針刀干預(yù)對(duì)帕金森病模型大鼠行為學(xué)及谷胱甘肽的影響*

梁靖蓉，郭長(zhǎng)青，蘆 娟，杜寧宇，馬薇薇，樸起范，吳 彤，徐 菁，趙瑞利，馬 田，陳 晨，安 娜，盧勝春

(北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京100029)

針刀干預(yù)對(duì)帕金森病模型大鼠行為學(xué)及谷胱甘肽的影響*

梁靖蓉，郭長(zhǎng)青△，蘆 娟，杜寧宇，馬薇薇，樸起范，吳 彤，徐 菁，趙瑞利，馬 田，陳 晨，安 娜，盧勝春

(北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京100029)

目的:觀察針刀對(duì)帕金森病(PD)大鼠行為學(xué)及谷胱甘肽(GSH)含量的影響。方法:雄性SD大鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、電針組和針刀組(各16只)，采用右側(cè)紋狀體雙靶點(diǎn)注射6-羥多巴胺造模。電針組“百會(huì)”沿皮向雙側(cè)“太陽(yáng)”透刺，每次20 min;針刀組取枕骨下項(xiàng)線中點(diǎn)和C1、C2橫突后結(jié)節(jié)進(jìn)行松解。進(jìn)行行為學(xué)評(píng)價(jià)和黑質(zhì)GSH含量檢測(cè)。結(jié)果:空白組未見(jiàn)旋轉(zhuǎn)行為，模型組干預(yù)治療前后無(wú)差異(P＞0.05);針刀大鼠旋轉(zhuǎn)圈數(shù)明顯減少且治療前后相比有差異(P＜0.01);電針組治療前后相比有差異(P＜0.05)。GSH含量比較，模型組GSH含量明顯降低與空白組相比差異明顯(P＜0.01);針刀組和電針組GSH含量明顯升高，針刀組、電針組與模型組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。結(jié)論:針刀可能通過(guò)改善PD旋轉(zhuǎn)行為、提升GSH含量從而提高抗氧化能力減輕黑質(zhì)DA能神經(jīng)元損傷。

針刀干預(yù);帕金森病;氧化應(yīng)激;谷胱甘肽

帕金森病(Parkinson disease，PD)是一種以中腦黑質(zhì)多巴胺(Dopamine，DA)能神經(jīng)元進(jìn)行性丟失為基本病理改變的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，主要臨床特征包括震顫、強(qiáng)直、運(yùn)動(dòng)遲緩、姿勢(shì)及步態(tài)異常等［1］。PD發(fā)病率逐年增高，在65歲以上的老年人，患病率高達(dá)1%［2］。該病起病隱匿，致殘率高，嚴(yán)重影響患者的健康和生活質(zhì)量［3］。氧化應(yīng)激過(guò)度及自由基損傷是PD發(fā)病機(jī)制的關(guān)鍵環(huán)節(jié)［4］。谷胱甘肽(Glutathione，GSH)是腦內(nèi)最重要的抗氧化保護(hù)劑之一，可清除自由基。GSH在黑質(zhì)多巴胺神經(jīng)元上的耗竭極有可能是PD發(fā)病機(jī)制中的重要原因之一［5］。研究發(fā)現(xiàn)針灸等方法可緩解PD的癥狀，減少副作用，改善并發(fā)癥［6］，提高GSH水平［7-8］。針刀療法是新的醫(yī)療過(guò)程，結(jié)合中醫(yī)和現(xiàn)代西方醫(yī)學(xué)，近年來(lái)運(yùn)用于PD治療收到明顯療效。本實(shí)驗(yàn)觀察針刀對(duì)PD模型大鼠行為學(xué)及中腦黑質(zhì)非酶抗氧化物質(zhì)GSH含量的影響，初步探討針刀治療對(duì)PD模型抗氧化應(yīng)激的可能機(jī)制。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

選用76只雄性清潔級(jí)SD大鼠(190～210 g)，購(gòu)于北京維通利華公司實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心［生產(chǎn)許可批號(hào): SCXK(京)200223］。于北京中醫(yī)藥大學(xué)針灸推拿學(xué)院針灸機(jī)理實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)，環(huán)境控制在溫度(20±1)℃，濕度50%，12 h光暗周期。給予自由進(jìn)食和飲水。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后進(jìn)行造模，大鼠手術(shù)前后12 h禁食不禁水。本實(shí)驗(yàn)所有操作按照世界衛(wèi)生組織的國(guó)際生物醫(yī)學(xué)研究指導(dǎo)原則進(jìn)行，動(dòng)物的倫理和使用由北京中醫(yī)藥大學(xué)批準(zhǔn)。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑

腦立體定位儀(美國(guó)Stoelting公司);微量進(jìn)樣器(上海安亭微量進(jìn)樣器廠);AE-160電子天平(瑞士MET-TLER公司);一次性漢章系列無(wú)菌針刀(規(guī)格: 0.4 mm×40 mm，北京健力園醫(yī)療器械有限公司);一次性無(wú)菌針灸針(0.25 mm×25 mm)和韓氏電針儀(北京中研太和醫(yī)療器械有限公司);6-羥多巴胺(6-OHDA)和阿樸嗎啡(APO)(美國(guó)Sigma公司);水合氯醛(天津市科密歐化學(xué)試劑中心);多聚甲醛(常德市華生醫(yī)療器械有限公司);0.9%氯化鈉溶液(哈藥集團(tuán)三精制藥有限公司);HE染色試劑盒(北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司);GSH含量測(cè)定試劑盒(南京建成生物工程研究所)。

1.3 PD動(dòng)物模型建立

隨機(jī)抽取16只作為空白對(duì)照組，剩余60只用于模型制備。采用右側(cè)紋狀體雙靶點(diǎn)注射6-羥基多巴胺(6-OHDA)造模［9］。首先10%水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠，顱平位固定大鼠，備皮消毒暴露前囟，右側(cè)紋狀體兩點(diǎn)坐標(biāo)按《大鼠腦立體定位圖譜》［10］確定(AP:-0.7 mm，L:-3.0 mm，DV:-4.5 mm;AP:-0.2 mm，L:-2.6mm，DV:-6.0 mm)。鉆孔后，選用微量注射器(10 μL)以0.5 μL/min速度分別向每點(diǎn)注射6-OHDA(15 μg)，留微量注射器5 min，以1 mm/min的速度緩慢退微量注射器。兩點(diǎn)顱骨孔用明膠海綿填塞減少滲血?？p合頭皮后，腹腔注射青霉素鈉(8萬(wàn)U)以防感染。大鼠分籠，保暖，待清醒傷口愈合后合籠。

模型評(píng)價(jià):術(shù)后第4周進(jìn)行行為學(xué)檢測(cè)，每周2次，連續(xù)2周。腹腔注射APO(0.5 mg/kg)誘發(fā)大鼠向左側(cè)(健側(cè))旋轉(zhuǎn)行為。注射10 min后開(kāi)始記錄大鼠旋轉(zhuǎn)的啟動(dòng)時(shí)間，旋轉(zhuǎn)較穩(wěn)定后記錄旋轉(zhuǎn)圈數(shù)持續(xù)30 min。每一個(gè)360度旋轉(zhuǎn)計(jì)數(shù)1次，平均轉(zhuǎn)速超過(guò)7轉(zhuǎn)/min轉(zhuǎn)向左側(cè)視為成功模型。結(jié)果顯示，48只大鼠符合成功模型，造模成功率為80%。

1.4 動(dòng)物分組

將造模成功的動(dòng)物隨機(jī)分成3組，每組16只。故分組為空白組、模型組、針刀組、電針組，每組各16只。

1.5 干預(yù)措施

1周后開(kāi)始治療?？瞻捉M和模型組在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中每天只抓取動(dòng)物，不作任何處理，正常飼養(yǎng)。電針組用自制襪套固定大鼠，手法輕柔，讓大鼠不強(qiáng)烈掙扎和嘶叫，參照李忠仁主編的《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》［11］取“百會(huì)”“太陽(yáng)”穴，用毫針(0.25 mm×25 mm)針刺“百會(huì)”，并沿皮向單側(cè)“太陽(yáng)”透刺，下次治療刺另一側(cè)“太陽(yáng)”，交替使用，稍作提插后連接韓式電針儀(100 Hz，1 mA)，幅度以大鼠頭部微顫為宜，但不引起動(dòng)物掙扎嘶叫。每次留針20 min。每周3次，共4周。

