• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    基于三種分子標(biāo)記的外伶仃島石珊瑚系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系研究

    2017-03-26 03:38:51肖寶華廖寶林楊小東謝子強(qiáng)
    海洋科學(xué) 2017年9期
    關(guān)鍵詞:種間蜂巢珊瑚

    肖寶華, 廖寶林, 楊小東, 謝子強(qiáng)

    ?

    基于三種分子標(biāo)記的外伶仃島石珊瑚系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系研究

    肖寶華1, 2, 廖寶林2, 楊小東2, 謝子強(qiáng)3

    (1. 廣東海洋大學(xué), 廣東 湛江 524025; 2. 廣東海洋大學(xué) 深圳研究院, 廣東 深圳 518108; 3. 深圳市碧海藍(lán)天海洋科技有限公司, 廣東 深圳 518108)

    以廣東省珠海市外伶仃島地區(qū)常見(jiàn)的4屬5種石珊瑚為研究對(duì)象, 對(duì)線(xiàn)粒體COI、16S rRNA和ITS三種基因片段數(shù)據(jù)進(jìn)行分析, 并計(jì)算了種間遺傳距離。序列分析結(jié)果表明5種石珊瑚的COI、16S rRNA基因片段堿基AT含量大于GC含量, 而ITS序列堿基AT含量小于GC含量; 5種石珊瑚種間的三種基因平均遺傳距離分別為0.043、0.134和0.763, 所得遺傳距離結(jié)果存在一定差異。將三種基因串聯(lián)起來(lái)并利用鄰位連接法(NJ)、最大似然法(ML)和最小進(jìn)化法(ME)分別構(gòu)建了分子系統(tǒng)樹(shù)。在系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)中, 科一級(jí)的系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系與形態(tài)學(xué)分類(lèi)一致, 但蜂巢珊瑚科內(nèi)的分子系統(tǒng)分類(lèi)結(jié)果與形態(tài)學(xué)分類(lèi)闡述的遺傳進(jìn)化關(guān)系略有差別, 說(shuō)明石珊瑚傳統(tǒng)分類(lèi)可能受骨骼可塑性的影響。研究結(jié)果為外伶仃島石珊瑚的親緣關(guān)系研究提供相關(guān)基礎(chǔ)數(shù)據(jù), 并為該地區(qū)石珊瑚資源保護(hù)奠定理論基礎(chǔ)。

    石珊瑚; COI; 16S rRNA; ITS; 分子系統(tǒng)進(jìn)化

    石珊瑚分子系統(tǒng)進(jìn)化研究始于20世紀(jì)90年代, 1996年Romano等[1]在世界上首次使用分子標(biāo)記(線(xiàn)粒體16S rRNA和細(xì)胞核28S rRNA)對(duì)石珊瑚系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系進(jìn)行研究, 研究結(jié)果表明現(xiàn)有石珊瑚目起源于兩個(gè)分支類(lèi)群(堅(jiān)實(shí)型類(lèi)群和復(fù)合型類(lèi)群)。目前, 應(yīng)用于石珊瑚系統(tǒng)進(jìn)化的分子標(biāo)記主要有核糖體18S rRNA、5.8S rRNA、內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔(Internal transcribed spacers, ITS)和線(xiàn)粒體的12S rRNA基因、16S rRNA基因和細(xì)胞色素b(cytochromeb, cyt b)基因、細(xì)胞色素c氧化酶亞基I基因(COI)等[2]。經(jīng)過(guò)近20年的研究發(fā)展, 石珊瑚的分子系統(tǒng)進(jìn)化研究已經(jīng)對(duì)石珊瑚較高階元的系統(tǒng)分類(lèi)學(xué)產(chǎn)生了極大的影響, 顛覆了以往通過(guò)形態(tài)學(xué)對(duì)石珊瑚系統(tǒng)進(jìn)化的認(rèn)識(shí)[3]。

    鹿角珊瑚科的石珊瑚品種是目前國(guó)內(nèi)外利用分子標(biāo)記研究系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系最多一類(lèi)珊瑚。Odorico等[4]利用ITS基因?qū)?種鹿角珊瑚科品種的系統(tǒng)關(guān)系進(jìn)行了初步的探討, 為鹿角珊瑚科分子系統(tǒng)研究打下了堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)。Fukami等[5]利用線(xiàn)粒體的細(xì)胞色素b和ATP6兩種基因片段對(duì)鹿角珊瑚科4個(gè)屬15個(gè)品種進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化分析, 分子系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)顯示15種珊瑚可分為三個(gè)大的珊瑚類(lèi)群。Forsman等[6]利用16S rRNA作為分子標(biāo)記對(duì)鹿角珊瑚科的薔薇珊瑚屬()多種薔薇珊瑚的種間遺傳關(guān)系進(jìn)行分析, 構(gòu)建了薔薇珊瑚屬的系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)。蜂巢珊瑚科的石珊瑚作為石珊瑚種類(lèi)第二豐富的種類(lèi), 使用分子標(biāo)記進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化研究也在國(guó)內(nèi)外積累了大量的報(bào)道。Huang等[7]基于線(xiàn)粒體COI和一個(gè)非編碼區(qū)序列對(duì)新加坡附近海域的41種蜂巢珊瑚科珊瑚系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系進(jìn)行研究, Arrigoni等[8]采用COI作為分子標(biāo)記對(duì)印度洋海域的蜂巢珊瑚科的珊瑚品種進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化分析。這些學(xué)者都發(fā)現(xiàn)蜂巢珊瑚科的分子系統(tǒng)進(jìn)化結(jié)果與形態(tài)學(xué)系統(tǒng)進(jìn)化結(jié)果存在一定的差異, 再次證明石珊瑚中普遍存在并系現(xiàn)象。相比較國(guó)外對(duì)石珊瑚分子系統(tǒng)進(jìn)化的報(bào)道, 國(guó)內(nèi)有關(guān)石珊瑚分子系統(tǒng)進(jìn)化的研究報(bào)道仍較少, 僅有海南[9-10]、廣東徐聞[11-13]等少數(shù)地方的石珊瑚系統(tǒng)進(jìn)化有過(guò)相關(guān)的報(bào)道。

    外伶仃島位于萬(wàn)山群島中部東北端, 珠江口東側(cè)。目前, 有關(guān)外伶仃島附近海域石珊瑚的研究知之甚少, 僅有黃暉等[15]在2008年開(kāi)展萬(wàn)山群島的石珊瑚群落分布研究時(shí)對(duì)外伶仃島海域石珊瑚情況進(jìn)行了初步的調(diào)查, 調(diào)查結(jié)果顯示多孔同星珊瑚()和腐蝕刺柄珊瑚()為外伶仃島的優(yōu)勢(shì)種。其他有關(guān)外伶仃島石珊瑚的研究還未見(jiàn)報(bào)道。

