(gè)平板后,用5 mm打孔器取菌餅5個(gè)接入 100 mL 液體培養(yǎng)基中,將其置于 25 ℃、140 r/min振蕩箱中培養(yǎng)48 h,用0.2mol/L、pH=6.5的磷酸鹽緩沖液將菌絲充分去除培養(yǎng)基[6],設(shè)置處理組和對(duì)照組。處理組把菌絲定量加到最適濃度的黃皮精油培養(yǎng)基中,對(duì)照組把菌絲定量加到滅菌的培養(yǎng)基中。室溫下放置0、1.5、3、4.5、6、7.5 h后,依照謝麗等[7-8]的方法測(cè)定電導(dǎo)率。

    1.2.6 還原性糖含量的測(cè)定 取供試軟腐病病原菌在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng),在第3 d菌絲覆蓋整個(gè)平板后,用5 mm打孔器取菌餅5個(gè)接入100 mL 液體培養(yǎng)基中,設(shè)置處理組和對(duì)照組,處理組加入60 μL最適濃度的黃皮精油,對(duì)照組加入相對(duì)應(yīng)滅菌的蒸餾水,將其置于 25 ℃、140 r/min振蕩箱中進(jìn)行培養(yǎng)。樣品中還原糖量的測(cè)定:參照王學(xué)奎和黃見良[9]的方法測(cè)定。

    1.2.7 可溶性蛋白質(zhì)含量的測(cè)定 取供試軟腐病病原菌在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng),在第3 d菌絲覆蓋整個(gè)平板后,用5mm打孔器取菌餅5個(gè)接入 100 mL 液體培養(yǎng)基中,設(shè)置處理組和對(duì)照組,處理組加入60 μL最適濃度的黃皮精油,對(duì)照組加入相對(duì)應(yīng)滅菌的蒸餾水,將其置于 25 ℃、140 r/min振蕩箱中進(jìn)行培養(yǎng)。樣品中蛋白質(zhì)含量的測(cè)定:參照王學(xué)奎和黃見良[9]的方法測(cè)定。

    1.2.8 數(shù)據(jù)分析 采用Excel進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 致病性測(cè)定

    通過結(jié)果可知,以針刺法接種的蓮霧果實(shí)均能發(fā)病。刺傷接種3~4d后可觀察到病害癥狀,出現(xiàn)白色菌絲和深色凹陷病斑,后期果肉顏色變深呈水漬狀。無傷接種組發(fā)病較晚,5~6d后果實(shí)才出現(xiàn)明顯病斑,8d后出現(xiàn)水漬狀現(xiàn)象和黑色小點(diǎn),相對(duì)于針刺接種發(fā)病有明顯的延后。而PDA培養(yǎng)基接種的對(duì)照組則不發(fā)病。對(duì)發(fā)病果實(shí)進(jìn)行再分離,確定了病原物的一致性。

    2.2 不同濃度的黃皮精油對(duì)蓮霧軟腐病抑制效果

    圖1表明,不同濃度黃皮精油對(duì)蓮霧軟腐病菌絲生長(zhǎng)的抑制程度不同。當(dāng)濃度為0.6μL/mL時(shí),對(duì)蓮霧軟腐病的抑制率可達(dá)到48.99%,且與其他精油濃度存在顯著性差異(P<0.05)。當(dāng)精油濃度為0.8μL/mL時(shí),抑菌效果減弱,僅為33.49%,因此黃皮精油抑制蓮霧軟腐病的最適濃度為0.6μL/mL。

    圖1 不同濃度精油對(duì)蓮霧軟腐病的抑菌效果 注:a、b、c不同處理均值存在顯著性差異(P<0.05)。

    2.3 黃皮精油對(duì)蓮霧軟腐病菌絲顯微形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

    在圖2中,通過低倍鏡,發(fā)現(xiàn)對(duì)照組菌絲生長(zhǎng)稠密,處理組菌絲體生長(zhǎng)稀疏;通過高倍鏡,發(fā)現(xiàn)對(duì)照組菌絲生長(zhǎng)正常,菌絲飽滿,經(jīng)黃皮精油處理的菌絲分叉、斷裂變短,說明黃皮精油對(duì)蓮霧果實(shí)軟腐病菌絲的形態(tài)結(jié)構(gòu)造成抑制,阻礙其生長(zhǎng)發(fā)育。