針刀組大鼠用自制襪套固定大鼠，手法輕柔，讓大鼠不強(qiáng)烈掙扎和嘶叫。取枕骨下項(xiàng)線中點(diǎn)、C1和C2橫突后結(jié)節(jié)3點(diǎn)，常規(guī)備皮，以龍膽紫定位，常規(guī)消毒。選用0.4 mm×40 mm的HZ系列一次性針刀，左手拇指尖按壓于枕骨下項(xiàng)線點(diǎn)，在枕骨下項(xiàng)線中點(diǎn)處進(jìn)針，沿枕骨骨面刺入10 mm;左手拇指尖按壓抵住橫突后結(jié)節(jié)，在C1和C2橫突后結(jié)節(jié)處進(jìn)針，右手拇食中指捏住刀柄，將針刀沿左手拇指指甲背加壓刺入。每周2次，共4周。

1.6 取材與指標(biāo)檢測(cè)

1.6.1 行為學(xué)評(píng)價(jià) 治療結(jié)束1周后，用APO誘導(dǎo)各組大鼠進(jìn)行行為學(xué)評(píng)價(jià)。評(píng)價(jià)方法同模型評(píng)價(jià)方法。評(píng)價(jià)后進(jìn)行取材。

1.6.2 中腦黑質(zhì)HE染色 行為學(xué)評(píng)價(jià)結(jié)束后，各組大鼠隨機(jī)選取8只進(jìn)行取材用于灌注。用10%的水合氯醛腹腔麻醉，待其麻醉后暴露心臟，將灌注針插入心尖搏動(dòng)處后剪開(kāi)右心耳。將生理鹽水注射液(100 ml)快速灌入心臟，待右心耳血液流盡流出無(wú)色液體后改用4%多聚甲醛固定液灌注(250 ml)，等待大鼠鼠尾變硬，身體挺直，四肢僵硬變白停止灌注?？焖偃∧X，放于含4%多聚甲醛的磷酸緩沖液的EP管固定1周以備檢測(cè)。標(biāo)本經(jīng)固定后，石蠟包埋，切片，切片厚度為5 μm，脫蠟，染色。常規(guī)脫水，中性樹(shù)脂封片，光學(xué)顯微鏡下觀察背根神經(jīng)節(jié)的病理改變。

1.6.3 各組大鼠紋狀體GSH含量水平檢測(cè) 剩余8只進(jìn)行取材用于勻漿。用10%的水合氯醛腹腔麻醉，待其麻醉后迅速用閘刀斷頭處死，迅速開(kāi)顱暴露腦組織，置于放冰的玻璃器皿上，參照《大鼠腦立體定位圖譜》［10］快速分離大腦皮層后取右側(cè)黑質(zhì)，放于標(biāo)記好的試管中后，保存于-70℃液氮中待測(cè)。將標(biāo)本取出制成組織勻漿(100 g/L)，用離心機(jī)離心(3000轉(zhuǎn)/min) 15 min，取上清液，配制成適當(dāng)?shù)臐舛?，按試劑?南京建成生物工程研究所)說(shuō)明書(shū)步驟進(jìn)行測(cè)試。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理和分析結(jié)果使用 SPSS22.0 (20150408-LSBJ，北京中醫(yī)藥大學(xué)，中國(guó))軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，對(duì)各數(shù)值變量進(jìn)行方差齊性和正態(tài)性檢驗(yàn)，多組間比較用單因素方差分析(One-way ANOVA)，行為學(xué)治療前后旋轉(zhuǎn)圈數(shù)統(tǒng)計(jì)運(yùn)用配對(duì)t檢驗(yàn)。檢驗(yàn)顯著性水平P＜0.05和P＜0.01。

2 結(jié)果

2.1 行為學(xué)評(píng)價(jià)

各組行為學(xué)評(píng)價(jià)結(jié)果顯示，空白組未見(jiàn)旋轉(zhuǎn)行為，模型組出現(xiàn)旋轉(zhuǎn)行為且干預(yù)治療前后旋轉(zhuǎn)圈數(shù)無(wú)差異(P＞0.05);針刀組干預(yù)后大鼠活動(dòng)有所增多，旋轉(zhuǎn)圈數(shù)明顯減少，治療前后相比有明顯差異(P＜0.01)，且與模型組相比有差異(P＜0.01);電針組治療前后相比有明顯差異(P＜0.05)，且與模型組相比有差異(P＜0.05)，針刀組與電針組兩組間無(wú)差異(P＞0.05)。見(jiàn)表1。