    本研究采用線(xiàn)粒體COI、16S rRNA基因以及核糖體ITS基因的部分序列片段作為分子標(biāo)記, 對(duì)外伶仃島海域的5種石珊瑚的系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系進(jìn)行研究, 為外伶仃島石珊瑚的親緣關(guān)系研究提供相關(guān)基礎(chǔ)數(shù)據(jù), 并為該地區(qū)石珊瑚資源保護(hù)奠定理論基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1.1 樣品采集和形態(tài)學(xué)鑒定

    本研究的石珊瑚樣品采自廣東省珠海市外伶仃島附近海域, 形態(tài)學(xué)鑒定依照鄒仁林[16]的《中國(guó)動(dòng)物志·腔腸動(dòng)物門(mén)·珊瑚蟲(chóng)綱·石珊瑚目·石珊瑚》和Veron[17]的六射珊瑚骨骼形態(tài)特征分類(lèi)系統(tǒng)。經(jīng)形態(tài)學(xué)鑒定采集的樣品可分為3科4屬5種, 樣品形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果見(jiàn)表1。截取一小段斷枝保存于無(wú)水乙醇中以備后續(xù)DNA提取實(shí)驗(yàn)使用。

    表1 珊瑚樣品

    1.2 基因組總DNA的提取

    使用北京天根生物有限公司生產(chǎn)的海洋動(dòng)物組織基因組提取試劑盒提取珊瑚樣品的DNA, 所提取的DNA置于4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

    1.3 引物設(shè)計(jì)合成

    COI基因的PCR引物參考李曉娜等[11]的研究報(bào)道, 16S rRNA基因的PCR引物參考Forsman等[6]的研究報(bào)道, ITS基因的PCR引物參考Odorico等[4]的研究報(bào)道。引物由上海生工生物技術(shù)服務(wù)有限公司合成, 引物信息見(jiàn)表2。

    1.4 PCR擴(kuò)增和DNA測(cè)序

    PCR反應(yīng)體系反應(yīng)總體積25 μL: 10×Buffer 2.5 μL, dNTP 2 μL, 上下游引物各1 μL, , Taq DNA聚合酶1U及DNA模板2 μL; 其余用去離子水補(bǔ)至25 μL。PCR反應(yīng)條件: 95℃預(yù)變性5min, 95℃變性45 , 50℃退火45 s, 72℃延伸1 min 30 s, 共35個(gè)循環(huán), 最后72℃延伸10 min。擴(kuò)增產(chǎn)物在1.0%的瓊脂糖凝膠中檢測(cè), 凝膠成像儀拍照記錄。選取擴(kuò)增條帶單一、濃度較高的PCR產(chǎn)物送至上海生工生物技術(shù)公司進(jìn)行測(cè)序, 獲取各基因片段的序列信息。

    表2 COI、16S rRNA、ITS基因的PCR引物

    1.5 序列分析及系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)的構(gòu)建

    測(cè)序所得序列用DNASTAR中的Editseq軟件進(jìn)行編輯、剪切、校正, 再將校正好的序列與NCBI的數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì), 確認(rèn)樣品的分子結(jié)果。采用MEGA6.0軟件進(jìn)行三種基因序列的串聯(lián)與分析, 統(tǒng)計(jì)出三種線(xiàn)粒體基因組序列長(zhǎng)度、堿基組成、簡(jiǎn)約信息位點(diǎn)等相關(guān)信息。同時(shí)根據(jù)簡(jiǎn)約信息位點(diǎn), 計(jì)算出種間遺傳距離。本研究三種基因的系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)是使用MEGA6.0軟件基于Kimu-ra雙參數(shù)模型(Kimura 2-parameter, K2P), 只計(jì)算顛換(Transversional substitutions only), 采用鄰位連接法(Neighbor-Joinning, NJ)、最大似然法(Minimum-Likelihood, ML)和最小進(jìn)化法(Minimum-Evolution, ME)構(gòu)建出來(lái)的。三種系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)中節(jié)點(diǎn)的自舉置信度水平由自引導(dǎo)值(Bootstrapvalue) 估計(jì), 重復(fù)次數(shù)為1 000次。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 三種基因序列及堿基組成分析

    本研究的5個(gè)物種的COI、16S rRNA基因以及ITS基因部分序列長(zhǎng)度分別為464~465bp, 470~485bp, 964~988bp。從5種石珊瑚的COI、16S rRNA基因以及ITS基因部分序列的堿基組成比例來(lái)看, 兩種線(xiàn)粒體基因(COI、16S rRNA)片段堿基中的A、T、C、G含量相差較大, 序列堿基AT含量大于GC含量, 與目前已知的無(wú)脊椎動(dòng)物mtDNA序列中AT含量大于GC含量的情況相同。而ITS基因序列片段堿基中的A、T、C、G含量相差不大, 除大角孔珊瑚外(), 其余物種的堿基AT含量小于GC含量。三種片段序列基因都處于高度飽和狀態(tài)。堿基組成比例見(jiàn)表3。

    表3 5種石珊瑚COI、16S rRNA以及ITS基因片段的堿基組成比例

    2.2 5種石珊瑚種間遺傳距離

    通過(guò)MEGA6.0計(jì)算5種石珊瑚的種間遺傳距離, 得到COI、16S rRNA基因以及ITS序列間的平均距離為0.043、0.134和0.763。在COI序列中, 標(biāo)準(zhǔn)蜂巢珊瑚和大角孔珊瑚的種間遺傳距離最大為0.093, 而標(biāo)準(zhǔn)蜂巢珊瑚和猩紅筒星珊瑚的遺傳距離最小, 為0.004。在16S rRNA基因序列中, 猩紅筒星珊瑚和多孔同星珊瑚以及向日葵蜂巢珊瑚的種間遺傳距離最大, 都為0.224, 而標(biāo)準(zhǔn)蜂巢珊瑚和多孔同星珊瑚的遺傳距離最小, 為0.002。在ITS序列中, 大角孔珊瑚和多孔同星珊瑚的種間遺傳距離最大, 為1.224, 而多孔同星珊瑚和向日葵蜂巢珊瑚的遺傳距離最小, 為0.028。三種序列得出的種間遺傳距離結(jié)果存在一定差異, 種間遺傳距離見(jiàn)表4、表5和表6。

    表4 基于COI的5種石珊瑚種間遺傳距離

    表5 基于16S rRNA基因的5種石珊瑚種間遺傳距離

    表6 基于ITS的5種石珊瑚種間遺傳距離

    2.3 基于三種基因序列對(duì)5種石珊瑚的系統(tǒng)進(jìn)化分析

    使用MEGA6.0軟件將每種石珊瑚的COI、16S rRNA基因以及ITS三種基因片段序列串聯(lián)起來(lái), 再采用鄰位連接法(Neighbor-Joinning, NJ)、最大似然法(Minimum-Likelihood, ML)和最小進(jìn)化法(Minimum-Evolution, ME)構(gòu)建5種石珊瑚的分子系統(tǒng)樹(shù), 結(jié)果顯示3種方法構(gòu)建的系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)完全一致, 蜂巢珊瑚科、濱珊瑚科和木珊瑚科的珊瑚品種各聚為一枝, 但在蜂巢珊瑚科中, 向日葵蜂巢珊瑚與多孔同星珊瑚先聚為一支然后再與標(biāo)準(zhǔn)蜂巢珊瑚再聚為一支, 這與傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)科屬分類(lèi)結(jié)果存在一定差異。三種基因構(gòu)建的系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)見(jiàn)圖1、圖2和圖3。