    2.4 黃皮精油對(duì)蓮霧軟腐病病原菌相對(duì)電導(dǎo)率的影響

    如圖3,從第0 h開始,對(duì)照組與處理組相對(duì)電導(dǎo)率均呈現(xiàn)上升的趨勢(shì),其中處理組相對(duì)電導(dǎo)率高于對(duì)照組;從1.5 h起,處理組相對(duì)電導(dǎo)率變化幅度大于對(duì)照組,說明處理組的變化趨勢(shì)大于對(duì)照組;在4.5 h時(shí)處理組的相對(duì)電導(dǎo)率達(dá)到44.10 μs/cm,顯著大于對(duì)照組的電導(dǎo)率,兩者存在極顯著性差異(P<0.01)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,經(jīng)過黃皮精油處理的軟腐病病原菌的相對(duì)電導(dǎo)率大于對(duì)照組。

    2.5 黃皮精油對(duì)蓮霧軟腐病病原菌還原性糖的影響

    通過圖4可知,從第0h開始,處理組與對(duì)照組還原性糖含量的變化趨勢(shì)均是先下降后上升,24~48 h時(shí)還原性糖含量急劇下降,48 h時(shí)對(duì)照組的還原糖含量為332.75 μg/mL,而處理組還原糖濃度為349.15 μg/mL,兩者之間存在顯著性差異(P<0.05),這說明培養(yǎng)基中

    圖2 黃皮精油對(duì)蓮霧軟腐病菌絲形態(tài)的影響注:A:空白對(duì)照菌絲×20;B:空白對(duì)照菌絲×40;C:處理菌絲樣品×20;D:處理菌絲樣品×40

    圖3 黃皮精油對(duì)蓮霧軟腐病相對(duì)電導(dǎo)率的影響

    圖4 黃皮精油對(duì)蓮霧軟腐病病原菌還原糖的影響

    圖5 黃皮精油對(duì)蓮霧軟腐病病原菌可溶性蛋白含量的影響

    營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗嚴(yán)重,菌絲生長(zhǎng)達(dá)到頂峰;48~96 h處理組還原糖含量持續(xù)上升,在72h時(shí)達(dá)到最大值。經(jīng)過持續(xù)的下降后,在72~96 h對(duì)照組含量呈現(xiàn)上升的趨勢(shì)。

    2.6 黃皮精油對(duì)蓮霧軟腐病病原菌可溶性蛋白質(zhì)含量的影響

    由圖5可知,從第0h開始,處理組與對(duì)照組可溶性蛋白含量逐漸降低;24 h時(shí)處理組與對(duì)照組可溶性蛋白質(zhì)含量出現(xiàn)差異,處理組開始升高,而對(duì)照組含量持續(xù)降低,在48h時(shí)處理組可溶性蛋白含量為10.88μg/mL,而對(duì)照組含量?jī)H為1.02 μg/mL,兩者存在顯著性差異(P<0.05)。

    3 結(jié)論與討論

    陳前等[9-11]運(yùn)用形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)對(duì)蓮霧病原菌進(jìn)行了鑒定并研究其病原菌的生物學(xué)特性,證明了蓮霧果實(shí)軟腐病病原菌有比較強(qiáng)的適應(yīng)能力和生存能力。Prasad KN 等發(fā)現(xiàn),黃皮中的香豆素類化合物具有很好的抗氧化活性;本次實(shí)驗(yàn)分離純化出蓮霧果實(shí)上的軟腐病并進(jìn)行抑菌活性測(cè)定,采取菌絲生長(zhǎng)速率法對(duì)黃皮精油進(jìn)行抑菌測(cè)定和利用顯微鏡對(duì)菌絲進(jìn)行觀察,實(shí)驗(yàn)證明:黃皮精油對(duì)軟腐病病原菌有抑制作用,且不同濃度的精油對(duì)菌絲有不同的抑制程度,最適精油濃度為0.6μL/mL;此外,大于0.8μL/mL的精油濃度反而使抑菌效果減弱。