表1 各組治療前后旋轉(zhuǎn)行為測(cè)定結(jié)果比較(±s)

表1 各組治療前后旋轉(zhuǎn)行為測(cè)定結(jié)果比較(±s)

注:與治療前比較，＊＊P＜0.01，*P＜0.05;與模型組比較，▲▲P＜0.01，▲P＜0.05;與電針組比較，##P＜0.01，#P＜0.05

組別 例數(shù) 平均轉(zhuǎn)數(shù)(r/min)治療前 治療后空白組 8 0 0▲▲##模型組 8 11.50±2.33 12.50±2.07#電針組 8 10.88±3.09 8.25±2.37＊▲針刀組 8 11.00±3.20 7.50±2.20＊＊▲▲

2.2 光鏡觀察

中腦黑質(zhì)HE染色結(jié)果顯示空白組神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)目多，分布密集，排列有序，細(xì)胞形態(tài)正常，未見(jiàn)變性壞死，神經(jīng)纖維排列整齊。模型組大鼠神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)目明顯減少，排列紊亂;部分細(xì)胞腫脹或細(xì)胞固縮，可見(jiàn)空泡變性和凋亡細(xì)胞，伴小膠質(zhì)細(xì)胞增生，少量間質(zhì)細(xì)胞浸潤(rùn);細(xì)胞核形態(tài)不一，體積增大，偏居一側(cè)，核仁不明顯;神經(jīng)纖維排列紊亂，結(jié)構(gòu)疏松。干預(yù)后，針刀組神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目明顯增加，形態(tài)結(jié)構(gòu)似正常，細(xì)胞腫脹減輕，小膠質(zhì)細(xì)胞增生較少，神經(jīng)纖維排列較整齊;電針組神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目有所增加，細(xì)胞腫脹減輕，伴小膠質(zhì)細(xì)胞增生，神經(jīng)纖維排列稍紊亂，且電針組與針刀組差異不明顯。見(jiàn)封三彩圖1。

2.3 大鼠黑質(zhì)GSH含量水平變化

與空白組相比，模型組中腦黑質(zhì)GSH含量明顯降低，具有顯著性差異(P＜0.01)。針刀和電針干預(yù)后，針刀組和電針組GSH含量明顯升高，針刀組與模型組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，電針組與模型組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，針刀組與電針組相比無(wú)差異(P＞0.05)。見(jiàn)表2。

表2 各組大鼠黑質(zhì)GSH含量水平測(cè)定結(jié)果(±s)

表2 各組大鼠黑質(zhì)GSH含量水平測(cè)定結(jié)果(±s)

注:與空白組比較，*P＜0.05，＊＊P＜0.01;與模型組比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01;與電針組比較，#P＜0.05，##P＜0.01

組別 n GSH(mg/L)空白組 8 5.19±1.94▲▲模型組 8 3.44±0.56＊＊#針刀組 8 4.65±0.83▲電針組 8 4.62±0.39▲

3 討論

腦內(nèi)有數(shù)個(gè)能神經(jīng)通路，最主要的是黑質(zhì)-紋狀體系統(tǒng)。合成多巴胺的原料來(lái)自血液，黑質(zhì)、紋狀體區(qū)域經(jīng)大腦中動(dòng)脈，大腦中動(dòng)脈則是頸內(nèi)動(dòng)脈直接的延續(xù)。中、老年人頸椎多有病變，頸部軟組織損傷形成痙攣、瘢痕、粘連等可使神經(jīng)、血管遭受牽拉或卡壓，若刺激頸上交感神經(jīng)節(jié)興奮，會(huì)引起頸內(nèi)動(dòng)脈及其分支的血管平滑肌攣縮，進(jìn)而血管管腔變小變窄，造成血流阻力增大從而影響大腦供血。臨床觀察發(fā)現(xiàn)無(wú)論P(yáng)D患者或PD大鼠模型均伴有腦部血流量減少，基底節(jié)黑質(zhì)-紋狀體區(qū)系統(tǒng)尤為明顯，血流量減少與臨床癥狀波動(dòng)有明顯關(guān)系［12］。也就是說(shuō)頸部軟組織病變的因素可能直接或間接引起頸上交感神經(jīng)興奮，從而可能出現(xiàn)頸內(nèi)動(dòng)脈系統(tǒng)區(qū)域供血不足，從而多巴胺的合成原料不足［13］。因此本實(shí)驗(yàn)提出針刀松解頸部，減輕對(duì)頸上交感神經(jīng)的刺激來(lái)治療PD。