    圖1 利用三種基因序列數(shù)據(jù)構(gòu)建的分子系統(tǒng)進(jìn)化NJ樹(shù)

    圖2 利用三種基因序列數(shù)據(jù)構(gòu)建的分子系統(tǒng)進(jìn)化ML樹(shù)

    圖3 利用三種基因序列數(shù)據(jù)構(gòu)建的分子系統(tǒng)進(jìn)化ME樹(shù)

    3 討論

    3.1 5種石珊瑚COI、16S rRNA基因和ITS基因序列特點(diǎn)

    線(xiàn)粒體細(xì)胞色素c氧化酶亞基I基因(COI)是動(dòng)物線(xiàn)粒體DNA的重鏈上參與細(xì)胞色素氧化反應(yīng)的關(guān)鍵基因。COI基因擁有長(zhǎng)度適宜、進(jìn)化速率慢及富含系統(tǒng)發(fā)育信號(hào)等特點(diǎn), 常被當(dāng)作動(dòng)物界物種鑒定的DNA條形碼工具[18]。近年來(lái), 很多研究表明在許多低等動(dòng)物的分子系統(tǒng)進(jìn)化研究中COI基因具有更為緩慢的進(jìn)化速率, 特別是石珊瑚。造成這一現(xiàn)象的原因可能是由于石珊瑚采用無(wú)性生殖方式使珊瑚蟲(chóng)個(gè)體可以存活上百年[19]。Hellberg[19]在使用COI基因?qū)Τ缺汉?)和猩紅筒星珊瑚系統(tǒng)進(jìn)化的研究中發(fā)現(xiàn)其較慢的進(jìn)化速率導(dǎo)致其較低的種內(nèi)分化。然而在石珊瑚種間關(guān)系的研究中, COI基因作為主要的分子標(biāo)記得到了廣泛的應(yīng)用[20-22]。本研究的5種石珊瑚COI序列長(zhǎng)度變化不大, 遵循真核生物線(xiàn)粒體基因AT偏向性的規(guī)律, 是本研究三種基因中種間序列變化程度最小的基因。

    線(xiàn)粒體16S rRNA基因相對(duì)于其他石珊瑚的線(xiàn)粒體基因進(jìn)化速率較慢, 且較為保守, 常用于種以上分子分類(lèi)的標(biāo)記[23]。本研究的5種石珊瑚16S rRNA基因序列長(zhǎng)度變化較大, 遵循真核生物線(xiàn)粒體基因AT偏向性的規(guī)律。國(guó)外學(xué)者研究發(fā)現(xiàn), 16S rRNA基因在石珊瑚屬以上的分類(lèi)階元中種間片段長(zhǎng)度具有較大的差異, 而屬內(nèi)差異片段長(zhǎng)度差異不大[23-24]。本研究的結(jié)果也較為符合這種情況, 兩種復(fù)合型珊瑚(大角孔珊瑚和猩紅筒星珊瑚)16S rRNA基因具有較為相似的堿基組成, 而與3種蜂巢珊瑚科珊瑚的16S rRNA基因序列堿基組成則相差較大。從序列的堿基組成、序列變化和遺傳距離上看, 16S rRNA基因比較適宜作為科、屬之間的分子分類(lèi)標(biāo)記。

    內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔序列(ITS)是細(xì)胞核中核糖體18S r RNA和5.8S r RNA之間的一段非轉(zhuǎn)錄區(qū)序列, 由于所受的選擇壓力較小、DNA堿基替換速率較快, 加上較大的拷貝數(shù)、適中的長(zhǎng)度和快速的同步化等特點(diǎn), 常被用于低等真核生物屬水平的種間關(guān)系研究[7]。而在石珊瑚目的鹿角珊瑚、扁腦珊瑚、沙珊瑚、濱珊瑚等類(lèi)群研究中, 國(guó)內(nèi)外都有相關(guān)ITS標(biāo)記的報(bào)道[3, 25]。本研究的5種石珊瑚ITS序列長(zhǎng)度變化是本研究三種基因中變化最大的基因。序列堿基組成情況上與16S rRNA基因結(jié)果較為一致, 同時(shí)由于其較高的堿基變化率, 對(duì)蜂巢珊瑚科內(nèi)不同種石珊瑚遺傳分化情況是三種基因中最為顯著一種。從序列的堿基組成、序列變化和遺傳距離上看, ITS基因比較適宜作為屬間的分子分類(lèi)標(biāo)記。