    菌絲在不同條件下培養(yǎng),菌絲的結(jié)構(gòu)、生長(zhǎng)速度等特征存在一定的差別,菌絲的顯微結(jié)構(gòu)也會(huì)發(fā)生細(xì)微的變化[11,14,16]。通過顯微觀察菌落的形態(tài)結(jié)構(gòu),發(fā)現(xiàn)經(jīng)0.6 μL/mL的黃皮精油處理后的菌絲體生長(zhǎng)稀疏,菌絲體數(shù)量減少,分支較少,說明黃皮精油對(duì)蓮霧軟腐病菌絲的形態(tài)結(jié)構(gòu)具有明顯的破壞效果,即黃皮精油對(duì)其生長(zhǎng)具有抑制作用。當(dāng)病原菌遇到抑制生長(zhǎng)作用時(shí),細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)遭到破壞,進(jìn)而菌體的保護(hù)被打破,其內(nèi)部電解質(zhì)會(huì)滲入到培養(yǎng)液中,導(dǎo)致培養(yǎng)液的電導(dǎo)率升高,因此驗(yàn)證0.6 μL/mL的黃皮精油對(duì)蓮霧果實(shí)軟腐病的抑制效果,可以通過培養(yǎng)液中電導(dǎo)率的變化來反應(yīng)。試驗(yàn)結(jié)果表明,處理組的電導(dǎo)率總體呈現(xiàn)上升的變化趨勢(shì)且遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于對(duì)照組,說明黃皮精油對(duì)菌絲細(xì)胞膜具有破壞作用,胞內(nèi)離子的外滲導(dǎo)致電導(dǎo)率的上升。

    還原性糖和可溶性蛋白是病原菌能量的來源,試驗(yàn)結(jié)果表明,處理組菌絲的細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)受到黃皮精油破壞,胞內(nèi)物質(zhì)的外滲造成中后期蛋白含量和還原糖含量呈現(xiàn)上升的趨勢(shì),證明了黃皮精油對(duì)蓮霧軟腐病原菌具有一定的抑制作用。而對(duì)照組在后期蛋白含量和還原糖含量的上升,是由于菌絲呈現(xiàn)負(fù)生長(zhǎng),細(xì)胞大量死亡,胞內(nèi)物質(zhì)釋放造成。

    綜上來看,從葉子中提取的黃皮精油具有較好的抑菌活性,再加上黃皮是我國(guó)普遍存在且非常易得的植物,開發(fā)成本低廉,在資源開發(fā)和果蔬保鮮技術(shù)方面具有較大的應(yīng)用價(jià)值和發(fā)展前景。◇

    [1]楊鳳珍,李敏,高兆銀,等.蓮霧果實(shí)病害及防治研究進(jìn)展[J].浙江農(nóng)業(yè)科學(xué),2009(5):961-964.

    [2]黃媛媛.大白菜軟腐病發(fā)生原因及其防治方法[J].河北省生物研究所,2008,25(4):48-51.

    [3]吳新.植物精油對(duì)草莓和楊梅果實(shí)保鮮的作用及機(jī)理研究[D].南京:南京農(nóng)業(yè)大學(xué),2010:29-51.

    [4]吳金平,劉曉燕,張靜柏.一株魔芋軟腐病拮抗菌的分離鑒定及其活性物質(zhì)的研究[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào),2011,27(24):302-306.

    [5]王健.植物精油的提取分離及其對(duì)病蟲生物活性的研究[D].武漢:華中農(nóng)業(yè)大學(xué),2003.

    [6]邢詠梅,李向東,郭順星.軟腐病病原菌對(duì)金釵石斛致病性的形態(tài)學(xué)研究[J].中國(guó)醫(yī)藥生物技術(shù),2014,9(3):202-207.

    [7]葉滔,馬志強(qiáng),張小風(fēng),等.抗戊唑醇禾谷鐮孢菌對(duì)滲透壓敏感性及電導(dǎo)率變化研究[J].華北農(nóng)學(xué)報(bào),2011,26(2):184-189.

    [8]謝麗,孫瑞珠,馬玉龍,等.利用電導(dǎo)率儀法檢測(cè)泰樂菌素高效降解菌的生長(zhǎng)量[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué),2012,51(16):3601-3602.

    [9]張立微,張景濤,李小梅.芫荽軟腐病病原菌分離與鑒定[J]. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué),2015(6):48-51.

    [10]王學(xué)奎,黃見良.植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理與技術(shù)[M].北京:高等教育出版社,2015:171-184.

    [11]陳前,吳光斌,楊秋明,等.蓮霧軟腐病病原菌鑒定及其生物學(xué)特性研究[J].中國(guó)植保導(dǎo)刊,2015,35(7):5-10.

    [12]郭勇,葉小金,甘炳成,彭衛(wèi)紅.不同溫度和光照培養(yǎng)條件下3種食用菌菌絲的菌落及菌絲形態(tài)的研究[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2011,24(6):2301-2306.