腦內(nèi)耗氧量高且本身含有大量多聚不飽和脂質(zhì)，極易發(fā)生過(guò)氧化反應(yīng)而引起神經(jīng)損傷。氧化應(yīng)激在PD發(fā)生發(fā)展的作用得到越來(lái)越多的重視與關(guān)注［14］。神經(jīng)毒素6-OHDA通過(guò)介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)外的氧化反應(yīng)引發(fā)黑質(zhì)DA能神經(jīng)元呈漸進(jìn)行性不完全損害，較接近人類PD進(jìn)行性變性特征。本實(shí)驗(yàn)采用單側(cè)紋狀體注射6-OHDA模型其誘發(fā)的旋轉(zhuǎn)癥狀可以量化并且PD模型大鼠的旋轉(zhuǎn)圈數(shù)常被用來(lái)反映大鼠黑質(zhì)多巴胺(DA)能神經(jīng)元受損程度。筆者實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)行為學(xué)旋轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)中觀察到空白組未見(jiàn)旋轉(zhuǎn)行為，PD模型組出現(xiàn)旋轉(zhuǎn)行為且干預(yù)治療前后旋轉(zhuǎn)圈數(shù)無(wú)差異(P＞0.05)，與空白組相比有顯著差異(P＜0.01);同時(shí)中腦黑質(zhì)HE染色發(fā)現(xiàn)模型組大鼠神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)目明顯減少，排列紊亂;部分細(xì)胞腫脹或細(xì)胞固縮，伴小膠質(zhì)細(xì)胞增生，說(shuō)明6-OHDA引發(fā)了黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元變性。針刀組和電針組干預(yù)治療后大鼠活動(dòng)有所增多，旋轉(zhuǎn)圈數(shù)明顯減少，治療前后相比有明顯差異(P＜0.05)，且HE染色觀察干預(yù)后，針刀組神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目明顯增加，神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu)改善，細(xì)胞腫脹減輕，小膠質(zhì)細(xì)胞增生較少;電針組神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目有所增加，神經(jīng)元結(jié)構(gòu)也改善。從行為學(xué)和病理組織學(xué)角度表明針刀可以改善PD模型大鼠APO誘發(fā)的旋轉(zhuǎn)行為，增加神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目，改善神經(jīng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)，黑質(zhì)紋狀體DA能神經(jīng)元損傷程度有所減輕。

PD黑質(zhì)致密部多巴胺能神經(jīng)元的進(jìn)行性變性壞死病理病因不明，目前眾多觀點(diǎn)認(rèn)為可能與自由基、氧化反應(yīng)增強(qiáng)、谷胱甘肽功能改變等因素有關(guān)［15］。GSH是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中非常重要的非酶性保護(hù)機(jī)制，作為細(xì)胞內(nèi)一種重要的調(diào)節(jié)代謝劑和抗氧化劑，具有清除氧自由基、提高機(jī)體抗氧化防御能力等作用［16-17］。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)PD黑質(zhì)部位GSH含量較對(duì)照組減少［18］，同時(shí)PD患者尸檢報(bào)告黑質(zhì)存在氧化應(yīng)激及谷胱甘肽的耗竭［19］，同時(shí)PD黑質(zhì)GSH含量降低是有疾病和部位選擇性的，可能是PD發(fā)病的易感因素和最初的神經(jīng)生化改變，GSH在PD的病理機(jī)制中起重要作用［20-22］。PD中GSH的大幅度降低會(huì)增加細(xì)胞組織對(duì)氧自由基的易感性，使神經(jīng)元對(duì)于氧化破壞高度敏感［23-24］。總的GSH水平在PD中降低且GSH丟失程度與疾病嚴(yán)重程度相關(guān)［25］。越來(lái)越多的研究證實(shí)GSH與PD的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，研究發(fā)現(xiàn)GSH能減輕PD大鼠模型黑質(zhì)區(qū)氧化應(yīng)激損傷，對(duì)殘存多巴胺能神經(jīng)元有保護(hù)作用以及改善早期PD患者的病情等［26-27］，說(shuō)明提高GSH在腦內(nèi)的濃度或應(yīng)用谷胱甘肽的類似物、前體可能是防治 PD及其它神經(jīng)退行性疾病的有效途徑［28］。筆者實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)PD模型組大鼠GSH含量明顯下降，與空白組相比具有顯著性差異(P＜0.01);針刀和電針干預(yù)后，針刀組和電針組中腦黑質(zhì)GSH含量明顯升高，針刀組、電針組與模型組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，針刀組與電針組兩組間比較無(wú)差異(P＞0.05)。由于GSH具有清除自由基的作用，對(duì)多巴胺能神經(jīng)元具有保護(hù)作用。說(shuō)明針刀和電針可能通過(guò)提升黑質(zhì)GSH含量而增強(qiáng)清除自由基的能力，提高一定的抗氧化能力，從而起到減輕黑質(zhì)DA神經(jīng)元損傷的作用而延緩PD的發(fā)展。