    3.2 石珊瑚系統(tǒng)進(jìn)化分析

    早在20世紀(jì)90年代, Romano和Palumbi[1]在應(yīng)用16S rRNA基因?qū)?4種石珊瑚的系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系進(jìn)行研究的過(guò)程中, 發(fā)現(xiàn)全球范圍內(nèi)現(xiàn)存的石珊瑚可劃分為兩大分支類(lèi)群, 并將其命名為堅(jiān)實(shí)型(Robust)和復(fù)合型(Complex)。結(jié)合已有的形態(tài)學(xué)研究, Romano認(rèn)為堅(jiān)實(shí)型珊瑚骨骼鈣化程度較高, 具有堅(jiān)實(shí)的骨骼結(jié)構(gòu), 珊瑚外觀主要以碟片狀和團(tuán)塊狀為主, 其代表種類(lèi)包括蜂巢珊瑚科、石芝珊瑚科、褶葉珊瑚科等。復(fù)合型珊瑚骨骼鈣化程度較低, 具有較為復(fù)雜多變的生長(zhǎng)形態(tài), 其代表種類(lèi)包括鹿角珊瑚科、菌珊瑚科、木珊瑚科、濱珊瑚科等。經(jīng)過(guò)近20年的石珊瑚分子系統(tǒng)學(xué)研究發(fā)展, 國(guó)內(nèi)外的許多學(xué)者積累的分子數(shù)據(jù)都極力地支持了這一學(xué)說(shuō)。Fukami等[26]使用多種分子標(biāo)記對(duì)17科75屬127種石珊瑚進(jìn)行了系統(tǒng)進(jìn)化分析, 通過(guò)構(gòu)建的系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)將127種石珊瑚細(xì)分成21個(gè)類(lèi)群, 其中9個(gè)類(lèi)群屬于復(fù)合型珊瑚, 12個(gè)類(lèi)群屬于堅(jiān)實(shí)型珊瑚。Kitahara等[22]對(duì)現(xiàn)有324種石珊瑚COI基因的系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系進(jìn)行了探討, 引入外源種進(jìn)行分析后, 將堅(jiān)實(shí)型分支的位置放在了復(fù)合型分支輻射范圍之內(nèi)。相對(duì)來(lái)說(shuō), 復(fù)合型珊瑚類(lèi)群的分子系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系與傳統(tǒng)分類(lèi)學(xué)的系統(tǒng)關(guān)系較為一致。而堅(jiān)實(shí)型珊瑚類(lèi)群的分子系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系則與傳統(tǒng)分類(lèi)學(xué)存在很多不一致的地方, 部分科屬之間關(guān)系較為混亂。其中最為混亂的第17個(gè)分類(lèi)群被稱(chēng)為“Bigmessidae”, 里面包含了4個(gè)石珊瑚科: 蜂巢珊瑚科、裸肋珊瑚科、梳狀珊瑚科、腦珊瑚科。這個(gè)類(lèi)群在分子系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系上存在相互并系現(xiàn)象, 不同科屬之間的物種重新聚為新的分支[27]。蜂巢珊瑚科作為堅(jiān)實(shí)型珊瑚的代表, 同時(shí)也是最為多源的系統(tǒng)進(jìn)化種類(lèi), 在不同的分子系統(tǒng)進(jìn)化研究中都分散在7種堅(jiān)實(shí)型珊瑚分類(lèi)群中, 在系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)上與裸肋珊瑚科、褶葉珊瑚科、梳狀珊瑚科、鐵星珊瑚科等珊瑚種類(lèi)交雜在一起, 成為并系情況最為復(fù)雜的一類(lèi)珊瑚。這些分子證據(jù)與傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)系統(tǒng)進(jìn)化存在許多不協(xié)調(diào)和不統(tǒng)一的地方, 暗示著傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)可能受珊瑚骨骼生長(zhǎng)變異性限制, 對(duì)石珊瑚的系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系分析中存在錯(cuò)誤, 尤其是堅(jiān)實(shí)型珊瑚類(lèi)型。

    本研究采用鄰位連接法(NJ)、最大似然法(ML)和最小進(jìn)化法(ME)對(duì)5種石珊瑚三種基因片段的串聯(lián)序列構(gòu)建了系統(tǒng)發(fā)育樹(shù), 從科一級(jí)單元來(lái)看, 串聯(lián)基因構(gòu)建的系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系符合Romano的兩大分支類(lèi)群學(xué)說(shuō)。蜂巢珊瑚科的珊瑚品種屬于堅(jiān)實(shí)型珊瑚類(lèi)群分支、而濱珊瑚科和木珊瑚科品種屬于復(fù)合型珊瑚類(lèi)群分支。同時(shí), 蜂巢珊瑚科科內(nèi)多源系統(tǒng)進(jìn)化的現(xiàn)象也在本研究體現(xiàn)出來(lái), 傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)分類(lèi)中同屬的向日葵蜂巢珊瑚和標(biāo)準(zhǔn)蜂巢珊瑚并沒(méi)有聚為一支, 反而向日葵蜂巢珊瑚與不同屬的多孔同星珊瑚聚率先聚為一支。

    近年來(lái), 許多學(xué)者通過(guò)顯微掃描技術(shù)對(duì)石珊瑚骨骼的精細(xì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察, 結(jié)合石珊瑚分子系統(tǒng)進(jìn)化數(shù)據(jù), 綜合全面的分析其系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系, 對(duì)Veron傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)研究結(jié)果進(jìn)行了校正和補(bǔ)充[28-29]。很多精細(xì)的石珊瑚骨骼數(shù)據(jù)正逐漸改變我們對(duì)石珊瑚傳統(tǒng)分類(lèi)的看法, 同時(shí)也對(duì)分子系統(tǒng)進(jìn)化研究結(jié)果進(jìn)行了有力的佐證。在當(dāng)今的石珊瑚系統(tǒng)進(jìn)化研究中, 無(wú)論是傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)方法還是利用分子技術(shù)手段, 兩者都必須相互利用和補(bǔ)充。

    [1] Romano S L, Palumbi S R. Evolution of scleractinian corals inferred from molecular systematics[J]. Science, 1996, 271(5249): 640.

    [2] 尤豐, 黃暉, 董志軍, 等. 造礁石珊瑚的分子系統(tǒng)學(xué)研究進(jìn)展[J]. 海洋通報(bào), 2010, 29(4): 459-465. You Feng, Huang Hui, Dong Zhijun, et al. Progress in taxonomy and genetic diversity of Scleratinia corals[J]. Marine Science Bulletin, 2010, 29(4): 459-465.

    [3] Budd A F, Romano S L, Smith N D, et al. Rethinking the phylogeny of scleractinian corals: a review of morphological and molecular data[J]. Integrative and Comparative Biology, 2010, 50(3): 411-427.

    [4] Odorico D M, Miller D J.Variation in the ribosomal internal transcribed spacers and 5.8S r DNA among five species of(Cnidaria; Sclerac-tinia): Patterns of variation consistent with reticulate evolution[J]. Molecular Biology and Evolution, 1997, 14: 465-473.

    [5] Fukami H, Omori M, Hatta M. Phylogenetic relationships in the coral family Acroporidae, reassessed by inference from mitochondrial genes[J]. Zoological science, 2000, 17(5): 689-696.

    [6] Forsman Z H, Concepcion G T, Haverkort R D, et al. Genetic and morphological characterization of a coral species of concern montipora dilatata in Kaneohe Bay, Oahu, Hawaii[J]. Pacific Islands Region Species of Concern, 2008: 1-17.

    [7] Huang D, Meier R, Todd P A, et al. More evidence for pervasive paraphyly in scleractinian corals: Systematic study of Southeast Asian Faviidae (Cnidaria; Scleractinia) based on molecular and morphological data[J]. Molecular Phylogenetics and Evolution, 2009, 50(1): 102-116.

    [8] Arrigoni R, Stefani F, Pichon M, et al. Molecular phylogeny of the robust clade (Faviidae, Mussidae, Merulinidae, and Pectiniidae): an Indian Ocean perspective[J]. Molecular Phylogenetics and Evolution, 2012, 65(1): 183-193.

    [9] 齊文同, 柯葉艷, 顧紅雅. 石珊瑚演化的18S rDNA分子生物學(xué)和形態(tài)學(xué)研究[J]. 北京大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版), 2008, 44(2): 171-176. Qi Wentong, Ke Yeyan, Gu Hongya. Molecular systematics of the 18S rDNA within the scleractinian corals[J]. Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Pekinensis, 2008, 44(2): 171-176.