    [13]王卿,祁芳斌,陳發(fā)興,等.植物精油對(duì)果蔬貯藏保鮮的應(yīng)用研究進(jìn)展[J].福建廣播電視大學(xué)學(xué)報(bào),2014(1):89-94.

    [14]Lindequist U,et al.The pharmacological potential of mushroom[J]. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine,2005,2(3):285-299.

    [15]Shi ZQ.Inhibition mechanism of osthol to plant fungus pathogens[D]. Nanjing Agricultural University,2004.

    [16]莫曉鳳,馮家望,麥向真,等.進(jìn)境蓮霧果實(shí)軟腐病的調(diào)查與鑒定[J]. 植物檢疫,2000,3(14):148-150.

    [17]羅炎華,魯紅學(xué),黃萍.魔芋軟腐病研究進(jìn)展[J]. 農(nóng)村經(jīng)濟(jì)與科技,2008(5):89-90.

    [18]曹建康,蔣微波,趙玉梅.果蔬菜后生理生化實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M].北京:中國(guó)輕工業(yè)出版社,2007:101-103.

    [19]王晶晶.四川獼猴桃軟腐病菌的鑒定、遺傳多樣性及侵染果實(shí)后的生理變化研究[D].成都:四川農(nóng)業(yè)大學(xué),2013.

    [20]任偉.石蒜堿和小檗堿對(duì)植物病原真菌抑制作用及其抑菌生理指標(biāo)分析[D].鄭州:河南農(nóng)業(yè)大學(xué),2014.

    (責(zé)任編輯 李婷婷)

    Inhibition Mechanism of Essential Oil ofClausenalansiumfor Soft Rot of Wax-apple Fruits

    ZHANG Shi-qing,ZHONG Man-xi,ZENG Feng,CONG Xin-li

    (College of Horticulture and Landscape,Hainan University,Haikou 570228,China)

    Taking‘Heijingang’wax apples as the test object,the soft rot pathogen has been separated and purified after harvesting the wax apple fruit.Based on the testing result of anti-fungal activity of the essential oil(EO)extracted from the foliage ofClausenalansiumagainst soft rot,we analyzed influence of such essence oil on both the form and structure of mycelia to probe into the antibacterial mechanism of essential oil ofClausenalansium.The results showed all essential oil ofClausenalansiumof different concentrations displayed antibacterial effects over the testing soft rot and the inhibition rate of 0.6 μL/mL EO reached 60.62%.The mycelium processed with 0.6 μL/mL EO was sparse with less branches.Essential oils ofClausenalansiumhad significant impacts over the permeability of pathogenic fungus membrane,which reduced the content of soluble protein and reducing sugar and hindered the fungus’s absorption of nutrients.To conclude,we identified the antibacterial mechanism of essential oils ofClausenalansiumpreliminarily and found 0.6 μL/mL EO had the best antibacterial effect.

    wax apple;soft rot;Clausenalansium;essential oil;antibacterial effect

    海南省重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目(項(xiàng)目編號(hào):ZDYF2016090)。