針刀療法是新的醫(yī)療過(guò)程，創(chuàng)造性的結(jié)合中醫(yī)和現(xiàn)代西方醫(yī)學(xué)，近年來(lái)常被運(yùn)用于帕金森病的治療，療效值得肯定。本實(shí)驗(yàn)以針刀對(duì)頸枕部肌群軟組織松解為切入點(diǎn)，針刀干預(yù)可改善PD模型大鼠的旋轉(zhuǎn)行為、提升非酶氧化指標(biāo)GSH含量。針刀治療PD亟待多角度進(jìn)行探討，針刀治療PD可能是復(fù)合多靶點(diǎn)效應(yīng)，本實(shí)驗(yàn)針刀通過(guò)對(duì)頸枕部肌群軟組織的松解從而提升抗氧化能力、減輕DA神經(jīng)元損傷，可能是針刀治療PD模型大鼠的機(jī)制之一。

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Effect of Acupotomy on the Ethology Changes and GSH Content of PD Model Rats

LIANG Jing-rong，GUO Chang-qing△，LU Juan，DU Ning-yu，MA Wei-wei，PIAO Qi-fan，WU Tong，XU Jing，ZHAO Rui-li，MA Tian，CHEN Chen，AN Na，LU Sheng-chun
(Beijing University of Chinese Medicine，Beijing100029，China)

Objective:To observe the effect of acupotomy on the changes of ethology and glutathione(GSH) contents of substantia nigra in model rats with Parkinson＇s disease.Methods:Healthy male SD rats were randomly divided into a blank group，a model group，an electroacupuncture(EA)group and an acupotomy group，with sixteen rats in each group.PD rat models were set up by unilateral striatum injection of 6-OHDA with two targets.Rats in EA group were treated by EA at“Baihui”(GV 20)and“Taiyang”(EX-HN5).Acupotomy group chose midpoint of the occipital bone inferior nuchal line and transverses process posterior tubercle C1 and C2 to debond and release.After treatment，rats were tested for rotational behavior and assessed the GSH contentof midbrain substantia nigra.Results:The blank group had no rotation behavior，and the model group had no difference before and after intervention(P＞0.05).In acupotomy group rotations were decreased significantly after treatment compared with those before treatment(P＜0.01)，and EA group had a significant difference before and after treatment(P＜0.05).The comparison of GSH contents among each group showed that the GSH contents of model group were significantly decreased compared with those of the blank group(P＜0.01).GSH contents of acupotomy group and EA group were increased significantly after the intervention，and the acupotomy group was significantly different from model group(P＜0.05).Conclusion:Acupotomy can improve the rotational behavior of PD model rats and increase GSH contents，and it may be by improving the antioxidant capacity to reduce the damage of DA neurons in substantia nigra.

Acupotomy intervention;Parkinson＇s disease;Oxidative stress;Glutathione

R246.6

A

1005-0779(2017)03-0061-04

2016-09-28

江西德興市勝春醫(yī)院課題，編號(hào):535104032。

梁靖蓉(1989-)，女，2014級(jí)針灸推拿專業(yè)碩士研究生。

△通訊作者:郭長(zhǎng)青(1959-)，男，教授，博士研究生導(dǎo)師，研究方向:針刀理論與臨床研究。