    [10] 程希婷. 石珊瑚的 DNA 條形碼研究及其系統(tǒng)發(fā)育分析[D]. 海南: 海南大學(xué), 2012. Cheng Xiting. DNA barcoding and molecular phylogeny of the scleractinia[D].Hainan: Hainan University, 2012.

    [11] 李曉娜, 劉麗, 劉楚吾. 運(yùn)用線(xiàn)粒體COI基因分析8種石珊瑚系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系[J]. 漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展, 2012, 33(4): 83-88. Li Xiaona, Liu Li, Liu Chuwu. Phylogenetic relationship in 8 species of Scleractinian coral based on COI sequences[J]. Progress in Fishery Sciences, 2012, 33(4): 83-88.

    [12] 劉麗, 李曉娜, 陳育盛, 等. 基于線(xiàn)粒體基因的石珊瑚分子系統(tǒng)學(xué)研究[J]. 海洋與湖沼, 2012, 43(4): 814-820. Liu Li, Li Xiaona, Chen Yusheng, et al. Molecular systematics study of scleractinian based on mitchondrial genes[J]. Oceanologia and Limnologia Sinica, 2012, 43(4): 814-820.

    [13] 劉麗, 陳育盛, 李曉娜, 等. 基于線(xiàn)粒體Cytb基因的10種石珊瑚的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系[J]. 廣東海洋大學(xué)學(xué)報(bào), 2011, 31(1): 6-11. Liu Li, Chen Yusheng, Li Xiaona, et al. Phylogenetic Relationships in 10 Species of Scleractinian Coral Based on Cyt b Sequences[J]. Journal of Guangdong Ocean University, 2011, 31(1): 6-11.

    [14] 廖偉群, 張加恭, 黃慧萍. 萬(wàn)山群島的旅游資源及其開(kāi)發(fā)利用研究[J]. 熱帶地理, 2000, 20(2): 134-138, 143.Liao Weiqun, Zhang Jiagong, Huang Huiping. Development of the tourism resources of the wanshan islands[J]. Tropical Geography, 2000, 20(2): 134-138, 143.

    [15] 黃暉, 尤豐, 練健生, 等. 珠江口萬(wàn)山群島海域造礁石珊瑚群落分布與保護(hù)[J]. 海洋通報(bào), 2012, 31(2): 189-197. Huang Hui, You Feng, Lian Jianshen, et al. Status and conservation strategies of the scleractinian coral community in the Wanshan Islands at Pearl River Estuary[J]. Marine Science Bulletin, 2012, 31(2): 189-197.

    [16] 鄒仁林. 中國(guó)動(dòng)物志—造礁石珊瑚[M]. 北京: 科學(xué)出版杜, 2001. Zou Renlin. Fauna Sinica: Coelenterata: Anthozoa, Scleractinia, Hermatypic coral[M]. Beijing: Science Press, 2001.

    [17] Veron J E N. Corals in space and time: the biogeography and evolution of the Scleractinia[M]. Ithaca, New York: Comstock/Cornell, 1995.

    [18] Yamauchi M M, Miya M U, Nishida M. Complete mitochondrial DNA sequence of the swimming crab, Portunus trituberculatus (Crustacea: Decapoda: Brachyura)[J]. Gene, 2003, 311: 129-135.

    [19] Hellberg M E. No variation and low synonymous substitution rates in coral mtDNA despite high nuclear variation[J]. BMC evolutionary biology, 2006, 6(1): 24.

    [20] Arrigoni R, Kitano Y F, Stolarski J, et al. A phylogeny reconstruction of the Dendrophylliidae (Cnidaria, Scleractinia) based on molecular and micromorphological criteria, and its ecological implications[J]. Zoologica Scripta, 2014, 43(6): 661-688.

    [21] Gittenberger A, Reijnen B T, Hoeksema B W. A molecularly based phylogeny reconstruction of mushroom corals (Scleractinia: Fungiidae) with taxonomic consequences and evolutionary implications for life history traits[J]. Contributions to Zoology, 2011, 80(2): 107-132.

    [22] Kitahara M V, Cairns S D, Stolarski J, et al. A comprehensive phylogenetic analysis of the Scleractinia (Cnidaria, Anthozoa) based on mitochondrial CO1 sequence data[J]. PloS One, 2010, 5(7): e11490.

    [23] Fukami H, Knowlton N. Analysis of complete mitochondrial DNA sequences of three members of thecoral species complex (Cnidaria, Anthozoa, Scleractinia)[J]. Coral Reefs, 2005, 24(3): 410-417.

    [24] Romano S L, Cairns S D. Molecular phylogenetic hypotheses for the evolution of scleractinian corals[J]. Bulletin of Marine Science, 2000, 67(3): 1043-1068.

    [25] 李文娟, 劉楚吾, 劉麗, 等. 利用ITS基因研究徐聞濱珊瑚的系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系[J]. 海洋科學(xué), 2012, 36(7): 56-60. Li Wenjuan, Liu Chuwu, Liu Li, et al. Phylogeny analysis of Porites link in Xuwen using its gene[J]. Marine Sciences, 2012, 36(7): 56-60.

    [26] Fukami H, Chen C A, Budd A F, et al. Mitochondrial and nuclear genes suggest that stony corals are monophyletic but most families of stony corals are not (Order Scleractinia, Class Anthozoa, Phylum Cnidaria)[J]. PloS one, 2008, 3(9): e3222.

    [27] Huang D, Licuanan W Y, Baird A H, et al. Cleaning up the'Bigmessidae': Molecular phylogeny of scleractinian corals from Faviidae, Merulinidae, Pectiniidae and Trachyphylliidae[J]. BMC Evolutionary Biology, 2011, 11(1): 1.

    [28] Stolarski J, Kitahara M V, Miller D J, et al. The ancient evolutionary origins of Scleractinia revealed by azooxanthellate corals[J]. BMC Evolutionary Biology, 2011, 11(1): 316.

    [29] Huang D, Benzoni F, Fukami H, et al. Taxonomic classification of the reef coral families Merulinidae, Montastraeidae, and Diploastraeidae (Cnidaria: Anthozoa: Scleractinia)[J]. Zoological Journal of the Linnean Society, 2014, 171(2): 277-355.

    (本文編輯: 梁德海)

    Study of phylogenetic relationships of scleractinian from Wailing-ding Island based on three standard molecular markers

    XIAO Bao-hua1, 2, LIAO Bao-lin2, YANG Xiao-dong2, XIE Zi-qiang3

    (1. Guangdong Ocean University, Zhanjiang 524025, China; 2. Guangdong Ocean University, Shenzhen Institute, Shenzhen 518108, China; 3. Shenzhen Bihai Blue Sky Marine Technology Co, LTD, Shenzhen 518108, China)

    The mitochondrial cytochrome oxidase subunit I (CO I), 16S rRNA, and nuclear ITS genes have been routinely used as standard molecular markers. A total of five species pertaining to four genera of scleractinian, collected from Wailingding Island, Zhuhai City, Guangdong Province, were analyzed by partial sequences, and the genetic distances of these three genes were calculated. The results indicated that the average AT contents of CO I and 16S rRNA gene fragments were obviously higher than the GC contents. However, the average AT content of ITS fragments was obviously less than the GC content. The average genetic distances of the three genes were 0.043, 0.134, and 0.763 from the five species, respectively. The neighbor-joining, maximum-likelihood, and minimum-evolution trees of combined partial sequences of these three genes revealed that the phylogenetic relationships were consistent with the morphological classification in the families. However, the phylogenetic relationships were slightly different from the morphological classification in Faviidae. This result suggested that morphological classification may be limited by coral skeleton plasticity. These findings provide basic data for studying the genetic relationship of Wailingding Island corals and a theoretical basis for resource protection of stone corals in this area.