    張史青(1991— ),男,碩士,研究方向:果蔬采后生理與貯藏技術(shù)。

    從心黎(1980— ),女,博士,副教授,研究方向:果蔬采后生理與貯藏技術(shù)。

    猜你喜歡
    蓮霧黃皮軟腐病
    中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所發(fā)現(xiàn)黃瓜幼苗細(xì)菌性軟腐病抗性基因
    廣東:郁南縣大力發(fā)展黃皮
    黃皮果就是桂圓嗎
    河南周口水果市場(chǎng)上獼猴桃軟腐病主要病原真菌鑒定及防治研究
    我愛家鄉(xiāng)的黃皮果
    林邊蓮霧
    林邊蓮霧
    小品文選刊(2018年7期)2018-07-05 16:38:14
    林邊蓮霧
    意林(2018年10期)2018-05-09 11:42:18
    伊犁地區(qū)蝴蝶蘭軟腐病病原體的分離與鑒定
    黃皮莖化學(xué)成分的研究
    中成藥(2017年6期)2017-06-13 07:30:35
    欧美日韩精品网址| 视频在线观看一区二区三区| 成年女人毛片免费观看观看9| 亚洲精品国产一区二区精华液| 色综合婷婷激情| 身体一侧抽搐| 久久久水蜜桃国产精品网| 99国产精品一区二区蜜桃av| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 精品国内亚洲2022精品成人| 久久精品91蜜桃| 久久婷婷人人爽人人干人人爱 | 一本久久中文字幕| 久久精品成人免费网站| 桃红色精品国产亚洲av| 午夜精品久久久久久毛片777| 欧美色欧美亚洲另类二区 | 久久婷婷成人综合色麻豆| 国产一级毛片七仙女欲春2 | 涩涩av久久男人的天堂| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 午夜免费观看网址| 亚洲伊人色综图| 成人av一区二区三区在线看| 一区二区三区高清视频在线| 国产高清视频在线播放一区| 人人妻人人澡欧美一区二区 | 国产亚洲欧美精品永久| 久久国产乱子伦精品免费另类| 国产真人三级小视频在线观看| 免费看美女性在线毛片视频| e午夜精品久久久久久久| 丝袜美足系列| 国产三级在线视频| 亚洲七黄色美女视频| 国产97色在线日韩免费| 少妇熟女aⅴ在线视频| 91成人精品电影| 免费高清在线观看日韩| 国产成人欧美在线观看| 午夜福利影视在线免费观看| 亚洲第一av免费看| 日本 欧美在线| 亚洲av电影不卡..在线观看| 麻豆成人av在线观看| 国产主播在线观看一区二区| 老鸭窝网址在线观看| 色av中文字幕| 黄色成人免费大全| 18禁国产床啪视频网站| av福利片在线| 黑人操中国人逼视频| 乱人伦中国视频| videosex国产| 首页视频小说图片口味搜索| 中文字幕精品免费在线观看视频| 国产又色又爽无遮挡免费看| 中国美女看黄片| 亚洲天堂国产精品一区在线| 久9热在线精品视频| 女人精品久久久久毛片| 国产精品永久免费网站| 9色porny在线观看| 久久精品国产综合久久久| 一二三四在线观看免费中文在| 亚洲全国av大片| 啦啦啦免费观看视频1| 久久婷婷人人爽人人干人人爱 | 成人18禁在线播放| 亚洲av片天天在线观看| 一级黄色大片毛片| 纯流量卡能插随身wifi吗| 午夜a级毛片| 免费搜索国产男女视频| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 国产一区二区三区视频了| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 国产国语露脸激情在线看| 可以在线观看毛片的网站| 日韩大尺度精品在线看网址 | 国产成人一区二区三区免费视频网站| 国产伦一二天堂av在线观看| 久久国产乱子伦精品免费另类| 国产成人精品在线电影| 久久久久国产一级毛片高清牌| 久久久久久久久中文| 18禁观看日本| 免费高清在线观看日韩| 欧美中文综合在线视频| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 国产成年人精品一区二区| 久久九九热精品免费| 国产成人av激情在线播放| 老熟妇仑乱视频hdxx| 视频区欧美日本亚洲| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 色老头精品视频在线观看| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 麻豆av在线久日| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 国产一级毛片七仙女欲春2 | 欧美黄色淫秽网站| 黄色成人免费大全| 久久香蕉国产精品| 成熟少妇高潮喷水视频| 一级黄色大片毛片| 久久久国产精品麻豆| 欧美色欧美亚洲另类二区 | 国产亚洲av嫩草精品影院| 亚洲色图综合在线观看| 亚洲国产精品sss在线观看| 满18在线观看网站| 黑人欧美特级aaaaaa片| 亚洲成人久久性| 色综合站精品国产| 国产亚洲欧美精品永久| 成人av一区二区三区在线看| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 亚洲avbb在线观看| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 欧美日本中文国产一区发布| 少妇的丰满在线观看| 色老头精品视频在线观看| 欧美午夜高清在线| 亚洲人成伊人成综合网2020| 99国产精品一区二区三区| 国产主播在线观看一区二区| 久99久视频精品免费| 99久久99久久久精品蜜桃| 国产精品久久久av美女十八| 国产色视频综合| 国产精品电影一区二区三区| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 色精品久久人妻99蜜桃| 