    Scleractinian; COI; 16S RNA; ITS; Molecular phylogenetics

    Dec. 22, 2016

    肖寶華(1978-), 男, 福建長(zhǎng)樂(lè)人, 高級(jí)工程師, 碩士, 主要從事海洋生態(tài)學(xué), 特別是珊瑚生態(tài)系統(tǒng)方面研究, 電話(huà): 0759- 2396216, E-mail: gdouxxhpaper@126.com

    Q75

    A

    1000-3096(2017)09-0001-08

    10.11759/hykx20160414001

    2016-12-12;

    2017-02-22

    廣東省漁港建設(shè)和漁業(yè)產(chǎn)業(yè)發(fā)展專(zhuān)項(xiàng)(A201708D06); 大鵬新區(qū)產(chǎn)業(yè)發(fā)展專(zhuān)項(xiàng)(KY20160107)

    Guangdong Ocean and Fishery Administration Project, No. A201708D06; Dapeng New District Industry Development Fund, No. KY20160107]

    猜你喜歡
    種間蜂巢珊瑚
    干旱條件對(duì)鬼針草和醉魚(yú)草種間相互作用及生長(zhǎng)的影響
    植物研究(2023年5期)2023-09-09 08:01:22
    三峽庫(kù)區(qū)支流花溪河浮游植物種間關(guān)聯(lián)及影響因子分析
    走進(jìn)科學(xué)
    碧波蕩漾珊瑚海
    蜂巢大變身
    兒童繪本(2018年6期)2018-04-17 16:47:14
    蜂巢
    換蜂巢
    美麗的珊瑚
    江蘇省宜興市茶園秋季雜草種間生態(tài)關(guān)系及群落分類(lèi)
    送你一支珊瑚花
    91精品三级在线观看| 高清不卡的av网站| 九九在线视频观看精品| 免费黄网站久久成人精品| 精品国产国语对白av| 亚洲av男天堂| av网站免费在线观看视频| 免费黄频网站在线观看国产| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 精品国产一区二区久久| 在线观看一区二区三区激情| 一级毛片我不卡| 亚州av有码| 午夜福利网站1000一区二区三区| 男人添女人高潮全过程视频| 免费黄色在线免费观看| 中国国产av一级| 最新中文字幕久久久久| 只有这里有精品99| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 亚洲国产最新在线播放| 免费人妻精品一区二区三区视频| 中国美白少妇内射xxxbb| 99热6这里只有精品| 欧美另类一区| 精品熟女少妇av免费看| 日本av手机在线免费观看| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 人妻 亚洲 视频| 午夜福利影视在线免费观看| 国产精品人妻久久久影院| 亚洲av国产av综合av卡| 999精品在线视频| 中文字幕最新亚洲高清| 免费观看a级毛片全部| .国产精品久久| 亚洲精品中文字幕在线视频| 国产高清有码在线观看视频| 午夜日本视频在线| 国产精品不卡视频一区二区| 国产免费一区二区三区四区乱码| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 欧美变态另类bdsm刘玥| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 亚洲av成人精品一二三区| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 亚洲无线观看免费| 新久久久久国产一级毛片| 国产在视频线精品| 免费观看av网站的网址| 在线观看免费视频网站a站| 丝袜在线中文字幕| 免费黄色在线免费观看| 熟女人妻精品中文字幕| 99热这里只有是精品在线观看| videos熟女内射| 国产伦理片在线播放av一区| 在线播放无遮挡| 尾随美女入室| 久久鲁丝午夜福利片| 亚洲经典国产精华液单| 免费大片黄手机在线观看| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 嘟嘟电影网在线观看| 国产乱来视频区| 99热6这里只有精品| 三级国产精品片| 在线免费观看不下载黄p国产| 黄色视频在线播放观看不卡| 国产老妇伦熟女老妇高清| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 九色亚洲精品在线播放| 久久久久精品性色| 下体分泌物呈黄色| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 妹子高潮喷水视频| 亚洲国产成人一精品久久久| 国产爽快片一区二区三区| 99久久人妻综合| 日本91视频免费播放| 国产色爽女视频免费观看| 高清在线视频一区二区三区| 免费黄频网站在线观看国产| 免费人成在线观看视频色| 午夜免费男女啪啪视频观看| 人妻一区二区av| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 亚洲成人av在线免费| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 亚洲av日韩在线播放| 22中文网久久字幕| 男女边摸边吃奶| 91aial.com中文字幕在线观看| 中国三级夫妇交换| 在线观看国产h片| 一级二级三级毛片免费看| 欧美性感艳星| 最近中文字幕高清免费大全6| 青青草视频在线视频观看| 在线观看免费高清a一片| 精品少妇内射三级| 日韩免费高清中文字幕av| a级毛片黄视频| 国产黄色视频一区二区在线观看| 久久99热6这里只有精品| 特大巨黑吊av在线直播| 中文字幕免费在线视频6| 超碰97精品在线观看| 另类精品久久| 99热全是精品| 晚上一个人看的免费电影| 熟妇人妻不卡中文字幕| av在线老鸭窝| 午夜免费观看性视频| 高清视频免费观看一区二区| 国产探花极品一区二区| 久久精品人人爽人人爽视色| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 91久久精品电影网| 最新的欧美精品一区二区| 哪个播放器可以免费观看大片| 精品久久久久久电影网| xxx大片免费视频| 丰满迷人的少妇在线观看| 国精品久久久久久国模美| 美女cb高潮喷水在线观看| 97精品久久久久久久久久精品| 亚洲精品中文字幕在线视频| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| tube8黄色片| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 国产伦理片在线播放av一区| 久久久久久久久久久免费av| 寂寞人妻少妇视频99o| 久久99精品国语久久久| 国产一区二区在线观看av| 有码 亚洲区| 校园人妻丝袜中文字幕| 一区二区三区免费毛片| 老司机亚洲免费影院| 在线观看www视频免费| 91成人精品电影| 国产成人午夜福利电影在线观看| av有码第一页| 欧美xxⅹ黑人| 亚洲精品日韩av片在线观看| 久久久久久久久大av| 欧美另类一区| 99久久综合免费| 亚洲人与动物交配视频| 自线自在国产av| 亚洲国产精品国产精品| 高清毛片免费看| 另类亚洲欧美激情| 国产精品一区二区在线观看99| 五月伊人婷婷丁香| 精品久久国产蜜桃| 99九九在线精品视频| 18禁动态无遮挡网站| 精品卡一卡二卡四卡免费| 久久久久人妻精品一区果冻| 街头女战士在线观看网站| 高清黄色对白视频在线免费看| 亚洲经典国产精华液单| 欧美人与善性xxx| 亚洲精品久久成人aⅴ小说 | 国产高清三级在线| 欧美xxxx性猛交bbbb| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 国产视频首页在线观看| 夫妻午夜视频| 精品久久久久久久久av| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 在线观看三级黄色| 在线观看三级黄色| 多毛熟女@视频| av天堂久久9| 精品少妇久久久久久888优播| 久久99热这里只频精品6学生| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 热re99久久国产66热| 最近手机中文字幕大全| 成年人午夜在线观看视频| 国产成人aa在线观看| 三级国产精品片| 香蕉精品网在线| 中文字幕免费在线视频6| 十八禁高潮呻吟视频| 欧美精品高潮呻吟av久久| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 午夜激情av网站| 日本黄色片子视频| 美女视频免费永久观看网站| 亚洲美女搞黄在线观看| 精品人妻一区二区三区麻豆| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 99久久精品一区二区三区| 国产精品人妻久久久久久| 不卡视频在线观看欧美| 久久久久久久久久人人人人人人| 高清午夜精品一区二区三区| 高清黄色对白视频在线免费看| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 国产极品粉嫩免费观看在线 | 丝袜美足系列| 大香蕉97超碰在线| 精品人妻熟女av久视频| 国产一区有黄有色的免费视频| 一区二区日韩欧美中文字幕 | 国产精品久久久久久久久免| 成年av动漫网址| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 在线观看免费视频网站a站| 亚洲无线观看免费| 久久女婷五月综合色啪小说| 三级国产精品欧美在线观看| 男女啪啪激烈高潮av片| 日本色播在线视频| 一级毛片 在线播放| 一级a做视频免费观看| 国产成人av激情在线播放 | 天堂俺去俺来也www色官网| 亚洲av不卡在线观看| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 日本欧美视频一区| 国产毛片在线视频| 国产av码专区亚洲av| 国产极品天堂在线| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 精品久久久久久久久av| 色视频在线一区二区三区| 国产男女内射视频| 高清不卡的av网站| 亚洲国产精品成人久久小说| 欧美 日韩 精品 国产| 国产高清三级在线| 麻豆成人av视频| 高清午夜精品一区二区三区| av在线观看视频网站免费| 久久久久久伊人网av| 青春草亚洲视频在线观看| 好男人视频免费观看在线| 最近的中文字幕免费完整| 高清毛片免费看| 国产精品国产av在线观看| videosex国产| 日韩av不卡免费在线播放| 人人妻人人澡人人看| 男女高潮啪啪啪动态图| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 狂野欧美激情性bbbbbb| 国产深夜福利视频在线观看| 色婷婷久久久亚洲欧美| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 亚洲欧美色中文字幕在线| 亚洲久久久国产精品| 三级国产精品欧美在线观看| 少妇被粗大猛烈的视频| 最近中文字幕高清免费大全6| 国产亚洲一区二区精品| 国产成人freesex在线| 亚洲国产精品专区欧美| 男女国产视频网站| 久久青草综合色| 亚洲高清免费不卡视频| 2021少妇久久久久久久久久久| 美女内射精品一级片tv| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 老司机亚洲免费影院| 免费黄色在线免费观看| 成人二区视频| av线在线观看网站| 日韩 亚洲 欧美在线| 欧美3d第一页| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 内地一区二区视频在线| 丝袜喷水一区| 成人午夜精彩视频在线观看| 色5月婷婷丁香| 波野结衣二区三区在线| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 精品熟女少妇av免费看| 国产免费一级a男人的天堂| 美女大奶头黄色视频| 久久久亚洲精品成人影院| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 2022亚洲国产成人精品| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 99久久中文字幕三级久久日本| 久久国产亚洲av麻豆专区| 在现免费观看毛片| 午夜激情福利司机影院| 中文字幕免费在线视频6| 午夜福利视频在线观看免费| 久久毛片免费看一区二区三区| 性高湖久久久久久久久免费观看| 国产成人精品久久久久久| 91aial.com中文字幕在线观看| 一本色道久久久久久精品综合| 丰满迷人的少妇在线观看| 精品久久久精品久久久| 免费观看的影片在线观看| 熟女人妻精品中文字幕| 内地一区二区视频在线| 成人午夜精彩视频在线观看| www.av在线官网国产| 欧美+日韩+精品| 免费看不卡的av| 熟女av电影| 欧美精品高潮呻吟av久久| 亚洲丝袜综合中文字幕| 91精品一卡2卡3卡4卡| 欧美精品一区二区大全| 日韩av在线免费看完整版不卡| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 亚洲熟女精品中文字幕| 草草在线视频免费看| 国产精品一国产av| 国产一区二区在线观看日韩| 久久久久精品久久久久真实原创| 国产精品人妻久久久影院| 天堂8中文在线网| 午夜老司机福利剧场| 五月天丁香电影| 久久久久久久大尺度免费视频| 欧美一级a爱片免费观看看| 少妇高潮的动态图| 午夜福利在线观看免费完整高清在| av福利片在线| 久久久久久久精品精品| 欧美日韩av久久| 欧美成人午夜免费资源| 国产精品国产av在线观看| 成人亚洲精品一区在线观看| 久久精品国产自在天天线| 午夜激情久久久久久久| 一区二区三区免费毛片| 欧美3d第一页| 在线观看免费视频网站a站| 亚洲人成77777在线视频| 91aial.com中文字幕在线观看| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 欧美成人午夜免费资源| 免费av不卡在线播放| 最新的欧美精品一区二区| 黑人高潮一二区| 久久韩国三级中文字幕| 一边摸一边做爽爽视频免费| 国产高清三级在线| www.av在线官网国产| 这个男人来自地球电影免费观看 | 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 色5月婷婷丁香| 伊人亚洲综合成人网| 女人精品久久久久毛片| 久久97久久精品| 亚洲五月色婷婷综合| 亚洲av成人精品一区久久| 免费高清在线观看日韩| 满18在线观看网站| 久久99精品国语久久久| 国产成人精品婷婷| 亚洲国产最新在线播放| 一本大道久久a久久精品| 一级黄片播放器| 亚洲第一av免费看| 性高湖久久久久久久久免费观看| 免费高清在线观看视频在线观看| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 午夜老司机福利剧场| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 男人添女人高潮全过程视频| 性高湖久久久久久久久免费观看| 97超视频在线观看视频| 亚洲欧美一区二区三区国产| av有码第一页| 