亚洲中文日韩欧美视频| 日韩欧美一区视频在线观看| 麻豆国产av国片精品| 亚洲国产欧美网| 国产xxxxx性猛交| 黄片大片在线免费观看| 国产熟女xx| 午夜福利18| 欧美在线一区亚洲| 国产成人免费无遮挡视频| 久久人人97超碰香蕉20202| 免费看美女性在线毛片视频| 高清在线国产一区| 少妇粗大呻吟视频| 免费观看人在逋| 成人18禁在线播放| 涩涩av久久男人的天堂| 两性夫妻黄色片| 日韩大尺度精品在线看网址 | av天堂久久9| 悠悠久久av| 精品国产乱码久久久久久男人| 亚洲国产精品久久男人天堂| 亚洲全国av大片| 最近最新中文字幕大全免费视频| av天堂久久9| 欧美+亚洲+日韩+国产| 18禁美女被吸乳视频| 伦理电影免费视频| 韩国精品一区二区三区| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 国产成人精品久久二区二区免费| 精品国产美女av久久久久小说| 后天国语完整版免费观看| 9191精品国产免费久久| 国产精品二区激情视频| 狂野欧美激情性xxxx| 国产亚洲av高清不卡| 美女高潮到喷水免费观看| 老司机午夜福利在线观看视频| 在线观看免费视频日本深夜| 精品免费久久久久久久清纯| 欧美最黄视频在线播放免费| 亚洲片人在线观看| 免费不卡黄色视频| 动漫黄色视频在线观看| 国产高清有码在线观看视频 | 国产色视频综合| 午夜日韩欧美国产| 精品乱码久久久久久99久播| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 午夜两性在线视频| 国产xxxxx性猛交| 两个人视频免费观看高清| 成人三级做爰电影| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 欧美日韩黄片免| 亚洲第一青青草原| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 男人舔女人的私密视频| 欧美av亚洲av综合av国产av| 国产亚洲精品久久久久5区| 亚洲欧美激情综合另类| 午夜福利成人在线免费观看| 看黄色毛片网站| 老汉色∧v一级毛片| 免费高清视频大片| 欧美成人性av电影在线观看| 亚洲免费av在线视频| 亚洲国产欧美网| 亚洲 国产 在线| 在线天堂中文资源库| 久久久国产成人免费| 亚洲 欧美一区二区三区| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 成人手机av| 成人精品一区二区免费| 此物有八面人人有两片| 黄色视频,在线免费观看| 日韩欧美国产在线观看| 亚洲自拍偷在线| 在线观看免费日韩欧美大片| 欧美日韩精品网址| 日本免费a在线| 两个人看的免费小视频| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 在线观看日韩欧美| 欧美成人午夜精品| 叶爱在线成人免费视频播放| 人妻久久中文字幕网| 亚洲中文字幕日韩| 欧美午夜高清在线| 大香蕉久久成人网| 9色porny在线观看| 99精品在免费线老司机午夜| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 亚洲在线自拍视频| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 亚洲片人在线观看| 1024视频免费在线观看| 色综合欧美亚洲国产小说| 日日夜夜操网爽| 精品福利观看| 乱人伦中国视频| 亚洲国产看品久久| 日韩av在线大香蕉| 日本三级黄在线观看| 欧美亚洲日本最大视频资源| av在线播放免费不卡| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 黄色成人免费大全| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| www.www免费av| 亚洲精品国产色婷婷电影| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 精品国产美女av久久久久小说| 99国产精品一区二区蜜桃av| 美女扒开内裤让男人捅视频| 欧美日韩精品网址| 婷婷六月久久综合丁香| 欧美激情极品国产一区二区三区| 女警被强在线播放| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 精品国产亚洲在线| 日韩三级视频一区二区三区| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 高清在线国产一区| 亚洲专区国产一区二区| 岛国在线观看网站| 亚洲精品中文字幕在线视频| 久久狼人影院| 变态另类丝袜制服| 成年人黄色毛片网站| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 亚洲天堂国产精品一区在线| 久久婷婷成人综合色麻豆| 深夜精品福利| 男人操女人黄网站| www.熟女人妻精品国产| 国产精品1区2区在线观看.| 丰满的人妻完整版| 亚洲九九香蕉| 亚洲激情在线av| 亚洲av美国av| 欧美日本中文国产一区发布| 又大又爽又粗| 国产精品 欧美亚洲| 在线观看免费视频日本深夜| 国产精品电影一区二区三区| 岛国视频午夜一区免费看| 啦啦啦免费观看视频1| 久久久久久久精品吃奶| 日本三级黄在线观看| 一本综合久久免费| 亚洲精品在线观看二区| 亚洲av成人av| 高清黄色对白视频在线免费看| 久久草成人影院| 一级黄色大片毛片| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 国产麻豆69| 9热在线视频观看99| 99re在线观看精品视频| 在线观看午夜福利视频| 国产激情久久老熟女| 又黄又爽又免费观看的视频| 日韩成人在线观看一区二区三区| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 亚洲av电影不卡..在线观看| 天天一区二区日本电影三级 | 欧美日韩乱码在线| aaaaa片日本免费| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 美女免费视频网站| 十八禁人妻一区二区| 99国产精品一区二区蜜桃av| 首页视频小说图片口味搜索| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 男女床上黄色一级片免费看| 亚洲免费av在线视频| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 午夜福利,免费看| 国产色视频综合| 怎么达到女性高潮| 99国产极品粉嫩在线观看| 电影成人av| 国产99久久九九免费精品| 国产男靠女视频免费网站| 日日干狠狠操夜夜爽| 国产成人啪精品午夜网站| 激情视频va一区二区三区| 国产成年人精品一区二区| 欧美丝袜亚洲另类 | 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 99在线视频只有这里精品首页| 国产成+人综合+亚洲专区| 丁香欧美五月| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 级片在线观看| 成人特级黄色片久久久久久久| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 夜夜夜夜夜久久久久| 亚洲五月色婷婷综合| 俄罗斯特黄特色一大片| 久久国产精品人妻蜜桃| 午夜免费成人在线视频| 久久精品成人免费网站| 无限看片的www在线观看| 视频区欧美日本亚洲| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 色在线成人网| 1024视频免费在线观看| 一区二区三区国产精品乱码| 天天添夜夜摸| 亚洲专区字幕在线| 俄罗斯特黄特色一大片| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 亚洲av成人一区二区三| 免费观看人在逋| 国产伦一二天堂av在线观看| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 亚洲专区字幕在线| 国产成人精品无人区| 日韩国内少妇激情av| 国产伦人伦偷精品视频| 激情在线观看视频在线高清| 午夜福利在线观看吧| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 十八禁人妻一区二区| 亚洲中文字幕日韩| 99在线视频只有这里精品首页| 色哟哟哟哟哟哟| 一区在线观看完整版| 亚洲成人久久性| 99香蕉大伊视频| ponron亚洲| 日本一区二区免费在线视频| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 十分钟在线观看高清视频www| 涩涩av久久男人的天堂| 老司机福利观看| 男人舔女人下体高潮全视频| 国产精品 欧美亚洲| 国产精品久久久人人做人人爽| 国产精品久久电影中文字幕| 精品人妻在线不人妻| 亚洲男人的天堂狠狠| 日韩精品免费视频一区二区三区| 午夜久久久久精精品| 免费在线观看完整版高清| 我的亚洲天堂| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 波多野结衣巨乳人妻| 视频区欧美日本亚洲| 午夜日韩欧美国产| 搡老妇女老女人老熟妇| 国语自产精品视频在线第100页| 免费搜索国产男女视频| 日日夜夜操网爽| 国产免费av片在线观看野外av| 首页视频小说图片口味搜索| 久久久久久免费高清国产稀缺| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 久久热在线av| av在线播放免费不卡| 精品无人区乱码1区二区| 国产亚洲av高清不卡| а√天堂www在线а√下载| 精品国产乱子伦一区二区三区| 美女午夜性视频免费| 日本一区二区免费在线视频| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 国产精品99久久99久久久不卡| 搡老熟女国产l中国老女人| 啦啦啦 在线观看视频| 色尼玛亚洲综合影院| 亚洲欧美日韩无卡精品| 99香蕉大伊视频| 色哟哟哟哟哟哟| 嫁个100分男人电影在线观看| 一级a爱视频在线免费观看| 国产精品精品国产色婷婷| 91老司机精品| 男女做爰动态图高潮gif福利片 | 亚洲在线自拍视频| 欧美黑人精品巨大| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | cao死你这个sao货| 99久久99久久久精品蜜桃| 久久精品影院6| 亚洲人成伊人成综合网2020| 一进一出抽搐gif免费好疼| 精品国产一区二区三区四区第35| 操出白浆在线播放| 色哟哟哟哟哟哟| 中亚洲国语对白在线视频| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 99久久99久久久精品蜜桃| 午夜福利,免费看| 欧美国产日韩亚洲一区| 婷婷六月久久综合丁香| 在线播放国产精品三级| 91在线观看av| 此物有八面人人有两片| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 啪啪无遮挡十八禁网站| 亚洲国产欧美网| 国产xxxxx性猛交| 精品一区二区三区四区五区乱码| 色哟哟哟哟哟哟| 69精品国产乱码久久久| 日本黄色视频三级网站网址| 亚洲人成电影观看| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 日本精品一区二区三区蜜桃| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| av天堂在线播放| 日本 欧美在线| 在线国产一区二区在线| 久热这里只有精品99| 精品欧美一区二区三区在线| 男女午夜视频在线观看| 久久这里只有精品19| 国产欧美日韩一区二区三区在线| av超薄肉色丝袜交足视频| 中文字幕精品免费在线观看视频| 亚洲激情在线av| 亚洲精品国产色婷婷电影| 他把我摸到了高潮在线观看| www.