十分钟在线观看高清视频www| av卡一久久| 亚洲av不卡在线观看| 国产成人freesex在线| 亚洲av欧美aⅴ国产| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 我要看黄色一级片免费的| 欧美成人午夜免费资源| 亚洲国产精品999| 午夜日本视频在线| 免费av中文字幕在线| 国内精品宾馆在线| 欧美精品高潮呻吟av久久| 全区人妻精品视频| 精品久久蜜臀av无| 秋霞在线观看毛片| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 大香蕉97超碰在线| 免费看不卡的av| 超色免费av| 久久 成人 亚洲| 中文字幕制服av| www.av在线官网国产| 一级毛片 在线播放| 亚洲国产最新在线播放| 国产日韩欧美亚洲二区| 满18在线观看网站| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 18禁动态无遮挡网站| 国产有黄有色有爽视频| 激情五月婷婷亚洲| 亚洲欧美日韩另类电影网站| www.av在线官网国产| 一区二区av电影网| 丰满少妇做爰视频| 秋霞伦理黄片| 日本黄大片高清| 大码成人一级视频| 简卡轻食公司| 国产精品不卡视频一区二区| 超色免费av| 午夜免费鲁丝| videos熟女内射| 黑丝袜美女国产一区| 欧美精品一区二区免费开放| 国产免费一区二区三区四区乱码| 日日啪夜夜爽| 在线天堂最新版资源| 日韩中文字幕视频在线看片| 国产 精品1| 成人午夜精彩视频在线观看| 69精品国产乱码久久久| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 久久久久久久亚洲中文字幕| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 国产精品熟女久久久久浪| 99久久精品一区二区三区| 亚洲精品aⅴ在线观看| 欧美性感艳星| 青春草视频在线免费观看| 国产极品粉嫩免费观看在线 | 黄色视频在线播放观看不卡| 精品人妻在线不人妻| 最黄视频免费看| 久久99热这里只频精品6学生| 欧美成人精品欧美一级黄| 亚洲第一区二区三区不卡| 美女国产视频在线观看| 精品一区二区三区视频在线| 老熟女久久久| 涩涩av久久男人的天堂| 国产黄色免费在线视频| 色视频在线一区二区三区| 久久久a久久爽久久v久久| 午夜福利网站1000一区二区三区| 久久久精品94久久精品| 久久久久久久大尺度免费视频| 成人亚洲欧美一区二区av| 国产精品一区二区在线不卡| 亚洲av综合色区一区| 成人免费观看视频高清| 多毛熟女@视频| 婷婷色av中文字幕| 久久久国产精品麻豆| 国产一区二区在线观看日韩| 国产精品久久久久久av不卡| 新久久久久国产一级毛片| 国产有黄有色有爽视频| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 亚洲国产成人一精品久久久| 性高湖久久久久久久久免费观看| 桃花免费在线播放| 曰老女人黄片| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 观看av在线不卡| 一级毛片我不卡| h视频一区二区三区| 日本与韩国留学比较| 一二三四中文在线观看免费高清| 免费黄网站久久成人精品| 黑丝袜美女国产一区| 黑人高潮一二区| 少妇人妻精品综合一区二区| 国产黄色免费在线视频| 视频中文字幕在线观看| 老熟女久久久| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 亚洲精品色激情综合| 99热6这里只有精品| 国产欧美亚洲国产| 女人精品久久久久毛片| 亚洲精品日本国产第一区| 日韩成人伦理影院| 一区在线观看完整版| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 22中文网久久字幕| 视频中文字幕在线观看| av黄色大香蕉| 成人毛片a级毛片在线播放| 9色porny在线观看| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 亚洲av欧美aⅴ国产| 精品少妇内射三级| 久久婷婷青草| 日韩伦理黄色片| 欧美 亚洲 国产 日韩一| www.av在线官网国产| 777米奇影视久久| 狂野欧美激情性bbbbbb| 性高湖久久久久久久久免费观看| 精品一区在线观看国产| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 多毛熟女@视频| 在线观看人妻少妇| 婷婷色麻豆天堂久久| 亚洲成人手机| 久久久久久久久久成人| 一级毛片 在线播放| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 我的老师免费观看完整版| 日韩成人av中文字幕在线观看| 老女人水多毛片| 欧美日韩在线观看h| 91精品国产国语对白视频| 夜夜爽夜夜爽视频| 一区在线观看完整版| 春色校园在线视频观看| 一区二区日韩欧美中文字幕 | 涩涩av久久男人的天堂| 精品久久久久久久久亚洲| 久久人人爽人人片av| .国产精品久久| 大码成人一级视频| 国产精品一二三区在线看| 欧美精品一区二区大全| 一二三四中文在线观看免费高清| 考比视频在线观看| 亚洲综合色网址| 91精品国产九色| 美女大奶头黄色视频| 男男h啪啪无遮挡| 热99久久久久精品小说推荐| 日本vs欧美在线观看视频| 日韩欧美精品免费久久| 另类亚洲欧美激情| 国产一区二区在线观看av| 国产老妇伦熟女老妇高清| av有码第一页| 日本av手机在线免费观看| 十八禁高潮呻吟视频| 国产黄频视频在线观看| 亚洲欧美一区二区三区国产| 亚洲中文av在线| 久久久久人妻精品一区果冻| 精品人妻在线不人妻| 国产成人免费观看mmmm| 特大巨黑吊av在线直播| 91aial.com中文字幕在线观看| 国产精品嫩草影院av在线观看| 久久精品国产亚洲av涩爱| 观看美女的网站| 午夜视频国产福利| 日韩中文字幕视频在线看片| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 午夜av观看不卡| 热99国产精品久久久久久7| 女人久久www免费人成看片| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 熟女av电影| 久久综合国产亚洲精品| 日本欧美视频一区| 日日撸夜夜添| 黄色欧美视频在线观看| 欧美日韩成人在线一区二区| av天堂久久9| 精品一品国产午夜福利视频| 日韩三级伦理在线观看| 国产片特级美女逼逼视频| 一级爰片在线观看| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 熟女人妻精品中文字幕| 九草在线视频观看| 精品国产乱码久久久久久小说| 秋霞在线观看毛片| 亚洲av日韩在线播放| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 大陆偷拍与自拍| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 全区人妻精品视频| 91精品国产国语对白视频| 91精品一卡2卡3卡4卡| 亚洲情色 制服丝袜| av视频免费观看在线观看| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 久久久a久久爽久久v久久| 精品午夜福利在线看| 在线观看免费视频网站a站| 免费av中文字幕在线| 91精品一卡2卡3卡4卡| 午夜激情久久久久久久| av专区在线播放| 国产成人精品婷婷| 国产av一区二区精品久久| 啦啦啦在线观看免费高清www| 丝袜喷水一区| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 免费黄频网站在线观看国产| 99热网站在线观看|