熟女人妻精品国产| 国产野战对白在线观看| 久久久久久久久久久久大奶| 热re99久久国产66热| 亚洲成人国产一区在线观看| 天堂影院成人在线观看| 97人妻精品一区二区三区麻豆 | 国产亚洲精品久久久久5区| 人人澡人人妻人| 99国产精品免费福利视频| 91麻豆av在线| 精品人妻1区二区| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 999精品在线视频| 久久香蕉激情| 色哟哟哟哟哟哟| 成人手机av| 一边摸一边做爽爽视频免费| 一级,二级,三级黄色视频| 国产乱人伦免费视频| 国产精品久久视频播放| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 日本 欧美在线| 亚洲最大成人中文| av网站免费在线观看视频| 亚洲色图av天堂| 夜夜爽天天搞| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 美国免费a级毛片| 亚洲久久久国产精品| 日韩欧美国产在线观看| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 人人妻人人澡人人看| 天天一区二区日本电影三级 | 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 大型av网站在线播放| 色老头精品视频在线观看| 国产高清有码在线观看视频 | 国产精品久久久久久人妻精品电影| 成人国产综合亚洲| 中亚洲国语对白在线视频| 国产精品99久久99久久久不卡| 亚洲国产欧美一区二区综合| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 高清毛片免费观看视频网站| 在线观看免费视频日本深夜| 久久久久久久精品吃奶| 又黄又爽又免费观看的视频| 黑丝袜美女国产一区| 国产1区2区3区精品| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 搡老熟女国产l中国老女人| 久久人妻熟女aⅴ| 亚洲最大成人中文| 精品免费久久久久久久清纯| 成人永久免费在线观看视频| 久久久国产精品麻豆| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 男女之事视频高清在线观看| 欧美国产精品va在线观看不卡| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 在线观看免费午夜福利视频| 99国产极品粉嫩在线观看| 1024香蕉在线观看| 欧美大码av| 老汉色av国产亚洲站长工具| 日日爽夜夜爽网站| 国产三级黄色录像| 一级毛片精品| 88av欧美| 亚洲精品av麻豆狂野| 久久中文字幕人妻熟女| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 色综合站精品国产| 一本综合久久免费| 大陆偷拍与自拍| 国产熟女xx| 啪啪无遮挡十八禁网站| 女同久久另类99精品国产91| a在线观看视频网站| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 嫩草影视91久久| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| av在线播放免费不卡| 国产精品一区二区免费欧美| 99在线人妻在线中文字幕| 韩国av一区二区三区四区| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 欧美一级毛片孕妇| 免费av毛片视频| 久久青草综合色| 久久久久久大精品| 亚洲一区二区三区不卡视频| 大型av网站在线播放| 中文亚洲av片在线观看爽| 不卡av一区二区三区| 国产午夜精品久久久久久| 免费在线观看日本一区| 久久中文字幕人妻熟女| 亚洲最大成人中文| 亚洲人成电影观看| ponron亚洲| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 国产主播在线观看一区二区| 国产精品永久免费网站| 黄片小视频在线播放| 国产1区2区3区精品| 亚洲七黄色美女视频| 一边摸一边做爽爽视频免费| 国产国语露脸激情在线看| 日本五十路高清| 老司机福利观看| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 色播在线永久视频| 日日干狠狠操夜夜爽| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 69av精品久久久久久| 色老头精品视频在线观看| 亚洲国产欧美一区二区综合| 一二三四在线观看免费中文在| 午夜免费激情av| 久久久久久人人人人人| 最新在线观看一区二区三区| 免费av毛片视频| 九色国产91popny在线| 国产黄a三级三级三级人| 99久久99久久久精品蜜桃| 18禁美女被吸乳视频| 成年版毛片免费区| 国产成人影院久久av| 成人av一区二区三区在线看| 欧美黄色淫秽网站| 国产主播在线观看一区二区| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 日韩视频一区二区在线观看| 757午夜福利合集在线观看| 黄片大片在线免费观看| 亚洲专区中文字幕在线| 多毛熟女@视频| 91av网站免费观看| 亚洲全国av大片| 欧美久久黑人一区二区| 久久国产亚洲av麻豆专区|